病理切片制作过程及注意事项
病理切片制备
病理切片制备
病理切片的制备主要包括以下步骤：
1. 取材：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。
2. 固定：固定分为小块组织固定法、注射灌注固定法、蒸汽固定法。
3. 脱水：用梯度酒精将组织块内的水分置换出来，可以用脱水机自动完成。
4. 包埋和切片：脱水以后进入石蜡包埋，石蜡凝固后，组织就被包在其中，制成蜡块。
然后将蜡块放在切片机上切成4-6微米薄片展开放在玻片上。
5. 染色封固：石蜡切片要经过苏木素-伊红染色，最后切片封固。
此外，在制片过程中，需要注意规范取材部位，准确地按解剖部位取材；选好组织块的切面，根据各器官的组织结构，决定其切面的走向；规范取材使用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动；夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形；选好组织块的切面；规范取材使用的刀剪要锋利等。
以上信息仅供参考，具体步骤和注意事项可能根据不同的制作设备和材料有所差异。
如需了解更多信息，建议咨询病理科医生或查阅专业书籍。
病理组织切片制作技术
（二）固定及目的：
应用化学试剂使组织或细胞中的无机 成分和有机成分液（4%甲 固定液是10%福尔马林溶液（4%甲 醛溶液），固定24小时以上。 醛溶液），固定24小时以上。
固定的目的
1、迅速阻止组织、细胞死后变化，防止 自溶与腐败，使之尽量保持生前的状 态与结构。 2、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等 成分转变为不溶性物质，以保持其原 有状态。 3、使组织内各种物质成分产生不同的折 光率，以便染色后易于鉴别和观察。 4、使组织块硬化，便于制作薄片。
三、脱蜡和染色
（一）、脱蜡 1、二甲苯Ⅰ5-10min 、二甲苯Ⅰ 2、二甲苯Ⅱ1-2min 、二甲苯Ⅱ 3、1：1二甲苯：乙醇（冬天20min） 二甲苯：乙醇（冬天20min） 5min 4、无水乙醇、 95%、80%、 70、 50% 95%、80%、 70、 梯度乙醇每级1 梯度乙醇每级1-2min 5、蒸馏水1-2min 、蒸馏水1
固定的注意事项
1、组织块不宜大，厚度小于5mm，长宽 、组织块不宜大，厚度小于5mm，长宽 也应小于15×15mm。 也应小于15×15mm。 2、固定液与组织块的比例应大于10：1。 、固定液与组织块的比例应大于10： 3、软组织或较大组织块可先经2-3小时固 、软组织或较大组织块可先经2 定后再修整成小块，重新投入新配制 的固定液中继续固定。 4、肠道可在浆膜面贴上一层厚纸，以防 固定组织变形。
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病理组织切片制作技术
实验内容 掌握组织材料的取材、固 定、脱水、透明、包埋、切片、 烤片、脱蜡、染色及封固的基 本操作。
一、取材及固定
（一）取材注意事项： 1、材料新鲜 2、组织块力求小而薄 3、勿使组织块受挤压 4、尽量保持组织的原有形态 5、熟悉取材部位
病理切片的制作过程
1.7.1 修整组织将手术切取的乳腺肿瘤切成一个平整面，各组织块不宜太大，以便固定剂穿透和组织脱水等操作，通常以10 mm×10 mm×3mm或5mm×5mm×3mm为宜。
找到不同的部位切取2块，以备后用。
1.7.2 组织洗涤组织经修整后，组织中的福尔马林等必须冲洗干净，尤其是含有重金属的物质存在。
因为残留在组织中的福尔马林，有的不利于染色，有的产生沉淀或结晶影响观察，所以组织修整后应冲洗12h左右。
1.7.3 组织脱水组织经洗涤后，组织中含有大量水分，由于水与石蜡不能互溶，所以必须将组织中的水分除去。
80%乙醇溶液：2h95%乙醇溶液:1h95%乙醇溶液:1h100%乙醇溶液:30min100%乙醇溶液:30min1.7.4 组织透明由于乙醇与石蜡不相溶，而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡，所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。
当组织中全部被二甲苯占有时，光线可以透过，组织呈现出不同程度的透明状态。
二甲苯Ⅰ：30min二甲苯Ⅱ：10min1.7.5 组织浸蜡浸蜡的目的是除去组织中的透明剂（如二甲苯等），使石蜡渗透到组织内部达到饱和程度以便组织包埋。
浸蜡时间根据组织的透蜡时间较长，需3h左右。
浸蜡应在恒温箱内进行，并保持箱内温度在55℃左右，注意温度不要过高，以免组织发脆。
石蜡Ⅰ：1h石蜡Ⅱ：1h。
石蜡Ⅲ：1h1.7.6 组织包埋将经过透蜡的组织连同熔化的石蜡，一起倒入容器内，然后立即投入冷水中，使其立刻凝固成蜡块的过程。
包埋时，将纸盒放在温箱旁边，用镊子夹取组织平放于纸盒底部，，再用温镊子轻轻拨动组织，从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯，沿壁倒入包埋用的纸盒中，速度要慢。
待石蜡凝固（约30min）后放入冰箱保鲜层内以备后用。
包埋时应根据组织材料、切片厚度、气候条件等因素，选择不同熔点的石蜡，新的石蜡一般要熬顿几次，以免石蜡固定后有气泡，影响切片。
用于包埋的石蜡的熔点在50~60℃之间。
病理组织切片制作
实验四病理组织切片制作一、实验目的组织切片技术是病理学中不可缺少的一个组成部分。
通过实验，能够使学生了解和掌握病理组织切片的基本方法之一，即石蜡包埋的组织切片法。
二、实验原理根据病变及检查的要求，合理采集病料，经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋后进行切片，在进行染色得到结果。
固定是用化学药品把组织原来的结构保存下来，以便观察。
脱水是除去组织中的水分，以利于透明和浸蜡。
组织的透明是便于透蜡包埋。
包埋的是使石蜡透入组织内部，把软组织变为适当硬度的包埋块，以便切成薄片。
最后使用切片机，将包埋块中组织切成薄片。
三、主要仪器及试材已固定好病料，石蜡，手术刀，手术剪，镊子，脱水框，染色缸，梯度脱水酒精和透明剂一套，烘箱，切片机，毛笔，玻片，蛋白甘油，染色架，酒精灯，三角架，大烧杯，温度计，火柴，切片刀，记号笔或铅笔。
四、实验方法与步骤。
（一）固定采取的病理材料必须立即放入10％福尔马林固定液中。
（二）脱水组织经固定后，尚含有多量水分，而水与透明剂苯、石蜡根本不相融合。
必须先把组织中的水分除去。
但脱水剂必须是与水在任何比率下均能混合的液体，脱水剂常兼有硬化组织的作用。
最常用的脱水剂为酒精、丙酮等。
1．酒精沸点78．4℃，为最常用的脱水剂。
脱水能力强，并能使组织硬化，能较好地与二甲苯透明剂相混合。
最终结果表明，只要脱水环节处理好，都会得到好的切片。
脱水的程序为70％一80％一95％一100％。
各级酒精2—4小时，视材料的大小、厚薄而定。
100％酒精有硬化组织的作用，时间不宜太长，一般不超过3小时。
脑组织、脂肪组织或疏松结缔组织，脱水时间要适当延长。
2．丙酮沸点为56℃。
脱水作用比乙醇强，但对组织块的收缩较大，主要用于快速脱水或固定兼脱水。
脱水时间l一3小时左右。
（三）透明透明对组织有脱酒精及透明两种作用。
当组织中全部为透明剂占有时，光线可以透过，组织可呈现不同程度的透明状态，此种现象称为透明，具有这种作用的试剂称为透明剂。
病理组织切片制作技术
病理组织切片制作技术病理组织切片制作技术病理组织切片常用的制作方法有三种。
即石蜡切片法，冰冻切片法和火棉胶切片法。
以石蜡切片法为代表，切片的基本制作过程是：组织取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→组织包埋→组织切片→展片附贴→切片脱蜡→染色→脱水→染片透明→封固。
以上基本过程是互相联系的，任何一环节出现问题，都将使整个切片制作归于失败。
因此应细致、耐心、认真负责，并事先做好计划安排。
一、取材采取病料，要刀剪锐利，剪切时不可挤压，扯拉病料，以防人为损伤。
切取的工具要清洁。
采取病料越新鲜越好，一般不超过死后24小时。
应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。
特殊病料应根据器官的结构特点切取。
管状，囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。
带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。
切取组织块大小，以1.5×1.5×0.3厘米为宜，最厚不宜超过0.5厘米。
组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。
切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。
二、固定固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。
材料取下后，应迅速固定。
固定液数量应为病理组织块的5到20倍。
由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达2到3厘米。
因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。
最常用的固定液是10%的福尔马林溶液：使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10毫升，加水90毫升配成。
三、冲洗固定后的组织块，应将固定液洗去。
一般均用流水（自来水）冲洗12到24小时左右。
及时冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色。
冲洗时如不方便用流水冲洗，也可用较大容器盛装水浸洗，每隔相当时间换水一次。
整个浸洗时间比流水冲洗应稍长一些。
酒精固定的组织材料不需冲洗。
病理切片、石蜡切片制作过程中注意事项
病理切片、石蜡切片制作过程中注意事项病理切片是病理医生用来诊断患者疾病的主要手段之一。
病理切片制作过程复杂漫长，影响病理切片制作质量的因素众多，常见问题归纳如下：一、固定标本要充分及时：固定标本是制片的第一个环节；固定时间不合适或者固定不正确的组织，在染色时常会出现较浅的核质着色和轮廓不清，还会出现不同程度的片状发白区；固定液的浓度要适宜，固定标本的正确方法为：组织离体后快速放入适宜浓度的固定液中，固定液的量大约为标本体积的7倍左右，盛放标本的容器以不使标准变形为宜，大小适中。
二、规范对标本进行取材：取材的原则为：保持病变的特征和器官的完整性。
尽量修除无关组织，切面尽量做到平整，原则上小标本要全部制片，大标本宜在病变部位以及病变部位与正常组织交界处多处取材。
三、及时更换试剂：在整个切片过程中，试剂的使用比较频繁，试剂的浓度改变，会影响到组织的脱水、透明、浸蜡效果，有些试剂因为挥发到别的试剂中，甚至会导致对病理组织的污染，从而产生误诊。
因此，制片过程应注意观察试剂情况，根据标本量的大小及时更换试剂，确保组织处理达到要求。
四、组织包埋、切片：小块组织要采用线状包埋，大块组织要在包埋时整理平整，以防出现切片不完全或片内组织杂乱而造成诊断医师误诊[3]。
切片机应随时检查刀口是否钝化，随时保持刀口锋利以防出现切片断裂、破碎的情况。
切片力求完整，尽量将每块组织切到最大面，以防发生漏诊。
五、染色、封固要仔细，掌握好烤片条件：一般为60℃烤片0.5～1 h，过高温度和过长时间都会导致组织发黑，染色不清；脱蜡过程也相当重要，如果出现脱蜡不干净，那么就会出现切片不易着色和着色不匀的情况。
盐酸乙醇的分化是影响染色效果的关键环节。
分化不足和过度都会导致染色失败。
树胶的稠度也应适中，树胶过稀过多会发生溢胶，树胶过稠过少又会出现封片不全或空泡。
完成切片固封后，应及时贴好标签，防止出现混淆事故。
六、加强操作人员的工作责任心，减少因人为因素导致差错事故及坏片的发生。
组织病理切片制备
组织病理切片制备
组织病理切片的制作，首先医生取下组织病理标本，放在10%的中性福尔马林里进行固定，固定完之后标本送到病理科。
小标本需要固定4-6个小时，大标本需要固定6-12个小时，固定完之后由病理医生进行取材。
所谓的取材指把标本取出放在标本盒里，置于全自动脱水机中脱水16个小时处理标本。
处理过程包括组织进行固定、透明、脱水、浸蜡，处理完16个小时之后，病理技师把标本拿到包埋机上进行包埋，把病变组织放在蜡里，包埋成病理蜡块。
蜡块包埋完之后，病理技师把蜡块放在切片机上进行切片，切片大约需要切3-4μm的切片。
切完片子需要捞在病理玻片上，玻片再进行脱蜡，放在二甲苯中需要透明，之后放在全自动染色机中进行染色，再放在封片机里进行封片，这样才能制成病理切片，这个过程一般需要2-3天的时间。
医院病理科病理切片操作规范
医院病理科病理切片操作规范病理切片是病理科诊断疾病的重要步骤之一，因此，对于病理切片操作应该遵循以下规范：2.标本固定：对于切片需要的组织标本，需要及时进行固定以防止组织脱落和变形。
通常使用10%的中性缓冲福尔马林进行固定，固定时间应根据样本大小和类型进行调整，以确保组织固定充分。
3.标本处理：接受标本后，需要进行适当的标本处理。
对于组织标本，应进行组织去水、蜡浸渍等处理，确保标本组织的切片质量。
对于细胞标本，应进行细胞离解和离心等处理。
4.病理切片制作：对于组织标本，制作病理切片通常采用甩片法或旋片法。
在制作切片之前，需要使用切片机对刀片进行清洗和消毒，并根据需要调整切片机的切片厚度。
确保制作的病理切片的厚度均匀一致。
5.切片染色：病理切片制作完成后，需要进行染色。
常用的染色方法包括苏木精-伊红染色、血液学染色、免疫组化染色等。
染色时，需要严格按照染色试剂的使用说明进行操作，确保染色的质量和结果的准确性。
6.切片质量控制：在病理切片操作过程中，需要进行质量控制以确保切片的质量。
包括检查切片的厚度、颜色、染色效果等。
对于染色不好或有问题的切片，需要重新制作。
7.切片保存和归档：制作完的病理切片需要进行保存和归档。
切片应放置在干燥、阴凉而通风良好的地方，避免切片暴露在阳光下，防止切片变形和褪色。
8.切片质量评估：对于制作的病理切片进行质量评估，包括切片的清晰度、染色的均匀性、细胞结构的完整性等。
评估结果可以作为诊断和治疗的参考。
总结：病理切片操作规范是病理科工作中非常重要的一环，合理规范的操作可以保证病理切片的质量，提高疾病的诊断准确性。
因此，医院病理科应该建立标本接受和登记制度，对标本进行适当处理，制作和染色病理切片，对切片进行评估和保存。
同时，医院病理科还应定期进行切片质量控制，提高切片的质量。
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病理切片制作过程及注意事项
简介
病理切片是病理学中非常重要的工具，它能够帮助医生做出准确的诊断。
本文将详细介绍病理切片的制作过程以及需要注意的事项。
制作过程
步骤1：组织取材
•选择适当的组织进行切片制作；
•确保组织样本取材的准确性和代表性。
步骤2：固定组织
•使用合适的固定剂固定组织样本，如福尔马林；
•确保固定时间和固定剂的浓度符合要求。
步骤3：脱水与清洁
•将固定的组织放入酒精溶液中进行脱水处理；
•清洁组织以去除固定剂和杂质。
步骤4：组织包埋
•将脱水的组织置于熔蜡中进行包埋；
•确保组织完全包裹，避免产生气泡。
步骤5：切片制作
•使用专用的切片机将包埋的组织切成薄片；
•控制切片的厚度和形状，确保质量。
步骤6：染色
•使用合适的染色剂对切片进行染色，如血液样本使用血液染色剂；•控制染色时间和染色剂的浓度，确保染色效果。
步骤7：封片
•将切片放在载片上，使用专用胶水将其封闭；
•确保切片和载片的牢固性。
步骤8：质量控制
•检查切片的质量，包括切片厚度、染色效果等；
•确保切片符合病理学的要求。
注意事项
注意事项1：安全
•在病理切片制作过程中，要注意使用个人防护装备，如手套、口罩等；•避免接触有害化学物质，如福尔马林。
注意事项2：操作规范
•按照病理切片制作的标准操作流程进行，确保结果的准确性；
•遵守操作规范，减少操作失误的风险。
注意事项3：仪器维护
•定期对切片机等相关仪器进行维护保养；
•确保仪器的正常工作状态，减少故障的风险。
注意事项4：质量控制
•对制作的病理切片进行质量控制，如切片的厚度、染色的均匀性等；•确保制作出的病理切片符合质量要求。
注意事项5：记录保存
•对制作的病理切片进行记录，包括样本信息、制作过程、染色方法等；
•妥善保存记录，方便后续查阅和追溯。
结论
病理切片的制作过程需要经过多个步骤，每个步骤都需要严格操作和控制。
同时，要注意安全、遵守操作规范、定期维护仪器，并进行质量控制和记录保存。
只有这样，才能制作出高质量的病理切片，为病理学的研究和诊断提供可靠的依据。