临床微生物学与检验重点
临床微生物学与检验重点

微生物与检验重点1. 简述致病菌引起全身感染后,常见的几种类型?答:①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症3. 试述构成细菌侵袭力的物质基础。
答:①荚膜②黏附素③侵袭性物质4. 简述病原菌感染机体后,机体如何发挥抗菌免疫功能?答:首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障结构,血脑屏障,胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。
7-10天后,机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌1. 简述细菌耐药性产生的主要机制。
答:①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力,在这种压力的作用下,原来只占很少比例的耐药菌株被保留下来,并不断扩大。
1.举例说明细菌命名的原则。
答:细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。
一个细菌种的学名由两个拉丁字组成,属名在前,用名词,首字母大写;种名在后,用形容词,首字母小写;两者均用斜体字。
中文译名种名在前,属名在后。
如Mycobaterium tuberculosis(结核分枝杆菌)。
属名亦可不将全文写出,只用第一个大写字母代表,如M. tuberculosis 2.如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌?并确定其有无致病性。
答:①直接镜检,经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌,可初步报告疑为葡萄球菌,需进一步分离培养鉴定。
②分离培养:血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定,若无细菌生长,需连续观察7天,并以血平板确定有无细菌的生长。
脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板,37℃过夜,可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。
金葡菌菌落周围有透明溶血环。
③试验鉴定:血浆凝固酶试验,甘露醇发酵试验,耐热核酸酶试验,肠毒素测定,SPA检测。
致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环,血浆凝固酶试验阳性,甘露醇发酵试验阳性,耐热核酸酶试验阳性,SPA检测有A蛋白的存在。
临床微生物学检验考试重点知识总结

临床微生物学检验第一章微生物感染与宿主免疫根据微生物与人体的关系:有益微生物条件致病微生物病原微生物。
肠道中双歧杆菌最为典型P11 *1潜伏感染:若宿主与病原病体在相互作用过程中暂时处于平衡状态,病原体潜伏在病灶内或某些特殊组织内,一般不排除体外。
(如果宿主的抗感染免疫力减弱,或侵入的病原体数量增多,毒力较强,机体的组织细胞受到不同程度的损害并出现一系列临床症状和体征,则称为显性感染。
)病原微生物的传播V:空气传播飞沫传播接触传播共同媒介物传播虫媒传播多途径传播P21 2,(病原菌的毒力包括侵袭力和毒素。
)侵袭力:病原菌在宿主见传播侵袭定植并逃避免疫的能力,称为侵袭力。
由菌体表面结构和侵袭物质等构成P25 3、胞内菌感染免疫:胞内菌分专职和兼职,兼职胞内菌在宿主体内主要寄居在细胞内生长繁殖,但是亦可在细胞外没有无活细胞的环境生存繁殖。
(如结核分支杆菌麻风分枝杆菌)第二章细菌的基本形状P38 1、细菌大小以微米um为测量单位。
人肉眼的最小分辨率为0.2mm. 按其外形:球菌杆菌螺旋菌球形呈圆球形、近圆球形、矛头状和肾形P41 2 、鞭毛功能:1)动力:鞭毛是细菌的运动器官,(旋转运动是由基础小体的同心环旋转产生,推动力来自质子动能,即质子浓度梯度流动所释放的ATP。
鞭毛旋转方向决定运动类型,观察细菌动力用悬滴法或压滴法在显微镜下观察其运动,也可将细菌接种于半固体培养基观察动力)2)鉴别细菌;鞭毛及细,一般染色不能看见,常用特殊染色和镀银染色观察细菌有无鞭毛及鞭毛数量、分布,可用于鉴别细菌P42 3、性菌毛可也结合的方式在细菌之间传到DNA,导致细菌毒性及耐药性的变异6、糖萼功能 1)与细菌毒力有关:有糖萼的细菌表面光滑,不易被细菌细胞吞噬,消化,逃避免疫吞噬后的细菌可在机体组织细胞中生长繁殖引起感染。
2)细菌的鉴别和分形:夹馍物质具有特异性抗原,可作为细菌的鉴别和分形。
3)形成生物膜7、革兰阴性菌细胞壁特有组分-----磷壁酸8、芽孢功能:1)对热力、干燥、辐射、化学消毒具有强大抵抗力2)以是否能杀死芽孢作为物品消毒灭菌效果的判断指标,3)芽孢在菌体的位置和直径的大小随菌种的不同,这种形态特点有利于细菌的鉴别。
临床微生物学检验复习重点

临床微生物学检验复习重点临床微生物学检验复习重点第一章生物安全和医院感染1.实验室生物安全保障:指单位和个人为防止病原体或毒素丢失、被盗、滥用、转移或有意释放而采取的安全措施。
2.医院感染(NI):在医疗机构中获得的感染。
包括外源性和内源性,外源性来自于另一感染者/环境内源性:患者,正常菌群迁徙至其他部位等导致病原体过度生长。
第二章临床微生物检验标本的采集1.标本的一般采集原则1.1早期采集病程早期、急性期或症状典型时,使用抗生素或其他抗菌药物之前。
1.2无菌采集:采集的标本应无外源性污染。
消毒,无菌容器。
1.3根据目的菌的特性用不同的方法采集1.4采集适量标本伤寒-1周:血液 2周:粪便和尿夜1.5安全采集2.厌氧菌:在有氧条件下不生长,在无氧条件下生长的细菌。
2.1厌氧菌感染的条件:组织缺氧或氧化还原电势降低→原因:局血障:血管损伤、肿瘤压迫、烧伤、动脉硬化、组织水肿、坏死、有异物等,刺伤,大面积外伤2.2厌氧菌感染的临床特征(1)分泌物具典型的腐臭,血性渗出物呈黑色。
在紫外线下可发红色荧光(产黑色素普氏菌或卟啉单胞菌感染)。
(2)感染组织局部有大量气体产生→皮下有捻发音时为产气荚膜梭菌。
(3)部位为黏膜附近(4)长期使用氨基糖苷类抗生素无效者,新近流产史,胃肠术后(5)深部外伤枪伤,咬伤后继发感染(6)分泌物经革兰染色后,有细菌,规培:阴性液体及半固体培养基深部生长第三章临床细菌学检验技术1.细菌形态学检查→显微镜检其菌体形态1.1涂片 1.2干燥 1.3固定1.4 染色:(1)初染:加草酸铵结晶紫一滴,约一分钟,水洗。
(2)媒染:滴加碘液冲去残水,并覆盖约一分钟,水洗。
(3)(3)脱色:将载玻片上的水甩净,并衬以白背景,用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止,约20—30秒,立即用水冲净酒精。
(4)复染:用复红液染1—2分钟,水洗。
1.5镜检:干燥后,置油镜观察。
革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏阳性菌呈紫色。
临床微生物学检验重点知识归纳

临床微生物学检验重点知识归纳
临床微生物学检验重点知识归纳:
1.细菌的基本结构有:细胞壁、细胞膜、细胞质、核质。
2.细菌的特殊结构:荚膜(抗吞噬作用)、菌毛(细菌的黏附器官)、鞭毛(细菌的运动器官)、芽胞(细菌在不良环境中的存活方式)。
3.肽聚糖:为革兰阳性菌和革兰阴性菌细胞壁的共同成分。
4.磷壁酸:为革兰阳性菌细胞壁特殊成分。
5.外膜层:为革兰阴性菌细胞壁特殊成分。
6.质粒:是细菌染色体外的遗传物质,存在于细胞中,是小的双股闭合环状DNA分子,可独立于染色体存在并复制,也可整合到染色体上。
7.细菌L型:是细胞壁缺陷型细菌。
8.细菌以“二分裂”方式繁殖。
9.细菌的生长曲线主要包括四期:延缓期、对数期(最佳研究时期)、稳定期、衰亡期。
10.细菌常见的遗传变异类型:
①转化(供体菌游离的DNA片段直接进入受体菌);
②接合(通过性菌毛互相连接,将遗传物质从供体菌转移给受体菌);
③转导(以温和噬菌体为载体,将遗传物质从供体菌转移给受体菌);
④S-R变异(细菌菌落由光滑型到粗糙型的变异)。
11.细菌非染色标本:检查细菌动力。
12.革兰染色:是细菌学中最经典、最常用的染色方法。
13.革兰染色步骤:初染(结晶紫)、媒染(碘液)、脱色(酒精)、复染(石炭酸复红)。
14.标本处理的一般原则:早期、无菌、适量、方法、安全。
15.培养基种类:基础培养基、选择培养基(SS培养基)、鉴别培养基(克氏双糖铁)、营养培养基(巧克力平板)、特殊培养基(细菌L型培养基)。
临床微生物学检验(理论)细菌部分 重点整理(下篇)——医学检验资料文档

分枝杆菌属是一类细长、略带弯曲、呈分枝状生长的细菌,革兰染色阳性,无芽胞、无荚膜。
抗酸染色阳性,故又称抗酸杆菌。
营养要求较高,常用罗琴培养基,生长缓慢,2~8周后方可见菌落第一节结核分枝杆菌是结核病的病原体。
结核病在上世纪40、50年代发病率和死亡率很高,60~80年代经过人们的努力,大大降低,80年代后期,发病率又有所上升,主要是因为耐药性的出现。
一、临床意义本菌抵抗力强,可存活6~8月,随着漂浮于空气中的微滴核被吸入呼吸道,植入肺泡发育繁殖导致结核。
引起结核病,随社区人群生活状况不同发病率有所差异,全球约有1/3人感染,有人类死亡之首和白色瘟疫之称。
二、生物学性状1、形态染色:①细长、略弯曲杆菌,牛型结核分枝杆菌稍短。
排列成团、成堆②抗酸染色阳性,治疗后菌体呈非抗酸性G+颗粒,称much颗粒(L型变异)③金胺“O”染色菌体:呈黄色荧光2、培养特性最适温度35~37℃,最适pH6.4~6.8。
专性需氧,在液体培养基上形成菌膜,有毒株呈索状生长营养要求高,专性需氧,专嗜甘油为碳源,常用罗琴培养基(鸡蛋、甘油、枸橼酸钠、天门冬酸、马铃薯粉、孔雀绿、钾镁离子),繁殖慢,增殖一代需要18小时,在固体培养基上2~5周才出现肉眼可见的菌落,为菜花样,凸起、不透明、粗糙,牛型结核分枝杆菌为光滑型。
3、生化反应:烟酸试验(+),硝酸盐还原(+),中性红(+),烟酰胺酶试验(+),脲酶试验(+),牛型分枝杆菌均为阴性。
糖类发酵(- ) ,热触酶(- ) ,Tween水解(- );热触酶(- ) 热磷酸酶(- ),为结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌鉴定试验,后者阳性4、抵抗力:强温度:菌悬液80℃5min、痰标本煮沸5min完全杀死细菌光线:对紫外线敏感干燥:对干燥或干热抵抗力强,干燥痰中可存活数周化学因素:75%乙醇5min,石炭酸、来苏儿、甲醛敏感5、结核杆菌多种性状可发生变异如:菌落变异、毒力变异等。
菌落变异由粗糙型变成光滑型。
微生物学检验重点知识总结

微生物学检验重点知识总结微生物学是研究微生物的结构、生理、生化、生态以及与人类和环境的关系的一门学科。
在微生物学检验中,掌握以下重点知识是非常重要的。
1.微生物分类学:微生物可以分为原核生物和真核生物。
原核生物包括细菌和古细菌,真核生物包括真菌、原生动物和线虫等。
了解微生物的分类和命名体系,对于正确识别和鉴定微生物是至关重要的。
2.微生物培养技术:微生物的培养是检验微生物的基础。
掌握常见的微生物培养方法,如液体培养、平板培养和深层培养等,并了解培养基的配制和消毒操作的方法。
3.微生物的生长特性:微生物的生长特性包括生长曲线、生长速率、最适生长温度和最适生长pH等。
了解微生物的生长特性对于选择合适的培养条件和进行微生物检验是非常重要的。
4.微生物的鉴定方法:微生物的鉴定是微生物学检验的重点。
常见的微生物鉴定方法包括形态学观察、生理生化特性检测、免疫学检测和分子生物学检测等。
掌握常用的微生物鉴定方法和技术,可以准确快速地鉴定微生物。
5.微生物与人类健康的关系:微生物在人类健康中起着重要作用。
了解微生物对人类健康的影响,如微生物的致病机制、致病微生物的鉴定和抗微生物药物的应用等,有助于预防和治疗微生物引起的疾病。
6.微生物在环境中的作用:微生物在环境中起着重要的生态作用。
了解微生物在土壤、水体和大气中的功能和影响,对于环境保护和资源利用具有重要意义。
7.微生物学检验方法:微生物学检验方法包括微生物计数、微生物培养、抗微生物药敏试验、细菌鉴定和病毒检测等。
掌握常见的微生物学检验方法和技术,能够准确、快速地检测微生物。
8.检验结果的解读和分析:对于微生物学检验结果的解读和分析是非常重要的。
了解常见的微生物学检验参数和阈值,能够根据检验结果判断微生物的致病性和药物敏感性等。
总结起来,微生物学检验的重点知识包括微生物的分类和命名、微生物培养技术、微生物的生长特性、微生物的鉴定方法、微生物与人类健康的关系、微生物在环境中的作用、微生物学检验方法以及检验结果的解读和分析等。
临床微生物检验知识点

临床微生物检验知识点1.微生物学基础知识:了解细菌、真菌、病毒、寄生虫等病原微生物的基本特征,包括形态、生长要求、代谢特性等。
2.微生物的分离和培养:熟悉常规培养基的选择和制备,掌握不同微生物的适宜培养条件,如温度、pH值、氧气需求等。
3.微生物鉴定:根据微生物的形态和特性进行初步鉴定,如形态学特征、革兰氏染色、厌氧性检测等。
此外,还可以使用生物化学试纸、血清学试验、分子生物学等方法进行鉴定。
4.耐药性检测:对微生物进行药敏试验,了解其对各类抗生素、抗真菌药物、抗病毒药物的敏感性和耐药性。
这有助于临床医生选择合适的药物治疗感染。
6.检验流程和规范:了解微生物检验的标本采集、处理和保存的基本要求,掌握各类检验方法的操作步骤,遵守无菌操作规范,以保证检验结果的准确性和可靠性。
7.抗生素治疗和微生物学监测:了解抗生素的分类、作用机制和临床应用,以及微生物的产生耐药性的机制和监测方法。
合理应用抗生素,避免滥用和不当使用,是临床微生物检验的重要目标之一8.感染控制:了解医院感染控制的基本原则和措施,包括手卫生、环境清洁、消毒灭菌、隔离措施等。
临床微生物检验在感染控制中发挥着重要作用,通过对患者、环境和医务人员的监测,提供科学依据进行感染防控。
9.病原微生物的定量检测:对一些病原微生物,如HIV、肺结核菌等,需要进行定量检测。
这有助于预测疾病进展、评估治疗效果和制定治疗方案。
10.新技术和新方法的应用:随着科技的进步,临床微生物检验也不断发展,新的方法和技术被广泛应用,如实时荧光PCR、质谱技术、核酸杂交等。
了解这些新技术的原理和应用,可以提高检验的灵敏度和特异性。
总结起来,临床微生物检验的知识点涉及微生物学基础、分离培养、鉴定、药敏试验、诊断、标本采集处理、抗生素治疗和感染控制等方面。
掌握这些知识,可以提高临床微生物检验的准确性和可靠性,为临床医生提供更科学的诊断和治疗建议。
临床微生物学检验考试重点知识总结

临床微生物学检验考试重点知识总结本页仅作为文档页封面,使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March1、潜伏感染:若宿主与病原体在相互作用过程中暂时处于平衡状态,病原体潜伏在病灶内或某些特殊组织内,一般不排出体外,称为潜伏感染。
2、抗生素相关性腹泻,严重时引起伪膜性肠炎、真菌性肠炎、葡萄球菌肠炎等,如果肠道正常菌群破坏后艰难梭菌异常增长并分泌肠毒素,则可损伤肠粘膜引起伪膜性肠炎。
3、病原菌的毒力包括侵袭力和毒素。
病原菌在宿主间传播、侵袭、定植并逃逸免疫的能力,称为侵袭力。
4、细菌的大小以微米(um)为测量单位。
5、球菌呈圆球形、近圆球形、矛头状或肾形。
6、观察细菌动力可用悬滴法或压滴法在显微镜下直接观察其运动,也可将细菌穿刺接种半固体培养基观察动力。
鞭毛染色7、鞭毛可鉴别细菌,糖萼可作为细菌的鉴定和分型。
8、芽孢的功能:⑴热力、干燥、辐射、化学消毒剂等具有强大的毒抗力。
⑵以是否杀死芽孢作为物品消毒灭菌判断效果的指标。
⑶芽孢在菌体的位置和直径大小随菌种的不同,这种形态特点有助于细菌鉴别。
9、生长曲线:细菌接种到液体培养基后以二分裂法进行繁殖。
以倾注平板法计数孵育后的菌落数可换算出菌落形成单位,连续检测细菌不同培养时间的CFU,以CFU为纵坐标,培养时间为横坐标可以作出一条反映细菌生长数的变化规律曲线,称生长曲线。
10、生长曲线分为四期:⑴迟缓期:是细菌适应环境的过程,为细菌的分裂繁殖做好准备。
⑵对数生长期:细菌以最大的速率生长和分裂,细菌数量对数增加。
此期细菌代谢活跃而稳定,其大小、形态、染色性和生化反应典型,对外界因素反应敏感,是检测细菌生物学性状和进行药物敏感性试验的适宜阶段. ⑶稳定期:生长繁殖菌数和死亡数处于动态平衡,此期细菌合成较多的代谢产物(如抗生素).⑷衰亡期:细菌死亡速率逐步增加,死亡数大于增加数,一般不用该期的细菌做鉴定和研究工作。
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微生物与检验重点1. 简述致病菌引起全身感染后,常见的几种类型?答:①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症3. 试述构成细菌侵袭力的物质基础。
答:①荚膜②黏附素③侵袭性物质4. 简述病原菌感染机体后,机体如何发挥抗菌免疫功能?答:首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障结构,血脑屏障,胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。
7-10天后,机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌1. 简述细菌耐药性产生的主要机制。
答:①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力,在这种压力的作用下,原来只占很少比例的耐药菌株被保留下来,并不断扩大。
1.举例说明细菌命名的原则。
答:细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。
一个细菌种的学名由两个拉丁字组成,属名在前,用名词,首字母大写;种名在后,用形容词,首字母小写;两者均用斜体字。
中文译名种名在前,属名在后。
如Mycobaterium tuberculosis(结核分枝杆菌)。
属名亦可不将全文写出,只用第一个大写字母代表,如M. tuberculosis 2.如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌?并确定其有无致病性。
答:①直接镜检,经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌,可初步报告疑为葡萄球菌,需进一步分离培养鉴定。
②分离培养:血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定,若无细菌生长,需连续观察7天,并以血平板确定有无细菌的生长。
脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板,37℃过夜,可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。
金葡菌菌落周围有透明溶血环。
③试验鉴定:血浆凝固酶试验,甘露醇发酵试验,耐热核酸酶试验,肠毒素测定,SPA检测。
致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环,血浆凝固酶试验阳性,甘露醇发酵试验阳性,耐热核酸酶试验阳性,SPA检测有A蛋白的存在。
1.什么是不耐热肠毒素(LT)?它的物理性质、基本结构、致病机理及与霍乱毒素(CT)的关系如何。
答:LT是肠产毒型大肠杆菌产生的致病物质,因对热不稳定,故称为不耐热肠毒素。
其65℃30min可被破坏。
LT分为LT-Ⅰ和LT-Ⅱ,LT-Ⅱ与人类疾病无关,LT-Ⅰ是引起人来胃肠炎的致病物质。
其结构包括1个A亚单位和5个B亚单位,其中A亚单位是毒素的活性部分。
B亚单位与肠粘膜上皮细胞表面的GM1神经节苷脂结合后,使A亚单位穿越细胞膜与腺苷环化酶作用,令胞内ATP转变为cAMP。
胞质内cAMP水平增高后,导致肠粘膜细胞内的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔,同时钠的吸收减少,导致可持续几天的腹泻。
LT-Ⅰ与霍乱肠毒素两者间的氨基酸的同源性达75%,他们的抗原高度交叉。
2.什么是O157:H7大肠杆菌?其致病物质和所致疾病是什么?答:O157:H7为肠出血性大肠杆菌的一个血清型,为出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原体。
其致病物质是其表达的志贺毒素。
3.如何根据O抗体和H抗体的变化特点判断肥达试验的结果?答:若O、H凝集效价均超过正常值,则肠热症的可能性大,若两者均低,肠热症的可能性小,若O不高H高,可能预防接种或非特异性回忆反应,若O高H不高,则可能感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。
4.对肠热症患者进行微生物学检查时标本采集应注意什么?答:根据不同的疾病、不同的病程取不同的标本。
肠热症第1、2周取外周血,第2、3周取粪便、尿液,全程可取骨髓分离培养细菌。
5.简述对疑似痢疾患者进行病原学诊断的常规及快速方法。
答:常规鉴定:①初步鉴定②最后鉴别③鉴别试验④血清学鉴定⑤非典型菌株可用传代法及毒力试验进行鉴定。
快速诊断:①直接凝集②免疫荧光菌球法③协同凝集试验④乳胶凝集试验⑤分子生物学方法2. 幽门螺杆菌与空肠弯曲菌的异同?答:1.尿素酶试验 2.产生大量尿素酶 3.婴幼儿腹泻3.霍乱患者为什么会出现剧烈腹泻及严重脱水的症状?答:霍乱弧菌可产生致泻性极强的霍乱肠毒素,该毒素由1个A亚单位和5个相同的B亚单位组成,B亚单位使毒素分子与真核细胞上的受体结合,A亚单位具有酶活性功能。
A亚单位进入细胞后,激活腺苷环化酶,令胞内cAMP水平增高,导致肠粘膜细胞内的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔,同时钠的吸收减少,导致严重的腹泻和呕吐。
1.假单胞菌属的代表菌种是何菌?其生物学性状有何特点?答:铜绿假单胞菌是假单胞菌属的代表菌种。
其生物学特性主要有4℃不生长,而42℃生长。
在血琼脂、麦康凯培养基上均可形成5种不同形态的菌落,在普通培养基上可产生多种色素。
2.非发酵菌鉴定原则及初步分群试验答:分群依据:①氧化酶试验②葡萄糖氧化发酵③动力④麦康凯培养基上生长情况。
3.假单胞菌的概念及其共同特点答:假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性菌,氧化酶试验阳性,多为腐生菌,少数为植物和动物寄生菌,大多为条件致病菌。
其共同特点是:革兰阴性、直或微弯、较细长、散在排列、无芽胞、有荚膜,多数有鞭毛,专性需氧,生长温度范围广,最适生长温度35℃,少数能在4℃或42℃生长。
生长中可产生各种水溶性色素。
4.简述铜绿假单胞菌的检验方法答:①标本的采集:按疾病和检查目的,采取不同的标本。
②标本直接检查:直接显微镜检查;抗原检测;核酸检测。
③分离培养和鉴定。
1.简述白喉棒状杆菌的致病过程。
答:白喉棒状杆菌存在于白喉患者的喉头气管及鼻腔粘膜,有时皮肤、结膜等部位也可见到。
传染源为患者及带菌者,细菌多随飞沫或污染的物品传播,感染后白喉棒状杆菌在鼻咽部粘膜处繁殖并产生外毒素,引起局部炎症和全身中毒症状。
白喉杆菌在侵犯局部增殖,产生外毒素致病。
2.简述白喉杆菌体外毒力试验的原理、方法及结果判断。
答:①琼脂平板毒力试验。
将含有20%牛血清肉汤琼脂分注与平皿中,每只平皿10ml,50℃冷却,在凝固之前,将浸有白喉抗毒素血清稀释液的滤纸条沉于琼脂内,制成平板(Elek平板)。
在与滤纸条相垂直的方向将待检菌画直线接种,划线宽度约6-7mm,两端与皿壁连接。
同时,与之相距10mm处平行划线接种一标准产毒菌株,作为阳性对照。
37℃培养24-48小时,若菌苔两侧出现斜向外延伸的乳白色沉淀线,并与其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合,则为产毒株。
②SPA 协同凝集试验:将白喉抗毒素IgG先吸附在SPA上,再加入待检菌培养物上清液。
若有白喉外毒素,则与SPA-IgG结合出现可见的凝集反应。
③对流电泳:将已知的白喉抗毒素和待检菌培养液分置琼脂板两孔之中,电泳30min后,若两孔之间出现白色沉淀线,表明待检菌为产毒株。
1.临床上对疑似的炭疽患者怎样鉴定病原。
答:若从标本中检出革兰阳性大杆菌,两端平截、呈竹节状排列,并有明显荚膜,在人工培养基上生长可产生芽孢,呈卵圆形,小于菌体,位于菌体中央;在普通琼脂平板上形成灰白色、扁平、干燥、无光泽的菌落;动力阴性,牛乳凝固试验、噬菌体裂解试验、串珠试验和青霉素抑菌试验均为阳性,则可报告:“检出炭疽芽胞杆菌”。
有条件者可应用DNA探针,其敏感性高,特异性强。
其他鉴定试验作为参考指标,可根据具体情况酌情选做。
同时应注意与其它芽胞杆菌相鉴别。
1. 简述结核菌素试验的原理、方法及结果分析和实际应用。
答:(1)原理:结核菌素试验属于迟发型超敏反应,用结核菌素试剂作皮肤试验,感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗者,一般都出现阳性反应。
(2)方法:取5UPPD或OT0.1ml注射于前臂掌侧皮下,经48—72h检查反应情况。
应特别注意局部有无硬结,不能单独以红晕为标准。
(3)结果分析:①阳性注射部位硬结、红肿直径0.5—1.5cm 之间。
这表明机体曾感染过结核,出现超敏反应,但不表示正患结核病;②强阳性硬结直径超过1.5cm以上,表明可能有活动性结核,应进一步检查;③阴性注射部位有针眼大的红点或稍有红肿,硬结直径小于0.5cm,说明无结核感染,但应考虑下述情况:如受试者处于原发感染的早期,或正患有其他传染病(如荨麻疹等)、霍奇金病、结节病、艾滋病。
(4)应用:①选择BCG接种对象及测定接种效果,结核菌素反应阴性者应接种BCG;②结核菌素试验对婴幼儿可做诊断结核病之用;③可在未接种BCG的人群中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查;④可借用其测定肿瘤病人的细胞免疫功能。
2. 结核分枝杆菌细胞壁中脂质含量高,这一特点有何意义?答:结核分枝杆菌胞壁含脂质多,与其染色性、抵抗力、生长速度及致病性等特性有密切关系,脂质中的分枝菌酸使其具有抗酸性;细胞壁含大量脂质,可防止菌体内水分的丢失,故对干燥的抵抗力特别强;同时影响营养物质的吸收,故生长缓慢,且脂质中的磷脂、索状因子、蜡质D、硫酸脑苷脂等毒性成分以不同机制致病。
3.简述从标本中检验结核分枝杆菌的方法。
答:1.显微镜检查(1)直接涂片染色镜检:是一种临床常用的简易快速的检查方法。
直接涂片法是用接种环取病人痰液中浓厚部分或离心沉淀(3000r/min,20min)的尿沉淀物2—3接种环涂片,涂片要厚。
经自然于燥和火焰固定后进行齐-尼抗酸染色,或作金胺“o”荧光染色。
前法用油镜检查,后法用荧光显微镜高倍镜检查。
镜检时应仔细查遍整个涂片或观察至少100个视野。
结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色,其它细菌和细胞为蓝色。
经荧光染色的结核分枝杆菌,在黑色背景中呈亮黄色。
涂片镜检结果应报告“找到抗酸性杆菌’’或“未找到抗酸性杆菌”,而不能报告“找到结核分枝杆菌”。
(2)浓缩集菌涂片检查法:如果直接涂片镜检不易检出结核杆菌,应采用浓缩集菌涂片检查法,以提高结核杆菌的检出率。
所谓浓缩集菌涂片即为将采集标本离心,取沉淀涂片,或是采用漂浮集菌法,集菌后标本经反复多次使涂层加厚,一般取3—4个接种环,涂抹面积大约直径在15mm 即可,干燥固定后染色镜检。
2.核酸检测用PCR法快速诊断结核分枝杆菌感染。
设计结核分枝杆菌特异rRNA片段的引物进行扩增,然后用结核分枝杆菌rRNA序列特异的DNA探针与之杂交。
PCR技术的特异性与敏感性均大于95%。
3.抗PPDIgG的检测用ELlSA 法检测患者血清中抗PPDIgG,可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法之一。
肺结核病人的血清阳性率为80%—90%。
4.简述抗酸染色的步骤及结果,并举出两种抗酸菌。
答:①初染:石炭酸复红加温染5min②脱色:3%的盐酸酒精脱色1min③复染:美兰染1min结果:抗酸菌为红色,非抗酸菌为蓝色。
结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌均为抗酸菌5.一患者怀疑患有肺结核,如何进行微生物学检查?(包括标本采集至报告结果的全过程,检查方法应有传统方法和快速检查方法。
)答:1)标本采集:根据感染部位不同,采集不同的标本。