常用培养基及染料的配制

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生物培养基和溶液的配制

生物培养基和溶液的配制

250 μ L、 0. 05% 溴酚蓝 250 μ L。
水定容至 1 L ,用 Whatman 1 号滤纸过滤 ,于 4 ℃保存 。
水定容至 100 mL ,分装后高压灭菌 。
26 3 mol/L NaAc(pH5 . 2) : 80 mL 水中溶解 40 . 81 g NaAc·3H2 O ,用冰醋酸约 11 . 4 mL 调 pH 至 5 . 2 ,加 27 2 mol/L NaAc(pH4 . 0) : 30 mL 水中溶解 27 . 22 g NaAc·3H2 O ,用冰醋酸约 56 mL 调 pH 至 4 .0 ,加水
附录 6 培养基与试剂的配制 定容至 100 mL ,分装后高压灭菌 。
207
28 5 mol/L NaCl : 800 mL 水中溶解 29 . 2 g NaCl ,定容至 100 mL 。
29 0 . 15 mmol/L NaCl( 即 0 . 9% NaCl 溶液 ) : 90 mL 水中溶解 0 . 9 g NaCl ,定容至 100 mL 。 7H2 O 于 100 mL 水中 。
份贮存于 - 20 ℃备用 。 于 - 20 ℃ 。
16 100 mmol/L IPTG 母液 :溶解 238 . 3 mg 的 IPGT( 异丙基硫代 β D 半乳糖苷 ) 于 10 mL 水中 ,分成小 17 2 mol/L KCl :溶解 37 . 28 g KCl 于 250 mL 水中 。 18 10 mg/mL 溶 菌 酶 ( lysozyme) :用 10 m mol/L Tris
100 mL 水中 。
206
附录 6 培养基与试剂的配制
液使用前配制 )
5 1×抽提缓冲液 : 0. 5% 的 2×抽提缓冲液 、 5 mol/L 尿素 、 10 mmol/L 巯基乙醇 、 5%苯酚 。 (1×抽提缓冲 6 DEPC( 焦碳酸二乙酯 ) 处理水 :0 .1%DEPC ,水 ,即加 1 mL DEPC(diethlpyrocarbonate) 于 1 L 水中 ,使

常用培养基及染料的配制

常用培养基及染料的配制

常用培养基的配制1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠 10g琼脂15~20gp H 7.0~7.2水1000mL121℃灭菌20min。

2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠 0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁 0.01g琼脂20g水1000mLp H 7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLp H 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100mL琼脂15—20gp H 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gp H 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制

实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制

实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制一、实验室常用染料性能介绍1.苏木精:苏木精是一种常用的组织染料,其主要成分是吡啶类化合物。

苏木精具有很好的亲水性,对细胞核染色效果好,特别适用于观察细胞的核结构和形态。

2.基本蓝1:基本蓝1是一种亲水性染料,也是常用的组织染料。

它能与细胞内核酸结合,使细胞核显色。

基本蓝1在显微镜下观察时呈现出暗蓝色,有良好的穿透性,可以用来观察细胞的核仁、蛋白质沉积等。

3.伊红:伊红是一种细胞染色常用的酸碱指示剂。

它在碱性条件下呈红色,在酸性条件下呈黄色,可以用来染色观察细胞的酸性和碱性成分。

4.甲磺酸伊地洛尔:甲磺酸伊地洛尔是一种常用的荧光染料,可以与细胞膜结合,形成荧光标记的细胞,用于细胞增殖、迁移等研究。

在实验室中,还有很多常用的药品试剂和培养基需要配制。

下面介绍一些常见的配制方法:1.X溶液的配制:X溶液通常是用于细胞培养的培养基中的一种添加剂。

具体的配制方法是将X溶液的粉末称取适量加入适量的去离子水中,搅拌均匀即可。

X溶液可以用于抗菌、抗霉等作用。

2.磷酸缓冲盐水的配制:磷酸缓冲盐水经常用于细胞培养中的一种缓冲液。

配制磷酸缓冲盐水需要称取适量的氢磷酸盐和二氢磷酸盐加入适量的去离子水中,搅拌均匀并调节pH值即可。

3.阿霉素的配制:阿霉素是一种常用的抗生素,常用于细胞培养中的抗菌作用。

阿霉素的配制需要将相应的阿霉素粉末加入适量的溶剂中,搅拌均匀形成阿霉素溶液。

4.LB培养基的配制:LB培养基是著名的富含营养成分的培养基,常用于大肠杆菌等细菌的培养。

LB培养基的配制需要称取适量的草莓粉末、酵母粉末、纯化骨粉和氯化钠加入适量的去离子水中,通过高压灭菌形成LB培养基。

以上仅为常用染料性能介绍及部分常用药品试剂和培养基的配制方法,实验室中还有很多其他药品试剂和培养基需要进行配制或选购,要根据实际需要进行选择和使用。

常用染色液的配制

常用染色液的配制

一、常用染色液的配制⒈碘—碘化钾(I2-KI)溶液能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物组织化学测定的重要试剂.配方:碘化钾2g ;蒸馏水300ml ;碘1g先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振荡溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻璃瓶内.用时可将其稀释2—10倍,这样染色不致过深,效果更佳。

⒉苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色,是著名的脂肪染色剂。

配方:(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉;95%酒精10ml ;过滤后再加入10ml甘油(2)先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml.(3)苏丹III 70%乙醇的饱和溶液.⒊1%醋酸洋红(aceto carmine)酸性染料,适用于压碎涂抹制片,能使染色体染成深红色,细胞质成浅红色。

配方:洋红1g ;45%醋酸100ml煮沸2h左右,并随时注意补充加入蒸馏水到原含量,然后冷却过滤,加入4%铁明矾溶液1~2滴(不能多加,否则会发生沉淀),放入棕色瓶中备用.⒋改良苯芬品红染色液(Carbol fuchsine) 核染色剂。

配制步骤:先配成三种原液,再配成染色液。

原液A:3g碱性品红溶于100ml 70%酒精中。

原液B:取原液A10ml加入到90ml 5%石炭酸水溶液中。

原液C:取原液B 55ml,加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林(38%的甲醛).(原液A和原液C可长期保存,原液B限两周内使用)染色液:取C液10~20ml,加45%冰醋酸80~90ml,再加山梨醇1~,配成10%~20%浓度的石炭酸品红液,放置两周后使用,效果显著(若立即用,则着色能力差)。

适用范围:适用于植物组织压片法和涂片法,染色体着色深,保存性好,使用2~3年不变质。

山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨醇也能染色,但效果较差。

⒌中性红(neutral red)溶液用于染细胞中的液泡,可鉴定细胞死活。

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文培养基(Culture medium)是一种用于细菌、真菌、植物细胞、动物细胞和其他微生物的繁殖和生长的营养物质。

常用的培养基可分为发酵培养基、微生物培养基和细胞培养基。

下面列举了一些常用的培养基配方。

1. LB培养基(Luria-Bertani medium)成分:-牛肉提取物:10克-酵母提取物:5克-热可溶性淀粉:10克-氯化钠:10克-水:1升2. NB培养基(Nutrient broth)成分:-牛肉提取物或肉蔻精:8克-酵母提取物:4克-葡萄糖:4克-水:1升3. MacConkey培养基成分:-水解动物蛋白:17克-中和胆盐:1.5克-中性红:0.03克-水:1升4. TSB培养基(Tryptic soy broth)成分:-大豆胨:17克-酵母提取物:3克-水:1升5. BHIA培养基(Brain Heart Infusion Agar)成分:-脑心汤固体:37克-水:1升6.R2A培养基成分:-水解酵母提取物:0.5克-蛋白胨:0.5克-葡萄糖:0.5克-脱脂乳粉:0.5克-黄豆粉:0.5克-高氯酸钠:0.3克-多聚体1466:0.05克-水:1000毫升7.比尔斯氏培养基(BHI培养基)成分:-大豆胨:37克-脑心汤固体:2克-水:1升8. 培养基199(Medium 199)成分:-高锰酸钾:0.015克-硫酸:1.55克-磷酸一氢钠:0.184克-高氯酸钠:8.0克-溴酚蓝:0.4克-d-葡萄糖:5.55克-l-谷氨酸:40.525克-苏打粉:0.84克-水:1升9. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)成分:-苔藓胶原酸:1克-乳糖:1克- 谷氨酸:584mg- 水:1000ml这只是一小部分常见的培养基配方,实际上有很多种不同的培养基,它们根据不同的生物特性和培养需求来设计。

不同的培养基可以提供细菌、真菌、细胞等微生物生长需要的各种营养物质。

实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制doc-

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实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制一、生物标本常用染料性能简介〔一〕天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木〔热带豆科植物〕干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。

苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精〔又叫苏木素〕后才能使用,这叫做“成熟〞。

苏木精的“成熟〞过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。

被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。

所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。

常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。

苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。

分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液〔如盐酸—酒精〕分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液〔如氨水〕分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。

2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。

一种热带产的雌性胭脂虫枯燥后,磨成粉末,提取出虫红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。

单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。

常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。

洋红使细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。

用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。

用洋红配成的溶液染色后能保持几年。

洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。

〔二〕人工染料人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多,应用极广。

它的缺点是经日光照射容易褪色,苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。

在制片中注意掌握酸碱度,并防止日光直射,也能经几年不褪色。

1、酸性品红酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精〔0.3%〕。

他是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。

他跟甲基绿同染,能显示线粒体。

组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。

酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过度,易在自来水中褪色。

实验常用染料

实验常用染料

实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制(一)2007-05-30 16:13生物标本常用染料性能简介(一)天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木(热带豆科植物)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。

苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。

苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。

被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。

所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。

常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。

苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。

分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。

2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。

一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出虫红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。

单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。

常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。

洋红是细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。

用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。

用洋红配成的溶液染色后能保持几年。

洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。

(二)人工染料人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多,应用极广。

它的缺点是经日光照射容易褪色,苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。

在制片中注意掌握酸碱度,并避免日光直射,也能经几年不褪色。

1、酸性品红酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(0.3%)。

他是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。

他跟甲基绿同染,能显示线粒体。

组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。

实验室常用培养基

实验室常用培养基

.常用培养基的制备(1)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和马铃薯蔗糖琼脂(PSA)培养基培养真菌最常用的培养基,成分如下:去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15-20g 水1000 ml配制方法:将马铃薯洗净去皮,称取200 g,切成小块(不必大小)放入锅中,加水1000ml,煮沸半小时,稍冷后用双层纱布过滤,在滤液中加蔗糖20g,加水补足到1000ml。

配成的培养基一般呈酸性,用于培养真菌,可以不必调pH。

如配制固体培养基,在加蔗糖前先加15-20g 琼胶加热熔化,最后加入蔗糖,混匀并加水补是至1000ml,趁热分装在试管或三角瓶中。

标准试管(15×150mm)分装量如下:一般用作斜面培养的每试管装培养基3-5ml,用作平面培养的每试管约10ml,加棉花塞后灭菌。

培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性(pH7.0左右)。

(2)牛肉汁蛋白胨培养基(NA)是培养细菌最常用的培养基,又称营养琼脂或肉汤培养基。

成分如下:酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖(或葡萄糖)l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法:称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用,在其余水中加入琼脂,加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀,然后加水补足到1000 ml,用NaOH或HCL调整至pH7.0,趁热分装,加棉花塞后灭菌。

(3)玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片,洗净后剪成1㎝2左右的小块,放在250ml的三角瓶中,盛放量一般为三角瓶的1/3,然后加少量的水以保持湿润,加棉花塞后灭菌。

天然培养基一般不必调整pH。

(4)查氏(Czapek)培养基查氏培养基是一种组合培养基,其成分如下:NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5gFeSO4 0.01g 蔗糖30g水1000ml(5)灭菌水的配制蒸馏水(或自来水)经过灭菌处理即成灭菌水,是实验室用量最大的必备品之一,常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。

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常用培养基的配制1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠 10g琼脂15~20gp H 7.0~7.2水1000mL121℃灭菌20min。

2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠 0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁 0.01g琼脂20g水1000mLp H 7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLp H 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100mL琼脂15—20gp H 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gp H 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(4)、将滤液稀释到5—6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。

121℃灭菌30min。

7、无氮培养基(自生固氮菌、钾细菌)甘露醇(或葡萄糖)10g磷酸二氢钾0.2g七水合硫酸镁0.2g氯化钠0.2g二水合硫酸钙0.2g碳酸钙5g蒸馏水1000mLp H 7.0—7.2113℃灭菌30min。

8、半固体肉膏蛋白胨培养基肉膏蛋白胨液体培养基100mL琼脂0.35—0.4gp H 7.6121℃灭菌20min。

9、合成培养基偏磷酸铵1g氯化钾0.2g七水合硫酸镁0.2g豆芽汁10mL琼脂20g蒸馏水1000mLp H 7.0加12 mL0.04%的溴钾酚紫(pH5.2—6.8,颜色由黄变紫,作指示剂)。

121℃灭菌20min。

10、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基黄豆芽100g蔗糖(或葡萄糖)50g水1000mLp H 自然培养基的配制:称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加入水1000mL,煮沸约30min,用纱布过滤。

用水补足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化。

121℃灭菌20min 。

11、油脂培养基蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠5g香油或花生油10g1.6%中性红水溶液1mL琼脂15—20g蒸馏水1000mLp H 7.2121℃灭菌20min注:(1)、不能使用变质油。

(2)、油和琼脂及水先加热。

(3)、调好pH值后,再加入中性红。

(4)、分装时,需不断搅拌,使油均匀分布于培养基中。

12、淀粉培养基蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠5g可溶性淀粉2g蒸馏水1000mL琼脂15—20g121℃灭菌20min13、明胶培养基牛肉膏蛋白胨液100mL明胶12—18gp H 7.6在水浴锅中将上述成分溶化,不断搅拌。

溶化后调pH7.2—7.4。

121℃灭菌30min。

14、蛋白胨水培养基蛋白胨10g氯化钠5g蒸馏水1000mLp H 7.6121℃灭菌20min。

15、糖发酵培养基蛋白胨水培养基1000mL1.6%溴钾酚紫乙醇溶液1—2mLp H 7.6另配制20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10mL。

培养基的配制:(1)、将上述含指示剂的蛋白胨水培养基(pH7.6)分装于试管中,在每管内放一倒置的小玻璃管(Durham tube),使之充满培养液。

(2)、将已分装好的蛋白胨水和20%的各种糖溶液分别灭菌,蛋白胨水121℃灭菌20min;糖溶液112℃灭菌30min。

(3)、灭菌后,每管以无菌操作分别加入20%无菌糖溶液0.5 mL(按每10mL培养基中加入20%的糖液0.5mL,则成1%的浓度)。

配制用的试管必须洗干净,避免结果混乱。

16、葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨5g葡糖糖5g磷酸氢二钾2g蒸馏水1000mL将上述各成分溶于1000mL水中,调pH7.0—7.2,过滤。

分装试管,每管10mL,112℃灭菌30min。

17、麦氏(Meclary)琼脂(酵母菌)葡萄糖1g氯化钾 1.8g酵母浸膏 2.5g醋酸钠8.2g琼脂15—20g蒸馏水1000mL113℃灭菌20min。

18、柠檬酸盐培养基磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g氯化钠5g硫酸镁0.2g柠檬酸钠2g琼脂15—20g蒸馏水1000 mL1%溴麝香草酚蓝乙醇液10 mL培养基的配制:将上述各成分加热溶解后,调pH6.8,然后加入指示剂,摇匀,用脱脂棉过滤。

制成后为黄绿色,分装试管,121℃灭菌20min后制成斜面,注意配制时控制好pH,不要过碱,以黄绿色为准。

19、醋酸铅培养基p H7.4的牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL硫代硫酸钠0.25g10%醋酸铅水溶液 1 mL培养基的配制:将牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL加热溶解,待冷却至60℃时加入硫代硫酸钠0.25g,调至pH7.2,分装于三角瓶中,115℃灭菌15min。

取出后待冷却至55—60℃,加入10%醋酸铅水溶液(无菌的)1mL,混匀后倒入灭菌试管或平板中。

20、血琼脂培养基p H7.6的牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL脱纤维羊血(或兔血)10 mL培养基的配制:将牛肉膏蛋白胨琼脂加热熔化,待冷却至50℃时,加入无菌脱纤维羊血(或兔血)摇匀后倒平板或制成斜面。

37℃过夜检查无菌生长即可使用。

21、玉米粉蔗糖培养基玉米粉60g磷酸二氢钾3g维生素B1100mg蔗糖10g七水合硫酸镁 1.5g水1000 mL121℃灭菌30min,维生素B1单独灭菌15min后另加。

22、酵母膏麦芽汁琼脂麦芽粉3g酵母浸膏0.1g水1000 mL121℃灭菌30min。

24、棉籽壳培养基培养基的配制:棉籽壳50%,石灰粉1%,过磷酸钙1%,水65%—70%,按比例称好料,充分搅拌均匀后装瓶,较薄地平摊盘上。

25、复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾 3.5g琼脂20—30g蒸馏水1000 mL5%碱性复红乙醇溶液20 mL培养基的配制:先将琼脂加入900 mL蒸馏水中,加热溶解,再加入磷酸氢二钾及蛋白胨,使溶解,补足蒸馏水至1000 mL,调pH至7.2—7.4。

加入乳糖,混匀溶解后,115℃灭菌20min。

称取亚硫酸钠置一无菌空试管中,加入无菌水少许使溶解,再在水浴中煮沸10min后。

立刻滴加于20 mL 5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色褪成淡粉红色为止。

将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中,充分混匀,倒平板,放冰箱中备用,贮存时间不宜超过2周。

26、伊红美蓝培养基(EMB培养基)蛋白胨水培养基100 mL20%乳糖溶液 2 mL2%伊红水溶液 2 mL0.5%美蓝水溶液 1 mL培养基的配制:将已灭菌的蛋白胨水培养基(pH7.6)加热熔化,冷却至60℃左右时,再把已灭菌的乳糖溶液,伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。

摇匀后,立即倒平板。

乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度,115℃灭菌20min。

27、乳糖蛋白胨培养液(“水的细菌学检查”用)蛋白胨10g牛肉膏3g乳糖5g氯化钠5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1 mL蒸馏水1000 mL培养基的配制:将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于1000 mL蒸馏水中,调pH至7.2—7.4。

加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1 mL,充分混匀,分装于有小倒管的试管中。

115℃灭菌20min。

28、石蕊牛奶培养基牛奶粉100g石蕊0.075g水1000 mLp H 6.8121℃灭菌15min。

29、LB(Luria-Bertani)培养基蛋白胨10g酵母膏5g氯化钠10g蒸馏水1000 mLp H 7.0121℃灭菌20min。

30、基本培养基磷酸氢二钾10.5g磷酸二氢钾 4.5硫酸铵1g二水合柠檬酸钠0.5g蒸馏水1000 mL121℃灭菌20min。

需要时灭菌后加入:糖(20%)10 mL维生素B1(硫胺素)(1%)0.5 mL七水合硫酸镁(20%) 1 mL链霉素(50mg/ mL)4 mL,终浓度200μg/ mL氨基酸(10mg/ mL)4 mL,终浓度40μg/ mLpH 自然(—7.0)31、庖肉培养基培养基的配制:(1)、取已去肌膜、脂肪之牛肉500g,切成小方块,置1000 mL蒸馏水中,以弱火煮1小时,用纱布过滤,挤干肉汁,将肉汁保留备用。

将肉渣用绞肉机绞碎,或用刀切成细粒。

(2)、将保留的肉汁加蒸馏水,使总体积为2000 mL,加入蛋白胨20g,葡萄糖2g,氯化钠5g,及绞碎的肉渣,置烧瓶摇匀,加热使蛋白胨溶化。

(3)、取上层溶液测量pH,并调整其达到8.0,在烧瓶壁上用记号笔标示瓶内液体高度,121℃灭菌15min后补足蒸发的水分,重新调整pH值8.0,再煮沸10—20min,补足水量后调整pH7.4。

(4)、将烧瓶内容物摇匀,将溶液和肉渣分装于试管中,肉渣约占培养基的1/4左右。

经121℃灭菌15min后备用,如当日不用,应以无菌操作加入已灭菌的石蜡凡士林,以隔绝氧气。

32、乳糖牛肉膏蛋白胨培养基乳糖5g牛肉膏5g酵母膏5g蛋白胨10g葡萄糖10g氯化钠5g琼脂粉15gp H 6.8水1000mL33、马铃薯牛乳培养基培养基的配制:200g马铃薯(去皮)煮出汁,脱脂鲜乳100mL,酵母膏5g,琼脂粉15g,加水1000mLpH7.0。

制平板培养基时,牛乳与其他成分分开灭菌,倒平板前再混合。

34、尿素琼脂培养基尿素20g琼脂15g氯化钠5g磷酸二氢钾2g蛋白胨1g酚红0.012g蒸馏水1000mLp H 6.8±0.2培养基的配制:在蒸馏水或去离子水100mL中,加入上述所有成分(除琼脂外)。

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