转基因小鼠与基因敲除小鼠的差异
基因编辑小鼠如何分类?

基因编辑小鼠如何分类?
基因编辑小鼠可分为三大类、7 小类:
(1)转基因(Tg)首先构建表达载体,包含启动子、增强子、编码区、polyA 等元件,然后将表达载体注入到受精卵的细胞核内,外源表达载体将插入到受精卵的基因组内,再将该受精卵移植到受体母鼠输卵管内,发育成为小鼠个体,该小鼠就会表达转入的外源基因。
(2)基因全身性敲除(KO)利用Crispr/Cas9 系统,在受精卵的目标基因的编码区两侧分别切断,然后受精卵在连接断口的过程中,会丢失掉断口之间的序列(即编码区)。
该受精卵移植到受体母鼠输卵管内,发育成为小鼠个体,该小鼠将无法表达目标基因,导致目标基因将完全失去活性,表现为全身性基因敲除。
(3)基因敲入(KI)首先构建打靶载体:包含同源臂和外源基因,然后将表达载体通过显微注射的方法注入到受精卵的细胞核内,同时利用 Crispr/Cas9 系统,在受精卵目的基因位置切断基因组 DNA,受精卵会通过同源重组将外源基因定点整合到基因组内。
该受精卵移植到受体母鼠输卵管内,发育成为小鼠个体,该小鼠就携带了转入的外源基因。
小鼠转基因干眼模型

小1.自鼠发小转鼠模基型 :因干眼模型 1.5.IQI/Jic 小鼠 • 尽管直到8周龄左右雌性IQI/Jic小鼠颌下腺与雄性IQI/Jic小鼠泪腺中才检测到明显的 淋巴细胞浸润,但大约在小鼠四周龄左右便可在颌下腺与泪腺中检测到MHCII型分子, CD11c+与CD86+树突状细胞的存在,表明树突状细胞与表皮细胞可能是参与激活 CD4+T细胞的关键因素。 • 胸腺切除的IQI/Jic小鼠在出生后3天便可出现严重的泪腺损伤,其损伤严重度与未进 行胸腺切除术16周龄的IQI/Jic小鼠相仿,这一结果表明年轻的IQI/Jic小鼠体内的免疫 调节性T细胞可能对IQI/Jic小鼠自身免疫紊乱起到一定的调节作用。 • 最近研究表明伴随着IQI/Jic小鼠颌下腺腺体淋巴细胞的浸润与功能的紊乱,腺泡细胞 中存在着AQP5的分布异常。
基因敲除与转基因互补

基因敲除与转基因互补英文回答:Gene knockout and genetic complementation are two important techniques used in molecular biology and genetics research.Gene knockout refers to the process of intentionally disabling or "knocking out" a specific gene in an organism. This is typically done by introducing a mutation into the gene, rendering it non-functional. Gene knockout is used to study the function of a particular gene by observing the effects of its absence. For example, if a gene is suspected to be involved in a specific disease, researchers can create a knockout mouse model by disabling that gene and then observe the resulting phenotype to understand the gene's role in the disease.On the other hand, genetic complementation is a technique used to determine whether a specific phenotype iscaused by a mutation in a particular gene. It involves introducing a functional copy of the gene into an organism that carries a mutation in the same gene. If the introduced gene is able to restore the normal phenotype, it indicates that the mutation in the original organism was responsible for the observed phenotype. This technique is often used to confirm the causative role of a gene mutation in a particular disease or trait.Both gene knockout and genetic complementation have their own advantages and limitations. Gene knockout allows researchers to study the function of a specific gene by observing the effects of its absence. It helps in understanding the role of genes in development, disease, and other biological processes. On the other hand, genetic complementation helps in confirming the causative role of a gene mutation by restoring the normal phenotype. It provides evidence for the involvement of a specific gene in a particular phenotype or disease.中文回答:基因敲除和转基因互补是分子生物学和遗传学研究中两种重要的技术。
小鼠品种品系 等级 规格

小鼠品种品系等级规格【原创版】目录1.小鼠品种分类2.小鼠品系介绍3.小鼠等级划分4.小鼠规格标准正文【小鼠品种分类】小鼠是生物医学研究中最常用的实验动物之一,其品种繁多,主要可分为以下几类:1.实验小鼠:这类小鼠主要用于实验研究,具有稳定的遗传背景和生理特征,如 C57BL/6、BALB/c 等。
2.野生小鼠:这类小鼠来自自然界,具有较强的适应能力和繁殖力,如田鼠、黄鼠狼等。
3.宠物小鼠:这类小鼠主要用于家庭饲养,具有可爱的外观和温顺的性格,如金丝熊、仓鼠等。
4.转基因小鼠:这类小鼠通过基因工程技术,具有特定的基因改造,如基因敲除小鼠、基因敲入小鼠等。
【小鼠品系介绍】品系是指具有相同遗传背景的小鼠群体,通过长期的选育和纯化,品系内的小鼠具有相似的表型和基因型。
以下是一些常见的小鼠品系:1.C57BL/6:该品系小鼠为实验小鼠,广泛应用于遗传学、免疫学等领域的研究。
2.BALB/c:该品系小鼠具有较高的繁殖力和生长速度,适用于肿瘤学、生理学等方面的研究。
3.DBA/2:该品系小鼠为野生型小鼠,常用于实验小鼠的遗传背景对照。
4.NOD/ShiLtJ:该品系小鼠为自身免疫性疾病模型小鼠,用于研究类风湿性关节炎等疾病。
【小鼠等级划分】根据小鼠的繁殖代数和遗传纯度,可以将小鼠分为以下等级:1.F0 代:初次繁殖的小鼠,遗传纯度最高。
2.F1 代:F0 代小鼠间的杂交后代,遗传纯度较高。
3.F2 代:F1 代小鼠间的杂交后代,遗传纯度逐渐降低。
4.F3 代及以上:F2 代及以上的小鼠,遗传纯度较低,适用于一般实验研究。
【小鼠规格标准】在实验小鼠的饲养和采购过程中,需要根据实验要求选择合适的规格。
小鼠的规格主要从以下几方面来衡量:1.体重:通常分为幼鼠(10-20g)、亚成年鼠(20-40g)和成年鼠(40-60g)。
2.年龄:小鼠的年龄分为幼年、亚成年和成年,通常以出生天数或周数来表示。
3.健康状况:小鼠应具有良好的健康状况,如无明显皮肤病变、眼耳口鼻无异常等。
【干货】基因敲除小鼠鉴定方法

【干货】基因敲除小鼠鉴定方法
1、基因敲除阳性鼠的鉴定
在敲除的片段两端设计引物,扩增后电泳。
理论上敲除成功的小鼠扩增出的片段大小=野生型小鼠的片段大小-敲除的片段大小,所以可通过电泳图的条带大小来进行鉴别,但实际上,若敲除的片段过大,有的酶是扩增不出来野生型片段的,比如有的酶,1.5K以下基本可以P出条带,大于1.5K的大部分是P不出的,所以当野生型的条带无法扩增时,这对引物就不能鉴定纯杂合了。
1.1、野生型片段扩增不出来时
敲除的片段较大时,野生型相应的片段往往扩增不出来。
电泳结果若是无条带,则为野生型;若是只有一条条带,则为敲除小鼠(纯合或杂合)。
PS:条带大小=野生型片段大小-敲除片段大小
1.2、野生型片段可以扩增出来时
假设
条带1大小=野生型条带大小
条带2大小=野生型片段大小-敲除片段大小
当野生型的片段可以扩增出来时,电泳结果若是只有条带1,则为野生型;若是既有条带1又有条带2,则为杂合敲除小鼠;若是只有条带2,则为纯合敲除小鼠。
所以这种情况就不需要再设计引物鉴定纯杂合了。
选择性敲除小鼠神经细胞adam10基因导致胼胝体和海马联合发育不全

选择性敲除小鼠神经细胞adam10基因导致胼胝体和海马联合发育不全王义辉;李秀娟;黄珊珊;汪明欢【摘要】目的探讨adam 10基因在小鼠神经系统发育的作用.方法将gfapcrce 转基因鼠和adam 10loxlox转基因鼠杂交,得到神经细胞特异性adam10基因敲除鼠(gfapcre-adam10loxlox);在出生后第14d对小鼠大脑切片行HE染色和免疫组织化学染色,观察adam10基因敲除后神经系统发育情况.结果选择性敲除小鼠神经细胞adam10基因(gfapcreadam10loxlox)后,小鼠可存活至出生后3 w左右;HE染色发现胼胝体缺失,海马发育不全,髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫荧光染色发现髓鞘发育异常.结论 Adam10基因在小鼠神经系统发育中具有重要作用,选择性敲除小鼠神经细胞adam10基因导致胼胝体和海马联合发育不全,髓鞘发育异常.【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】2015(024)003【总页数】5页(P219-223)【关键词】adam10;条件性基因敲除;中枢神经系统;胼胝体和海马联合发育不全【作者】王义辉;李秀娟;黄珊珊;汪明欢【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科,武汉430030;武汉市中西医结合医院老年病科,武汉430022;华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科,武汉430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科,武汉430030【正文语种】中文【中图分类】R322.81Adams(a disintigrin and metalloprotease)因其结构上具有解聚素(disintigrin)和金属蛋白酶(metalloprotease)二个重要的结构域而命名[1,2]。
Adam10是adams家族的一个亚型,在神经系统中特别是神经元有表达[3,4],其作用底物广泛,其中包括Notch、Cadherin、Ephrin等[5-7],这些底物分子在中枢神经系统发育中具有重要作用。
几种基因敲除鼠简介

目录
• 基因敲除鼠概述 • 条件性基因敲除鼠 • 全敲除鼠 • 诱导性基因敲除鼠
01 基因敲除鼠概述
基因敲除鼠的定义
• 基因敲除鼠:通过基因工程技术,将特定基因从 老鼠体内敲除,从而产生具有特定表型特征的转 基因动物。
基因敲除鼠的用途
疾病模型
药物筛选
基因敲除鼠可以模拟人类遗传性疾病 的发生和发展过程,用于研究疾病的 发病机制和治疗方法。
全敲除鼠通常是通过将经过基因 编辑的胚胎干细胞注入早期胚胎 中,然后移植到代孕母鼠体内发
育而成。
全敲除鼠的应用
01
02
03
疾病研究
全敲除鼠可以模拟人类遗 传性疾病,用于研究疾病 的发病机制、病理生理变 化和药物筛选等。
药物研发
全敲除鼠可以用于评估新 药对特定基因缺陷的治疗 效果,加速药物的研发进 程。
部分基因敲除鼠
03
将特定基因部分敲除或敲低,产生具有部分缺失或降低该基因
表达的转基因动物。
02 条件性基因敲除鼠
条件性基因敲除鼠的原理
条件性基因敲除鼠是通过基因打靶技术,将特 定基因的启动子替换为可诱导的启动子,使得 基因的表达只在特定条件下被激活或沉默。
可诱导的启动子通常来源于激素响应元件或化 学诱导系统,如四环素响应系统、干扰素响应 系统等。
药物研发
利用条件性基因敲除鼠可以筛选出 对特定疾病有疗效的药物,缩短药 物研发周期并提高成功率。
条件性基因敲除鼠的优缺点
优点
条件性基因敲除鼠具有高度特异性,可以避免全身敲除基因带来的副作用;同 时,可以在特定时间和空间范围内研究基因的功能,提高实验的可控性和精确 度。
缺点
条件性基因敲除鼠的构建过程复杂,需要较高的技术要求和时间成本;同时, 诱导系统的效果可能受到多种因素的影响,如激素水平、给药方式等。
基因工程小鼠名称解读

基因工程小鼠名称解读基因工程小鼠是指通过人为干预小鼠基因组的技术手段,使其表达特定基因或缺失特定基因,从而实现对基因功能的研究和相关疾病模型的建立。
这些小鼠通常被用于研究基因功能、疾病机制、药物筛选等方面。
在基因工程小鼠的命名中,常用的方式是根据其基因改造方式或目的来命名。
以下是一些常见的基因工程小鼠名称及其解读:1. 转基因小鼠(Transgenic mice),这类小鼠是通过将外源基因导入小鼠的基因组中而得到的。
这些外源基因可以来自其他物种,如人类或其他动物。
转基因小鼠常用于研究特定基因的功能、表达模式等。
2. 敲除小鼠(Knockout mice),这类小鼠是通过人为干预使特定基因在小鼠体内失去功能的方式得到的。
一般采用基因敲除或基因靶向突变技术,使小鼠体内特定基因的表达受到抑制或完全消除。
敲除小鼠常用于研究基因的功能缺失对生理和病理过程的影响。
3. 过表达小鼠(Overexpression mice),这类小鼠是通过人为干预使特定基因在小鼠体内过度表达的方式得到的。
通过引入外源基因或增强内源基因的表达水平,使小鼠体内特定基因的表达量显著增加。
过表达小鼠常用于研究基因的过度表达对生理和病理过程的影响。
4. 突变小鼠(Mutant mice),这类小鼠是指在小鼠基因组中引入或产生突变的小鼠,突变可以是点突变、插入突变、删除突变等。
突变小鼠常用于研究特定基因突变对生理和病理过程的影响。
除了上述常见的命名方式,基因工程小鼠还可以根据具体的研究目的、基因改造技术等来命名,例如组织特异性表达小鼠、条件性基因敲除小鼠等。
需要注意的是,基因工程小鼠的命名通常是根据研究者或研究机构的需求和约定来进行的,不同研究领域和实验室可能会有不同的命名方式和规范。
总体而言,基因工程小鼠的命名旨在描述其基因改造方式、基因功能或研究目的,以便研究者能够清楚地了解其特点和应用范围。
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转基因小鼠与基因敲出小鼠的差异
请问:转基因小鼠与基因敲出小鼠之间有什么差异呀??
最佳答案
转基因小鼠就是基因组中含有外源基因的小鼠。
它是按照预先的设计,通过细胞融合、细胞重组、遗传物质转移、染色体工程和基因工程技术将外源基因导入精子、卵细胞或受精卵,再以生殖工程技术而发育。
用以改变普通小鼠的性状.
基因敲除是基因打靶技术的一种,类似于基因的同源重组。
指外源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组,从而代替受体细胞基因组中的相同/相似的基因序列,整合入受体细胞的基因组中。
此法可产生精确的基因突变,也可正确纠正机体的基因突变。
基因嵌入又称基因置换,它是利用内源基因序列两侧或外面的断裂点,用同源
序列的目的基因整个置换内源基因。
用以研究某一基因的作用.。