月季植物组织培养实验报告
月季的组织培养
外植体的取材部位对芽的萌发也有影响，“Gold Glow”和“Improved fire”月季的侧芽如果在不 同激素的培养基上进行组培，可发现在枝条顶部 和基部的芽发育慢，而枝条中部的芽发育快。在 研究中发现靠近外植体顶端的芽较其他部位芽的 发育慢，在茎尖脱毒培养时，由嫩茎的顶芽得到 的外植体成活率高于腋芽。在实际工作中由于顶 芽数量少，故月季的组培依旧常常使用腋芽作为 外植体，这时一般需要进行茎切除顶芽（摘心） 以打破顶端优势、促使腋芽健壮生长，以促进嫩 茎的增殖。 此外，外植体的取材时间及培养所需时间对月季 嫩茎的发育和增殖也有影响。对于“Bulgarian rose”而言，选取外植体的最佳时间是冬季 （1～3月），而“Improved fire”月季的培养时 间以28d继代一次较好，超过 28d，茎的数目就 不再增加了。
诱导培养基以MS为基本培养基（硝酸 盐、钾和铵的含量高），附加适量的 细胞分裂素6-卞氨基嘌呤（6-BA）0.53.0mg/L和生长素萘乙酸（NAA） 0.01-1.0mg/L,且培养基中添加蔗糖有 增加丛生芽数量的作用。
壮苗培养与生根
1、壮苗培养 在继代培养过程中，细胞分裂素浓度的增加有助于增殖系 数的提高。但伴随着增殖系数的提高，增殖的芽往往出现 生长势减弱，不定芽短小、细弱，无法进行生根培养的现 象；即使能够生根，移栽成活率也不高，必须经过壮苗培 养。壮苗培养时，可将生长较好的芽分成单株培养，而将 一些尚未成型的芽分成几个芽丛培养。 通过选择适宜的细胞分裂素和生长素的种类及不同浓度配 比，可以同时满足增殖和壮苗的不同要求。高浓度的生长 素和低浓度的细胞分裂素的组合有利于形成壮苗。因此， 在以丛生芽方式进行增殖时，适当降低培养基中BA等细胞 分裂素的浓度，并增加NAA等生长素的浓度，就能达到壮 苗培养的目的。在实际生产中，我们一般用较低浓度的细 胞分裂素与生长素组成合理的比列，将有效增殖系数控制 在3.0-5.0，以实现增殖和壮苗的双重目的。
月季组织培
月季组织培养技术作者：龙华班级：林学10级1班学号：20101832 指导老师：钟宇摘要：月季为蔷薇科蔷薇属木本植物, 其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小;其花型大，美丽，幽雅，高贵。
月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖，但是一些名贵品种扦插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度慢，因而造成优良品种的月季苗供不应求。
关键词：月季；组培；赤霉素引言随着生物技术的迅猛发展，植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用，为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。
以月季为试材进行组培试验,综述了月季组织培养、快繁的研究技术及进展，并对月季组培的最优条件进行了总结。
本研究探索出的月季组培快速繁殖技术，在试管苗单芽诱导丛生苗、利用代用品培养降低组培成本、试管苗管外扦插生根、试管苗微型化长途运输等方面，较前人有所改进。
1 月季组织培养的研究进展月季是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一。
别名长春花、月月红、斗雪红、瘦客等，蔷薇科蔷薇属植物，其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小。
其花型大，美丽，幽雅，高贵。
在鲜花应用中，月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一[1]。
月季的花色可编制成完美的连续色谱。
月季是重要的花卉，世界的销售额多年来稳居各类花)卉的第一或第二。
月季的一大优点是分布极广，适应性良好，栽培容易。
月季是四季常青花卉，花期长，花色多，芳香馥郁，由于其特殊的情感内涵和商品价值[2]，被广泛应用于园林、庭院装饰，并可制成月季盆景，作切花、花篮、花束等。
此外，月季花可提取香料，根、叶、花均可人药，具有活血消肿、消炎解毒等功效。
当前，月季育种是花卉育种中最活跃的领域之一。
月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖，但是一些名贵品种扦插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度慢，因而造成优良品种的月季苗供不应求[3]。
随着生物技术的迅猛发展，植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用，为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。
实习报告月季
实习报告：月季栽培与养护一、实习背景作为一名热爱园艺的学生，我深知月季花在我国园艺领域的重要地位。
为了深入了解月季的栽培与养护技术，提高自己的实践操作能力，我利用暑假期间，在本地一家花卉种植基地进行了为期一个月的实习。
二、实习内容1. 月季栽培在实习期间，我参与了月季的种植环节。
首先，我学习了月季的生物学特性，包括生长习性、花期、繁殖方式等。
在此基础上，我掌握了月季的种植技巧，如选择合适的种植时间、土壤改良、栽植密度等。
此外，我还学习了如何给月季浇水、施肥，以及如何进行修剪、抹芽等操作。
2. 月季养护在月季栽培过程中，养护工作至关重要。
实习期间，我学习了月季病虫害防治、修剪造型、调整株型等养护技术。
针对月季常见的病虫害，如黑斑病、蚜虫等，我掌握了相应的防治方法，如喷洒农药、生物防治等。
在修剪方面，我学会了如何根据月季的生长状况进行适度修剪，以保持良好的株型和延长花期。
3. 实习收获通过实习，我不仅掌握了月季的栽培与养护技术，还加深了对园艺行业的认识。
在实际操作中，我学会了如何将理论知识运用到实践中，提高月季的种植效益。
同时，实习期间与我一起工作的同事们，他们的敬业精神和丰富经验也给我留下了深刻的印象，激发了我对园艺事业的热爱。
三、实习体会本次实习使我深刻认识到，月季栽培与养护并非简单的劳动，而是需要掌握一定的专业知识和技巧。
作为一名园艺爱好者，我将继续努力学习，不断提高自己的园艺技能，为我国园艺事业的发展贡献自己的力量。
同时，实习期间我也体会到了园艺工作的艰辛。
在炎炎夏日，我们顶着高温，辛勤劳作，只为让月季茁壮成长。
这让我更加珍惜每一株花草，也更加尊敬那些为园艺事业默默奉献的劳动者。
总之，这次实习让我受益匪浅，不仅提高了我的实践操作能力，拓宽了我的知识视野，也让我对园艺事业产生了更深的感情。
在今后的学习和工作中，我将继续努力，为我国园艺事业的发展贡献自己的力量。
月季的植物组织培养
月季的植物组织培养一．实验目的1．掌握蔷薇科月季的组织培养技术2．熟悉、巩固无菌操作技术二．实验器皿及试剂1.仪器及用品：超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、电子天平、电热炉酒精灯、镊子、解剖刀、解剖剪、烧杯、三角瓶、培养皿、滤纸、封口膜2.试剂：MS+6BA1+NAA1（诱导）培养基、MS+6BA2+NAA2（继代）培养基、70%酒精、3%次氯酸钠、无菌水3.材料：月季茎段、幼嫩叶片、花萼片、花瓣及花药。
三．实验步骤配制诱导培养基：MS+6BA1+NAA1，1升，灭菌后分装到35个培养1.皿中。
2.取材：将采集的月季茎段、幼嫩叶片、花萼片、花瓣及花药冲洗干净，按不同部位分装到3个500烧杯中，放入超净工作台；先用70%酒精浸没并轻摇10秒进行预消毒；倒出酒精，加入3%次氯酸钠浸没，轻摇11分钟；倒净次氯酸钠，用无菌水冲洗5遍以上，倒出无菌水。
3.将消毒后的外植体放入带有滤纸的无菌平皿中，用解剖剪和解剖刀将嫩叶剪成5mm2大小、茎段长2—3cm每段至少有1 个侧芽、将花苞打开取花药，分别接种到带有培养基的平皿中并封口（每皿3—5个）。
4.标记好后，放入培养室中培养（2周左右）。
5.配制分化培养基：MS+6BA2+NAA2培养基，配制1升，灭菌后分装到35个100ml的三角瓶中。
6.挑选长有愈伤组织的外植体，将其转移到分化培养基中。
在超净工作台中，将培养皿封口膜在酒精灯旁打开，将长有愈伤组织的外植体用灭菌的镊子从平皿中取出，转移到带有分化培养基三角瓶中（每瓶最多）并封口。
7.标记好后，放入培养室培养。
继续观察愈伤组织的生长情况。
四．实验结果茎段出愈率=25根出愈/总接种40根*100%=63%叶片出愈率=5片出愈／总接种30片*100%=17%花药及萼片出愈率=1片出愈/总接种20片*100%=5%通过实验得出月季茎段的出愈率最高，其次是叶片及花药。
接种过程中有三个平皿出现污染现象。
五．问题分析及解决1.三个污染的外植体，两个是叶片内延至周围。
月季的组培实践
月季的组培实践1.1 实验材料月季。
1.2 材料处理月季枝条在自来水下冲洗干净, 用75%乙醇表面消毒30–40秒, 再用0.1%HgCl 2溶液灭菌2–6分钟, 无菌水冲洗3–5次。
在无菌条件下将叶片、叶柄和茎段剪成0.5 cm见方的小块或1 cm的小段, 并露出新鲜伤口。
培养瓶开口于酒精灯火焰处，接种于诱导愈伤组织培养基上2 培养基成分与培养条件2.1 培养基及培养条件(1) 诱导愈伤组织和不定芽均以MS培养基为基础.培养基诱导愈伤组织的最佳培养基配比为1.0 mg·L–16-BA+3.0 mg·L–12,4-D(2) 诱导不定芽产生的植物生长调节剂配比1.0 mg²L–1 6-BA+0.1 mg·L–1NAA+0.02 mg·L–1TDZ(3) 1/4MS+0.1 mg·L–1NAA为生根培养基.(含30 g²L–1蔗糖和7.0 g²L–1琼脂, pH 5.8–6.2), 并于121°C高压蒸汽灭菌25分钟。
培养条件为(25±2)°C, 每天16小时光照, 光照强度为40 μmol²m–2²s–1。
2.2 愈伤组织诱导选取经处理的外植体接种于不同激素配比(表1)的MS培养基上进行愈伤组织诱导。
定期观察, 3–4周继代1次。
2.3 不定芽的诱导和增殖外植体在愈伤组织诱导培养基上培养30天后, 挑选长势良好的愈伤组织, 接种yu配比植物生长调节剂的培养基中进行不定芽诱导.2.4 生根诱导将长势良好的再生苗移植到生根培养基上诱导生根.2.5 移栽炼苗将再生根生长状况良好的微型月季幼苗取出, 用流水缓慢地将根部残留的培养基冲洗干净(注意不要伤及根部), 移栽至土壤中炼苗1–7天。
月季组织培养
有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
不同植物激素使用顺序和使用量
使用顺序 实验结果
先生长素， 有利于分裂但 后细胞分裂素 不分化 先细胞分裂素， 细胞既分裂也 分化 后生长素 同时使用 分化频率提高
生长素细胞 结果 分裂素比值 比值高时 促根分化， 抑芽形成 比值低时 促芽分化， 抑根形成 比值适中 促进愈伤组 织生长
3 .培养基
• 用于月季的基本培养基种类很多，如 B5、N6、WPM和 MS 培养基等。众多培养基中以 MS 培养 基的效果为最好，广泛用于月季的离体快速繁殖中。培养基的培养成分（主要是各类无机盐浓度） 及物理性能（pH 值、糖分以及固化支持物）会影响月季的组培。对 MS 培养基的成分及物理性能 进行合理的选择会提高月季组织培养的成功率。 MS 培养基中无机盐离子浓度因月季培养阶段的不同而有不同： 1）茎段培养阶段，将带有腋芽的嫩茎接种到不添加任何激素类物质的 MS 和 1/2MS 培养基上，两 周后，MS 培养基上的腋芽生长，而在 1/2MS 培养基上的腋芽几乎不萌发或发育不良。通过提高 MS 培养基中氯化钴的浓度，并用硫酸铵代替硝酸铵培养“Bulgarian rose”，可使其茎的生长状况 得到改善。同时有报道认为在 MS 培养基中添加硝酸银可以缓解叶片衰败并提高茎段侧芽的生长。 2）诱导生根阶段，一般要求较低的 MS 培养基无机盐离子浓度。Skirvin 等在用（Forever Yours ）月季做生根试验时发现，采用1/4MS 培养基，不加生长素即可以促进生根。
外植体消毒
接种
冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌 水冲洗至少三次之上
培
养
栽
培
移
栽
月季组织培养
（b）移栽。幼苗出瓶后，先洗去沾附的琼 脂培养基，再种植到粗沙+园田土（1：3） 介质中，总的原则是疏松透气，有一定的 保水、保肥能力。种植密度2～3厘米×4～ 6厘米/株，移栽完毕浇透水，并用0.1％的 百菌清、多菌灵或甲基托布津等喷雾保苗， 能显著提高成活率。 （c）移栽后管理。移栽后需保持相对湿度 85％以上，在温室、拱棚中移栽，覆好遮 荫网，一般成活率都比较高，并注意通风 和温度管理。4～6周后，须做好第二次移 植，通常植入5厘米×9厘米的塑料杯中， 每杯种1苗，再经4～6周，地上、地下部分 都充分生长，有些植株还能开花。
• （4） 壮苗培养 ①对增殖倍率高的品 种，所增殖的嫩茎很细弱，要求进行一次 壮苗培养，以取得适合生根和今后移栽的 苗子。壮苗培养的培养基为：MS+BA0.30.5+NAA0.01-0.1，如果并不特别强调繁 殖速度，也可以一直使用这种培养基，以 壮苗为主，增殖为辅，使增殖与壮苗合为 一步。②培养条件。光照10～12小时/天， 光强800～1800LX，温度20～23℃，最高 24～26℃。
（四）问题与讨论
• 初代培养外植体的褐变：褐变是由于植物组织
中的多酚氧化酶被激活而使细胞的代谢发生变化。 在褐变过程中产生醌类物质，他们多呈褐色，当 扩散到培养基后，就会抑制其他酶的活性，从而 影响从接种的外植体的一种现象。 减轻褐变现象发生的方法： （1）合适的培养基。降低无机盐浓度和细胞分 裂素浓度，但蔗糖浓度不能降低。 （2）使用抗氧化剂PVP半光氨酸 （3）使用吸附剂活性炭，0.1%~0.5% （4）连续转移
• （5）生根与移栽 月季嫩芽生长到一定 长度时，就应切割下来，转入生根培养基。 切下的嫩芽长度以2～3厘米为宜，让幼苗基 部伤口愈合，已长出根原基，幼根尚未长出， 即出瓶种植。这种方法不会损伤根系，移栽 速度快，成活率高。 • （a）以MS培养基为基础，配方为 MS+NAA0.5，此外加入300mg/L活性炭， 30g/L蔗糖。插植2厘米以上无根嫩茎，经2 周左右出现根原基，幼根尚未长出即出瓶种 植。
月季组培实验报告(3篇)
第1篇一、实验简介实验名称：月季组培实验实验目的：通过组培技术，了解月季组织培养的原理和方法，掌握无菌操作技术，提高植物繁殖效率，为月季的快速繁殖和遗传改良提供技术支持。
实验时间：2023年X月X日至X月X日实验地点：XX大学园艺实验室实验材料：月季植株（品种：XX）实验设备：超净工作台、无菌操作箱、高温高压灭菌器、移液枪、解剖刀、培养皿、试管、滤纸、镊子、剪刀、酒精灯、高压蒸汽灭菌锅等。
二、实验方法1. 外植体选取与消毒：- 选择生长健壮的月季植株，取其茎尖作为外植体。
- 使用无菌水清洗外植体，然后用75%酒精浸泡30秒，再用无菌水冲洗3次。
- 将外植体置于0.1%的氯化汞溶液中消毒5分钟，再用无菌水冲洗5次。
2. 诱导生根：- 将消毒后的外植体切成1-2厘米的小段，接种到含有不同激素比例的MS培养基中。
- 将接种后的培养皿放入培养箱中，培养温度为25℃，光照时间为12小时/天。
3. 生根培养：- 当外植体开始生根时，将培养基更换为含有较低激素浓度的MS培养基。
- 继续培养至生根率达到80%以上。
4. 炼苗与移栽：- 将生根的植株从培养皿中取出，置于温室中炼苗。
- 炼苗成功后，将植株移栽到花盆中，进行正常的养护管理。
三、实验结果与分析1. 外植体消毒效果：- 通过显微镜观察，发现消毒后的外植体表面无细菌污染，说明消毒效果良好。
2. 诱导生根效果：- 在不同激素比例的培养基中，生根效果最好的培养基为1/2MS+0.5mg/LNAA+0.5mg/L IBA。
- 在此培养基中，生根率达到90%，平均根长为3.5厘米。
3. 炼苗与移栽效果：- 炼苗过程中，植株生长良好，无病虫害发生。
- 移栽后的植株成活率达到了95%。
四、实验讨论1. 外植体选取：- 本实验选择茎尖作为外植体，主要是因为茎尖细胞分裂旺盛，易于诱导生根。
2. 消毒方法：- 消毒是组培实验的关键步骤，本实验采用氯化汞溶液消毒，效果良好。
3. 激素配比：- 激素配比对生根效果有显著影响，本实验通过优化激素配比，提高了生根率。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
月季植物组织培养实验报告姓名：张恒玉（天津师范大学10生乙10517085）摘要：月季（Floribunda roses）为蔷薇科蔷薇属木本植物,其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小;其花型大，美丽，幽雅，高贵。
在鲜花应用中，月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一。
植物组织培养主要以绿色植物细胞或组织块为研究主要对象，把植物体上的生活器官、组织块活细胞从整体上离体下来进行人工培养。
以细胞全能性为理论基础对最适月季培养的培养基、激素、培养基质进行筛选，使离体组织经过脱分化和再分化而发育成新的植物个体。
为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。
关键词：月季组织培养Rose Plant Tissue Culture Lab ReportName: ZhangHengyu（Tianjin Normal University college of Life Science, Biological Sciences 300387）Abstract:Rose (Floribunda roses) for the woody Rosaceae Rosa, the beautiful flower position, abundant flowers, colors available, easy to trim the tree, planting small difficulty; its flowers large, beautiful, elegant, noble. Applications in the flowers, the status and the proportion rose growing is the world's leading one of the four cut flowers. Plant Tissue Culture main object of the green plant cells or tissue blocks for research, Of life on the plant organ, tissue block living cells isolated from the whole down the artificial culture, Cell totipotency theory based on the optimum rose culture medium, hormones, culture media filter, Isolated tissue and develop into new individual plants after dedifferentiation and redifferentiation. breeding of new varieties offer a new way, in the rose show a significant improvement potential applications.Keywords: Rose tissue culture1 月季介绍月季为常绿有刺灌木，或呈蔓状与攀援状。
常绿或落叶灌木，直立，茎为棕色有一点绿，具有钩刺或无刺，但也有几乎无刺的。
小枝绿色，叶为墨绿色，多数羽状复叶，宽卵形或卵状长圆形，长 2.5-6厘米，先端渐尖，具尖齿，叶缘有锯齿，两面无毛，光滑；托叶与叶柄合生，全缘或具腺齿，顶端分离为耳状。
花朵常簇生，稀单生，花色甚多，色泽各异，径4-5厘米，多为重瓣也有单瓣者；萼片尾状长尖，边缘有羽状裂片；花柱分离，伸出萼筒口外，与雄蕊等长；每子房1胚珠。
果卵球形或梨形，长1-2厘米，萼片脱落。
花期4--10月。
大多数是完全花，或者是两性花。
有花中皇后的美称。
现为天津市的市花，还是中国十大名花.2 月季植物组织培养试验2.1 实验原理植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
狭义是指组培指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
2.2 实验材料及用具2.2.1 实验材料：月季2.2.2 实验试剂：MS母液70％酒精氯化汞0.1 mol/L NaOH与0.1 mol/L HCl IAA 2,4-D2.2.3 实验器具：广口瓶棕色瓶锥形瓶剪刀镊子酒精灯紫外灯2.3 实验步骤：2.3.1 培养基的配制2.3.1.1 称取6.5g～12g琼脂，先用蒸馏水置1000ml搪瓷杯浸泡2小时后充分洗去杂质。
弃去浸液用无离子水再洗1～2次，并加入500ml无离子水在电炉上溶化。
边搅拌边溶化，直至完全溶化备用。
2.3.1.2 另取蔗糖30g于上述溶液中搅拌完全溶解备用。
2.3.1.3 另按MS培养基用量量取无机大量微量元素及有机成分的母液于一烧杯中，并完全倒入②液中搅拌溶解混匀备用。
2.3.1.4 按目的要求用取样器加入各种激素并搅拌混匀，加稀碱或稀释酸调pH 值应比目的要求的pH值稍高0.1～0.2。
定溶1000ml。
趁热大于60℃分装于培养瓶中，应边搅拌边分装液体，根据要求的量分装。
一般液体的厚度掌握在1cm左右为宜。
分装时不得将液体粘落至瓶口上。
将培养瓶封口塞棉塞、包牛皮纸系线绳。
另取Ф5cm的滤纸若干，置Ф9cm的培养皿中并用牛皮纸包好准备灭菌。
另取无离子水若干不得超过瓶内总体积的70%，加棉塞包牛皮纸，灭菌制备无菌水。
另取清毒瓶包好备用。
2.3.2 灭菌2.3.2.1检查有无漏电漏水现象，加无离子水的3升，将要灭菌的物品平稳地放置高压锅套桶内。
2.3.2.2盖上锅盖水平拧好螺栓，打开放气阀，接通电源加热，待放气阀处水汽充分溢出时盖上放气阀，待压力升至0.05Mpa时打开放气阀放气至压力回到零位时盖上放气阀升压。
2.3.2.3待压力达0.12～0.15Mpa时，开始计时，使调压器自220V回调170～180V 左右维持30分钟断电。
2.3.2.4待压力回降至零位时，打开锅盖错开一缝隙使热蒸汽迅速溢出烘干包纸和瓶塞。
2.3.2.5趁热取出被灭菌之物，将培养瓶置平稳处使培养瓶中的培养基凝固。
23小时后查有无细菌，48小时后查有无霉菌，如有杂菌应及时处理，无杂菌备用。
2.3.3 接种2.3.3.1 取材：将采集的月季茎段冲洗干净，分装到烧杯中，放入超净工作台；先用70%酒精浸没并轻摇15s进行欲消毒；倒出酒精，加入0.1%二氯化汞浸没；倒净二氯化汞。
用无菌水冲洗3次，将废液倒弃备用。
2.3.3.2解下培养瓶上包头纸的线绳，并将培养瓶整齐地排列在接种台的左侧，然后用70%的酒精棉球从内向外擦接种台面。
2.3.3.3 在酒精灯下用用镊子在消毒瓶内取出材料置于培养皿内的无菌滤纸上吸干水分，右手持镊子左手拿灭过菌的解剖刀迅速地将茎段切成剪成每段2～3cm至少有1个侧芽，用镊子将外植体迅速地在酒精上接入培养瓶内。
头纸，系好线绳，移出净化台或接种箱，写好标签，外植体的名称、种类、接种日期、接种人等，移入培养室进行培养。
2.4 实验结果2.5 讨论2.5.1 培养材料采集要根据培养目的适当选取材料，选择原则：易于诱导、带菌少。
要选取植物组织内部无菌的材料。
这一方面要从健壮的植株上取材料，不要取有伤口的或有病虫的材料。
另一方面要在晴天，最好是中午或下午取材料，决不要在雨天、阴天或露水未干时取材料。
因为健壮的植株和晴天光合呼吸旺盛的组织，有自身消毒作用，这种组织一般是无菌的。
培养材料的消毒从外界或室内选取的植物材料，都不同程度地带有各种微生物。
这些污染源一旦带人培养基，便会造成培养基污染。
因此，植物材料必须经严格的表面灭菌处理，再经无菌操作手续接到培养基上。
2.5.2 灭菌方法2.5.2.1物理方法：物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理除菌、过滤、离心、沉淀等2.5.2.2 化学方法：消毒剂、抗菌素灭菌2.5.2.3 培养基灭菌：高温高压湿热灭菌法压力在9.8×104—10.8×104Pa，温度在121℃，灭菌20—30min3 参考文献[1] 郭志刚，张伟．月季[M].北京:中国林业出版社 2000 ．[2] 余树勋- 月季[M].北京:金盾出版社,1992 ．[3] 林玉红．月季试管苗繁殖的研究[J].甘肃农业科技,1994( 1 ) :36—37 ．[4] 李美茹,李洪清，孙梓建等.月季组织培养和基因转化研究进展[J] ．广西植物，2003，23(3) ：243—249.[5] Bressan PH Kim YJ，Hyndman SE et a1．Factors affectng in vitro propagation of rose [J]．J Am Soc hort Sci ,1982 ,107：979- 990[6] 李青,苏雪痕,李湛东.藤本月季组织培养快繁研究[J]．北京林业大学学报， 1999 ， 21(6):17—21 ．[7] 于冰沁．微型月季组织培养的研究[J].辽宁农业科学,2005(4):53-54 ．[8] 李海燕,胡国富,胡宝忠.月季组培快繁技术的研究[J]．东北农业大学学报,2004,35 (1):84—88 ．[9] 吴雪，高成华．月季茎尖离体培养的研究[J].辽宁师专学报：自然科学版，2007 ( 2 ) ：108—110 ．[10] Iangford P J ,Wainwright H. Effect of sueros concentration On the photosynthetic ability of rose shoots in vitro [J] ．Ann Bot ，1987，6 0：633 —639．[11] 陈正华.小本植物组织培养及其应用[M].北京:高等教育出版社,1986:307—308 ．。