生理实验五 蛙坐骨神经腓肠肌标本的制作及刺激与反应的关系.

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实验步骤：
• ㈠ 坐骨神经-腓肠肌标本的制备 • 1、破坏脑和脊髓 • 2、去除躯干上部、皮肤及内脏 • 左手捏住蟾蜍的脊柱，右手持粗剪刀在前肢腋窝处连同皮 肤、腹肌、脊柱一并剪断，然后左手握住蟾蜍后肢，仅靠 脊柱两侧将腹壁及内脏剪去（注意避开坐骨神经）。并剪 去肛门周围的皮肤，留下脊柱和后肢。
神经纤维兴奋，它们所支配的全部肌纤维也都发生兴奋和收缩，从而引起肌肉的最大收缩。 此后，若再增加刺激强度，肌肉收缩幅度将不再增加。我们把引起肌肉产生最大收缩时的最 小刺激强度叫最适刺激强度。
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刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响（把刺激强度固定在最适刺激强度，把单刺激改为连续单刺 激）：
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刺激频率就是单位时间内连续刺激的次数。随着刺激频率的增高，肌肉的反应依次表现为单收 缩、不完全强直收缩和完全强直收缩：
• 5、辨认蛙后肢主要肌肉，找出腓肠肌。
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6、游离坐骨神经和腓肠肌
取一游离坐骨神经腹腔段，
分离坐骨神经直至腘窝（不要伤及 神经）；再用玻璃分针分离腓肠肌， 并在肌腱上穿线结扎。
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7、剪去其他不用的组织 在坐骨神经两端各留一块骨头和肌肉，以便于固定。 注意：剥离时一定要保持标本完整性；尽可能用玻璃分针，少用镊子，避免 刺激神经。 8、标本检验 完整的标本应包括四部分：
实验五 蛙坐骨神经—腓肠肌标 本的制备及刺激与反应的关系
实验目的：
• 掌握蛙类坐骨神经腓肠肌标本的制备方法。
• 应用电刺激方法测出肌肉阈刺激、阈上刺
激与最适刺激的强度值
• 了解刺激与肌肉收缩的关系
实验原理
• 两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与恒温
动物相似，其离体组织器官所需的生活条件比较简 单，并且易于控制和掌握，因此在生理试验中常用 蟾蜍或蛙类的离体组织器官作为试验标本。蛙类坐 骨神经－腓肠肌标本是研究神经冲动和肌肉收缩机
能等生理试验最常用的试验材料，制备此标本是生
理试验的一项基本但又非常重要的操作技术。
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兴奋性：可兴奋组织对外界刺激发生反应的能力（或细胞受刺激时产生动作电位的能 力）。
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兴奋：也就是动作电位，指可兴奋细胞受阈刺激或阈上刺激时，细胞在静息电位的基 础上发生一次迅速的、短暂的并可扩布的电位变化。
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阈强度：在刺激持续时间和刺激强度-时间变化率固定时，引起可兴奋细胞产生动作电 位的最小刺激强度，也叫阈值或阈刺激。
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刺激包括三方面的内容：刺激强度、刺激时间、刺激强度-时间变化率。其中，刺激强度就是
电刺激的脉冲电压，刺激时间就是某个单刺激所持续的时间。
• 1. 2.
刺激强度对骨骼肌收缩形式的影响（固定刺激的时间和刺激强度-时间变化率）： 单根神经纤维或肌纤维对刺激的反应是“全或无”式的。 但在神经纤维肌肉标本中，则表现为当刺激强度很小时（阈下刺激），不能引起神经纤维动 作电位的产生和肌肉的收缩；
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⑶当刺激频率继续增大时，新的刺激引起肌肉收缩落在前一次刺激引起肌肉收缩的收缩期，这
样，肌肉在连续收缩不全的基础上出现新的收缩，形成一个类似方波的完全强直收缩张力曲线。
实验用品
• 实验动物：蟾蜍
• 试剂与器材：计算机、BL-420F生物信号处理系
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统、手术剪、手术镊、玻璃分针、 蛙板、锌铜弓、张力换能器、 连接导线、刺激输出、烧杯、任氏液、 棉球、棉线等。
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⑴如果刺激频率很小时，每相邻两个刺激的间隔时间很大，当其大于肌肉收缩的收缩期和舒张
期之和时，肌肉表现为一个个的单收缩。单收缩包括收缩期及舒张期。前者占时较后者为短。
• ⑵当逐渐增加刺激频率，使新的刺激引起的肌肉收缩落在前一个刺激引起肌肉收缩的舒张期， 这样，肌肉在连续未完全舒张的基础上就开始新的收缩，形成锯齿样的不完全强直收缩张力曲 线。
一段脊柱骨、坐骨神经、腓肠
肌、一段股骨头。 用镊子轻 轻提起结扎神经线，经任氏液 沾湿的锌铜弓短暂轻触坐骨神 经，如腓肠肌发生迅速的收缩 反应，则表明机能完好。将标 本置于任氏液中，稳定其兴奋 性15－20 min，即可进行实验。
• 9、将坐骨神经-腓肠肌标本固定于蛙板上， 把跟腱端的接线与张力换能器相连，调节 高度与张弛度。
① 单收缩曲线
② 复合收缩 ③ 强直收缩
• 3、剥离皮肤 • 一只手捏住脊柱的断端（注意不要捏住脊柱两侧的神经），另一只手 捏住皮肤的边缘，向下剥掉全部后肢的皮肤，将标本放在盛有任氏液 的玻璃器皿中。将手及使用过的全部器械冲洗干净。
• • 4、分离双下肢 将标本提起，剪去向上突起的 骶骨，然后沿正中线将脊柱剪 为两半，并从耻骨联合处剪开 两侧下肢，浸入盛有任氏液的 培养皿中使用。
3.
当刺激强度在一定范围内变动时，肌肉收缩的幅度与之成正比。因为坐骨神经干中含有数千 万条粗细不等的神经纤维，其兴奋性各不相同。弱刺激只能使其中少量兴奋性高的神经纤维 先兴奋，并引起它所支配的少量肌纤维收缩。
4.
随着刺激强度逐渐增大，发生兴奋的神经纤维数目逐渐增多，其所引起收缩的肌纤维数目亦
增多，结果肌肉收缩幅度随刺激强度的增加而增强。当刺激达到某一强度时，神经干中全部
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阈刺激或阈上刺激产生动作电位，其特点：①“全或无”现象；②进行长距离无衰减 传递（神经纤维、骨骼肌细胞等）。
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阈下刺激引起局部电兴奋，其特点：①幅度在阈下刺激的范围内，随刺激强度的增大
而升高；②在细胞膜上可进行电紧张性扩布，即衰减性传播；③可以相互融合（时间 总和、空间总和）。
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最适刺激强度：引起肌肉产生最大收缩时的最小刺激强度。
实验项目
1. 刺激强度与反应关系 ① 刺激腓肠肌：调节刺激参数，选择单刺激，改变刺激强度（从弱到强），观 察刺激强度变化对肌肉收缩的影响；找出阈强度、最适刺激强度； ② 刺激神经：调节刺激参数，选择单刺激，改变刺激强度（从弱到强），观察 刺激强度变化对肌肉收缩的影响；找出阈强度、最适刺激强度； ③ 比较腓肠肌与神经的兴奋性 2. 刺激频率与反应的关系： • 调节刺激参数，固定最适刺激强度，改变刺激频率（从低到高），用连续单 刺激刺激腓肠肌，观察刺激频率变化对肌肉收缩的影响。