自来水中细菌总量的测定
实验5 水中细菌总数的检测
实验五水中细菌总数的检测一、实验目的1.采用标准平皿法对水样中细菌作计数。
2.掌握微生物实验中无菌操作技术方法。
二、实验原理水中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关，它是评价水质污染程度的一个重要指标之一。
由于重金属及某些其他有毒物质对细菌有杀灭或抑制作用，因此总细菌数少的水样，并不能排除已被这些物质所污染。
试验采用标准平皿法对水样中细菌作计数，这是一种测定水中好氧的和兼性厌氧的异养细菌密度的方法，由于细菌在水体中能以单独个体、成对、链状，成簇或成团的形式存在，此外没有单独的一种培养基或某一环境条件能满足一个水样中所有细菌的生理要求，所以由此法所得的菌落数实际上要低于被测水样中真正存在的活细菌的数目。
细菌总数是指l ml水样在营养琼脂培养基中，37ºC、24h 培养后所生长的菌落数。
一般规定，1ml自来水中总菌数不得超过100个。
三、材料和器皿1.培养基：营养琼脂培养基牛肉膏：3-5 g ；NaCl ：5 g ；蛋白胨：10 g ；琼脂：15-20 g；H2O ：1000 ml ；pH ：7.0-7.2.2.无菌采样瓶、灭菌移液管、灭菌培养皿，盛有90ml及9ml灭菌蒸馏水的锥形瓶和试管。
四、方法和步骤1.采集水样。
2.吸取10ml水样(河水、污水、游泳池水或港湾水等)，注入罐有90ml无菌水的三角瓶中，混匀成10-1稀释液，在吸水样前，水样应彻底搅动均匀。
3.按10倍稀释法将水样稀释成10-2、10-3、l0-4。
4.营养琼脂培养基(用于河水样)倒平皿(厚度约2-3毫米，12毫升）水平放置至固化。
5.根据水样的洁净程度，污染严重者选取10-2、10-3、l0-4稀释度；中等的选取10-1、10-2、10-3稀释度，每个稀释液分别注入两个培养皿，每皿0.2 ml，用玻璃刮刀涂匀。
稀释度的选择是本试验精确度的关键，选择适宜者，平皿上菌落总数介于30～300个之间。
6.将培养皿倒置于37ºC 培养24h，可观察出明显菌落。
实验三_水中细菌总数的测定
（2）待检水样的采集方法
可应用采样器，器内的采样瓶应先灭菌。采水样
时，直接将水灌入已灭菌的采样瓶，不需再用样
水洗采样瓶。采样后，采样瓶内的水面与瓶塞底
部间应留有一些空隙，以便在检验时可充分摇动
混匀水样。
2. 水中细菌总数的测定
（1）水样的稀释（梯度稀释法） 根据水被污染程度的不同，可用无菌吸管作10倍 系列稀释。具体步骤如下：取水样10ml，盛于 有90ml无菌水的三角瓶内，充分振摇15分钟， 此即为10-1浓度的稀释液。静置15秒后，用无菌 吸管取10-1稀释液2 ml加至18ml无菌水试管中， 充分摇匀，此即为10-2浓度稀释液。另取无菌吸 管，依次作10倍知释，制成10-3、10-4……等一 系列稀释液，通常稀释至10-6浓度。
实验三、水中细菌总数的测定
（平板混匀法）
我国饮用水标准
细菌总数主要作为判断被检水样污染程度的标志。在水
质卫生学检验中，细菌总数是指1ml水样在牛肉膏蛋白
胨琼脂培养基中，于37℃经24小时培养后，所生长的细
菌菌落的总数。我国生活饮用水卫生标准（GB5749-
2006）中规定生活饮用水的细菌总数l ml中不得超过
微量移液器的使用方法
吸液时到第一格； 吸液时轻放； 排液时到第二格； 排液时快推。
（3）培养
待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于
37℃恒温箱内培养24小时，进行菌落计数，即
为l ml水中的细菌总数。
（4）菌落计数
先计算同一稀释度的平均菌落数，若其中一个平 皿有较大片状菌落生长时，则不予采用，而应以 无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落 数。若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中 菌落数分布又很均匀，则可将此半皿计数后乘2 以代表全皿菌落数，然后再计算该稀释度的平均 菌落数。
自来水中细菌总数的测定
自来水中细菌总数的测定自来水是我们生活中必需的一种水源，但由于其经过管道输送，可能会受到外界环境的影响，其中细菌是其中一种污染物。
因此，对自来水中的细菌总数进行测定，有助于判断自来水是否符合生活饮用水标准。
一、实验原理本实验采用了膜过滤法对自来水中的细菌总数进行测定。
其原理是通过将水样通过微孔膜滤器，将水中的微生物捕捉在滤膜的表面，再将滤膜培养在含有营养物质的琼脂培养基中，使细菌能够生长形成菌落，然后再通过计数器进行计数。
二、实验步骤1. 实验前处理：先将实验室的玻璃仪器清洗干净，用工业酒精将滤器放入灭菌杯中斜着着火杀菌，备用。
2. 取一个样品瓶，将自来水（1L）倒入瓶中。
将样品瓶放入一个不透明的塑料袋中，用胶带密封塑料袋，防止紫外线照射导致细菌死亡。
3. 首先将滤装置组装好，将滤膜放入滤装置的中间柄内，放入开口的滤膜夹中。
然后用无菌注射器将琼脂培养基吸入滤装置的压力室中，将压力室旋好。
4. 用烧杯等容器将自来水倒入滤装置中，通过压力室将水样通过滤膜，滤膜表面残留的微生物被滤装置中的滤膜抓住，滤液通过过滤口流出。
滤液需丢弃。
5. 将滤膜夹子取下，将滤膜放入用滤膜侧朝上的营养琼脂培养基培养皿中，培养皿需用无菌手套拆开。
将其覆盖好，标明标识，并用胶带作为封口。
6. 将培养皿竖起放入培养箱中，温度设定为37℃左右，需要放置24h以上，17~25℃下也可进行培养，培养天数也需要视不同微生物而定。
7. 取出培养皿，用目镜进行菌落计数。
计数时需要注意，培养皿中的菌落数量需要控制在20~200个之间。
计数完后将数据进行转换，得出升级菌落数，即水样中的细菌总数。
三、实验注意事项1. 玻璃仪器需要在实验前清洗干净，并且需要消毒处理，防止样品污染。
2. 在进行实验前，实验人员需要洗手，并穿戴洁净的实验服和手套，防止手部细菌对实验结果的影响。
3. 滤装置和培养皿需要在无菌条件下进行处理，避免细菌的交叉感染。
4. 培养皿中需要加盖，防止紫外线照射导致细菌死亡，同时也可以避免污染。
自来水中菌落总数的测定
自来水中菌落总数的测定课题：自来水中菌落总数的测定使用教材：《食品微生物检验》教材分析：本节课是《食品微生物检验》中的重点内容，是GB4789·2中规定的测定食品中菌落总数的常规方法，也是质检专业学生必须掌握的重要技能之一。
其程序包括取样—稀释—接种—培养，其中前三项都要求无菌操作。
对于即将就业的学生，教学重点应放在测定方法及程序的掌握上，这样能使他们在将来的质检工作中对常见指标的检测做到得心应手。
因此，本次实验课老师要先演示清楚，大部分时间放在指导学生自己操作上。
无菌操作是微生物检验实验的基本原则，同时也是一大难点，因为它要求操作者要手指灵活、双手配合得当、动作迅速、心细。
对于只做过理化实验并且仪器操作尚且不规范的学生来说，在本实验中要让他们认识到无菌操作的重要性并掌握无菌操作的基本动作。
为此，我打算采用让学生无菌操作，然后老师非无菌操作的方法，以实验结果的对比让学生建立无菌操作意识。
一、教学目标：1、了解菌落总数测定原理2、掌握菌落总数的测定方法，建立无菌操作意识二、教学重点：菌数总数测定方法三、教学难点：无菌操作四、教学方法：老师演示，学生分组实验，评比记分五、课时安排：2课时六、教学过程：（一）引言（2分钟）现在天热了，有些学生喜欢喝自来水解渴，自来水看起来清亮亮的，里面有细菌吗？有多少？能不能直接喝？今天我们就来学习水中菌落总数的测定方法，用这种方法测测我们学校自来水中的细菌含量，这项技能是质检工作者必须掌握的，大学一定要认真学习，争取当节掌握。
（二）介绍实验目的、原理（5分钟）（板书）（三）介绍实验器材（实物）（3分钟）无菌三角瓶、无菌移液管、无菌平皿、（装有9ml无菌水的）无菌试管、试管架、酒精灯、火柴、洗耳球、无菌牛肉膏蛋白胨培养基（放置50℃左右水浴锅中备用）、恒温培养箱（37℃）（四）演示实验步骤并讲解（20分钟）1、取样：先将自来水龙头用火焰灼烧3分钟灭菌，再开放水龙头，让水流5分钟后，以无菌三角瓶接取25ml左右。
自来水中细菌的测定
自来水中细菌总数的测定【摘要】本实验应用平板菌落技术测定水中细菌总数。
以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中细菌种数仅是一种近似值。
实验用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在保证无菌的环境下，采取自来水的样品，利用培养基制作平板，计数。
国家饮用水标准规定，饮用水中大肠菌群数每升中不超过3个，细菌总数每毫升不超过100个。
所谓细菌总数，指1毫升或1克检样中所含的细菌菌落的总数。
按菌落计数方法进行计数，得到如下结果：在显微镜下可观察到众多的菌落且种类繁多，取其平均值得到，菌落数为65/mL，自来水中细菌总数为65/mL，符合国家饮用水标准。
【关键词】自来水细菌总数平板菌落计数技术牛肉膏蛋白胨琼脂培养基自来水的微生物学检验，特别是肠道细菌的检验，在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义，同时也是评价水质状况的重要指标。
应用平板计数技术测定水中细菌总数是用微生物测水质的常用方法。
由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。
目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。
通过此方法我们能够计算出水中的细菌总数，从而判断自来水是否符合国家标准，是否受到污染。
1材料与方法1.1 水样的采取先在自来水龙头周围放置酒精灯进行灭菌，再放开水龙头使水流5min后，以灭菌三角烧瓶接取水样，以待分析。
1.2 固体培养基的制作牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：牛肉膏 1.5g 蛋白胨 5.0g NaCl 2.5g水500mL pH 7.4～7.6将培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中，牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后到入烧杯。
也可放在称量杯中，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。
水中细菌总数的测定
水中细菌总数的检测1. 实验目的1、学习并掌握水的细菌学检测方法2、了解水质状况与细菌数量在饮用水检测中的重要性。
2. 菌落总数standard plate-count bacteria水样在营养琼脂上、有氧条件下37°C培养48 h后，所得1 mL水样所含菌落的总数细菌总数是评价水质污染程度的主要卫生指标，所测定的细菌总数增多说明水被生活废弃物污染。
由于结果不能说明污染的来源，因此必须结合总大肠菌群数来判断污染源和安全程度。
3. 培养基与试剂2.1营养琼脂成分2.2制法：根据实际需要量，按照上述配方称取各成分混合后,加热溶解，调整pH为7.4~7.6, 分装于玻璃容器中（如用含有较多杂质的琼脂，应先过滤。
），经103.43 kPa（ 121°C,15 lb）湿热灭菌20 min，储存于冷暗处备用。
4. 仪器和材料仪器：高压蒸汽灭菌器、干热灭菌箱、水热恒温培养箱、电炉、天平、冰箱。
材料：灭菌平皿（直径9 cm）、灭菌试管、刻度吸管、三角烧瓶、采样瓶、酒精灯、消毒水、镊子、试管架等。
放大镜或菌落计数器、pH计或精密pH试纸、火柴或打火机。
5. 样品采集自来水的取样：先将自来水龙头用酒精棉擦拭，再用酒精灯火焰灭菌，打开龙头放水3-5 min，用无菌空三角瓶接取水样200 ml。
纯净水取样：用消毒酒精棉擦拭纯水机出口后，先放走部分水，再用无菌空三角瓶接取水样200毫升。
地表水的取样：应取距水面10—15 cm的深层水样，先将灭菌的带玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流入瓶中，盛满后，将瓶塞盖好，再从水中取出，最好立即检查，否则需放入冰箱中保存。
6. 检验步骤生活饮用水（自来水、纯净水）：以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1 mL充分混匀的水样, 注入火菌培养皿中，倾注约15 ml已融化并冷却到45 C左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。
每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注培养基作为空白对照。
生活饮用水中细菌总数的测定法平皿计数法-V1
生活饮用水中细菌总数的测定法平皿计数法-
V1
生活饮用水中细菌总数的测定法平皿计数法
测定生活饮用水中细菌总数的一种方法是平皿计数法，本文将对这种方法进行详细介绍。
一、实验原理
平皿计数法是利用细菌在液体培养基表面生长成菌落的原理，通过计算菌落个数来确定水中的细菌总数。
二、实验步骤
1. 准备培养基，将培养基倒入无菌平皿中；
2. 取样，将水样取自自来水管道或自然水源中；
3. 稀释，将取样液进行10倍、100倍、1000倍稀释，分别将每份稀释液分别均匀分散在培养基表面，避免液滴残留；
4. 写标签，标注菌落计数的相关信息，例如样品名称、稀释倍数、菌落计数的日期等；
5. 培养，将培养皿放置在恒温培养箱中，设定温度为37℃，并在3-5天内进行观察和计数。
三、实验注意事项
1. 取样应避免超过24小时，以免菌群失去代表性；
2. 取用的平皿应事先灭菌处理，以避免外来细菌的污染；
3. 实验室应有专门的抽风设备、消毒液等清洁工具，以维持实验室的高度卫生。
通过以上三个步骤，我们就可以精确地测定出生活饮用水中细菌总数。
同时，这种方法也可以应用在其他领域，例如食品安全、环境监测等
方面。
但需要注意的是，实验过程中必须遵守实验室操作规程，以保
证实验结果的可靠性。
自来水中细菌总量的测定
自来水中细菌总量的测定微生物学实验论文—自来水中细菌总数的测定自来水中细菌总数的测定摘要： 水对于人类扮演者不可或缺的角色，同样水质的好坏对人们生活起着至关重要的作用，而判断水质的标准，微生物在水中的数量、种类是必不可少的。
良好的饮用水细菌总数因<100CFU/Ml,而>500CFU/mL 则不适宜饮用，我国饮用水卫生标准（GB5749—85）规定每毫升水样细菌总数37℃培养24h 不得大于100个，每升水中总大肠杆菌群数小于3个。
本实验采用普通牛肉膏蛋白胨培养基[1]对水中细菌进行培养，通过平板菌落计数技术【2】从而来测定自来水是否符合饮用水的微生物方面的卫生标准。
关键词： 自来水 平板菌落计数技术 牛肉膏蛋白胨培养基引言： 微生物学指标是评价饮用水生物性污染的重要指标，是水质在流行病学上安全的保证。
各种天然水中常含一定数量的微生物。
水中微生物的主要来源是：水中的水生性微生物（如光合藻类）、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。
自来水指通过水处理厂净化、消毒后生产出来的符合国家饮用水标准的供人们生活、生产使用的水。
我国饮水卫生标准（GB5749—85）规定每毫升水样细菌总数37度培养24个小时不得大于100个，每升水中总大肠杆菌群数小于3个。
微生物学指标是评价水中生物性污染的重要指标，是水质在流行病学上安全的保证。
近年来随着环境污染加重我国水质不断下降，给居民饮水安全带来隐患。
因此，我们想通过测定自来水中的细菌总数，了解水质情况，呼吁人们保护水资源。
测定水样是否符合饮用水的微生物方面的卫生标准，通常包括下列两个项目：细菌总数测定和总大肠杆菌群的测定。
本实验只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数，通过此实验我们能够计算出水中的细菌总数，从而判断自来水是否符合国家标准，是否受到污染。
[3]1. 材料与方法1.1 材料、试剂与仪器(1) 实验材料 自来水(2) 实验试剂 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 1mol/LNaOH 1mol/LHCl 蒸馏水(3) 实验仪器 高压蒸气灭菌锅 培养皿 三角烧瓶 天平 牛角匙 pH 试纸（pH5.5-9.0） 吸量管 麻绳 牛皮纸 量筒 玻璃棒 电炉 温度计1.2 实验方法1.2.1灭菌（1）首先将高压蒸气灭菌锅的内锅层取出,再向外锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。
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—自来水中细菌总数的测定
自来水中细菌总数的测定
摘要：水对于人类扮演者不可或缺的角色，同样水质的好坏对人们生活起着至关重要的作用，而判断水质的标准，微生物在水中的数量、种类是必不可少的。
良好的饮用水细菌总数因<100CFU/Ml,而>500CFU/mL则不适宜饮用，我国饮用水卫生标准（GB5749—85）规定每毫升水样细菌总数37℃培养24h不得大于100个，每升水中总大肠杆菌群数小于3个。
本实验采用普通牛肉膏蛋白胨培养基[1]对水中细菌进行培养，通过平板菌落计数技术【2】从而来测定自来水是否符合饮用水的微生物方面的卫生标准。
关键词：自来水平板菌落计数技术牛肉膏蛋白胨培养基
引言：微生物学指标是评价饮用水生物性污染的重要指标，是水质在流行病学上安全的保证。
各种天然水中常含一定数量的微生物。
水中微生物的主要来源是：水中的水生性微生物（如光合藻类）、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。
自来水指通过水处理厂净化、消毒后生产出来的符合国家饮用水标准的供人们生活、生产使用的水。
我国饮水卫生标准（GB5749—85）规定每毫升水样细菌总数37度培养24个小时不得大于100个，每升水中总大肠杆菌群数小于3个。
微生物学指标是评价水中生物性污染的重要指标，是水质在流行病学上安全的保证。
近年来随着环境污染加重我国水质不断下降，给居民饮水安全带来隐患。
因此，我们想通过测定自来水中的细菌总数，了解水质情况，呼吁人们保护水资源。
测定水样是否符合饮用水的微生物方面的卫生标准，通常包括下列两个项目：细菌总数测定和总大肠杆菌群的测定。
本实验只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数，通过此实验我们能够计算出水中的细菌总数，从而判断自来水是否符合国家标准，是否受到污染。
[3]
1. 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器
(1) 实验材料自来水
(2) 实验试剂牛肉膏蛋白胨 NaCl 1mol/LNaOH 1mol/LHCl 蒸馏水
(3) 实验仪器高压蒸气灭菌锅培养皿三角烧瓶天平牛角匙pH试纸（pH5.5-9.0）吸量管麻绳牛皮纸量筒玻璃棒电炉温度计
1.2 实验方法
1.2.1灭菌
（1）首先将高压蒸气灭菌锅的内锅层取出,再向外锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。
（2）放回内层锅,并加入用报纸包好的培养皿、三角烧瓶、。
（3）加盖，并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内。
再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺旋，使螺旋松紧一致，勿使漏气。
（4）用电炉加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷气。
待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸气压力增加而逐渐上升。
当锅内压力上升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。
本实验用0.1MPa,121℃,20min灭菌。
（5）灭菌时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至“0”时打开排气阀，旋松螺旋，打开盖子，取出灭菌物品。
1.2.2水样的采取
对自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌，放开水龙头使水流5min后，用已灭菌的三角烧瓶接取水样，以待分析。
1.2.3制备培养基
（1）称量
按4.2g/100ml营养琼脂粉称量，放在称量纸上，称量后直接放入水中，稍微加热。
（2）溶化
在上述烧杯中加入所需的水后不断搅拌使营养琼脂粉溶解。
1.2.4细菌总数测定
（1）灭菌吸管吸取1mL水样，注入其中一套灭菌的培养皿中。
对照不加自来水。
（2）取一空的灭菌培养皿，立即倾注溶化了的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基15mL，作空白对照。
（3）分别倾注约15mL已溶化并冷却到45℃左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基，并立即在桌上作平面旋摇，使自来水和培养基混匀。
（4）待培养基凝固后，倒置于37℃温箱中，培养24h，进行菌落计数。
两个平板的平均菌落数即为1mL自来水的细菌总数。
[4]
1.3菌落计数方法
（1）计算相同稀释度的平均菌落数，若其中一个平板有较大片状菌苔生长时，则不应采用，而应以为片状菌苔生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。
若片状菌苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布又很均匀时，则可将此一半的菌落数乘2以代表全平板的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落数。
（2）首先选择平均菌落数在30～300之间的，则只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的菌落总数。
（3）若有两个稀释度的平均菌落数均30～300之间，则按两者菌落总数之比值来决定。
若其比值小于2，应采取两者的平均数；若大于2，则取其中较小的菌落总数。
（4）若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数。
（5）若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数。
（6）若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，则以最近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数。
2、结果与分析
表：自来水中菌落数表实验数据
平板菌落数1ml自来水中细菌总数
1
2
对照组 90
102
48
（90+102）/2-48=48
（1）对照组中的菌数应为0个，但实验测得数据为48个，这主要是因为有杂菌混入，杂菌来源可能：培养皿灭菌不充分；灭菌后在空气中放置又落入杂菌；培养基倾入培养皿后没有立即加盖；配置培养基时反复升降温（没有立即转移使培养基凝固），使一些杂菌产生抗性;做实验时灭菌后对着培养基呼气也可能造成细菌污染,以及在对照组加培养基时第二次加入培养基，引入细菌更多。
所以在以后的试验中必须注意实验操作的严密性。
（2）根据我国饮用水卫生标准规定，每毫升细菌总数37℃培养24 h不得大于100个，正常应该在60-90个/ml,而本实验中测得结果是48个/mL，菌落数相对较少，可能是倒入培养基时温度过高，烫死部分自来水中的细菌，而且，培养基中有小部分呈片状，这是培养基和自来水没有混匀的原因。
（3）由于培养基是倒置的，所以可以观察到绝大多数的细菌着生在培养基表面。
这是由于菌种在固体培养基上借助重力作用而形成的，有利于菌落计数。
2.2实验注意事项
（1)倒置培养基时应降温至45 ℃左右，否则温度过高会烫死部分细菌，实验结果受影响，如观察结果中菌落过分稀少就可能是这一因素引起的；若温度过低培养基提前凝固，无法倒入培养皿。
（2）倾注培养基后要将培养皿在桌面上做匀速旋转，将培养基和自来水样摇匀，在培养基中观察时可见一些菌苔就是没有摇匀的结果。
(3)培养基不能反复升降温，倾入培养皿后应立即加盖，且灭菌后不应在空气中放置，以免杂菌混入。
(4)在实验操作过程中操作者尽量避免对着培养基呼气，人类呼出气体中含大量细菌，可能会影响实验结果，致使菌落数过多。
先将培养皿，吸量管，三角烧瓶放入高压蒸汽灭菌锅内，0.1MPa，121℃，20min灭菌。
3.讨论
在本实验中的空白对照培养基上长了细菌菌落，说明此培养基被污染了。
主要原因是本小组在倒入培养基时未一次性倒入，在第二次加培养基时已有较多菌落，导致对照菌落数较多。
实验组整体较好，菌落生长正常。
通过此实验，我们可知平板菌落技术法是测定水样中细菌个数比较方便的方法，但它也存在不准确的因素比如在数菌落时，菌落太小且又处于培养基内部这样就不能观察到菌落从而影响结果，又如在培养过程中由于细菌之间的相互抑制也会使计数菌落减少。
因此，在制作培养基及培养的过程中要严格杀菌，并严格按照实验步骤认真操作，从而使得结果更加精确。
[5]
虽然水中存在大量的细菌且种类繁多，但由于牛肉膏蛋白胨所提供的生长条件的限制，培养基中所得的细菌群落大部分为大肠杆菌，呈圆片状。
4.结论
根据国家饮水卫生标准（GB5749—85）规定：每毫升水样细菌总数37℃培养24个小时不得大于100个。
此实验自来水中的细菌个数为48个，符合国家标准，故该自来水水质合格。
［6］
参考文献：
[1]沈萍，陈向东.微生物学实验[M].4版.北京[2]：高等教育出版社，2007
[2] 陈声明,刘丽丽. 微生物学实验研究方法. 北京：人民教育出版社，1982
[3] 郝士海，《现代细菌学培养基和生化试验手册》北京：中国科学技术出版社，1992
[4] 李根生《干燥培养基恩德制造及应用》上海：上海科学技术文献出版社，1994
[5] 张秀绘，苏筱军，李庆平，等．生活饮用水细菌学指标的影响因素．环境与健康杂志，2006，23：152—153．
[6] 陈声明刘丽丽《微生物学实验研究方法》北京：人民教育出版社，1982。