2014 高分子学报 两步蒸馏沉淀聚合法制备红霉素表面分子印迹聚合物及其性能研究_刘江

第12期2014年12月高分子学报ACTA POLYMEＲICA SINICANo．12Dec．，20141635*2014-04-15收稿，2014-05-16修稿；兵团博士资金专项（项目号2012BB020）、石河子大学高层次人才科研启动资金专项（项目号ＲCZX201115）、国家自然科学基金（基金号81260487）和人社部留学回国人员启动项目（项目号ＲSLX201204）资助．＊＊通讯联系人，E-mail ：yingchunli_judy@163．com ；Th_pha@shzu．edu．cn doi ：10.11777/j．issn1000-3304.2014．14123两步蒸馏沉淀聚合法制备红霉素表面分子印迹聚合物及其性能研究*刘江刘媛李迎春＊＊唐辉＊＊吴冰冰（新疆特种植物药资源教育部重点实验室石河子大学药学院石河子832002）摘要采用两步蒸馏沉淀聚合法，制备了红霉素表面分子印迹聚合物．第一步制备了甲基丙烯酸和二乙烯基苯共聚物微球（PMAA-co -DVB ），将其作为内核，再通过第二步蒸馏沉淀聚合，以甲基丙烯酸（MAA ）为功能单体，二乙烯基苯（DVB ）为交联剂，偶氮二异丁腈（AIBN ）为引发剂，红霉素（EM ）为模板分子，内核表面聚合一层分子印迹膜层，从而制得具有“核-壳”结构的红霉素表面分子印迹聚合物．通过激光粒径测定、扫描电子显微镜以及结合实验对其形貌和结合性能进行表征．结果表明，在聚合物单体体积分数为7%时，制备出的PMAA-co -DVB 微球形态良好，当EM 与MAA 的比例为1ʒ4，第二步蒸馏沉淀聚合中单体体积分数为2.8%时，所得的印迹材料结合性能最佳，对EM 最大结合量为76.8mg /g ，结合达到平衡的时间为90min．对红霉素的识别能力高于对其结构类似物罗红霉素．关键词两步蒸馏沉淀聚合，表面分子印迹，红霉素分子印迹聚合物（molecularly imprintedpolymers ，MIPs ）是利用分子印迹技术（molecular imprinting technique ，MIT ）制备的对特定的模板分子有选择性结合的功能材料．由于MIPs 具有构效预定性（predetermination ）、特异识别性（specific recognition ）和广泛实用性（practicability ）等诸多特点且有较强的分离和富集能力，逐渐发展成一个研究热点，已应用于药物分析、食品分析、军事、生化分离、生物传感器等多个领域［1］．传统方法制备的印迹聚合物因印迹位点大都位于聚合物内部，存在模板分子洗脱困难、分子渗漏、结合速率低、达结合平衡时间较长、或反应体系中需加入稳定剂而导致成分复杂等诸多问题，且制备的材料形状各异，粒径难以控制［2］．近年来发展的表面印迹技术可以将印迹位点固定于材料表面，从而克服传统印迹中的模板“包埋”现象，所制备的表面分子印迹聚合物（surface molecularly imprinted polymers ，SMIPs ），较其他方法制备的印迹材料有显著特点：结合位点较容易获得；物质迁移快；结合动力学快；可以印迹蛋白质等生物大分子［2］．以“核-壳”结构为代表的球状SMIPs ［3］可以通过基质微粒的大小控制SMIPs 的大小和形状，规整的外形拓展了其应用范围，也提高了材料的性能．SMIPs 的制备方法大致可分为牺牲载体法、化学接枝法、聚合加膜法等［2］，大都以硅胶作为内核，在其表面进行修饰聚合而得到表面印迹材料．但硅胶需要进行前处理，制备过程繁琐，导致产率较低［4］；且大部分商品化的硅胶颗粒多为无定形，粒径大小不均，使制得的印迹材料形状、粒径都难以控制，降低了印迹材料性能．如以有机聚合物微球为内核，则能弥补硅胶作为内核的不足．首先，目前聚合物微球的制备技术已能保证具有良好单分散性内核的合成，其次，在合成有机内核的过程中，可以根据需要直接合成含有特定基团的微球（如氯甲基［5］、腈基［6，7］、羟基［8，9］、羧酸基［10 12］和吡啶基［13］、氨基［14］等），从而简化了外壳接枝聚合的制备流程，提高了产率．目前合成有机聚合物微球的常见方法有分散聚合、乳液聚合、悬浮聚合、沉淀聚合、蒸馏沉淀聚合法等［15］．蒸馏沉淀聚合是杨新林、黄文强等［6］在沉淀聚合的基础上发展起来的，其课题组已将此聚合方法的机理进行了深入的研究并用此方法高分子学报2014年制备出了一系列功能材料［16］．蒸馏沉淀聚合反应开始于含有单体和引发剂的均相体系，随着溶剂被蒸馏出来，体系中形成单分散的聚合物微球．由于该聚合过程中通常不需要添加任何表面稳定剂或添加剂，聚合物微球洁净，避免了用溶剂对这些助剂进行抽提等复杂过程，且反应容易进行，聚合过程能得到很好的控制［16］．蒸馏沉淀聚合已经被证实是一个方便且能有效地制备具有不同化学结构和相结构的聚合物微球的反应方法．本课题采用以蒸馏沉淀聚合法制得的甲基丙烯酸-二乙烯基苯共聚微球（PMAA-co-DVB）为内核，通过二次蒸馏沉淀聚合反应，以限制使用的兽药红霉素（EM）为模板分子制备了红霉素表面印迹聚合物（EM-SMIPs）．1实验部分1.1仪器与试剂UV-2401PC型紫外分光光度计（Shimadzu中国公司）；LC-15C高效液相色谱仪（Shimadzu中国公司）；JSM-6490LV扫描电子显微镜（日本电子公司）；S3500激光散射粒度分析仪（美国Microtrac公司）；IＲaffinity-1CE红外仪（Shimadzu中国公司）；SHA-C型水浴恒温振荡器（江苏省金坛市医疗仪器厂），BS110S天平（德国Sartorius公司）；JJ-1电动搅拌器（常州市伟嘉仪器制造有限公司）；雷磁PHS-3C型pH计（上海精密科学仪器有限公司）；SK5200HP超声波提取器（上海科导超声仪器有限公司）；干燥箱（上海市实验仪器总厂）．红霉素（erythromycin，EM），广东省韶关市集琦药业有限公司；罗红霉素（roxithromycin，ＲOX），上海源叶生物科技有限公司；甲基丙烯酸（MAA）、偶氮二异丁腈（AIBN），天津光复精细化工研究所；二乙烯基苯（DVB），纯度≥80%，Sigma 中国公司；乙腈、甲醇，色谱纯，Fisher Scientific中国公司；乙腈、甲醇、冰乙酸、磷酸氢二钾，均为市售分析纯试剂．DVB使用前用5%的氢氧化钠洗涤以除去阻聚剂；MAA使用前经旋转蒸发以除去阻聚剂；AIBN用前用乙醇重结晶．1.2EM-SMIPs的制备1.2.1第一步蒸馏沉淀聚合制备甲基丙烯酸-二乙烯基苯共聚物微球（PMAA-co-DVB）按文献［17］所述方法制备，具体如下：将均匀分散在80mL乙腈中的引发剂AIBN（占单体总质量的2%）、单体MAA和交联剂DVB置于圆底烧瓶中，通氮气5min后以120r/min的速度搅拌并加热，于30min内加热至乙腈沸点并收集蒸出的溶剂，控制温度，以1.5 2h内蒸出40mL乙腈为反应终点．将所得聚合物乳液经超声、抽滤后，分别用四氢呋喃、丙酮和乙醚各洗3次，将所得固体干燥备用．1.2.2第二步蒸馏沉淀聚合制备EM-SMIPs取红霉素、AIBN、MAA、DVB溶于20mL乙腈中，超声2min使之混合均匀，避光静置12h得预聚合液．取第一步蒸馏沉淀聚合得到的聚合物0.5g置于三口烧瓶中，倒入预聚合液，加入乙腈60mL，通氮气5min后以120r/min的速度搅拌并加热，在30min内加热至乙腈沸点并收集蒸出的溶剂，控制温度，以1.5 2h内蒸出40mL乙腈为反应终点．将所得聚合物乳液经超声、抽滤后，分别用甲醇洗3次，将所得固体干燥备用．除不加模板分子红霉素外，非印迹聚合物（non-imprinted polymers，NIPs）的制备方法同上．1.2.3表面分子印迹聚合物模板分子的洗脱所得聚合物用甲醇-冰醋酸（9ʒ1，V/V）作为洗脱剂以3mL/min回流速度索式提取24h，之后用甲醇冲洗数次，烘箱50ħ干燥，保存备用．1.3红霉素、罗红霉素色谱条件含量检测均采用2010版中国药典高效液相色谱（HPLC）法，色谱柱，WondaSil C18（150mmˑ4.6mm，5μm）；柱温，25ħ；流速，1.0mL/min．红霉素色谱条件为：流动相，乙腈-磷酸盐缓冲液（pH=8.2）（6ʒ4，V/V）；检测波长，215nm．罗红霉素色谱条件为：流动相，0.067mol/L 磷酸二氢铵溶液（用三乙胺调节pH值至6.5）-乙腈（65ʒ35，V/V）；检测波长，210nm．1.4结合热力学实验称取10份20mg EM-SMIPs于5mL离心管中，除一份加入3mL甲醇作为空白，另9份分别加入浓度为0.3、0.6、1.0、2、5、8、12、16、20mg/ mL的红霉素甲醇溶液3mL．将离心管密封处理，放入25ħ振荡器中振荡24h，取出离心，吸取上清液用HPLC测定含量．NIPs按同样操作进行．1.5结合动力学实验分别称取20mg EM-SMIPs和NIPs各9份至5mL离心管中，加入一定浓度红霉素甲醇溶液3 mL，置于25ħ振荡器中．分别于10、30、60、90、120、150、180、240、300min取样，离心，测定上清636112期刘江等：两步蒸馏沉淀聚合法制备红霉素表面分子印迹聚合物及其性能研究液中游离红霉素的含量．2结果与讨论2.1MAA 与EM 的结合验证为了判别MAA 是否可以作为EM-SMIPs 的功能单体，配制了不同摩尔比例的EM 与MAA 的乙腈溶液，进行紫外光谱扫描．如图1，随着加入MAA 量的增加，EM 的最大吸收波长由207nm 红移至226nm ，且吸光度也逐渐增大，说明EM 和MAA 混合后2种分子间的相互作用形成了EM-MAA 复合物，MAA 可以作为红霉素分子印迹材料的功能单体．Fig．1UV absorbance spectra of EM and MAA at differentconcentration ratiosTable 1Particle size and yield of PMAA-co -DVB microspheres prepared at different concentrations of monomer Entry MAA （mL ）DVB （mL ）Percentage of total monomer volume （%）D n （μm ）D v （μm ）PDI Yield （%）A10．160．641————A20．481．9230．87539．8945．5924．7A30．83．251．2658．236．5133．3A41．124．4871．4833．612．4342．9A51．66．41012．2436．122．9535．1Ｒeaction conditions ：the ratio of MAA and DVB of 1ʒ4（V /V ），DVB loading of 64vol%relative to the whole monomers in 80mL of acetonitrile and initiator of 2wt%relative to the total monomers2.2红外光谱分析未洗脱EM 的分子印迹聚合物和EM-SMIPs 的红外光谱对比如图2所示．从图中可以看出，前者（图2谱图b ）在1115cm －1处中有EM 的特征吸收峰，它是红霉素中多羟基的伸缩振动峰，另一处吸收峰在1374cm －1处，与红霉素的特征吸收峰（图2谱图a ）相吻合，由此说明未洗脱的SMIPs 中存在红霉素分子，在洗脱模板分子后的聚合物红外图谱中（图2谱图c ），未出现上述2个EM 的特征峰，说明模板分子已经除去．Fig．2IＲspectra of EM （a ），SMIPs before （b ）andafter elution （c ）of EM2.3单体含量对PMAA-co -DVB 微球性能的影响按表1的原料配比，分别在单体含量为1、3、5、7、10（体积分数）的条件下制备了PMAA-co -DVB 微球，考察单体总量对微球粒径分布的影响．粒径分布指数计算公式为PDI =D v /D n ［17］．PDI 表示粒径分布指数，D v 表示体积平均粒径，D n 表示数目平均粒径．结果表明，单体体积为反应体系体积的1%时只有絮状的寡聚物（图3（a1）），并没有形成微球，原因在于较低的单体总体积分数下，虽发生了聚合，但聚合度较低，形成的聚合体分子量较小，不足以从溶剂中沉淀出来．当单体总体积分数从3%（图3（a2））提高到7%（图3（a4））时，聚合物微球的粒径从0.875μm 增加到1.483μm ，且粒径分布指数PDI 逐渐变小（表1），说明单分散性越来越好，所得微球的粒径随单体转化率的升高而增大，聚合物微球的产率也由24.7%升高到42.9%，原因在于低单体浓度下由于溶剂的笼蔽效应，引发剂分解生成的自由基大量发生偶合终止，使引发剂效率降低，从而导致产率降低．低单体总浓度下得到的微球单分散性较差，原因是随着单体总体积分数的下降，微球成核期延长，导致微球的粒径分布较广．而继续增加单7361高分子学报2014年体浓度至10%时，反应过程中反应液非常黏稠，乙腈蒸出较困难，且黏壁现象严重导致反应不均，同时粒径急剧增大，粒径分布指数也有所增加．因此采用A4组即单体总量为7%的条件制备后续实验中PMAA-co -DVB 微球．Fig．3SEM photos of PMAA-co -DVB microspheres prepared at different concentrations of monomer ：（a1）1%，（a2）3%，（a3）5%and（a4）7%Fig．4Schematic illustration for the preparation of EM-SMIPs2.4EM-SMIPs 制备条件的优化2.4.1内核的组成成分及致孔剂甲苯对EM-SMIPs 合成的影响作者曾采用最为普遍的聚苯乙烯交联二乙烯基苯微球作为内核进行表面印迹，尝试多次均未形成表面印迹层．分析认为，第二步蒸馏沉淀聚合中微球内核依赖于微球表面含有的特定基团捕捉反应体系中单体和寡聚物实现粒径的增长［10，16，18］，而苯乙烯不含有功能基团，从而很难捕捉到单体和寡聚物．因此，选取含有功能基团的单体制备内核是表面印迹成功的重要条件，本实验采用MAA 作为单体与DVB 交联形成微球，其表面含有羧基，可以通过活性羧基基团相互间的氢键作用力，捕捉预聚合液中的MAA-EM 复合物及寡聚物，从而实现微球表面的印迹修饰，制备流程如图4．836112期刘江等：两步蒸馏沉淀聚合法制备红霉素表面分子印迹聚合物及其性能研究在分子印迹材料的制备中，常需要加入致孔剂，来增加聚合物的孔穴，利于模板分子的结合与解离．甲苯因具有较大的分子结构和苯环的平面性质，且不具影响反应的功能基团，是最常用的致孔剂．本文制备反应体系中不含甲苯与7.5%（体积分数）甲苯的EM-SMIPs 并用扫描电镜进行了表征（图5），结果发现表面印迹聚合物的粒径较PMAA-co -DVB 微球均有所增长，说明确形成了印迹层．但加入甲苯容易引起反应液自聚，降低表面印迹产率．故在后续试验中选取不再加甲苯作为致孔剂，仅使用乙腈作为溶剂和致孔剂．Fig．5SEM photos of EM-SMIPs prepared without toluene（b1）and with 7．5%toluene （b2）2.4.2功能单体比例优化在其他条件不变的情况下，制备了EM 和MAA 摩尔比分别为1ʒ2、1ʒ4、1ʒ6、1ʒ8的EM-SMIPs ，各取20mg 分别置于1mg /mL 的EM 和ＲOX 甲醇溶液中，结合3h 后取上清液，测定EM与ＲOX 浓度，考察模板分子与单体在不同比例下所得EM-SMIPs 对EM 的最大结合量以及选择性结合行为的影响．分子印迹聚合物对分子的选择识别性能通常用静态吸附分配系数K D 、分离因子α来表征．静态分配系数K D 的定义为：K D =c p /c s ；式中，c P 、c S 分别表示底物在聚合物和溶液中的浓度．K D 体现了MIPs 对底物结合能力的大小，越大说明结合能力越强．分离因子α的定义为：α=K D1/K D2；K D1和K D2分别表示模板分子和竞争分子的静态分配系数．α越大表明MIPs 对其模板分子的选择专一性越好．若α＜1或在1附近，则表明MIPs 对底物没有选择性；若α＞1则表明，MIPs 对底物有一定的选择性．由表2可知，随着MAA 比例的增加，印迹材料对于EM 的结合量并不是一直增加，当两者摩尔比为1ʒ4时，所得印迹材料对EM 结合量最大，且分离因子α也最大，高于采用悬浮聚合法［19］所制备的红霉素分子印迹聚合微球（α=1.83）．而对于结构类似物ＲOX ，其结合量随着MAA 比例的增加而增加．分析认为，在交联剂DVB 及模板红霉素用量确定的情况下，增加功能单体MAA 的用量，聚合物中非特异性的结合位点数目会增加，然而这些非特异性的位点其空间结构与EM并不匹配，可能导致EM 的特异性孔穴在全部单体形成的空穴中变得更为稀疏，给EM 的特异性识别造成了障碍，最终导致结合量降低．对于ＲOX ，MAA 数量的增加提供了更多的结合位点，所以其结合量在聚合物上随着MAA 比例的增加而升高．根据实验结果，我们选取EM 与MAA 摩尔比为1ʒ4作为后续制备条件．Table 2Binding behavior of EM-SMIPs prepared at different ratios of template and functional monomerEntry EMʒMAA （molar ratio ）Binding capacity （mg /g ）K DEM ＲOX EM ＲOX αC11ʒ212．745．230．340．122．93C21ʒ420．735．480．710．125．76C31ʒ616．246．610．480．153．16C41ʒ815．828．020．460．192．422.4.3EM-SMIPs 聚合过程中单体总量的选择在第二步蒸馏沉淀聚合中，反应体系中单体总量直接决定了印迹膜层的厚度．为了考察反应液单体总量对PMAA-co -DVB 微球表面印迹膜层结合行为的影响，进行了如下试验：在EM 、MAA 与DVB 摩尔比为1ʒ4ʒ20的条件下，分别制备了单体总量占总反应液比例为0.4%、1.6%、2.8%、4%和5.9%（体积分数）的EM-SMIPs ，考察其对EM 的结合行为．结果如图6所示，随着单体总量的增加，EM-SMIPs 对EM 的最大结合量也9361高分子学报2014年呈现出增大的趋势，但相应的结合平衡时间也有所延长．材料对EM 的结合是由外及内的，当表面的空腔被占据后，EM 分子才扩散到较深的孔穴，需要克服来自微球表面和孔壁的重重阻力，传质速度较慢，导致物理结合和结合速度减慢，曲线上升趋势变缓．综合考虑结合平衡时间和结合容量，得出最佳的单体总量为2.8%，该条件下合成的EM-SMIPs 对模板分子的最大平衡结合量为76mg /g ，结合平衡时间为90min．Fig．6Binding kinetics curves of EM-SMIPs prepared atdifferent concentrations of monomer for EM2.5结合热力学分析按照上述实验得到的最优条件（即在单体体积分数为7%制备PMAA-co -DVB 内核，在不加甲苯条件下，以EM 与MAA 摩尔比1ʒ4，单体体积分数为2.8%条件下进行第二步蒸馏沉淀聚合）制备EM-SMIPs 和NIPs ，进行结合性能的考察．从图7EM-SMIPs 、NIPs 结合等温线趋势可以看出，在EM 甲醇溶液浓度低于5mg /mL 时，EM-SMIPs 的结合容量呈现快速上升趋势，当其浓度高于5mg /mL 时，结合容量趋于定值，即已吸附饱和，达到吸附平衡．EM-SMIPs 与NIPs 的最大结合容量分别为76.8mg /g 与47.5mg /g ，远高于悬浮聚合法［19］制备的红霉素分子印迹聚合物在相同浓度下的最大结合量（31.26mg /g ）．充分显示出所制备的表面印迹微球对模板分子红霉素具有较好的特异结合性能．将EM-SMIPs 的静态结合数据用Scatchard 方程拟合之后，如图8所见，曲线呈明显的非线性关系．但在图的两端有2个明显的部分分别呈线性关系，线性回归方程和相关系数分别为y =－0.385x +26.78.63，Ｒ2=0.974和y =－1.851x +147.0，Ｒ2=0.789．这说明在所研究的浓度范围Fig．7Binding isotherms of MIPs and NIPs forEMFig．8Scatchard plots of EM binding on EM-SMIPs内，EM-SMIPs 对红霉素存在结合力不均匀的两类位点．由它们的斜率和截距可分别求得其解离常数和最大表观结合量，高亲和力结合位点：K d1=0.54mg /mL ，Q max1=79.4mg /g ；低亲和力结合位点：K d2=2.59mg /mL ，Q max2=69.5mg /g．之所以会在分子印迹聚合物中产生两类不同的键合位点，原因可能是由于功能单体和印迹分子之间存在多种相互作用，可以形成多种不同组成的复合物，不同类型的复合物在聚合之后就在聚合材料的骨架中形成了亲和力有差异的作用位点［20］．就本研究中的印迹分子红霉素而言，其结构中存在几种官能团（羟基、羰基、叔胺等），可能在聚合过程中印迹产生不同性质的作用位点，继而在与SMIPs 结合过程中，这些官能团与SMIPs 中的不同位点结合能力不同，造成了最终表观结合性能的差异．2.6结合动力学分析由图9所示，EM-SMIPs 和NIPs 对EM 的结合量Q 随时间增加而增加，在90min 后基本达到结合平衡，远低于采用本体法［21］所得印迹材料的结合平衡时间5h ，体现了对EM 的快速响应能46112期刘江等：两步蒸馏沉淀聚合法制备红霉素表面分子印迹聚合物及其性能研究力．NIPs 对红霉素的平衡结合量要远小于MIPs ，表明所制红霉素分子印迹聚合物对红霉素具有较好的印迹效果，与图7得到的结果一致．结合现象表明EM-SMIPs 中由交联剂和功能单体构成的立体孔穴分布深浅不一，在开始阶段由于聚合物微球外表面分布着大量印迹位点，因而对模板分子快速结合；随着外表面结合逐渐达到平衡，EM 开始向深孔传质，此时会有一定的空间位阻效应，导致结合速率显著下降，直至平衡．Fig．9Binding kinetics curves of EM-SMIPs and NIPs for EM3结论本文探索了一种新的表面分子印迹材料的制备方法，即在蒸馏沉淀聚合法制备单分散聚合物微球的基础上，通过第二步蒸馏沉淀聚合在第一步蒸馏沉淀聚合的产物PMAA-co -DVB 微球表面聚合一层由红霉素为模板分子的印迹膜层，从而制备了具有“核-壳”结构的表面分子印迹聚合物微球．实验发现，单体体积分数为7%时，制备的PMAA-co -DVB 微球较为理想．在第二步蒸馏沉淀聚合中，最佳的制备条件为：不加致孔剂甲苯，EM 与MAA 摩尔比1ʒ4，单体体积分数为2.8%．扫描电镜和粒径分析仪的表征结果显示印迹材料形貌圆整，粒径均一．该法制备的EM-SMIPs 对EM 的最大结合量为76.8mg /g ，结合平衡时间为90min．将蒸馏沉淀聚合法应用到分子印迹材料的合成中，该反应体系更为简单，制备条件易于控制，且产物单分散性和结合性能都较好，从而为分子印迹技术提供了新的更具优势的制备手段．ＲEFEＲENCES1Guo Xiuchun （郭秀春），Zhouwenhui （周文辉）．Chemical Ｒesearch （化学研究），2012，（5）：103 1102Yi Xiaofei （尹晓斐），Tang Shuifen （汤水粉），Liu Wei （刘玮），Lu Chunhua （卢春华），Yang Huanghao （杨黄浩）．Journal of Fuzhou University （Natural Science Edition ）（福州大学学报（自然科学版）），2011，（5）：639 6483Wei Xiao （卫潇），Pan Jianmin （潘建明），Dai Jiangdong （戴江栋），Yan Yongsheng （闫永胜）．Ion Exchange and Adsorption （离子交换与吸附），2013，（2）：183 1924Guo Jianfeng （郭建峰），Gao Bgaojiao （高保娇）．Acta Polymerica Sinica （高分子学报），2012，（1）：47 555Li S F ，Yang X L ，Huang W Q ，Chinese J Polym Sci ，2005，23：197 2026Lu Xianyong （鹿现永），Huangda （黄达），Yang Xinlin （杨新林），Huang Wenqiang （黄文强）．Acta Polymerica Sinica （高分子学报），2007，（2）：103 1077Lu X Y ，Huang B ，Yang X L ，Huang W Q．Polym ，Bull ，2006，54：171 1768Bai F ，Li Ｒ，Yang X L ，Li S ，Huang W Q．Polym ，Int ，2006，55：319 3259Bai F ，Yang X L ，Zhao Y Z ，Huang W Q．Polym ，Int ，2005，54：168 17410Bai F ，Yang X L ，Li Ｒ，Huang B ，Huang W Q．Polymer ，2006，47：5775 578411Dai Z ，Yang X L ，Huang W Q．Polym ，Int ，2007，56：224 23012Dai Z ，Yang X L ，Huang W Q．Chinese J Polym Sci ，2007，25：303 30913Li S N ，Yang X L ，Huang W Q．Chinese J Polym Sci ，2007，25：555 56314Li G L ，Yang X L．J．Phys．Chem．B 2007，111：12781 1278615Zhang Yue （张玥），Hu Xiaoling （胡小玲），Liangliang （梁良），Guan Ping （管萍），Xi Shan （西珊）．Journal of Materials Science and Engineering （材料科学与工程学报），2010（5）：778 782，73416Zhang Han （张晗），Yang Xinlin （杨新林）．Polymer Bulletin （高分子通报），2010，（7）：9 2317Chen Hou （陈厚），Xiufei （修飞），Cui Hengli （崔亨利），Qu Ｒongjun （曲荣君），Chen Guangmin （陈广民），Ji Lianqin （纪连芹）．Ludong University Journal （Natural Science Edition ）（鲁东大学学报（自然科学版）），2008，（2）：149 15318Bai F ，Huang B ，Yang X L ，Huang W Q．Polym ，Int ，2007，48：3641 364919Song Ｒenyuan （宋任远），Hu Xiaoling （胡小玲），Guan Ping （管萍），Yi Yanan （尹雅楠），Zhu Li （朱丽）．Ion Exchange and Adsorption （离子交换与吸附），2013，29（2）：97 10714612461高分子学报2014年20Yang Weihai（杨卫海），Yan Shoulei（严守雷），Wei Chen（卫晨），Wang Qingzhang（王清章）．Acta Polymerica Sinica（高分子学报），2010，（10）：1163 116921Song Suquan（宋素泉）．Preparation，characterization and application of molecularly imprinted polymers toward key veterinary drugs of erythromycin and chlorpromazine in food safety detection（重要违禁兽药红霉素和氯丙嗪的分子印迹聚合物的制备、表征及在食品安全检测中的应用）．Doctoral Dissertation of Shanghai Jiao Tong University（上海交通大学博士学位论文），2008Preparation and Characterization of Erythromycin Surface Molecularly Imprinted Polymers Based on Two-step Distillation-Precipitation PolymerizationJiang Liu，Yuan Liu，Ying-chun Li*，Hui Tang*，Bing-bing Wu（Key Laboratory of Xinjiang PhytomedicineＲesources of Ministry of Education，School of Pharmacy，Shihezi University，Shihezi832002）Abstract Surface molecularly imprinted polymers（SMIPs）with a core-shell structure were prepared through a novel two-step distillation precipitation polymerization（DPP）method．The first-step DPP allowed formation of cores composed of copolymeric microsphere of methacrylic acid and divinylbenzene（PMAA-co-DVB），and in the second-step DPP，the core was modified with a molecularly imprinting layer with erythromycin（EM）as template，methacrylic acid（MAA）as functional monomer，divinylbenzene（DVB）as crosslinking agent and azobisisobutyronitrile（AIBN）as initiator．Laser particle size determination，scanning electron microscope （SEM）and a series of binding tests were employed to characterize the morphology and the binding properties of the obtained SMIPs．It showed that when the fraction of the monomers was7vol%in the whole reaction system，the prepared PMAA-co-DVB microspheres afforded good morphology and monodispersity．Moreover，when the molar ratio of MAA to EM was1ʒ4and the fraction of the monomers was2.8vol%in the second-step DPP，the synthesized SMIPs displayed optimal binding performance with the maximum binding capacity of 76.8mg/g and the binding saturation time of90min．Meanwhile，the produced SMIPs exhibited higher binding ability to the template molecule-EM，compared with its analogue，roxithromycin．Keywords Two-step distillation precipitation polymerization，Surface molecularly imprinting，Erythromycin*Corresponding authors：Ying-chun Li，E-mail：yingchunli_judy@163．comHui Tang，E-mail：Th_pha@shzu．edu．cn。