第7章细菌感染的检查与防治

①直接涂片染色镜检
适用于具有特征性形态和染色性的病原菌, 适用于具有特征性形态和染色性的病原菌,如葡萄 球菌、脑膜炎奈瑟菌、抗酸染色阳性的结核分枝 杆菌等。
②分离培养
大多数细菌的形态与染色并无显著特异性， 大多数细菌的形态与染色并无显著特异性，因此需要 分离培养。如肠道杆菌均为G 杆菌，菌落形态亦相同。 分离培养。如肠道杆菌均为G-杆菌，菌落形态亦相同。 培养特征：化脓性链球菌---小而透明、溶血环。 ---小而透明 培养特征：化脓性链球菌---小而透明、溶血环。
区别点 制剂特点 接种剂量与特点 保存及有效期 免疫效果 死疫苗 死，强毒株 量较大，2~3次 量较大，2~3次 易保存， 易保存，约1年 较低， 较低， 维持数月~2 ~2年 维持数月~2年 活疫苗 活减毒株 量较小， 量较小，1次 不易保存，4℃数周 不易保存，4℃数周 较高， 较高， 维持3~5 3~5年甚至更长 维持3~5年甚至更长
注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免 疫球蛋白抗体，或细胞因子等免疫制剂， 疫球蛋白抗体，或细胞因子等免疫制剂，使机 体获得特异性免疫力 主要生物制品 抗毒素 抗菌免疫血清 免疫球蛋白 细胞因子制剂
区别要点 免疫物质 免疫出现时间 免疫维持时间 主要用途
人工主动免疫 抗原 慢，2~4周 周 长，数年~数月 数年 数月 预防
小
结
医院感染：概念、类型及传播途径； 医院感染：概念、类型及传播途径；医院 感染的判定标准及常见病原体和特点； 感染的判定标准及常见病原体和特点；
病原学检测标本采集与送检的原则； 病原学检测标本采集与送检的原则； 细菌学诊断的一般程序； 细菌学诊断的一般程序； 人工自动免疫、 人工自动免疫、人工被动免疫的概念及常用的生 物制品； 物制品； 常用抗菌药物的杀菌机制。 常用抗菌药物的杀菌机制。
检测Q 补体结合试验 检测Q热柯克斯体等抗体 中和试验 ELISA 风湿热（ 风湿热（抗O试验） 试验） 广泛用于病原体的诊断和流行病学调查
玻片凝集试验
试管凝集试验
酶联免疫吸附试验
④细菌的快速鉴定
API细菌数值鉴定系统 细菌数值鉴定系统
PCR技术 技术
【了解】其它内容。 了解】其它内容。
一、细菌学诊断
1.标本的采集和送检 1.标本的采集和送检
避免杂菌污染 不同期不同标本 用抗菌素以前 采集病变明显部位
标本必须新鲜 运送注意保存 检材容器贴上标签,并填写好化验单 检材容器贴上标签 并填写好化验单
2.致病菌的检验程序和常用项目 2.致病菌的检验程序和常用项目
2、获得性耐药： 获得性耐药：
敏感的细菌中出现了对抗菌药物有耐药性的菌株， 敏感的细菌中出现了对抗菌药物有耐药性的菌株，如 金葡菌对青霉素耐药； 金葡菌对青霉素耐药；
获得性耐药产生的分子机制如下： 获得性耐药产生的分子机制如下：
1.基因突变： 1.基因突变： 基因突变 耐药性突变株在接触药物前即已出现， 耐药性突变株在接触药物前即已出现，抗菌药的作 用只是选择耐药株，淘汰敏感株而已； 用只是选择耐药株，淘汰敏感株而已；以单一耐药 为主；相对稳定，很少自然丢失。 性为主；相对稳定，很少自然丢失。 2. 质粒介导的耐药性 1955年日本首先分离出对磺胺 氯霉素、 年日本首先分离出对磺胺、 1955年日本首先分离出对磺胺、氯霉素、链霉素和 四环素同时耐药的志贺菌。 四环素同时耐药的志贺菌。 耐药质粒R可携带多个耐药基因， 多重耐药性常 耐药质粒R可携带多个耐药基因，以多重耐药性常 容易丢失，可经结合和转导传递。 见，但容易丢失，可经结合和转导传递。 3.转座因子介导的耐药性 3.转座因子介导的耐药性 转座因子能在质粒之间或质粒与染色体间自行转移 位置，是细菌体内可移动的遗传物质。 位置，是细菌体内可移动的遗传物质。
2、药物作用的靶位发生改变 耐药菌株改变药物作用靶位，使抗菌药物不 能与其结合而产生耐药性。如链霉素：核糖 体30S亚基上的S12蛋白构象改变；红霉素: 核糖体50S亚基上的L12蛋白构象改变。 3、胞壁通透性的改变和主动外排机制 、 1.改变细胞壁通透性：减少药物吸收； 2.主动外排机制：增加药物的排出；
形态学检查 分离培养
（常规培养或 特殊培养）
直接涂片 染色镜检 形态特征 生化试验 血清学试验 动物实验
初步诊断
血清学诊断
（凝集试验、 沉淀反应、免疫标记技术等） 凝集试验、 沉淀反应、字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、核 微生物数字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、 微生物数字编码分类鉴定法 酸杂交技术、 技术、 芯片技术等） 酸杂交技术、PCR技术、DNA芯片技术等） 技术 芯片技术等
②分离培养
生化试验： 生化试验：如肠道杆菌进行乳 糖发酵试验。 糖发酵试验。 血清学试验： 血清学试验：已知抗体测抗原 或已知抗原测病人血清中相应 的抗体。如玻片凝集， 的抗体。如玻片凝集，鉴定菌 种和型。 种和型。 动物试验：测定细菌的毒力、 动物试验：测定细菌的毒力、 病原菌的分离和鉴定。 病原菌的分离和鉴定。
人工被动免疫 抗体或细胞因子等 快，立即 短，2~3周 周 治疗或紧急预防
第三节 细菌感染的治疗
一、抗菌药物的种类 1.生物来源 生物来源： 1.生物来源：
细菌：多黏菌素、杆菌肽 真菌：青霉素、头胞菌素 放线菌：链、卡那、四、红、两性霉素B、放线菌素D
2.按化学结构和性质分类 2.按化学结构和性质分类
第 7章 细菌感染的检查方法 与防治原则
【掌握】 掌握】
学习要求
1）临床常用的病原学检测标本采集与送检的原则； 临床常用的病原学检测标本采集与送检的原则； 人工自动免疫、 2）人工自动免疫、人工被动免疫的概念及常用的 生物制品； 生物制品；
【熟悉】 熟悉】
1）细菌学诊断的一般程序； 细菌学诊断的一般程序； 常用血清学试验的原理； 2）常用血清学试验的原理； 获得性免疫产生的方式； 3）获得性免疫产生的方式；
《抗菌药物临床应用指导原则》 抗菌药物临床应用指导原则》
2004年10月 日我国首次制定的全面、 2004年10月9日我国首次制定的全面、系统的 针对抗菌药物合理应用的指导性文件《 针对抗菌药物合理应用的指导性文件《抗菌药 物临床应用指导原则》 物临床应用指导原则》，对指导我国医师抗菌 药物的应用， 药物的应用，规范我国医疗机构和医务人员的 用药行为，进一步提高抗菌药物的治疗效果， 用药行为，进一步提高抗菌药物的治疗效果， 降低不良反应、减少药源性疾病发生率， 降低不良反应、减少药源性疾病发生率，合理 应用抗菌药物，提升临床药物治疗水平， 应用抗菌药物，提升临床药物治疗水平，确保 医疗质量和医疗安全， 医疗质量和医疗安全，同时降低不合理医药费 用具有十分重要的意义。 用具有十分重要的意义。
（三）抗菌药物应用与耐药性产生的关系
1.耐药菌株的出现与抗菌药物使用无直接关系； 1.耐药菌株的出现与抗菌药物使用无直接关系； 耐药菌株的出现与抗菌药物使用无直接关系 2.耐药性突变株在接触药物前即已出现 耐药性突变株在接触药物前即已出现， 2.耐药性突变株在接触药物前即已出现，抗菌药 的作用只是选择耐药株，淘汰敏感株而已； 的作用只是选择耐药株，淘汰敏感株而已； 3.临床不合理用药形成了抗菌药物的选择压力 临床不合理用药形成了抗菌药物的选择压力， 3.临床不合理用药形成了抗菌药物的选择压力， 这种选择压力作用下， 这种选择压力作用下，原来只占很少比例的耐药 菌株被保留下来，并不断扩大。 菌株被保留下来，并不断扩大。
（四） 细菌耐药性的控制策略
1.科学合理使用抗菌药物； 1.科学合理使用抗菌药物； 科学合理使用抗菌药物 2.严格执行消毒隔离制度 防止耐药菌交叉感染； 严格执行消毒隔离制度， 2.严格执行消毒隔离制度，防止耐药菌交叉感染； 3.必须规定抗菌药物凭处方供应 3.必须规定抗菌药物凭处方供应 4.研制新型抗菌药物 4.研制新型抗菌药物 5.研制质粒消除剂 5.研制质粒消除剂 6.抗菌药物的轮休 6.抗菌药物的轮休 细菌耐药性的防治是一项长期、复杂、艰巨的工作。 细菌耐药性的防治是一项长期、复杂、艰巨的工作。
常用的血清学诊断方法
类型 诊断应用举例
直接凝集试验 伤寒和副伤寒（肥达试验）、立克次体（外 伤寒和副伤寒（肥达试验）、立克次体（ ）、立克次体 斐试验）、钩端螺旋体（显微凝集试验） ）、钩端螺旋体 斐试验）、钩端螺旋体（显微凝集试验） 检测脑膜炎奈瑟菌、 乳胶凝集试验 检测脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等抗体 沉淀试验 梅毒（VDRL、RPR试验）、 梅毒（VDRL、RPR试验）、 试验
ß-内酰胺类：青霉素、头胞菌素 大环内酯类：红霉素 氨基糖苷类：链、卡那霉素 四环类：四环素 氯霉素 人工合成：喹诺酮类、磺胺类
二、抗菌药物的杀菌机制
① ③
④ ⑤ ④ ②
抗菌药物在发挥杀菌作用的过程中， 抗菌药物在发挥杀菌作用的过程中，病原菌 又是如何应对的？ 又是如何应对的？
三、细菌的耐药性
（二） 细菌耐药的生化机制
① ③
④ ⑤ ④ ②
1、钝化酶的产生 • （1）B-内酰胺酶 水解青霉素或头孢菌素的B－内酰胺环 水解青霉素或头孢菌素的B • （2）氨基糖苷类钝化酶 磷酸转移酶使链霉素、 磷酸转移酶使链霉素、卡那等羧基磷 酸化，而将抗菌药物钝化失活。 酸化，而将抗菌药物钝化失活。 • （3）氯霉素乙酰转移酶 • （4）甲基化酶
③血清学诊断
原理 已知抗体测未知抗原进行病原菌的鉴定 或用已知抗原检测患者体液中有无相应特异 性抗体和其效价的动态变化， 性抗体和其效价的动态变化，可作为某些传 染病的辅助诊断。 染病的辅助诊断。 标本 双份血清标本， 双份血清标本，恢复期血清抗体效价比急性 期升高≥ 倍者方有意义。 期升高≥4倍者方有意义。单份血清效价超过 一定标准才有诊断意义。 一定标准才有诊断意义。 种类 凝集试验、沉淀试验、中和试验、补体结合试验。 凝集试验、沉淀试验、中和试验、补体结合试验。
主要的生物制品