实验六亚硝酸盐的测定
食品中亚硝酸盐的测定
3、饱和硼砂溶液：称取5.0g硼酸钠(Na2B07·10H20)，溶于100 mL热水中，冷却后备用。
分装，1瓶/大组
4、对氨基苯磺酸溶液(4g/L)：称取0.4 g对氨基苯磺酸，溶于100 mL 20％的盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存。
分装，1瓶/大组
5、盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）：称取0.2克盐酸萘乙二胺，溶于100mL水中，避光保存。有致癌作用
（3）过滤：加水定容，放置，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去
初滤液30mL，滤液备用。
2标准曲线的绘制和样品的测定
取10个25ml具塞比色管，标号，按下列步骤操作：
管号
0
1
2
3
4
5
6
7
8
样
标准溶液
（ml）
相当亚硝酸钠（μg）
对氨基苯磺酸（ml）
各管均加1ml（混匀，静置3-5min）
盐酸萘乙二胺（ml）
分装，1瓶/大组
8.蒸馏水
1瓶/组
五、实验步骤
1、样品的处理：
（1）取样：准确称取5.0g经绞碎、混匀的样品，置于50mL烧杯中。
（2）沉淀蛋白质：①加硼砂饱和溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约300mL将样品洗入500mL容量瓶中，置沸水浴中加热15min，取出后冷却至室温。②一面转动一面加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质
1个/组
10.玻璃棒，温度计，标记笔，标签纸
若干
四、试剂（所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂。）
1.亚铁氰化钾溶液：称取106.0g亚铁氰化钾[K4Fe6(CN)·3H2O]，用水溶解后，稀释至1000mL。
分装，1瓶/大组
亚硝酸盐测定实训报告
一、实训目的本次实训旨在通过实验操作，使学生掌握亚硝酸盐的测定方法，了解亚硝酸盐在食品中的存在形式及其对人体健康的影响，提高学生的实验技能和数据分析能力。
二、实训时间2023年10月25日三、实训地点化学实验室四、实训仪器与试剂1. 仪器：- 高速离心机- 分光光度计- 电子天平- 磁力搅拌器- 容量瓶（100mL、50mL）- 试管- 移液管（1mL、10mL）2. 试剂：- 亚硝酸钠标准溶液- 对氨基苯磺酸溶液- N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液- 硫酸溶液- 氨水- 食品样品五、实验原理亚硝酸盐在食品中主要存在于腌制肉类、鱼类等加工食品中，其含量对人体健康有重要影响。
本实验采用比色法测定食品中亚硝酸盐的含量。
其原理是：在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，生成的重氮盐与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成紫红色偶氮染料，通过测定吸光度，可以计算出亚硝酸盐的含量。
六、实验步骤1. 样品处理：- 称取适量的食品样品，加入适量的硫酸溶液，用高速离心机离心分离。
- 取上清液备用。
2. 标准曲线的绘制：- 取一系列不同浓度的亚硝酸钠标准溶液，按照实验步骤进行操作。
- 测定吸光度，以亚硝酸钠浓度（mg/L）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样品测定：- 按照实验步骤，对处理后的样品进行测定。
- 测定吸光度。
4. 结果计算：- 根据标准曲线，计算出样品中亚硝酸盐的含量。
七、实验结果与分析1. 标准曲线：- 通过绘制标准曲线，得出线性回归方程：y = 0.0486x + 0.0013，R² =0.9969。
2. 样品测定结果：- 根据实验结果，样品中亚硝酸盐的含量为2.5mg/kg。
3. 结果分析：- 本次实验中，样品中亚硝酸盐的含量略高于国家标准限值（1mg/kg），说明该食品样品中亚硝酸盐含量较高，消费者在食用时应注意。
八、实验总结1. 通过本次实训，我们掌握了亚硝酸盐的测定方法，了解了亚硝酸盐在食品中的存在形式及其对人体健康的影响。
流动注射分光光度法测水样中的亚硝酸盐精选全文完整版
可编辑修改精选全文完整版实验六流动注射分光光度法测水样中的亚硝酸盐1 实验目的了解流动注射分光光度法的基本原理方法及其实验注意事项；熟练掌握流动注射分光光度法测定水样中的亚硝酸盐的实验操作。
2 实验原理2.1方法原理流动注射分光光度法的基本原理是在把一定体积的试样溶液注入到一个流动着的、非空气间隔的试剂溶液（或水）载流中。
被注入的试样溶液与载流中的试剂混合、反应，在反应盘管中形成一个区域。
进入流通检测器进行测定分析及记录。
在酸性介质中，水中的亚硝酸盐与磺胺反应生成重氮盐，再与盐酸萘乙二胺偶联生成红色染料，于540 nm波长处测定吸光值。
2.2仪器原理FIA 基本流路系统一般包括:载液驱动系统、注入阀或进样器、微型反应器、流通式检测器( 折光计、比色计、紫外/可见分光光度计、离子选择电极、原子吸光光度计、荧光计等) 、信号记录装置[1]。
其中蠕动泵驱动载液以恒定流率流过细微的管路;注入阀将一定体积的样品溶液重现地注入载液中;微型反应器则使注入的样品带在其中适当地分散, 并与载液( 或试剂) 中某些组分进行反应, 生成能使检测器产生适量响应值的产物;检测器和信号记录装置测量和记录下响应值数据。
FIA的三大要素：试样注入：通过进样阀实现控制进样体积或进样时间；试样带受控分散：反应盘管中完成；时间控制的高度再现：由泵和流路转换阀决定可在非平衡状态下检测。
泵：用于驱动载流通过细管；进样阀：重现地定量注入样品；转换阀：进行流路切换较少使用；转换阀：进行流路切换较少使用；反应器（管）：样品带在其中分散并与载流试剂中的组份反应，包括空管式反应器、填充床反应器以及单珠串反应器；检测器：检测样品带在分散过程中的反应情况，包括分子光谱检测器、原子光谱检测器、电化学检测器以及质谱检测器；输出一般为一个峰一次进样。
其特点主要包括：简单、方便、精确、重现、快速、可处理大量样品、样品和试剂用量少、可在平衡和非平衡状态下完成测定、密闭、减少污染和不安全因素。
亚硝酸盐的测定实验报告
一、实验目的本实验旨在学习亚硝酸盐的测定方法，了解亚硝酸盐在食品中的存在及其对人体健康的影响。
通过实验，掌握亚硝酸盐的提取、分离和定量分析方法，提高对食品中亚硝酸盐含量的检测能力。
二、实验原理亚硝酸盐（NO2-）是一种常见的食品添加剂，广泛应用于肉制品的加工中，具有发色、防腐和抗微生物作用。
然而，过量的亚硝酸盐摄入对人体健康有害，可能导致急性中毒、慢性疾病甚至癌症。
因此，对食品中亚硝酸盐含量的检测具有重要意义。
本实验采用盐酸萘乙二胺法测定亚硝酸盐含量。
该方法基于亚硝酸盐与对氨基苯磺酸在酸性条件下发生重氮化反应，生成重氮盐，再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐偶合形成玫瑰红色染料。
通过比色法测定染料的吸光度，可以计算出样品中亚硝酸盐的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 火腿肠样品- 试剂：对氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺盐酸盐、盐酸、亚硝酸钠标准溶液等- 仪器：酸度计、分光光度计、离心机、移液器、容量瓶、试管等2. 实验步骤：1. 样品处理：将火腿肠样品剪碎，称取适量，加入蒸馏水溶解，搅拌均匀。
2. 提取：将样品溶液用酸度计调至pH 2.0，加入适量的亚铁氰化钾和乙酸锌，充分混合，静置30分钟，使蛋白质沉淀。
3. 分离：将上层清液转移至离心管中，离心分离蛋白质沉淀。
4. 测定：取一定量的上层清液，加入对氨基苯磺酸和N-1-萘基乙二胺盐酸盐，充分混合，静置15分钟，使染料形成。
5. 比色：用分光光度计测定染料的吸光度，与标准曲线比较，计算出样品中亚硝酸盐的含量。
四、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据亚硝酸钠标准溶液的浓度和吸光度，绘制标准曲线。
2. 样品测定：对火腿肠样品进行测定，得到样品中亚硝酸盐的吸光度。
3. 结果计算：根据标准曲线和样品吸光度，计算出样品中亚硝酸盐的含量。
五、实验讨论1. 实验过程中，酸度对亚硝酸盐的测定结果有较大影响。
实验过程中应严格控制酸度，确保测定结果的准确性。
2. 亚铁氰化钾和乙酸锌在实验中起到沉淀蛋白质和除去脂肪的作用，提高实验的灵敏度。
食物中的亚硝酸盐含量测定实验
食物中的亚硝酸盐含量测定实验亚硝酸盐是一种普遍存在于食物中的化学物质，它具有一定的危害性。
过量的亚硝酸盐摄入可引起健康问题，如致癌作用和对血液循环系统的不良影响。
因此，了解食物中的亚硝酸盐含量对我们的健康至关重要。
本文将详细介绍一种简单有效的食物中亚硝酸盐含量测定实验方法。
实验材料：- 油酸银试剂：用浓硝酸和两滴稀硝酸混合制成的10%油酸银溶液。
- 食物样品：如蔬菜、肉类或加工制品等。
- 高纯水：用于制备试剂和稀释样品。
实验步骤：1. 样品制备：将所需食物样品洗净，去皮并切成小块。
取适量的食物样品（约10克）放入容器中备用。
2. 制备油酸银试剂：在实验室条件下，取适量的浓硝酸（约1ml），加入两滴稀硝酸，并充分混合。
得到的溶液即为10%油酸银试剂。
3. 样品处理：将预先准备好的食物样品置于容器中，加入适量的高纯水（约50ml），然后加入足量的油酸银试剂（约2ml）。
4. 摇晃溶液：将容器封闭，并轻轻地摇晃溶液，使油酸银试剂充分与样品接触，反应1分钟。
5. 过滤液处理：使用滤纸或滤膜将溶液过滤，以去除残留的食物固体颗粒。
6. 比色测定：将过滤后的溶液放入比色皿中，然后使用紫外-可见分光光度计测量其吸光度。
数据处理与结果分析：根据所得的吸光度值，可以通过制定标准曲线来计算食物样品中的亚硝酸盐含量。
标准曲线通常由不同浓度的亚硝酸钠溶液制成。
通过比较食物样品的吸光度值与标准曲线上的相应吸光度值，可以确定食物中的亚硝酸盐含量。
实验注意事项：1. 实验操作时请佩戴适当的实验室防护设备，如手套和护目镜。
2. 使用实验室用具时要注意安全，如锥形瓶和滤纸。
3. 进行比色测定时，确保比色皿干净，并且避免空气中的尘埃进入溶液。
结论：通过本实验，我们可以有效地测定食物中的亚硝酸盐含量。
这有助于我们评估食物的安全性，并采取相应的措施来减少亚硝酸盐的摄入。
同时，本实验方法简单易行，可以在实验室或家庭环境中进行，为亚硝酸盐的监测提供了一种可行的方法。
香肠中亚硝酸盐含量的测定
实验课题：用分光光度法测香肠中亚硝酸盐的含量一、实验人员二、实验目的测定香肠中亚硝酸盐的含量。
三、实验原理亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定。
利用碱性的硼砂将脂肪从样品中分离，利用乙酸锌及亚铁氤化钾使蛋白质变性分离。
试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，利用分光光度法来测定，最大吸收波长为540nm。
根据朗伯比尔定律，并结合工作曲线，可以得到香肠中亚硝酸盐的含量（mg/kg）。
四、试剂和材料除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯水，为GB/T 6682规定的二级水或去离子水。
1、双汇王中王香肠一根（净含量：50g）2、乙酸锌溶液（220g/L）：称取11g乙酸锌，先加1.5mL冰醋酸溶解,用水稀释至50 mL。
3、亚铁氤化钾溶液（106 g/L）:称取5.3 g亚铁氤化钾，用水溶解，并稀释全 50mL。
4、饱和硼砂溶液（50g/L）:称取2.50 g硼酸钠，溶于50mL热水中，冷却后备用。
5、亚硝酸钠标准溶液（10 “g /mL）6、对氨基苯磺酸溶液（1.0%）7、盐酸萘乙二胺溶液（0.3%）五、仪器和设备1、天平：感量为0.1mg和1mg2、研钵3、分光光度计4、电热炉5、50ml烧杯1个、500ml容量瓶1个、50m容量瓶10个、胶头滴管、各个规格的移液管、玻璃棒六、实验步骤（一）试样的预处理：1、取全部，用研钵制成匀浆备用。
2、称取5 g（精确至0.1 g）制成匀浆的试样置于50 mL烧杯中，加12.5 mL 饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70 C左右的水约300 mL将试样洗入500 mL容量瓶中，80^加热15 min，取出置冷水浴中冷却，并放置全室温。
3、在振荡上述提取液时加入5 mL亚铁氤化钾溶液，摇匀，再加入5 mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。
加水至刻度，摇匀，放置30 min,除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤（用移液管吸取中间澄清的部分）。
实验五、水中亚硝酸盐的测定
实验五、水中亚硝酸盐的测定
方法选择
水中亚硝酸盐氮的测定方法通常采用重氮—偶联 反应，使生成红紫色染料。所用重氮和偶联试剂种类 较多，最常用的一般有对氨基苯磺酸和α—奈胺，该 法简便，灵敏度高，但盐度对吸光度有影响，而且试 剂α—奈胺对人体有致癌作用，现今基本不再使用。 磺胺（对氨基苯磺酰胺）和N-（1-萘基）-乙二胺盐 酸盐（简称萘乙二胺）法灵敏度更高，反应速度快， 试剂较为稳定，而且不受盐度等组分的影响，因此， 该法是目前国内普遍采用的测定亚硝酸盐氮的方法。 当将试剂配制成固体粉末时，适合于野外快速测定。 此外，还有目前国内外普遍使用的离子色谱法和新开 发的气相分子吸收法。这两种方法虽然须使用专用仪 器，但方法简便、快速，干扰较少。
实验五、水中亚硝酸氮的测定
磺胺和萘乙二胺试剂法 原理
在酸性介质中亚硝酸盐与磺胺进行重氮化反应，其产物再与盐酸萘乙二 胺偶合生成红色偶氮染料，在543nm波长处测定吸光度。本方法最低检出 浓度(以N计)为0.02µmol/L，测定上限为10μmol/L。
主要仪器
分光光度计及配套比色皿、25mL具塞比色管等。
实验五、水中亚硝酸氮的测定
操作步骤——水样测定
• • （ 曲1线）制取作适过量程水的样步（骤V（水样2） ）～于（比4色）管，中显，色用并纯测水定定该容水到样2的5m吸L，光参度照A水标样准。 • （2）同时取25mL纯水，代替水样重复上述操作，获得试剂空白的吸光
实验六 奶粉中亚硝酸钠含量的测定
实验六、奶粉中亚硝酸盐的测定一、实验目的1.掌握样品制备、提取的基本操作技能。
2.进一步熟练掌握分光光度计的结构和使用方法。
3.掌握比色法测定食品中亚硝酸盐的原理和方法。
二、仪器与试剂1仪器①分光光度计；②比色管、移液管、容量瓶等常用玻璃仪器2试剂①亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾溶于水，并定容至100ml。
②乙酸锌溶液：称取22.0g乙酸锌，加30ml冰醋酸，溶于水并定容至100ml。
③硼砂饱和溶液：称取5g硼砂溶于100 ml热水中，冷却后备用。
④0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100 ml 20%的盐酸中，避光保存。
⑤0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶于100 ml水中，避光保存。
⑥亚硝酸钠标准溶液：准确称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。
此溶液每毫升相当于200μg的亚硝酸钠；⑦亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL，置于100mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于10.0μg亚硝酸钠。
三、原理样品经沉淀分离蛋白质，除去脂肪后，在弱酸的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸起重氮化反应，生成重氮化合物，再与盐酸萘乙二胺偶合，形成紫红色的的染料，其颜色的深浅与亚硝酸盐的含量成正比，可与标准比较定量。
通过分光光度计比色测定，计算出样品中亚硝酸盐的含量。
四、实验步骤准确称取奶粉2.50克于50ml烧杯中，加硼砂饱和溶液6.3ml，以70℃以上的热水100～150ml将样品搅拌均匀后，全部洗入250ml容量瓶中，放入沸水浴中加热15分钟，取出冷却后，边转动容量瓶边加入亚铁氰化钾溶液2.5ml，摇匀后，再加入乙酸锌溶液2.5ml，以沉淀蛋白质。
然后，加水至刻度，混匀，放置半小时后，弃去上层脂肪，清液用滤纸或脱脂棉过滤，弃去初滤液5～10ml ，滤液备用2测定 吸取上述滤液20ml 于25ml 带塞比色管中，同时吸取0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50ml 10.0ug/mL 的亚硝酸钠标准溶液（相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ug/25mL 的亚硝酸钠）分别置于25ml 比色管中。
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亚硝酸盐的测定(格里斯试剂比色法)
一、原理
样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与N-1-萘基乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准比较定量。
二、试剂
氯化胺缓冲液：1L容量瓶中加入500mL水，准确加入20.0mL盐酸，振荡混匀，准确加入50mL氢氧化铵，用水稀释至刻度。
必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试至pH9.6~9.7。
硫酸锌溶液（0.42mol/L）：称取120g硫酸锌（ZnSO4·7H2O），用水溶解，并稀释至1000mL。
（国标方法用）。
乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL。
10.6%亚铁氰化钾溶液。
氢氧化钠溶液(20g/L)：称取20g氢氧化钠用水溶解，稀释至1 L。
对氨基苯磺胺酸溶液：称取10g对氨基苯磺酸，溶于700 mL水和300 mL 冰乙酸中，置棕色瓶中混匀，室温保存。
N-1-萘基乙二胺溶液（1g/L）：称取0.1gN-1-萘基乙二胺，加60%乙酸溶解并稀释至100mL，混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。
显色剂：临用前将N-1-萘基乙二胺溶液（1g/L）和对氨基苯磺胺酸溶液等体积混合。
亚硝酸钠标准溶液：准确称取250.0mg于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500mL容量瓶中，加100mL氯化铵缓冲液，加水稀释至刻度混匀，在4℃避光保存。
此溶液每毫升相当于500μg的亚硝酸钠。
亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液1.00mL，置于100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度此溶液每毫升相当于5.0μg亚硝酸钠。
三、操作方法
1、样品处理（本实验用）
称取约10.00g（粮食取5g）经绞碎混匀细碎样品，置于研钵中，加5-10mL 氢氧化钠溶液(20g/L)，充分研磨成浆状，加约70mL水转移入200 mL容量瓶中，慢慢加入5 mL乙酸锌和5 mL亚铁氰化钾溶液，混匀。
置60℃水浴中加热10min，
取出后冷至室温，加水至刻度混匀。
放置0.5h ，干燥滤纸过滤，弃去初滤液20 mL ，收集滤液备用。
1、样品处理（国标中步骤）
称取约10.00g （粮食取5g ）经绞碎混匀样品，置于打碎机中，加70mL 水和12mL 氢氧化钠溶液(20g/L)，混匀，用氢氧化钠溶液(20g/L)或盐酸溶液（6mol/L ）调样品pH=8，定量转移至200 mL 容量瓶中，加10 mL 硫酸锌溶液，混匀，如不产生白色深沉，再补加2~5 mL 氢氧化钠，混匀。
置60℃水浴中加热10min ，取出后冷至室温，加水至刻度混匀。
放置0.5h ，滤纸过滤，弃去初滤液20 mL ，收集滤液备用。
2、测定
1)亚硝酸盐标准曲线的制备：吸取0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL 亚硝酸钠标准使用液（相当于0，2.5，5，10，15，20，25μg 亚硝酸钠），分别置于25mL 带塞比色管中。
于标准管中分别加入4.5mL 氯化铵缓冲液，加2.5mL60%乙酸后立即加入5.0mL 显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置25min ，用1cm 比色杯（灵敏度低时可换2cm 比色杯），以零管调节零点，于波长550nm 处测吸光度，绘制标准曲线。
低含量样品以制备低含量标准曲线计算，标准系列为：吸取0，0.4，0.8，
1.2，1.6，
2.0mL 亚硝酸钠标准使用液（相当于0，2，4，6，8，10μg 亚硝酸钠）。
2)样品测定：吸取10.0mL 上述滤液于25mL 带塞比色管中，于管中分别加入
4.5mL 氯化铵缓冲液，加2.5mL60%乙酸后立即加入
5.0mL 显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置25min ，用1cm 比色杯（灵敏度低时可换2cm 比色杯），以零管调节零点，于波长550nm 处测吸光度。
同时做试剂空白.
3、计算
1000110001
22⨯⨯⨯=V V m m X X ——样品中亚硝酸盐的含量，mg/kg ；
M 1——样品质量，g ；
M 2——测定用样液中亚硝酸盐的质量，μg 。
V
——样品处理液总体积，mL；
1
——测定用样液体积，mL。
V
2
结果的表述：报告算术均值的二位有效数。