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生物化学实验

生物化学实验

⽣物化学实验实验⼀1、糖类的颜⾊反应1. α-萘酚反应糖在浓⽆机酸(硫酸或盐酸)作⽤下,脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物,后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。

注意:因糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性,不是糖类的特异反应。

2. 间苯⼆酚反应在酸作⽤下,酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛,后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。

此反应是酮糖的特异反应。

因为醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢,只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。

2、还原作⽤许多糖类由于其分⼦中含有⾃由的或潜在的醛基或酮基,因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等⾦属离⼦还原,同时糖类本⾝被氧化成糖酸及其他产物。

糖类这种性质常被利⽤于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。

本实验所⽤的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。

它们都是Cu2+的碱性溶液,能使还原糖氧化⽽本⾝被还原成红⾊(颗粒⼤)或黄⾊(颗粒⼩)的Cu2O沉淀。

实验⼆脂肪碘值的测定碘值(价)是指100g脂肪在⼀定条件下吸收碘的克数。

碘值是鉴别脂肪的⼀个重要常数,可⽤以判断脂肪所含脂肪酸的不饱和程度。

脂肪中常含有不饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸具有⼀个或多个双键,能与卤素起加成作⽤⽽吸收卤素。

常⽤碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加成作⽤。

脂肪的不饱和程度越⾼,所含的不饱和脂肪酸越多,与其双键起加成作⽤的碘量就越多,碘值就越⾼。

故可⽤碘值表⽰脂肪的不饱和度。

I2+-CH=CH--CHI-CHI-本实验⽤溴化碘(Hanus试剂)代替碘。

⽤⼀定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作⽤后,⽤硫代硫酸钠滴定的⽅法测定溴化碘的剩余量,然后计算出待测脂肪吸收的碘量,求得脂肪的碘值。

加成作⽤:IBr+-CH=CH--CHI-CHBr-剩余溴化碘中碘的释放:IBr + KI KBr + I2再⽤硫代硫酸钠滴定释放出来的碘:I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI思考题:何谓空⽩溶液和空⽩实验?空⽩实验有何意义?在各种分析⽅法中,为消除⼲扰,⽤与测定试样时完全⼀致的条件进⾏测定的溶液。

生物化学实验

生物化学实验
2、氨基酸溶液0.5%的赖氨酸、脯氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸溶液及它们的混合液(各组份浓度均为0.5%)。各5mL
3、显色剂50~100mL
1.1%水合茚三酮正丁醇溶液。
五、操作
1.将盛有平衡溶剂的小烧杯置于密闭的层析缸中。
2.取层析滤纸(长22cm、宽14 cm)一张。在纸的—端距边缘2~3cm处用用铅笔划一条直线,在此直线上每间隔2cm作一记号如图。
5.显色用喷雾器均匀喷上O.1%茚三酮正丁醇溶液,然后置烘箱中烘烤5分钟(100℃)或用热风吹干即可显出各层析斑点。
6.计算各种氨基酸的只Rf值。
思考题
1、何谓纸层析法?
2、何谓片Rf值?影响Rf值的主要因素是什么?
3、怎样制备扩展剂?
4、层析缸中平衡溶剂的作用是什么?
实验二小麦萌发前后淀粉酶活力的比较
实验一纸层析法分离鉴定氨基酸
一、目的
通过氨基酸的分离,学习纸层析法的基本原理及操作方法。
二、原理
纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。
层析溶剂由有机溶剂和水组成。
物质被分离后在纸层析图谱上的位置是用Rf值(比移)来表示的:

在一定的条件下某种物质的只Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。
休眠种子的淀粉酶活力很弱,种子吸胀萌动后,酶活力逐渐增强,并随着发芽天数增加而增加。
本实验观察小麦种子萌发前后淀粉酶活力的变化。
三、器材
1.25mL刻度试管 2. 吸管
3.离心管 4.乳钵
5.分光光度计 6.恒温水浴
7.离心机
四、试剂和材料
1、小麦种子
2、o.1%标准麦芽糖溶液

生物化学实验(整理版)

生物化学实验(整理版)

生物化学实验(整理版)一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。

2. 掌握实验操作技能,提高实验技能。

3. 培养科学探究能力,提高分析问题和解决问题的能力。

4. 深入了解生物体的化学组成、结构、功能及其相互关系。

二、实验内容1. 氨基酸的分离与鉴定2. 蛋白质的结构与性质3. 酶的催化作用与活性测定4. 糖类的分离与鉴定5. 脂类的提取与鉴定6. 核酸的分离与鉴定7. 代谢途径的探究三、实验操作1. 实验前的准备工作:了解实验原理、实验目的、实验步骤、实验所需试剂和仪器等。

2. 实验过程中的注意事项:严格按照实验步骤进行操作,注意实验安全,保持实验环境的整洁。

四、实验报告1. 实验报告的格式:包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验讨论、实验结论等部分。

2. 实验报告的要求:内容完整、条理清晰、数据准确、分析深入、讨论充分、结论明确。

五、实验拓展1. 结合实验内容,查阅相关文献,了解生物化学领域的最新研究进展。

2. 尝试设计新的实验方案,对生物化学现象进行深入探究。

3. 参加学术讲座、研讨会等活动,拓宽生物化学知识面。

生物化学实验(整理版)一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。

2. 掌握实验操作技能,提高实验技能。

3. 培养科学探究能力,提高分析问题和解决问题的能力。

4. 深入了解生物体的化学组成、结构、功能及其相互关系。

二、实验内容1. 氨基酸的分离与鉴定2. 蛋白质的结构与性质3. 酶的催化作用与活性测定4. 糖类的分离与鉴定5. 脂类的提取与鉴定6. 核酸的分离与鉴定7. 代谢途径的探究三、实验操作1. 实验前的准备工作:了解实验原理、实验目的、实验步骤、实验所需试剂和仪器等。

2. 实验过程中的注意事项:严格按照实验步骤进行操作,注意实验安全,保持实验环境的整洁。

四、实验报告1. 实验报告的格式:包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验讨论、实验结论等部分。

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生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一:糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的掌握莫氏(molisch)实验鉴定糖的原理和方法。

二、原理糖经浓无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水产生糠醛或糠醛衍生物,后者在浓无机酸作用下,能与α-萘酚生成紫红色缩合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称“紫环反应”,其反应如下图:利用这一性质可以鉴定糖。

三、实验器材1、棉花或滤纸。

2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。

3、试管1.5*15cm(*4)。

四、实验试剂1、莫氏试剂:称取α-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀释至100ml。

此试剂需新鲜配置,并贮于棕色试剂瓶中。

2、1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml。

3、1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液:讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅。

最后以沸蒸馏水稀释至100ml。

五、操作于4支试管中,分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素(棉花或滤纸浸在1ml水中)。

然后各加莫氏试剂2滴1,摇匀,讲试管倾斜,沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇!)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层,观察液面交界处有无紫色环出现。

六、注意事项1、试管中加入各种糖后,应做好标记,浓硫酸加入的方式应保持一致。

2、莫氏反应非常灵敏,所用的试剂应洗净,不可再样品中混入纸屑等杂物。

3、当糖浓度过高时,由于浓硫酸对他的焦化作用,将呈现红色及褐色而不呈现紫色,需稀释后再做。

思考题:1、解释α-苯酚反应的原理。

2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些?试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏(Seliwanoff)实验鉴定酮糖的原理和方法。

二、原理酮糖在浓酸的作用下,脱水生产5-羟甲基糠醛,后者与间苯二酚作用,呈红色反应,有时亦同时产生棕色沉淀,此沉淀溶于乙醇,呈鲜红色沉淀2,以果糖为例,其反应如下:三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。

生物化学实验内容(一)2024

生物化学实验内容(一)2024

生物化学实验内容(一)引言概述:生物化学实验是在生物化学领域中进行的实验研究,主要涉及生物分子的结构和功能、生物代谢、生物反应等方面的内容。

本文将介绍生物化学实验的一些基本内容。

正文:一、生物分子结构1. 研究生物大分子(如蛋白质、核酸、多糖)的结构与功能。

2. 分析生物分子的化学组成、序列和空间结构。

3. 制备和纯化生物分子样品,如蛋白质表达与纯化。

4. 应用分子生物学技术(如基因工程)对生物分子进行改造。

5. 测定生物分子在生物系统中的定位和互作关系。

二、生物代谢1. 研究生物的能量转换过程,如糖酵解、脂肪酸代谢等。

2. 测定生物体内代谢产物的生成量及速率。

3. 研究酶的活性、底物特异性及反应机制。

4. 探索代谢途径的调控机制,如信号转导通路等。

5. 应用同位素示踪技术研究代谢途径和产物的动力学变化。

三、生物反应1. 研究生物反应的动力学和热力学特性。

2. 研究酶促反应的速率与底物浓度、酶浓度等之间的关系。

3. 利用酶反应测定生物样品中特定分子的含量。

4. 研究药物与生物分子的相互作用。

5. 测定酶的抑制剂和激活剂对酶反应速率的影响。

四、生物分析技术1. 应用色谱技术对生物化学分子进行分离与分析。

2. 应用质谱技术鉴定和定量生物分子。

3. 应用光谱技术探究生物分子的结构和功能。

4. 应用电泳技术测定生物分子的大小、电荷和形态。

5. 应用生物传感器技术检测生物分子的存在和浓度。

五、生物化学实验安全与伦理1. 遵守实验室安全操作规范,保证实验人员的安全。

2. 尊重生物材料的来源和使用权益,遵守伦理规范。

3. 危险试剂的储存、处理和废物处理。

4. 生物实验的风险评估与危害控制。

5. 遵守相关法律法规,保护实验对象和环境安全与健康。

总结:生物化学实验内容涵盖了生物分子结构、生物代谢、生物反应、生物分析技术以及实验安全与伦理等方面的研究。

这些实验内容不仅促进了对生物化学领域的深入理解,还为疾病治疗、药物研发等方面的应用提供了重要的基础。

生物化学实验

生物化学实验
2.用蛋白溶液实验:取2ml蛋白溶液,加入0.5ml米伦试剂,此时出现蛋白质的沉淀。小心加热,凝固之蛋白质出现红色。
3.用白明胶(也是一种蛋白)做上述实验,结果如何?
(二)双缩尿反应
1.取少许结晶尿素放在干燥试管中,微火加热,尿素熔化并形成双缩尿,释出之氨可用红色石蕊试纸检测。至试管内有白色固体出现,停止加热,冷却。然后加10%NaOH溶液1ml摇匀,再加2滴1%CuSO4溶液,混匀,观察有无紫色出现。
6.尿素:如颗粒较粗,最好研成细粉末状。
7. 10%NaOH溶液:10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml。
8.浓硝酸:比重1.42
9. 1%硫酸铜溶液:硫酸铜1g溶于蒸馏水,稀释至100ml。
10.硫酸铵晶体:如颗粒太大,最好研碎。
11.饱和硫酸铵溶液:蒸馏水100ml,加硫酸铵至饱和。
12. 95%乙醇
纱布过滤,滤液备用。
主要内容
1.过氧化氢酶实验:
取试管4支,按下表加入试剂:
管号
2%H2O2
(ml)
新鲜猪肝糜
(g)
煮熟肝糜
(g)
生马铃薯
(g)
熟马铃薯
(g)
1
2
3
4
3
3
3
3
0.5




0.5




1


-ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ

1
加完,观察有无气泡产生,特别注意肝糜周围和马铃薯周围。
2.过氧化物酶实验:
取试管4支,按下表编号加入试剂:
取蛋白质溶液1ml,加晶体NaCl少许(加速沉淀并使沉淀完全),待溶解后再加入95%乙醇2ml混匀,观察有无沉淀析出。

生物化学实验

生物化学实验

生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一:糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的精品文档,你值得期待掌握莫氏(molisch)实验鉴定糖的原理和方法。

二、原理糖经浓无机酸(浓硫酸、浓盐酸)脱水产生糠醛或糠醛衍生物,后者在浓无机酸作用下,能与α-萘酚生成紫红色缩合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称“紫环反应”,其反应如下图:利用这一性质可以鉴定糖。

三、实验器材1、棉花或滤纸。

2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。

3、试管1.5*15cm(*4)。

四、实验试剂1、莫氏试剂:称取α-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀释至100ml。

此试剂需新鲜配置,并贮于棕色试剂瓶中。

2、1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml。

3、1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液:讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅。

最后以沸蒸馏水稀释至100ml。

五、操作于4支试管中,分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素(棉花或滤纸浸在1ml水中)。

然后各加莫氏试剂2滴1,摇匀,讲试管倾斜,沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇!)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层,观察液面交界处有无紫色环出现。

六、注意事项1、试管中加入各种糖后,应做好标记,浓硫酸加入的方式应保持一致。

2、莫氏反应非常灵敏,所用的试剂应洗净,不可再样品中混入纸屑等杂物。

3、当糖浓度过高时,由于浓硫酸对他的焦化作用,将呈现红色及褐色而不呈现紫色,需稀释后再做。

思考题:1、解释α-苯酚反应的原理。

2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些?试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏(Seliwanoff)实验鉴定酮糖的原理和方法。

二、原理酮糖在浓酸的作用下,脱水生产5-羟甲基糠醛,后者与间苯二酚作用,呈红色反应,有时亦同时产生棕色沉淀,此沉淀溶于乙醇,呈鲜红色沉淀2,以果糖为例,其反应如下:三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。

生物化学实验

生物化学实验
(1)温度对α-淀粉酶活性的影响 取3支试管,编号,各加入0.5%可溶性淀粉溶液3mL,分别置于冰水浴,37℃水浴及沸水浴中,保温5min,各缓缓加入1mLα-淀粉酶稀释液(试管勿从水浴中取出)继续保温5min,取出37℃水浴及沸水浴中试管置于冰水浴中冷却后,各加入碘—碘化钾溶液约1mL,比较各管颜色,并解释之。
(二)样品蛋白质浓度的测定 待测样品必须进行适当的稀释,使每毫升中含有0.5mg左右的蛋白质,才能进行测定。 该过程至少重复两次或平行测定两次。
7200分光光度计的使用
四、结果处理
固体样品中蛋白质含量=m’×Vm/Vn×1/m×10-3×100% 式中m′——由标准曲线查到的样品的蛋白质含量(mg) Vn ——用于显色的样品体积(ml) Vm —— 样品稀释后的体积(ml) m ——样品的质量(g)
三、操作方法
1. 样品制备 称取粉碎过40目筛的(玉米)样品2.50 g(精确至0.01 g)放入100 mL锥形瓶中; 沿器壁缓慢加入50 mL l%的盐酸溶液,并轻轻摇动使全部样品润湿; 将锥形瓶放入沸水浴中,预热3min,在沸水中准确加热15min; 立即取出,迅速冷却至室温。
2.样品测定 先加1 mL30%的硫酸锌溶液,充分混匀; 再加入1 mL亚铁氰化钾溶液,摇匀并全部转 移至 100 mL容量瓶中,用少量蒸馏水将锥形瓶冲洗几次; 若泡沫过多,加几滴无水乙醇消泡; 用蒸馏水定容至刻度; 混匀后过滤,弃去初始滤液15 mL,收集其余滤液 充分混匀; 进行旋光测定。
四、结果处理 皂化值=
式中 VA—空白瓶盐酸用量(mL); VB—样品瓶盐酸用量(mL); m—油脂的质量(g)。
五、思考题
1. 上式中(VA - VB )的含义是什么? 2. 试列出由皂化值计算油脂相对分子质量的公式。
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3
2
0
1
3
10人
水浴锅1台
试管2支、滤纸3张
2
影响酶活性的因素
3
2
0
1
3
10人
水浴锅1台
试管5支
3
血清醋酸纤维素薄膜电泳
6
2
0
2
1
25人
电泳仪1台电泳槽1台
薄膜条1张干
4
血清胆固醇的测定
3
2
0
1
1
25人
分光光度计1台
试管3支
5
转氨基作用
6
2
0
1
1
25人
烘干箱1台层析缸1个
层析滤纸1张
6
血清尿素氮的测定
2、通电一般电压用110~140V,电流约0.4~0.6mA/cm,时间45~60min。
3、染色关闭电源后立即将膜取出,放入染色液中浸染2~3min,然后移入漂洗液中漂洗数次,至蛋白条带清晰,背景无色为止。
4、定量取试管6支,编号依次为0(空白)、A、α1、α2、β、γ,将电泳图谱亦按A、α1、α2、β、γ蛋白区带剪开,分别装入相应号码试管中。再在图谱两端无蛋白部位剪一条宽约α1带的空白带放入空白管中。各管中加0.4mol/L NaOH 4ml,振摇数次,使染料色泽浸出,30min后,在620nm波长下进行比色,以空白管校正零点,读取清蛋白及α1、α2、β及γ球蛋白各管的吸光度。
2
1、稀释唾液的配制
将痰吐尽,用水漱口,再含蒸馏水做咀嚼运动,2分钟后吐入烧杯中,再用滤纸过滤后待用。
2、酶的特异性实验
取2支试管标号后按下表加入试剂。
试剂
管号
缓冲液
(pH6.8)
淀粉溶液
(1%)
蔗糖溶液
(1%)
稀释唾液
1
20滴
10滴
-
5滴
2
20滴
-
10滴
5滴
各管混匀后,放入37℃水浴中保温10分钟,然后每管加入班氏试剂20滴,放入沸水中煮沸,观察结果。
唾液淀粉酶可催化淀粉逐步水解,生成大小不同的糊精及最后水解成麦芽糖。淀粉及糊精遇碘各呈不同的颜色反应。直链淀粉遇碘呈蓝色,糊精按分子的大小遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色和红色。最小的糊精和麦芽糖遇碘不显色。根据颜色反应,可以了解淀粉水解的程度。由于在不同的温度、不同的酸碱度下唾液淀粉酶活性高低不同,所以淀粉水解的程度也不同。因此,通过与碘产生的颜色反应判断淀粉水解的程度,来了解温度、pH、和激活剂与抑制剂对酶促反应的影响。
5、激活剂和抑制剂的影响
管号
试剂
1%淀粉溶液(滴)
1%NaCl
(滴)
1%硫酸铜(滴)
1%硫酸钠
(滴)
蒸馏水
(滴)
稀释唾液(滴)
1
20
2
-
-
-
10
2
20
-
2
-
-
10
3
20
-
-
2
-
10
4
20
-
-
-
2
10
取4支试管,编号,按照下表加入试剂。
将上面4支试管放入37℃恒温水浴中保温10分钟。取出分别滴加碘液2~3滴,摇匀,观察现象,说明原因。
④ 将操作“2”的滤液漏斗置于1支小试管上,用玻棒戳穿滤纸尖部,加少量蒸馏水将滤纸上的沉淀粉洗入试管内,摇匀后观察和解释结果。
(二)重金属盐和三氯乙酸沉淀蛋白质
1. 原理
重金属粒子如Pb2+、Cu2+、Hg2+、Ag+等可与蛋白质分子上的羧基结合生成不溶性蛋白质金属盐而沉淀。三氯乙酸属于生物碱试剂,能与蛋白质分子上的氨基结合而沉淀。它们均可引起蛋白质分子的变性和失去生物学活性。
4、pH对酶促反应的影响
(1)取3支试管,编号后按下表加入各种试剂。


管号
pH5.0
缓冲液
pH6.8
缓冲液
pH8.0
缓冲液
淀粉溶液
1%
稀释唾液
1
20滴
-
-
10滴
5滴
2
-
20滴
-
10滴
5滴
3
-
-
20滴
10滴
5滴
(2)将上面三支试管放入37℃恒温水浴中保温10分钟。
(3)取出试管,分别加入1滴碘液,观察三支试管颜色的区别,说明pH对酶促反应的影响。
实验二 影响酶活性的因素
【预习要求】
预习各小实验的具体实验原理和操作内容
【实验目的】
验证酶的特异性,观察影响酶促反应的一些因素,加深对酶性质的认识。
【实验内容】
淀粉酶能催化淀粉水解,生成的麦芽糖属于还原性糖,能使班氏试剂中二价铜离子还原成一价亚铜,生成砖红色的氧化亚铜。淀粉酶不能催化蔗糖水解,所以不能产生具有还原性的葡萄糖和果糖,蔗糖本身又无还原性,故不与班氏试剂产生颜色反应。
二、实验操作
1、点样将醋酸纤维薄膜(2.5cm×8cm)一条,浸于巴比妥缓冲液,待完全浸透后,取出轻轻夹于滤纸中,吸去多余的溶液,再于薄膜的无光泽面的一端2.0cm处,用小玻片蘸取少许血清,垂直印于膜上,待血清渗入薄膜后,以无光泽面向下,两端用数层浸湿的滤纸(或纱布)贴紧,加盖,平衡2~3min,然后通电。
2、操作:
1)取试管4支,编号,按下表操作
管号
试剂 (滴) 1 2 3 4
5%蛋白质溶液 20 20 20 20
1% 醋酸 _ 1 _ _
10% 醋酸 _ _ 10 _
10% NaOH _ _ _ 10
2)将上述试管同时放入沸水浴中加热,观察并记录各试管出现的现象,解释变化原因。
3)取出试管,冷却后于第3管中慢慢滴入10%氢氧化钠溶液并观察现象。
三、考试方法及成绩评定方法
占总成绩之比
总分
分数分配
考核目的要求
30%
30
移液管正确使用方法
10
考察学生平时对移液管的使用是否正确与熟练程度
移液枪的正确使用方法
10
考察学生平时对移液枪的使用情况是否正确与熟练程度
紫外分光光度计的正确使用方法
10
考察学生平时对紫外分光光度计的使用情况是否正确与熟练程度
四、说明
二、基本要求
1.通过实验过程中的操作和观察来验证和巩固理论知识,加深学生对理论课内容的理解。
2.通过对实验现象的观察,逐步培养学生学会观察,比较,分析和综合各种现象的科学方法,培养学生独立思考和独立操作的能力。
3.通过对各类实验的操作和总结,培养学生严谨的科学态度。
4.进行本学科的基本技能的训练,使学生能够熟练各种基本实验方法和实验技术的操作。
4)向第4管中慢慢滴入10%的醋酸溶液并观察现象。
【教学方法】
1.课堂讲授
2.指导学生操作
3.课堂提问
4.课外实验报告作业
【复习思考题】
1. 什么因素可导致蛋白质的沉淀作用?举例说明。
2. 蛋白质的沉淀有几种?试举例说明。
3. 蛋白质的沉淀与变性之间有何关系?蛋白质在发生沉淀和变性后,其性质发生哪些变化?
3)类型:0:演示1:验证2:综合3:设计
4)每组人数:指教学实验项目中一次实验在每套仪器设备上完成实验项目的人数。
六、各实验项目教学大纲
实验一 蛋白质的沉淀反应
【预习要求】
预习四个小实验的具体实验原理和操作内容。
【验目的】
1. 加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识;
2. 了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。
5、计算吸光度总和T为各种蛋白吸光度的总和:T = A +α1 +α2 +β+γ。分别按下面算式计算各组分蛋白质的百分数:清蛋白(%)=(A/T)×100%α1球蛋白(%)=(α1 /T)×100%α2球蛋白(%)=(α2 /T)×100%β球蛋白(%)=(β/T)×100%γ球蛋白(%)=(γ/T)×100%现在许多实验室采用光密度计定量法。待薄膜完全干燥后,浸于透明液中约5~10min,取出平贴在玻璃板上,完全干燥后成为透明的膜。然后在光密度计上测定吸光密度,并可绘制成曲线,或者直接计算出各种蛋白质的百分含量。
3、温度对酶促反应的影响
(1)取三支试管,编号,每管加入pH6.8缓冲液20滴。1%淀粉溶液10滴。
(2)将第一支试管放入37℃恒温水浴,第二支试管放入沸水浴,第三支试管放入冰浴。
(3)放置5分钟后,分别向各试管中加入稀释唾液5滴,再放回原处。
(4)10分钟后,分别向各试管中加入碘液1滴,观察三支试管中颜色的区别,说明温度对酶促反应的影响。
《生物化学》实验教学大纲
课程类别:专业基础
适用专业:本科临床学专业
课程总学时:实验学时:32
实验指导书:生物化学与分子生物学实验教程
开课实验室名称:生化实验室
一、目的和任务
生物化学是一门在分子水平上研究生命现象的学科,也是一门重要的实验性较强的基础医学课程.随着医学的发展,该学科已渗透到医学的各个领域。生物化学实验技术已被广泛地应用于生命科学各个领域和医学实验的研究工作。生物化学实验是生物化学教学的重要组成部分,它与理论教学既有联系,又是相对独立的组成部分,有其自身的规律和系统。我们根据国家教委对医学生物化学课程基本技能的要求,开设了大分子物质的常用定量分析法、酶活性分析、电泳法、层析技术、离心技术及临床生化,使学生对生物化学实验有一个比较系统和完整的概念,培养学生的基本技能和科学思维的形成,提高学生的动手能力。
实验教材及参考书:
1.揭克敏主编:生物化学与分子生物学实验教程(第2版)。科学出版社,2010
参考资料:
1..袁道强主编:生物化学实验(第1版)。化学工业出版社,2011
五、实验项目数据表
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