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培养基的配制及灭菌实验报告

培养基的配制及灭菌实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除培养基的配制及灭菌实验报告篇一:培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目:培养基的制备与灭菌二、实验目的:1、明确培养基的配置原则,掌握配置方法。

2、了解灭菌的原理,学习掌握灭菌器的使用方法。

三、实验器材:1、药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。

2、仪器:三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。

四、实验原理:1、培养基的制备包括一下几种成分:(1)水分:主要成分。

(2)n源:包括无机氮和有机氮。

(3)c源:主要是含碳有机物、碳氢化合物等。

(4)无机盐:如nacl、Kh2po4等。

微量元素:cu、K、mg、s、p、Zn。

有些还需要添加“生长因子”,通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。

2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的,选用不同的培养基,但有机物总量不得超过15%,盐类一般不超过1%。

培养基有以下分类:按成分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态:固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌,防止营养物质中的微生物富集。

3、灭菌:用理化手段杀灭一切微生物的营养体,包括芽孢和孢子,在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。

(1)高压蒸汽灭菌:将物品放入封闭的加压灭菌器,加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽,将冷空气排尽,压力上升,使水沸点变高,导致菌体蛋白质变性,一般0.1mpa、121℃、15~30min可以彻底灭菌,本次实验灭菌20min。

若是含糖培养基,110℃、30min。

(2)干热灭菌:微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。

因高温,所以含水量小,不利于蛋白质受热变性,所以温度高,时间长。

(3)紫外灭菌:诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DnA复制。

(4)过滤除菌:实验室中用微孔滤膜(孔径一般为0.22μm)。

除病菌需更小。

五、实验步骤:1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gnacl放入烧杯,加入100mL水,用玻璃棒搅匀溶解,移入三角瓶,并加入1.5g琼脂。

培养基的配制与灭菌实验报告

培养基的配制与灭菌实验报告

培养基的配制与灭菌实验报告一、实验目的1、掌握培养基的配制方法和原理。

2、学习并掌握高压蒸汽灭菌锅的使用方法和操作要点。

3、了解灭菌在微生物实验中的重要性。

二、实验原理(一)培养基的配制培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。

不同的微生物对营养物质的需求不同,因此需要根据培养的微生物种类和实验目的来选择合适的培养基配方。

培养基通常包含碳源、氮源、无机盐、生长因子和水等成分。

在配制培养基时,需要按照一定的比例准确称量各种成分,并将其溶解在水中,调节 pH 值至合适范围,最后定容至所需体积。

(二)灭菌灭菌是指杀灭或去除物体上所有微生物(包括芽孢和孢子)的方法。

在微生物实验中,为了防止杂菌污染,必须对培养基、实验器具等进行灭菌处理。

高压蒸汽灭菌是一种常用的灭菌方法,其原理是利用高温高压使微生物的蛋白质和核酸变性失活,从而达到灭菌的目的。

一般在 121℃、1034 kPa 的条件下灭菌 15 20 分钟,可以杀灭包括芽孢在内的所有微生物。

三、实验材料和仪器1、材料牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、NaOH 溶液、HCl 溶液、蒸馏水等。

2、仪器电子天平、药匙、玻璃棒、烧杯、量筒、pH 试纸、三角瓶、移液管、高压蒸汽灭菌锅、培养皿等。

四、实验步骤(一)培养基的配制1、计算根据培养基配方,计算所需各种成分的用量。

例如,配制 1000 mL 牛肉膏蛋白胨培养基,需要牛肉膏 3 g、蛋白胨 10 g、氯化钠 5 g、琼脂 15 20 g。

2、称量用电子天平准确称量各种成分。

先称取琼脂,放入三角瓶中,然后分别称取牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,放入另一个烧杯中。

3、溶解在烧杯中加入适量蒸馏水,用玻璃棒搅拌,使各种成分溶解。

将溶解后的溶液倒入三角瓶中,用少量蒸馏水冲洗烧杯,冲洗液也倒入三角瓶中。

4、调节 pH 值用 pH 试纸测定培养基的初始 pH 值,然后用 1 mol/L 的 NaOH 溶液或 1 mol/L 的 HCl 溶液调节 pH 值至 72 74。

实验七培养基的制备及干湿灭菌法

实验七培养基的制备及干湿灭菌法
实 验 五
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培养基配制 及干、湿热灭菌
了解配制培养基的基本原理,掌握配
制方法 了解并掌握干、湿热灭菌的原理及方法
一.实验目的及要求
二.实验原理
培养基 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养物质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。不同微生物选用不同培养基,但是,不同种类的培养基中,一般应含有水分、碳源、氮源、无机盐、生长因素等。
(二)干、湿热灭菌
药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、可溶性淀粉 、 K2HPO4、 KH2PO4 、 蒸馏水、琼脂、1mol氢氧化钠、花生油、葡萄糖、溴甲酚紫、中性红、乙醇
器材:天平、药匙、瓷缸、玻璃棒、电炉、 PH试纸、试管、三角瓶、移液管、牛皮纸、棉花、线绳、高压锅。
三.材料仪器
向上述烧杯中加入所需要的水量,搅拌,加热使其溶解。如是配制固体培养基,在琼脂的熔化过程中,需不断搅拌,并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。待完全熔化后,补足所失水分。 培养基的制备过程 称量---溶解----调节pH值----过滤----分装及包扎----灭菌----灭菌后试管摆放斜面
高压蒸汽灭菌器使用方法
手提式高压蒸汽灭菌器示意图
作业:
1. 在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题 ?为什么? 2.你配制的高氏一号培养基有沉淀产生吗?说明产生或未产生的原因。 3.高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽?灭菌完毕后,为什么待压力降低为“0”时才能打开排气阀,开盖取物?
培养基的分类
按照配制培养基的营养物质来源可分为: ⑴天然培养基 :利用天然的有机物配制而成的培养基。如:牛肉膏蛋白胨培养基。 ⑵半合成培养基:既有天然物质又含化学试剂的培养基称半合成培养基。如马铃薯蔗糖培养基。 ⑶合成培养基:采用多种化学试剂配制的,各种成分及其用量都确切知道的培养基。如高氏一号培养基。 根据培养基制成后的物理状态可分为: ⑴液体培养基:呈液体状态的培养基。 ⑵固体培养基:外观呈固体状态的培养基。 ⑶半固体培养基:将各种营养成份按比例配制成营养液后,加入适量固化剂 ,处于半固体状态的培养基。

培养基的配制与灭菌实验报告

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培养基的配制与灭菌实验报告培养基的配制与灭菌实验报告引言:细菌培养是微生物学实验中常见的一项技术,而培养基的配制和灭菌则是细菌培养的基础。

本实验旨在探究培养基的配制方法和灭菌技术对细菌培养的影响,为后续的微生物实验打下坚实的基础。

一、培养基的配制培养基是细菌生长和繁殖所需的营养物质,其配制需要考虑细菌的营养需求和生长环境。

本实验选取了常用的液体培养基和固体培养基进行配制。

1. 液体培养基的配制液体培养基的配制相对简单,主要包括基础成分和营养物质的添加。

首先,按照配方中的要求称取所需的基础成分,如蛋白胨、肉汤等。

然后,将基础成分溶解在适量的蒸馏水中,加热至沸腾,搅拌均匀。

待溶液冷却至室温后,再添加适量的营养物质,如葡萄糖、氨基酸等。

最后,用蒸馏水将溶液稀释至所需的体积,调节pH值至适宜范围。

2. 固体培养基的配制固体培养基的配制相对复杂,需要考虑到培养基的凝固和固化。

首先,按照液体培养基的配制方法,将基础成分和营养物质溶解在蒸馏水中。

然后,将溶液加热至沸腾,搅拌均匀。

接着,将溶液倒入试管或培养皿中,待溶液冷却至40-50℃时,添加适量的琼脂或琼脂糖,充分搅拌均匀。

最后,将试管或培养皿密封,放置于室温下,待培养基凝固后,进行灭菌处理。

二、灭菌实验灭菌是为了避免培养基受到外界细菌污染,保证实验的准确性和可靠性。

常用的灭菌方法包括高温灭菌、滤过灭菌和化学灭菌。

1. 高温灭菌高温灭菌是最常见的灭菌方法之一,通过加热培养基使其中的细菌被杀灭。

将配制好的培养基装入培养瓶中,盖上瓶盖,放入高压锅或高温灭菌器中。

加热至121℃,保持15-20分钟,使培养基充分灭菌。

待培养基冷却后,即可进行细菌接种。

2. 滤过灭菌滤过灭菌是一种物理灭菌方法,通过滤器将培养基中的细菌过滤掉。

将配制好的培养基装入滤器中,选择合适的孔径和材质的滤膜。

然后,将滤器连接到真空泵或压力泵上,启动泵进行过滤。

待培养基完全通过滤器后,即可得到无菌的培养基。

培养基的制备与灭菌实验报告

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培养基的制备与灭菌实验报告一、引言在微生物学研究中,培养基的制备与灭菌是非常重要的步骤。

培养基是供养微生物生长和繁殖所必需的营养物质的混合物,而灭菌则是为了消除其中的有害微生物,保证培养基的纯净度。

本实验旨在探讨培养基的制备与灭菌的方法与步骤,以及其对微生物培养的影响。

二、培养基的制备2.1 选择培养基成分培养基的成分根据所需培养的微生物种类和目的而定,常见的成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。

在制备培养基之前,需要明确所需微生物的营养需求,选择合适的成分。

2.2 配制培养基根据所选的成分和配方,按照一定比例将各种成分溶解在适当的溶剂中,常见的溶剂包括蒸馏水和生理盐水。

注意溶解顺序和温度,保证各种成分充分溶解。

2.3 调节pH值微生物对pH值的要求各不相同,因此在制备培养基时需要调节pH值。

使用酸碱溶液逐滴加入培养基中,同时使用pH试纸或pH计检测pH值,直到达到所需的范围。

2.4 灭菌前的处理在灭菌之前,需要对培养基进行一些处理,包括过滤、加热和冷却等。

过滤可以去除其中的固体杂质和大颗粒微生物。

加热可以杀灭其中的有害微生物,常用的方法包括高温灭菌和压力灭菌。

冷却后的培养基可以用于微生物的培养。

三、灭菌实验3.1 高温灭菌高温灭菌是常用的灭菌方法之一,其原理是利用高温杀灭微生物。

将配制好的培养基倒入培养瓶中,盖上瓶盖,放入高温灭菌器中。

设置合适的温度和时间,一般为121℃,15-20分钟。

高温灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。

3.2 压力灭菌压力灭菌是一种利用高温和高压杀灭微生物的方法。

将配制好的培养基倒入培养瓶中,盖上瓶盖,放入压力灭菌器中。

设置合适的温度和压力,一般为121℃,15-20分钟。

压力灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。

3.3 灭菌效果验证灭菌后的培养基需要进行灭菌效果验证,以确保其中没有活菌存在。

常用的方法包括接种试验和平板计数法。

接种试验是将灭菌后的培养基接种到无菌平板上,观察是否有菌落生长。

培养基的制备与灭菌实验报告

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培养基的制备与灭菌实验报告培养基的制备与灭菌实验报告引言:在微生物学研究中,培养基是不可或缺的工具。

培养基的制备和灭菌是保证实验结果准确性和可重复性的重要步骤。

本实验旨在探究培养基的制备方法和灭菌技术的应用。

一、培养基的制备1.1 选择合适的培养基成分培养基的成分根据微生物的需求而定。

常见的培养基成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。

在制备培养基时,需根据所研究的微生物特性选择合适的成分。

1.2 制备培养基的步骤制备培养基的步骤主要包括称量、溶解、调pH、加热消毒和装瓶。

首先,按照配方称取所需成分,并逐一溶解于适量的蒸馏水中。

随后,根据微生物的需求,调节溶液的pH值。

最后,将溶液装入试管或培养皿中,并加热消毒。

二、灭菌技术的应用2.1 灭菌的目的灭菌是指将培养基、培养器具和实验室环境中的微生物杀灭或去除的过程。

灭菌的目的是为了避免外来微生物的污染,确保实验结果的准确性。

2.2 常用的灭菌方法常用的灭菌方法包括高温灭菌、化学灭菌和紫外线灭菌。

高温灭菌是指将培养基或器具在高温条件下进行加热消毒,常用的方法有烘箱灭菌和压力灭菌。

化学灭菌则是通过使用化学物质如酒精、乙醛等来杀灭微生物。

紫外线灭菌则是利用紫外线的辐射杀灭微生物。

2.3 实验中的灭菌操作在实验中,常用的灭菌操作包括培养基灭菌、器具灭菌和工作台灭菌。

培养基灭菌是将制备好的培养基加热消毒,以杀灭其中的微生物。

器具灭菌则是通过高温、化学物质或紫外线对实验器具进行消毒。

工作台灭菌则是通过紫外线辐射对实验台面进行灭菌处理。

结论:培养基的制备和灭菌是微生物学研究中的重要环节。

正确的培养基制备和灭菌操作可以确保实验结果的准确性和可重复性。

通过本实验,我们学习了培养基的制备方法和常用的灭菌技术,为今后的微生物实验打下了基础。

参考文献:[1] 陈晓玲, 赵莉, 邱晓红, 等. 基础微生物学实验教程[M]. 2版. 北京: 高等教育出版社, 2017.[2] 郭燕妮, 张晓红. 微生物学实验指导[M]. 北京: 高等教育出版社, 2019.。

培养基的配制与灭菌实验报告

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培养基的配制与灭菌实验报告一、实验目的1.掌握培养基的配制方法;2.掌握培养基的灭菌方法;3.了解常用的培养基配方和用途。

二、实验仪器和试剂仪器:称量器、自动调pH计、恒温培养箱、高压灭菌器等。

试剂:各种常用的培养基配方、蒸馏水、紫外灯、酒精等。

三、实验步骤1.准备工作首先准备好需要的试剂和仪器,经过试剂和仪器的消毒处理后,将其放置在试验台上,以备使用。

2.培养基的配制培养基的配制是实验的关键步骤之一。

在实验过程中,我们使用锥形试管来制备试验的培养基。

首先需要称量出所需的重量并将其加到试管中,之后按照规定的比例加入蒸馏水、糖和其他的试剂,搅拌均匀。

最后使用自动调pH计来调节培养基的pH,确保在制备培养基过程中能够准确地保持pH值在标准范围内。

3.培养基的灭菌在实验中,我们使用高压灭菌器对制备好的培养基进行灭菌处理,以确保在培养试验过程中,培养基中不会出现杂菌和异物的干扰。

在灭菌过程中,我们需要将培养基放入高压灭菌器中,通过高压和高温来杀死细菌和其他微生物。

同时,也需要不断监测培养基的温度和压力,确保灭菌过程的正常进行。

四、实验结果根据实验的结果可以发现,在正确地配制和灭菌培养基的情况下,我们可以得到符合规定标准的培养基样品。

通过实验,我们也可以更加深入地理解常见的培养基配方和用途,为今后的实验研究提供更加可靠和高质量的实验基础。

五、实验思考在实验过程中,我们还需要注意以下几个问题:1.实验时需要仔细操作,避免粗心大意和疏忽带来的不好的影响。

2.在配制和灭菌时,需要严格遵守规定的操作流程和步骤,以免影响前后实验结果的统一性和准确性。

3.值得注意的是,在配制和灭菌过程中,需要注意卫生和消毒处理,以避免细菌和其他微生物的污染和繁殖。

4.在实验过程中,还需要对实验结果进行仔细的分析和讲解,以便更好的理解和掌握实验原理和方法。

综上所述,在实验培养基的配制和灭菌实验中,需要做好多方面的考虑和准备,以确保实验能够顺利进行,并能获得稳定、高质量和高准确度的结果。

培养基的配制与灭菌实验报告

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培养基的配制与灭菌实验报告实验名称:培养基的配制与灭菌实验
实验目的:了解培养基的配制方法和灭菌技术,掌握实验操作
技能,培养实验室操作能力。

实验原理:
1. 培养基配制
培养基的配制是在一定比例下将各种营养成分混合组成的,包
括碳水化合物、胺基酸、氮源、矿物质等,以提供生长和繁殖细
菌所需的条件。

2. 灭菌
细菌培养需要具备无菌环境,因此必须对培养基进行灭菌处理。

实验中常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌和紫外线灭菌。

实验器材和试剂:
1. 水浴锅
2. 培养瓶和试管
3. 称量硬度高的玻璃容器
4. 试剂:琼脂、提取物、蔗糖、酵母提取物、胆汁、NaCl,
实验步骤:
1. 培养基配制
按照比例将各种营养成分混合,加入含有一定含量的蔗糖和酵母提取物的琼脂,再加入一定量的胆汁和NaCl,配制成固体培养基。

将琼脂和提取物等放入庞大的试管中;配合无水熔点管等研磨出来的溶液进行试管的分离悬胶操作,所得的琼脂可以冷藏保存。

2. 灭菌
将培养基装入培养瓶中,放入水浴锅中加热,使水温达到100℃左右,进行高压蒸汽灭菌。

灭菌后将培养基放置在无菌环境中,
待其温度降至40℃左右,即可使用。

实验结果和分析:
实验结果表明,配制的培养基已可以暂存和使用,经过高温蒸
汽灭菌可以达到无菌效果。

实验结论:
本实验灭菌技术和培养基配制方法是现代微生物学实验检测的
基础,熟练掌握这些操作技能可以提高实验室操作能力,为实验
的顺利开展提供有力保障。

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南昌大学实验报告
学生姓名:学号:专业班级:
实验类型:√验证□综合□设计□创新实验日期:实验成绩:
实验七培养基的配制和灭菌
一、实验目的:
1 、学习玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备工作;
2、了解配制微生物培养基的基本原理,本实验通过学习常用细菌培养基的配制来了解并掌握常规培养基配制和无菌水的制备方法;
3、学习各类物品的包装及灭菌技术;
二、实验基本原理:
培养基是应科研、生产需要,根据微生物对营养的需求按一定比例人工配置的适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的混合营养物,任何培养基都应具备微生物生长所需要的六大类营养要素。

培养基配制好后应立即灭菌后备用。

由于微生物的种类及代谢的多样性,因而培养基的种类也很多,它们的配方及配制方法也各有差异,除一些特殊培养基外,一般培养基的配制过程大致相同。

一款成熟的培养基配方都会在其配方后面附上配制方法及pH值、灭菌温度等其他配制要求。

三、主要仪器设备及耗材:
1、药品及试剂:
可溶性淀粉、营养琼脂(或牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂粉、10%NaOH,10%HCl)
2 、仪器及其它
高压蒸汽灭菌锅、干燥箱、试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻棒、天平、药匙、pH试纸(1-14)、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、培养皿、吸管、玻璃珠等
四、实验步骤:
(一)培养基的制备与分装
1 称量:按培养基配方比例依次准确地称取药品。

(可溶性淀粉先用少量冷水溶化后再加入)
2 熔化:在沸水浴锅中加热熔化。

3 调pH:10%NaOH,10%HCl调pH至7.4-7.6。

4 过滤:趁热用多层纱布过滤(本实验勿需过滤)
5 分装:将溶化的固体培养基趁热加至漏斗上,装试管时,装量不超过试管的1/4,注意管口不要沾上培养基。

6 加塞:试管应先捆成一捆,然后再于棉塞外包扎牛皮纸,贴上标签,注明培养基名称、日期、组别。

(二)无菌水的制备
用量筒量取150ml自来水于带玻璃珠三角瓶中,塞上棉塞,包扎牛皮纸。

(三)器皿的准备
1、培养皿的包装每6~10个一包,用旧报纸包扎(或放在特制铁皮圆筒里加盖扣严)。

2、吸管的包装首先在吸管的上端塞上一小段棉花,用长纸条包扎、打结。

(四)培养基、无菌水、器皿的灭菌
1、将培养基、无菌水放入高压蒸汽灭菌锅内,湿热灭菌。

2、培养基灭菌完毕,将试管培养基搁成斜面。

3、器皿放入干热灭菌箱内干热灭菌。

(注:详情请同学参考教材实验五培养基的配制和灭菌)
五、思考讨论题
1、培养基是根据什么原理配制的?
2、营养琼脂中含有些什么成分?
3、为什么湿热灭菌比干热灭菌优越?
六、实验体会及对实验改进的建议。

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