肠杆菌科分类与鉴定
肠杆菌科鉴定(全)(精品)
多数菌属是肠道正常菌群，也是条件致病菌
与人类感染有关的肠杆菌科细菌有31个菌属， 其中临床标本中常见的菌属有15种
克雷伯菌属
爱德华菌属
邻单胞菌属
变形杆菌属
普罗威登斯菌属 沙门菌属
伯
臭鼻亚种
菌 ➢ 肺炎克雷伯菌（K. pneumonia鼻e）硬结亚种
属 ➢ 产酸克雷伯菌（K. oxytoca）
➢ 解鸟氨酸克雷伯菌（K. ornitThhiisnporloyptoiscaal ）is base on
➢ 植生克雷伯菌（K. planticola1s6）eSqurDeNncAinagndanrpdocBargbeonne
试验
摩根摩根菌 摩根菌(生物1群)
赖氨酸
-
+
动力
+
-
4.塔特姆菌属的鉴定
苯丙氨酸
H2S 枸橼酸盐 鸟氨酸 靛基质
+
-
-
-
-
5 .苯丙氨酸阳性组菌属鉴别索引图
苯丙氨酸+
+
H2S
－
靛基质
+
－
枸橼酸盐
+
－
普 通 变 形 杆 菌
鸟氨酸 侧金盏花醇 靛基质
+
－+
－+
－
奇 异 变 形 杆 菌
潘 氏 变 形 杆 菌
➢ 河生肠杆菌生物群1
3.肠杆菌属各种的鉴别
试 验 坂崎杆菌 阴沟杆菌 产气杆菌 格高菲杆菌
赖氨酸
－
－
+
一文理清系列：肠杆菌科种类、感染、耐药特点及药敏解读
一文理清系列：肠杆菌科种类、感染、耐药特点及药敏解读肠杆菌科细菌包括一大群生物性状相似的革兰阴性无芽胞杆菌，其中部分为致病菌，如：沙门菌属、志贺菌属等；而多数为肠道正常菌群，在一定条件下可以致病，故称为条件致病菌。
肠杆菌科细菌多数细菌有周身鞭毛，能运动，个别细菌有荚膜，多数细菌有菌毛。
本科细菌为需氧和兼性厌氧菌，营养要求不高，在普通培养基上生长良好，各种细菌菌落大小相似，直径2~3μm。
肠杆菌科细菌有42个属，其中与医学相关的常见菌属有：埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登斯菌属、哈夫尼亚菌属、摩根菌属、耶尔森菌属等。
2020年，美国临床和实验室标准协会（CLSI）将原来肠杆菌科中的哈夫尼亚菌属、摩根菌属、耶尔森菌属升级为科，和肠杆菌科一起，归类于肠杆菌目。
药敏报告解读临床工作中，肠杆菌科尤以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌最为常见。
今天我们就以大肠埃希菌为例，介绍一下阅读肠杆菌科细菌药敏报告单的注意事项！(一) 概念介绍SDD（剂量依赖性敏感）：部分菌株的头孢吡肟药敏结果报告方式可能既非S（敏感）、R（耐药），亦非I（中介），而是报告为SDD。
此处的SDD是指分离株的敏感性依赖于对患者的用药方案。
介于药物结果在SDD范围内的分离株，为了使血药浓度达到临床疗效，采用给药方案时（较高剂量、增加用药频率或二者皆有）的药物暴露应高于以前常用敏感折点的剂量。
(二) 常规推导1. 氨苄西林测试结果可预测阿莫西林结果。
2. 对四环素敏感的菌株被认为对多西环素和米诺环素也敏感。
然而，某些对四环素中介或耐药菌株可对多西环素、米诺环素或二者敏感。
3. 头孢曲松测试结果可以代表头孢噻肟的敏感性。
4. 当用于治疗大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的单纯尿路感染时，头孢唑啉敏感指示口服头孢菌素敏感，包括头孢克洛、头孢地尼、头孢泊污、头孢丙烯、头孢呋辛、头孢氨苄和氯碳头孢。
肠杆菌科的鉴定
肠杆菌科的鉴定1、标本要求：1.1 尽量用药前采集标本。
1.2 痰液：病人清晨咳痰于无菌、防漏小塑料盒内，切勿唾液送检。
1.3 尿液：病人留取12h尿液，送检。
1.4 粪便：病人留取粪便5 10g，送检。
1.5 脑脊液及其它无菌体液：用无菌瓶直接送检。
血标本不要冷冻。
1.6 不可接受的标本：干的拭子、蜡盒、未消毒容器、留取24h后的尿或痰、破裂的瓶子、标本泄漏、标本无标签。
2、仪器35℃孵箱、普通光学显微镜3、试剂羊血平皿、麦康凯平皿、硝酸盐培养管、葡萄糖蛋白胨水、葡萄糖酸盐培养管、苯丙氨酸脱氨培养管、氨基酸脱羧培养管、拘橼酸盐培养管、尿素培养管、糖醇发酵管、湖南长沙天地人肠杆菌鉴定板。
4、试验方法及原理：4.1 硝酸盐还原试验：方法：将待检菌接种硝酸盐培养基中，孵育过夜，加入等量A、B液1～3滴，观察结果。
结果：红色为“+”，即还原硝酸盐。
注意点：（1）．培养基不应含亚硝酸盐，以避免假阳性。
（2）．某些肠杆菌还原硝酸盐的能力很强，还原硝酸盐为亚硝酸盐后，进一步将亚硝酸盐分解为氨、氮、氧化氮，造成假阴性。
所以，观察结果时，如无红色出现，应加少量锌粉，仍无色，说明亚硝酸盐进一步分解，硝酸盐反应为阳性。
若加锌粉后出现红色，说明锌使硝酸盐还原为亚硝酸盐，而待检菌无还原硝酸盐的能力，即硝酸盐还原试验阴性。
4.2 甲基红试验方法：将待检菌接种于葡萄糖蛋白胨水中，孵育过夜，加甲基红试剂1～2滴，观察结果。
结果：红色为阳性，桔黄色为阴性。
4.3 尿素培养基方法：将待检菌穿刺接种于尿素培养基中，孵育过夜，观察结果。
结果：培养基变红为尿素阳性，不变色为阴性。
4.4 拘橼酸盐试验(Simmons法)方法：将待检菌接种于拘橼酸盐培养基中，孵育过夜，观察结果。
结果：有细菌生长培养基变蓝色为阳性，无颜色改变为阴性。
4.5 氨基酸脱羧试验方法：取待检菌接种于氨基酸脱羧培养基和对照管中，封石腊油，35℃培养过夜，观察结果。
结果：培养基变紫色为阳性，黄色为阴性。
阴沟肠杆菌科鉴定实验方法
阴沟肠杆菌科鉴定实验方法
阴沟肠杆菌科是一类革兰氏阴性杆菌，常见于土壤、水体和动植物体内。
它们具有多样的代谢途径和生理特性，对环境中的有机物质分解和循环有重要作用。
鉴定阴沟肠杆菌科的实验方法主要包括形态学观察、生理生化特性测试和分子生物学鉴定等。
通过形态学观察可以初步判断样品中是否存在阴沟肠杆菌科。
阴沟肠杆菌科的菌落形态多样，常见的形态包括圆形、不规则形、凹陷形等。
菌落表面光滑或粗糙，颜色多为乳白色、灰白色或黄色。
在显微镜下观察，阴沟肠杆菌科的细胞为革兰氏阴性杆状，长度一般为0.5-3微米，直径约为0.2-0.4微米。
生理生化特性测试是鉴定阴沟肠杆菌科的重要方法之一。
阴沟肠杆菌科细菌通常是好氧菌或兼性厌氧菌，能够利用多种碳源进行代谢。
常用的生理生化特性测试包括氧气需求量、温度和pH值的适应性、产酸产气能力等。
阴沟肠杆菌科细菌通常对氧气需求较高，可以在含氧环境中正常生长。
同时，它们对温度和pH值的适应性也较广，能够在较宽的范围内生长繁殖。
分子生物学鉴定是确定阴沟肠杆菌科的确切属种的重要手段。
通过分析菌株的16S rRNA基因序列，可以与数据库中已知的细菌序列进行比对，进而确定菌株的分类地位。
目前，分子生物学鉴定已成为鉴定阴沟肠杆菌科的金标准，具有高度的准确性和可靠性。
鉴定阴沟肠杆菌科的实验方法主要包括形态学观察、生理生化特性测试和分子生物学鉴定。
这些方法结合使用可以对阴沟肠杆菌科进行准确鉴定，为进一步研究其生态学和应用价值提供了基础。
未来，随着科学技术的不断进步，相信对阴沟肠杆菌科的鉴定方法会更加精确和高效。
肠杆菌科的分类与鉴定
志贺氏 菌属
— — —/+ — — — — —
沙门氏 菌属
+ + — +/— +/— —
+ +/—
枸橼酸 杆菌属
+ + —/+
+ +/— +/— —
+
爱德华 氏菌属
+/—
+ + —
+ —
+ —
小肠结肠炎 耶尔森氏菌
—
+ +/— +/— —
+ — +/—
苯丙氨酸脱氨酶试验阴性；葡萄糖酸盐利用试验阴性菌群
四、苯丙氨酸脱氨酶试验阳性 菌群的分类鉴定
苯丙氨酸脱氨酶试验阳性菌群共包括三 个菌属，即：变形杆菌属、摩尔根氏菌 属、普罗维登斯菌属。
生化反应 H2S 鸟氨酸脱羧酶 枸橼酸盐利用 尿素酶 迁徙生长
变形杆菌属 摩尔根氏菌属 普罗维登斯菌属
+
—
—
+/—
+
—
+
—
+
+
—
+/—
+
—
—
苯丙氨酸脱氨酶试验阳性菌群
4、 生物拮抗作用：
肠杆菌科的生物拮抗作用主要靠与病原菌争夺 营养和占据空间位置来实现。此外，大肠埃希 氏菌还产生大肠菌素和酸性物质，抑制志贺氏 菌和金葡菌的生长。
由此可见，肠杆菌科在正常寄生部位和正常寄 生数量的情况下，不仅对人体无害，并且有益， 但如果其寄生部位和寄生数量发生变化，同样 可引起机体的各类病变。因此，肠杆菌科的多 数细菌又被称为“条件致病菌”。
河生肠杆菌科菌种鉴定
河生肠杆菌科菌种鉴定一、背景介绍河生肠杆菌科（Enterobacteriaceae）是一类常见的革兰氏阴性菌，包括多种与人和动物健康相关的致病菌，如大肠杆菌、沙门氏菌、克雷伯氏菌等。
这些细菌不仅会引起人类和动物的感染，还会对水质和食品安全造成威胁。
因此，对这些细菌进行鉴定非常重要。
二、鉴定方法1. 生化鉴定法：通过观察细菌在不同培养基上的生长特征和代谢产物来进行鉴定。
2. 分子生物学鉴定法：利用PCR技术或基因测序分析目标细菌的DNA序列来确定其种属和亚属分类。
三、生化鉴定法1. 常用培养基：(1) MacConkey琼脂培养基：用于筛选革兰氏阴性肠道杆菌，能够区分乳糖发酵阳性和阴性细菌。
(2) Eosin Methylene Blue琼脂培养基：适合于检测大肠杆菌等肠道杆菌，能够区分乳糖发酵强度。
(3) Triple Sugar Iron琼脂培养基：可用于区分肠道杆菌的糖代谢类型，如葡萄糖、乳糖和蔗糖。
2. 常用生化测试：(1) 氧化/发酵试验：通过观察细菌在含糖和底物的培养基上产生气体或酸碱变化来判断其代谢类型。
(2) 非葡萄糖发酵试验：检测细菌对非葡萄糖类底物的代谢能力，如甘油、琼脂和麦芽糖等。
(3) 酶反应试验：检测细菌对不同酶的产生情况，如氧化酶、羟丁酸氧化酶和尿素酶等。
四、分子生物学鉴定法1. PCR技术：(1) 16S rRNA基因PCR：利用通用引物扩增16S rRNA基因片段，进行序列比对来确定目标细菌种属和亚属分类。
(2) 特异性PCR：利用特异性引物扩增目标细菌的DNA片段，进行电泳分离和检测来确定其存在与否。
2. 基因测序：(1) 16S rRNA基因测序：通过对PCR扩增的16S rRNA基因片段进行测序，进行比对和分类鉴定。
(2) 多基因组合测序：通过同时对多个基因进行测序，提高鉴定准确性和可靠性。
五、鉴定结果的判断1. 生化鉴定法：根据细菌在不同培养基上的生长特征和代谢产物来判断其种属和亚属分类。
肠杆菌科概述、分类与特性
3. 其中鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门菌对 人致病性较强。此外，许多细菌既 是正常菌群，也是条件致病菌。在 机体抵抗力下降，寄居部位的改变 或菌群失调时能引起机会感染。
肠杆菌科概述、分类和特性
二、临床意义
占临床分离菌总数的50％和Ｇ-总数的 80％, 将近50％的败血症70％以上的泌尿 道感染和大量的肠道感染是由肠杆菌科 细菌引起的。 1. 人类肠道外感染 除志贺菌较少引起肠外 感染，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产 酸克雷伯菌、奇异变形杆菌、产气肠杆 菌、阴沟肠杆菌、粘质沙雷菌等均可引 起泌尿道、呼吸道、伤口和中枢神经系 统的感染;
⑵ 内毒素 具有发热、休克、DIC等病理作用。
⑶ 肠毒素 产生不耐热和耐热肠毒素两种肠 毒素：均可使肠道细胞中cAMP 的水平升高，引起肠液大量分泌 而导致腹泻。
肠杆菌科概述、分类和特性
二、临床意义 ⑵ 2. 所致疾病 ⑴ 肠道外感染 是临床分离的G-杆菌中最常见的 菌种，可引起泌尿系等各种类型的感染。 引起泌尿系感染的菌株以血清型01、 2、6为多见，本菌还可引起菌血症、 胆囊炎、肺炎及新生儿脑膜炎等。 常 见于腹腔内脓肿、肠穿孔继发腹膜炎、 肠道手术后继发感染或大面积灼伤创面 感染。
肠杆菌科概述、分类和特性
4. 培养和生化特性 营养要求不高，在普通培养基上生长
良好；兼性厌氧，主要生化特性包括发 酵葡萄糖(产酸或产酸产气)，触酶阳性, 氧化酶阴性，可将硝酸盐还原至亚硝酸 盐。 5. 抵抗力
抵抗力不强，加热60℃30min即被杀 死，不耐干燥，对一般化学消毒剂均敏 感。对低温有耐受力。能耐胆盐，能抵 抗染料的抑菌作用。
毛，能运动。致病性菌株有菌毛。 2. 抗原成分
⑴Ｏ抗原是细胞壁成分脂多糖。以核 心多糖为中心的三层结构，内侧是脂类 A, 为内毒素的毒性成分。外侧是由重复 的特异多糖，决定Ｏ抗原的特异性。
肠杆菌科鉴定全
土生克雷伯菌（K. terrigena）
柔特勒菌属 解鸟氨酸柔特勒菌（R. ornithinolytica） (Raoultella)
植生柔特勒菌（R. planticola）
土生柔特勒菌（R. terrigena）
克 培养特征
雷 伯 血琼脂上菌落较大，呈 菌 黏液状，以接种环挑取 属 时易拉成丝
+
葡萄糖酸盐 － － － － + + + + + + － － － － － － － +
六.苯丙氨酸阳性组的各属鉴别
试 验 变形杆菌属 普鲁维登菌属 摩根氏菌属 塔特姆属
H2S
+
-
-
-
枸橼酸盐
+/-
+
-
-
靛基质
+/-
+
+
-
1.变形杆菌属内各种的鉴别
试 验 普通变形杆菌 奇异变形杆菌 潘氏变形杆菌 产粘液变形杆菌
+
分类：现有13个种2个生物型
肠
杆 原有7个种2个生物型
菌 属
产气肠杆菌(E. aerogenes)
阴沟肠杆菌(E. cloacae)
杰高维肠杆菌
坂崎肠杆菌
泰洛肠杆菌
中间肠杆菌
聚团肠杆菌
河生肠杆菌生物群2
后增加7个菌 阿氏肠杆菌 何氏肠杆菌 溶解肠杆菌 超压肠杆菌 克沃尼肠杆菌 考伯肠杆菌 帕瑞勒肠杆菌
属
致泻性E.coli分为5类：
肠毒素型大肠埃希菌 (ETEC)
肠致病性大肠埃希菌 (EPEC)
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勒米诺菌属 Leminorella 默勒氏菌属 Moellerella 肥大杆菌属 Obesumbacterium 布拉格菌属 Pragia 光杆菌属 Photorhabdus 邻单孢菌属 Plesiomonas 拉恩氏菌属 Rahnella 塔特姆氏菌属 Tatumella 特布尔西菌属 Trabulsiella 致病杆菌属 Xenorhabdus
约克纳菌属 Yokenella 肠道菌 58 群 Enteric group 58 肠道菌 59 群 Enteric group 98 肠道菌 60 群 Enteric group 60 肠道菌 63 群 Enteric group 63 肠道菌 64 群 Enteric group 64 肠道菌 68 群 Enteric group 68 肠道菌 69 群 Enteric group 69 肠道菌 137 群 Enteric group 137
1、 自然菌膜的保护作用：
肠杆菌科作为一种正常菌群，在肠道粘膜上生 长繁殖形成一层自然菌膜。他们是非特异性的 局部保护膜，可使机体抵抗病原微生物的侵袭 和群集。Andreyeva等在两组HEP—2细胞上作 了如下试验：
HEP—2 细胞（试验组）
接种大肠埃希氏菌 M17 株
+
6 个半小时后接种宋内志贺氏菌 +
肠杆菌科的分类与鉴定
肠杆菌科是临床上最常见的一类革兰氏 阴性杆菌，它主要存在于人或动物的肠 道以及自然界的水源、土壤中。在正常 情况下，多数肠杆菌科细菌对人是无害 的，有些菌种还是人体所必需的，这是 因为肠杆菌科在正常寄生部位和正常寄 生数量的条件下对人体具有重要的生理 作用：
肠杆菌科在正常寄生部位和正常寄生数量的条 件下对人体具有以下重要的生理作用：
细胞感染率
低
HEP—2 细胞（对照组） —
+ 高
2、 非特异性免疫作用：
正常菌群对人体是一种抗原刺激，可使机 体产生免疫反应，从而限制了病原菌的危 害性。如大肠埃希氏菌的生理作用之一就 是广谱的免疫原性。有人作了如下试验：
接种少量痢疾志贺氏菌 结果
正常豚鼠 +
不发生菌痢
无菌豚鼠 +
致死性溃疡性肠炎
普通 生化反应
变形杆菌
Indol
+
鸟氨酸脱羧酶 —
木糖发酵
+
七叶苷水解
+
豪萨 变形杆菌
+ —
+ —
奇异 变形杆菌
—
+ + —
潘尼氏 变形杆菌
— —
+ —
产粘液 变形杆菌
— — — —
变形杆菌属
I
+
— 鸟氨酸
—
—+—来自普通变形杆菌 豪萨变形杆菌
+
迁徙生长
—
+
H2S
—
变形杆菌属
摩尔根氏菌属 普罗维登斯菌属
鸟氨酸脱羧酶
—
枸橼酸盐利用 +
+
—
普罗维登斯菌属
摩尔根氏菌属
1、 变形杆菌属的分类鉴定
变形杆菌属原来共分为四个种，即：普 通变形杆菌（包括生物2群和生物3群）、 奇异变形杆菌、潘尼氏变形杆菌和产粘 液变形杆菌。 2000年又将普通变形杆 菌生物3群命名为豪萨变形杆菌。
克雷伯氏菌属 Klebsiella
布丘杆菌属 Buttiauxella
沙雷氏菌属 Serratia
西地西氏菌属 Cedecea
哈夫尼亚菌属 Hafnia
爱文氏菌属 Ewingella
埃希氏菌属 Escherichia
克吕沃氏菌属 Kluyvera
志贺氏菌属 shigella
莱克勒菌属 Leclercia
菌
属
变形杆菌属 摩尔根氏菌属 普罗维登斯菌属 肠杆菌属 泛杆菌属 克雷伯氏菌属 沙雷氏菌属 哈夫尼亚菌属 埃希氏菌属 志贺氏菌属 沙门氏菌属 枸橼酸杆菌属 爱德华氏菌属 耶尔森氏菌属
生化 苯丙氨酸脱氨酶试验
+ + + — — — — — — — — — — —
反应 葡萄糖酸盐利用试验 — — —
+ + + + + — — — — — —
变形杆菌属 Proteus
沙门氏菌属 Salmonella
摩尔根氏菌属 Morganella
枸橼酸杆菌属 Citrobacter
普罗维登斯菌属 Providencia
爱德华氏菌属 Edwardsiella
肠杆菌属 Enterobacter
耶尔森氏菌属 Yersinia
泛杆菌属 Pantoea
布特维西菌属 Budvicia
二、肠杆菌科的初步识别
肠杆菌科 弧菌科 非发酵菌群 巴氏菌科
形 态 短杆状 弧状或逗点状 球杆状 球杆状
鞭毛及位置 周毛或无 氧化酶 — O/F 试 验 F
端毛 周、端毛或无 无
+
+/— +
F
O/— F
三、肠杆菌科的初步分群
肠杆菌科现有31个属和8个未分类的生化群
肠杆菌科的 31 个菌属和 8 个未分类的生化群（《全国临床检验操作规程》第三版）
四、苯丙氨酸脱氨酶试验阳性 菌群的分类鉴定
苯丙氨酸脱氨酶试验阳性菌群共包括三 个菌属，即：变形杆菌属、摩尔根氏菌 属、普罗维登斯菌属。
生化反应 H2S 鸟氨酸脱羧酶 枸橼酸盐利用 尿素酶 迁徙生长
变形杆菌属 摩尔根氏菌属 普罗维登斯菌属
+
—
—
+/—
+
—
+
—
+
+
—
+/—
+
—
—
苯丙氨酸脱氨酶试验阳性菌群
由此可见，肠杆菌科在正常寄生部位和正常寄 生数量的情况下，不仅对人体无害，并且有益， 但如果其寄生部位和寄生数量发生变化，同样 可引起机体的各类病变。因此，肠杆菌科的多 数细菌又被称为“条件致病菌”。
此外，肠杆菌科中还有一些细菌如沙门氏菌属、 志贺氏菌属是世界公认的肠道病原菌。
第二节、 肠杆菌科的分类与鉴定
肠杆菌科包括一大类生物学性状相似的 革兰氏阴性无芽胞杆菌。它们需氧或兼 性厌氧生长；营养要求不高，在普通培 养基上生长良好；多数具有周身鞭毛 （少数无鞭毛）；能分解葡萄糖产酸或 产酸产气，多数能还原硝酸盐为亚硝酸 盐；氧化酶（—），触酶阳性，O/F试验 （F型）；DNA G+C=38—60mol%。
肠杆菌科细菌能合成核黄素、生物素、 叶酸、泛酸、吡多醇、维生素K和B族维 生素等重要物质。如人体所需的维生素K 和B族维生素等在自然食物中极少含有， 必须靠大肠埃希氏菌合成，若长期使用
抗生素导致大肠埃希氏菌缺失，可造成 维生素K和B族维生素的缺乏。
肠杆菌科的生物拮抗作用主要靠与病原菌争夺 营养和占据空间位置来实现。此外，大肠埃希 氏菌还产生大肠菌素和酸性物质，抑制志贺氏 菌和金葡菌的生长。