免疫学实验方法
免疫学实验方法
免疫学实验方法免疫学实验方法是免疫学研究的重要部分，它通过一系列的技术手段来识别、分析免疫系统中的各种生物分子、细胞和组织，以及它们之间的相互作用。
这些方法在免疫学领域广泛应用于疾病诊断、药物研发、疫苗研究等方面，对促进免疫学的发展和应用发挥了重要作用。
下面将介绍一些常用的免疫学实验方法。
一、ELISA法ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种用于检测抗体或抗原的免疫学实验方法。
该方法通过将待测抗体或抗原与固相物质结合，再加入酶标记的二抗来进行标记，最后通过酶底物的底物变色反应或荧光底物的发光反应来检测待测抗体或抗原的存在量。
二、流式细胞仪流式细胞仪是一种用于分析和计数悬浮细胞的仪器，它利用激光照射细胞，通过细胞膜上的特异性抗体标记来检测细胞的表面标记物和内部细胞器的性质和分布，对免疫细胞的表型和功能进行高效的分析。
三、免疫印迹法免疫印迹法是一种用于检测蛋白质的免疫学实验方法，通过电泳将待测蛋白分离，再将其转移到膜上，最后使用特异性抗体和标记的二抗来检测待测蛋白的存在量和大小。
四、免疫组化法免疫组化法是一种用于检测组织中特定蛋白的免疫学实验方法，通过将组织切片后进行脱水、脱脂和脱水处理，再使用特异性的抗体来标记待测蛋白，并观察标记物的颜色变化或发光情况来确定蛋白的位置和表达量。
五、免疫沉淀法免疫沉淀法是一种用于检测蛋白相互作用的免疫学实验方法，通过将待测抗体与蛋白结合，再使用蛋白A/G琼脂糖或磁珠等材料将蛋白抗原免疫沉淀下来，最后使用核酸酶或质谱技术来分析蛋白的互作关系。
以上介绍的是一些常用的免疫学实验方法，它们在免疫学研究中起着举足轻重的作用，不仅在科研领域有重要应用，同时在临床诊断和治疗中也有着广泛的运用。
希望以上内容能够对您有所帮助。
免疫学实验
免疫学实验免疫学实验是研究机体免疫系统的功能和特性的重要手段之一。
通过实验的方法可以深入理解免疫系统的工作机制，探究免疫应答过程中的各种分子、细胞和组织的相互作用，以及相关疾病的发生机制。
本文将介绍几种常见的免疫学实验和它们的应用。
流式细胞术是一种常用的免疫学实验方法，主要用于研究细胞表面标记物的表达和免疫细胞亚群的鉴定。
该技术利用荧光染料或荧光标记的抗体与待测细胞进行结合，然后通过流式细胞仪进行细胞的快速单细胞分析和排序。
通过该方法，可以同时检测多个细胞表面标记物的表达水平，并且能够得到高度纯化的特定亚群细胞。
这种技术在免疫学研究中广泛应用，例如在研究癌症、感染病和自身免疫性疾病等方面发挥了重要作用。
酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种敏感、特异、定量的免疫学实验技术，用于检测样本中特定抗原或抗体的存在和浓度。
该方法利用特异性的抗原-抗体反应，将待测物质与固相或液相检测试剂结合，然后通过酶标记的二抗或底物染色等方法来定量检测。
ELISA广泛应用于免疫学研究和临床诊断中，例如用于检测HIV抗体、乙肝病毒表面抗原等。
免疫组化是一种常用的研究组织或细胞中特定分子的表达和定位的免疫学实验方法。
该方法利用特异性的抗体与待测物进行特异性结合，然后通过染色或荧光探针等方法来可视化该分子在组织或细胞中的位置和分布。
免疫组织化学在癌症研究、器官发育和免疫细胞分析等方面具有广泛的应用。
细胞毒性实验是用于评估某种物质对细胞的毒性作用的免疫学实验方法。
通过将待测物质与靶细胞共培养，观察细胞的形态变化、增殖能力、凋亡率等指标，从而评估待测物质对细胞的毒性水平。
细胞毒性实验在药物筛选、环境污染评估和基础研究中有重要应用价值。
以上介绍了几种常见的免疫学实验和它们的应用。
这些实验方法在免疫学研究和临床诊断中起着重要作用，为我们深入了解免疫系统的工作机制和相关疾病的发生机制提供了有力的工具。
通过不断改进和发展这些实验方法，我们将能够更加全面、精确地揭示免疫系统的奥秘，进一步推动免疫学科的发展。
免疫学方法
免疫学方法免疫学是研究生物体对抗外源性病原体和异物的免疫应答机制的科学。
免疫学方法是研究免疫学过程和免疫学问题的一种手段，主要包括免疫学实验方法、免疫学检测方法和免疫学治疗方法等。
本文将从这几个方面对免疫学方法进行介绍。
一、免疫学实验方法。
1. 免疫细胞分离和培养。
免疫细胞分离和培养是研究免疫细胞生物学特性的重要方法。
通过离心、梯度离心、磁珠分选等技术，可以分离出各种免疫细胞，如T细胞、B细胞、巨噬细胞等，并进行体外培养，用于进一步的实验研究。
2. 免疫组化技术。
免疫组化技术是利用抗体与抗原特异性结合的原理，通过染色或荧光标记等方法来检测组织中特定抗原的分布和表达情况。
这项技术在病理诊断、免疫细胞定位等方面有着广泛的应用。
3. 免疫沉淀技术。
免疫沉淀技术是利用抗体与抗原特异性结合的原理，通过将抗体与抗原结合后沉淀下来，从而分离出特定的蛋白质或复合物。
这项技术在蛋白质相互作用、蛋白质结构分析等方面有着重要的应用。
二、免疫学检测方法。
1. ELISA法。
ELISA法是一种常用的免疫学检测方法，通过将待检样品中的抗原或抗体与固相载体上的特异性抗体或抗原结合，再加入酶标记的二抗或底物，通过酶的催化作用产生可检测的信号，从而进行定量或半定量的检测。
2. 免疫印迹法。
免疫印迹法是通过将待检样品中的蛋白质分离、转膜到膜上，然后用特异性抗体结合，最后通过化学发光或染色等方法来检测特定蛋白质的存在和表达水平。
3. 流式细胞术。
流式细胞术是一种利用流式细胞仪对细胞进行快速、高通量的检测和分析的方法，可以用于细胞表面标记物的检测、细胞周期分析、细胞凋亡检测等。
三、免疫学治疗方法。
1. 免疫抑制剂。
免疫抑制剂是一类能够抑制免疫系统功能的药物，常用于器官移植术后的免疫抑制治疗，以防止移植物排斥反应。
2. 免疫增强剂。
免疫增强剂是一类能够增强免疫系统功能的药物或治疗方法，常用于免疫功能低下或免疫缺陷性疾病的治疗，以增强机体抵抗能力。
免疫elisa名词解释
免疫elisa名词解释
免疫 Elisa 是一种用于检测抗体或细胞因子的免疫学实验方法。
在 Elisa 中，样本中的抗体或细胞因子与固相载体上的抗原或抗体结合，形成复合物。
然后加入酶标记的第二抗体，使其与复合物结合。
最后，使用底物溶液检测酶标记的第二抗体，形成可见信号。
免疫 Elisa 是一种常用的免疫学实验方法，可以用于检测各种疾病和药物的疗效。
该方法具有高灵敏度、高特异性和高精度的特点，可以用于检测血液中病原体的抗体、自身免疫性疾病的抗体和细胞因子等。
在 Elisa 中，固相载体的选择和制备非常重要。
常用的固相载体包括膜、板、珠和微球等。
其中，膜和板是最常用的固相载体。
膜通常用于检测细胞内抗体和细胞因子，而板则通常用于检测血液中的抗体和细胞因子。
此外，在免疫 Elisa 中，抗体和细胞因子的选择也非常重要。
通常需要选择与目标抗原或抗体高度匹配的抗体或细胞因子。
同时，为了确保实验结果的准确性和可靠性，还需要对实验进行严格的质量控制和实验流程优化。
总结起来，免疫 Elisa 是一种非常重要的免疫学实验方法，可以用于检测各种疾病和药物的疗效。
在应用 Elisa 时，需要严格遵循实验流程和规范，以确保实验结果的准确性和可靠性。
免疫学实验 免疫比浊(免疫球蛋白的测定)
3 免疫胶乳比浊法
原理
选择一种大小适中，均匀一致的胶乳颗 粒，吸附抗体后，当遇到相应抗原时，则 发生凝集，单个胶乳颗粒在入射光波长之 内，光线可透过，当两个胶乳凝集时，则 使透过光减少。这种减少的程度与胶乳凝 集成正比，与抗原量成正比。
（a）带抗体的胶乳在波长之内可透过光线； （b）结合后，则形成光线衰减
2. 海德堡（heidelberger）曲线理 论
2 抗体的质量
（1）特异性高 （2）效价高 （3）亲和力高 （4）抗血清来源
3 抗原抗体反应的溶液
• pH 6.5~8.5
• 电解质 离子强度、种类（磷酸盐缓冲液）
4 增浊剂的使用
• PEG、tween-20等非离子型亲水 剂
• 作用：消除蛋白质分子周围的电子 云和水化层，促进抗原、抗体分子 靠近，结合形成大分子复合物。
（二）类型
1. 透射免疫比浊法 2. 散射免疫比浊法 3. 免疫胶乳比浊法
1 透射免疫比浊法
原理：
抗原抗体在一定缓冲液中形成免疫复合物 (IC)，当光线透过反应溶液时，由于溶液内复 合物粒子对光线的反射和吸收，引起透射光减 少，免疫复合物量越多，透射光越少，即光线 吸收越多，可用吸光度表示。吸光度和复合物 的量成正比，当抗体量固定时，与待检抗原量 成正比。用抗原标准品建立标准曲线，可测出 待检抗原含量。
•
样本管吸光度
• 浓度＝————————×校准液浓度（g/L）
•
校管吸光度
• 结果及讨论
– 检测报告 – 检测意义
实验二、免疫浊度测定 ——免疫球蛋白检测
实验步骤见说明书 IgG9.77g/L IgA1.72g/L IgM1.37g/L
沉淀反应
微生物与免疫教研室
各种免疫学方法
各种免疫学方法
免疫学中有很多种方法，以下列举其中一些：
1. 免疫细胞分离和培养：通过离心和分层技术，可以从体内分离出免疫细胞，如淋巴细胞、单核细胞等，并在体外培养它们以进行后续实验。
2. 免疫组化和免疫荧光：这些技术用于检测和定位免疫细胞和抗原在组织中的分布。
通过使用特定的抗体标记，可以在显微镜下观察到这些标记物。
3. 流式细胞术：这是一种常用的技术，用于分析和鉴定免疫细胞的表型和功能。
通过使用荧光标记的抗体，可以通过流式细胞仪检测和分离特定的细胞亚群。
4. 免疫沉淀和免疫印迹：这些技术用于检测和分离特定的蛋白质。
通过与目标蛋白质特异性结合的抗体，可以将其从复杂的混合物中分离出来，并通过免疫印迹技术进行检测。
5. 免疫基因学：这是通过研究免疫相关基因的表达和功能来了解免疫系统的方法。
包括使用PCR、实时荧光定量PCR和基因敲除等技术。
6. 酶联免疫吸附试验：这是一种常用的免疫学检测方法，通过将待测抗原或抗体与酶结合，再利用酶的催化作用对待测抗原或抗体进行放大信号反应，以提高检测的灵敏度。
7. 血清凝集试验：这是一种检测抗原或抗体的方法，通过将待测血清与已知抗原或抗体在体外进行反应，观察是否发生凝集现象来判断待测血清中是否存在相应的抗原或抗体。
8. 补体激活试验：这是一种检测补体系统活性的方法，通过观察补体系统被激活后对病原微生物的杀伤作用来评估机体的免疫功能。
9. 疫苗接种：通过接种疫苗来激发机体产生特异性免疫反应，以提高机体的免疫力，预防相应的疾病。
以上各种免疫学方法各有特点，适用于不同的应用场景。
在实际应用中，应根据具体情况选择合适的方法。
医学免疫学实验技术
医学免疫学实验技术医学免疫学实验技术是研究和应用免疫学原理和方法的一门学科。
它主要通过实验手段来观察和分析生物体对外界抗原的免疫反应，从而揭示机体的免疫机制和疾病发生发展的规律。
本文将从实验技术的基本原理、常用实验方法和应用领域等方面进行介绍。
一、实验技术的基本原理免疫学实验技术的基本原理是利用生物体对抗原的特异性免疫反应来检测、分离和定量抗原或抗体。
根据抗原和抗体的相互作用原理，可以通过免疫沉淀、电泳、免疫荧光、酶联免疫吸附等方法来分离和检测抗原或抗体。
同时，还可以利用免疫反应的特异性和高度敏感性来检测和定量微量物质。
二、常用实验方法1. 免疫沉淀法：该方法利用抗原与抗体的特异性结合，将抗原-抗体复合物与载体（如蛋白A、蛋白G等）结合，经过离心沉淀后，可以分离出抗原和抗体。
2. 免疫电泳法：该方法将待测样品经过电泳分离后，利用抗体与目标抗原的结合，形成免疫沉淀带。
通过电泳分离的方式，可以实现对不同抗原的检测和分离。
3. 免疫荧光法：该方法利用荧光标记的抗体与待测样品中的抗原结合，通过荧光显微镜观察荧光信号的强弱来检测抗原的存在和定量。
4. 酶联免疫吸附法：该方法利用酶标记的抗体与待测样品中的抗原结合，通过酶的催化作用，将底物转化为可见的产物，从而实现对抗原的检测和定量。
三、应用领域医学免疫学实验技术在临床诊断、疾病预防和药物研发等领域具有广泛的应用价值。
1. 临床诊断：免疫学实验技术可以用于检测和诊断各类感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤等。
例如，通过检测患者体液中的特定抗体或抗原，可以判断患者是否感染了某种病原体或患有某种疾病。
2. 疾病预防：免疫学实验技术可以用于疫苗的研制和评价。
通过检测疫苗接种后患者体内产生的特定抗体水平，可以评估疫苗的免疫效果，并为疫苗的改良和研发提供依据。
3. 药物研发：免疫学实验技术可以用于药物的研发和评价。
通过检测药物对免疫反应的影响，可以评估药物的免疫调节作用和毒副作用，为药物研发提供参考。
免疫学检验的基本原理与方法
免疫学检验的基本原理与方法免疫学检验是一种常见的实验室技术，在医学、生物学等领域具有广泛的应用。
本文将介绍免疫学检验的基本原理和常用的方法，并探讨其在疾病诊断、病毒检测和药物研发中的应用。
一、免疫学检验的基本原理免疫学检验基于机体免疫系统的特性，利用抗原与抗体之间的特异性结合反应来检测和定量分析抗原或抗体的存在。
其基本原理如下：1. 特异性识别：抗体可以识别并结合与之对应的抗原，形成特异性的抗原-抗体复合物。
2. 高度敏感性：免疫学检验可以检测极低浓度的抗原或抗体，提供高度敏感的结果。
3. 双重验证：通过采用一对互补的抗原和抗体，可以用于验证检测结果的准确性。
二、常见的免疫学检验方法在免疫学检验中，常用的方法包括酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫印迹（Western Blotting）、免疫荧光等。
下面将对这些方法进行具体介绍：1. 酶联免疫吸附实验（ELISA）ELISA是一种常见且广泛应用的免疫学检验技术。
它利用酶标记的抗体与待检测样品中的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标记物复合物。
通过添加底物，酶标记物能够催化底物的反应，产生可测量的信号。
ELISA可用于定量或半定量测定目标物的浓度，并可应用于多种领域，如感染性疾病的诊断、蛋白质的定量等。
2. 免疫印迹（Western Blotting）免疫印迹是一种常用于检测特定蛋白质的免疫学技术。
该方法通过将复杂的蛋白质混合物经SDS-PAGE电泳分离后，将之转移到固体载体上。
然后，用特异性抗体与目标蛋白质结合，并通过酶标记的二抗与一抗结合，产生可见的信号。
免疫印迹可用于诊断疾病、检测蛋白质相对分子质量和检测表达水平等。
3. 免疫荧光免疫荧光是一种利用抗体对荧光染料标记的抗原进行特异性识别的免疫学技术。
该技术通过与荧光探针结合并激发荧光信号，来检测细胞或组织中特定抗原的定位和表达。
免疫荧光广泛应用于免疫组织化学、细胞信号转导、病毒感染等领域，可用于研究细胞和组织的结构、功能以及疾病的发生机制。
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1）形态计数法
2）3H-TdR或125I-UdR掺入法
放射性元素 wash
Stimulate
Assay
3）MTT（噻唑蓝）比色法 MTT是一种可接受氢离子的淡黄色唑氮盐染料，被
活细胞线粒体呼吸链中的琥珀酸脱氢酶和细胞色素
还原，生成不溶于水的深紫色结晶产物甲簪。因此
甲簪的生成量仅与活细胞数目成正比。细胞增殖速
三. 制备SDS－PAGE胶
四. 转移电泳及免疫印迹
五. 结果分析-用Western Blot 图片灰度分析软件
imageJ或Quantity One
免疫学三大工具比较
• 免疫荧光是融合了免疫学原理（抗原抗体特异性结合）和荧 光标记技术，通过荧光激发，来对组织（细胞）内抗原进行
定位、定性及定量的研究（主要是定位）。样本是细胞或组
• 免疫组化和ELISA所用到的原理大致相同，只 是因为所检测的样品不同，从而在操作方法上 有所不同。ELISA多用于定量分析，其灵敏度 非常高。 • Western Boltting 先要进行SDS-PAGE，然后 将分离开的蛋白质样品用电转仪转移到固相载 体上，而后利用抗原-抗体-标记物显色来检测 样品，可以用于定性和半定量。
假阴性结果。
• 双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大
分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单
价抗原，因其不能形成两位点夹心 。
间接法测抗体
☆ 间接法是检测抗体最常用的方法。 ☆ 原理：利用酶标记的抗体检测已与固相结合的
受检抗体，故称为间接法。
☆ 操作步骤：
（1）将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原，
用于临床检验的ELISA主要有以下几 夹心法 双抗原夹心法测抗体 • 间接法测抗体（常用）
竞争法测抗原
• 竞争法 竞争法测抗体 • 捕获包被法测抗体 • 亲和素-生物素 ELISA法
双抗体（原）夹心法测抗体
双抗原夹心法
双抗体夹心法
*
待测抗体
*
酶标抗原
酶标抗体
洗涤。
（2）加稀释的受检样本，其中的特异抗体与固相抗原
结合，形成固相抗原抗体复合物，孵育洗涤。
（3）加酶标抗体：与固相复合物中的抗体结合，从而
使该抗体间接地标记上酶，孵育洗涤。
（4）加底物显色：颜色深度代表标本中受检抗体的量
。
☆间接法的特点 • 本法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病 的诊断。 • 间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一 酶标抗体检测相应抗体。 • 间接法成功的关键在于抗原的纯度。特别应注意 除去能与一般健康人血清发生反应的杂质。若抗 原中含有无关蛋白，也会因竟争吸附而影响包被 效果。
抗原或抗体的酶标记 * *
•用途：目标蛋白的定性或定量分析
ELISA三个必要试剂：
（1）固相的抗原或抗体，
即"免疫吸附剂"（immunosorbent）;
（2）酶标记的抗原或抗体， 称为"结合物"（conjugate）； （3）酶反应的底物。
ELISA基本的实验过程： a.包被 b.抗原抗体反应 c.酶促反应,显色 d.终止显色，读取数据。 对照和标准曲线： 阳性对照 阴性对照 定量测定：标准品制作标准曲线 待测样品的合理稀释
ELISPOT（酶联免疫斑点法）
方法是用抗原包被固相，然后加入抗原特异性B细胞。如果 B细胞产生抗体，抗体与班上的抗原结合。加入二抗和显色 剂就会显色。一个斑点就代表一个产生抗体的细胞。
此法的主要优点是:
① 稳定、特异，且抗原用量少；
②与ELISA联合使用，可同时检测不同抗原诱导的抗体分泌
，并可定量测定； ③可检测组织切片中分泌抗体的单个细胞。
结果判断 • 设立实验对照:阳性对照和阴性对照
• 阳性细胞显色分布:胞质型、胞核型和膜表面型
TNFR1–/–
TNFR1–/–/TNFRR2–/–
Figure 3. mTNF induces infiltration of innate immune cells and angiostasis in tumors from TNFR1–/– but not TNFR1–/–/R2–/– mice. and CD31+ (E and F) cells as indicated. G and H, for confocal microscopy analysis, tissue sections were stained with Cy3-labeled anti-CD31 for blood vessel endothelial cells (green) and the VasoTACS in situ kit to detect apoptosis (red). Arrows, apoptotic endothelial cells in the tumor.
ELISA与Western Blotting比较
• WB可以看到特异性的条带，但是定量比较麻烦； • ELISA可以直接读出浓度，但是如果抗体有非特异性结合，那 得到的数值就不可信； • WB只能半定量,但是可以检测细胞膜蛋白,这点ELISA做不到； • WB所检测的一般是抗原，而ELISA抗原抗体都可以检测； • WB所检测的抗原可以知道其分子量的大小，或是否是多聚体 、降解产物等，一句话，WB可以确定所用抗体是与那种蛋白 起作用的；而ELISA无能为力； • WB一次处理量就是一块胶版，10-20个样品最多了。ELISA一 块96孔板一次可以处理96个样本，可以设置多个复孔、对照 、梯度样等来提高检测的可信度。
免疫学试验方法
Commonly used immunological methods
免疫
识别和清除抗原性异物
可能有利，也可能有害
免疫应答
免疫系统具有区别“自己”和“非己”的能力
免疫耐受
免疫学检测与免疫学技术
一、抗原抗体的检测技术 二、免疫细胞的检测 三、细胞因子的检测-ELISA 四、免疫组织化学 五、免疫印迹技术 –Western Blotting 六、 流式细胞术 七、PCR技术 八、基因沉默技术
四、免疫组织化学 Immunohistochemistry 原理：抗原抗体反应，抗体标记技术（荧光、酶）
用途：组织或细胞内抗原的定性和定位
流程：
免疫荧光技术（immunofluorescence ，IF）
• 定义：将免疫学方法（抗原抗体特异结合）与荧
光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内
分布的方法。
度越快，则甲簪生成的量越多，吸光度越高；细胞
毒性越大，则甲簪生成的量越少，吸光度越低。
MTT实验流程
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。 2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验 每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数 量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等 因素确定)。 3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予010微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子
• 原理：根据抗原抗体反应的原理，先将已知的
抗原（抗体）标记上荧光素制成荧光标记物， 再用这种荧光标记物作为分子探针检查细胞或 组织内的相应抗原（或抗体）。在细胞或组织 中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，荧光 素受激发光的照射而发出明亮的荧光，可以看 见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗 体的性质、定位，以及利用定量技术测定含量 。
（2）巨噬细胞吞噬试验：将待测巨噬细胞与某种可
被吞噬又易于计数的颗粒性物质（如鸡红细胞）混
合温育后，颗粒物质被巨噬细胞吞噬，根据吞噬百
分率即可反映巨噬细胞的吞噬能力。
三、细胞因子的检测
酶联免疫吸附试验-ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay
•基础: 抗原或抗体的固相化
细胞密度：
每毫升培养基中活细胞的个数=每个方块内细胞的平 均数×细胞稀释比例×104
1 mm2×0.1 mm = 0.1 mm3 = 10-4cm3 = 10-4 ml
(二)免疫细胞功能的测定
1．T细胞功能测定
（ 1 ） T 淋巴细胞增殖试验： T 细胞受到特异性抗原
或有丝分裂原（PHA、ConA）刺激后可发生增殖，
织，要在显微镜下观察结果，可能出现膜阳性、质阳性和核 阳性。 • ELISA用到了免疫学原理和化学反应显色，待测的样品多是 血清、血浆、尿液、细胞或组织培养上清液，因而没有用到
组织包埋、切片等技术，这是与免疫组化的主要区别，操作
上 开始需要将抗原或抗体结合到固相载体表面，从而使后来 形成的抗原-抗体-酶-底物复合物粘附在载体上，这就是“吸 附”的含义。
细胞，又可测定抗体分泌量的体外实验方法。
详细见后述
3．细胞毒试验
细胞毒实验技术是检测 CTL 、 NK 等细胞杀伤靶
细胞活性的一种细胞学技术。主要用于肿瘤免疫、
移植排斥反应和病毒感染等方面的研究。
（1）放射性核素释放法：(51Cr、125I—UdR)
51Cr
release
CTL
51Cr
labeled
Target cell CTL
Target cell
Assay Cr51 release
Target cell
（2）乳酸脱氢酶释放法：细胞受损，LDH释放，
LDH在催化乳酸生成丙酮酸的同时将NAD+还原成
NADH 。后者再通过递氢体 - 吩嗪二甲酯硫酸盐
(PMS) 还原碘硝基氯化氮唑蓝 (INT) 或硝基氯化四 氮唑蓝(NBT)形成有色的甲簪类化合物，在490nm 或570nm波长处读取的OD值，经计算即可得NK细 胞活性. （3）MTT比色分析法