色谱参数及色谱图方面的术语
有关色谱保留的基本术语及参数

固定相的粒径
固定相的粒径大小影响色谱分离的效 率和分离度,粒径越小,分离效率越 高,但同时也会增加柱压和减少柱寿 命。
流动相的性质
流动相的选择
流动相的选择对色谱分离效果也 有重要影响,需要根据不同物质 的性质选择合适的流动相。
流动相的极性
流动相的极性影响物质的溶解度 和在固定相上的吸附力,极性强 的流动相有利于极性物质的分离 。
优化分离时间的方法
可以通过提高流速、减少进样量、选择合适 的色谱柱和检测器等方法来缩短分离时间。
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峰宽
峰宽(Peak Width)
色谱峰的高度与基线之间的距离,用于衡量色谱峰的宽度。
峰宽计算公式
$W = frac{H}{2sqrt{2ln 2}}$,其中$H$为色谱峰的高度。
塔板数
塔板数(Number of Plate):用于衡量色谱柱对物质的分 离能力。
塔板数计算公式:$N = frac{16pi^2mu L}{E^2Delta t}$, 其中$mu$为流动相流速,$L$为色谱柱长度,$E$为扩散系 数,$Delta t$为保留时间差。
03
在实际应用中,可以通过实验条件优化,如调整温度、流速等
,来提高分离效果和分离速度。
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色谱参数
分离度
分离度(Resolution,R)
相邻两色谱峰之间距离与峰底宽度的比值,用于衡量色谱峰的分离程度。
分离度计算公式
$R = frac{2(t_{2} - t_{1})}{W_{1} + W_{2}}$,其中$t_{2}$和$t_{1}$分别为相邻 两峰中后峰和前峰的保留时间,$W_{1}$和$W_{2}$分别为相邻两峰的峰底宽度 。
后延峰
液相色谱基本概念和术语

Ⅱ基本概念和理论一、基本概念和术语1.色谱图和峰参数⊕色谱图(chromatogram)--样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile).⊕基线(base line)--流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。
一般应平行于时间轴。
⊕噪音(noise)――基线信号的波动。
通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。
⊕漂移(drift)基线随时间的缓缓变化。
主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
⊕色谱峰(peak)--组分流经检测器时相应的连续信号产生的曲线。
流出曲线上的突起部分。
正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线(高斯Gauss曲线)。
不对称色谱峰有两种:前延峰(leading peak)和脱尾峰(tailing peak )。
⊕拖尾因子(tailing factor,T)T=B/A,用以衡量色谱峰的对称性。
也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor)《中国药典》规定T应为0.95~1.05。
T<0.95为前延峰,T>1.05为拖尾峰。
⊕峰底――基线上峰的起点至终点的距离。
⊕峰高(Peak height,h)――峰的最高点至峰底的距离。
⊕标准偏差(standard deviation, σ)--正态分布曲线x=±1时(拐点)的峰宽之半。
正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。
⊕峰宽(peak width,W)--峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。
W=4σ。
⊕半峰宽(peak width at half-height,W h/2)--峰高一半处的峰宽。
W h/2=2.355σ。
⊕峰面积(peak area,A)――峰与峰底所包围的面积。
色谱图上的一般性术语

6、色谱图上的有关术语:
它的纵坐标一般是表示检测的信号强弱,与色谱柱流出组分的浓度成正比。
横坐标表示从进样开始至峰最高处的分析时间(时间乘载气流速等于体积,横坐标也可以体积单位表示)。
基线:在操作条件下,未进样品只有载气通过系统时,信号随时间变化的曲线。
正常稳定的情况下,基线是一条直线。
峰高:峰的最高点距基线的垂直距离。
图1-1中AB线段,以h表示。
峰高可以作为定量指标,它与操作条件、样品浓度和进样量以及检测器的灵敏度有关。
峰宽:色谱计算中常用半峰宽来表征色谱过程峰展宽的程度,以W1/2h表示,即图1-1中的aa’线段。
高斯峰的W h=2.354δ。
另一个常用来表征峰展宽的指
标是峰底宽,又称基线宽度,以W b表示,高斯峰的W b=4δ(高斯峰的宽度是用它的标准偏差δ来表示,它的值是0.607h处峰宽的一半。
2.1、死时间、保留时间、调整保留时间和相对保留时间。
死时间:以t M表示,它的定义是不被固定相溶解或吸附的化合物,从进样开始至流出峰最高点的时间。
当色谱系统(包括柱、柱温及仪器)给定。
t M只受载气流速的影响。
就好比上面的比拟中A船的时间。
在色谱分析中特别是毛细管柱色谱分析中,测定t M值是必要的。
用热导检测器时,常用空气来测定t M值;用氢焰离子化检测器时可用甲烷测定t M值。
因空气或甲烷在大多数固定液上近似不被保留。
如果已知同系物中三个组分的保留时间也可以计算相应条件下的t M值。
保留时间:被保留化合物(溶质)从进样开始至流出峰最高点的时间,称保留时间,用t R表示。
有关色谱图的一些术语

从各种色谱仪(包括毛细管电泳仪)上得到的色谱图横坐标均为与流动相有关的信息,一般为流动相流动时间或流动相流出体积;纵坐标均为与流动相中被分离组分含量有关的信息,一般为检测器的响应值。
因此,从每一张色谱图上可以得到每个色谱峰的流出时间(或出峰时流动相流出体积)和该色谱峰在检测器上的响应强度这两个基本信息(数据)。
根据这两个基本信息,结合其他一些方法,就可以对这一色谱峰进行定性和定量的分析。
为了规范色谱图中出现的一些术语,国家标准局制定了有关色谱图的一些术语,现介绍如下:1.色谱图(chromatogram):色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或流动相流出体积的曲线图(见图)。
2.(色谱)峰[(chromatographic)peak]:色谱柱流出组分通过检测器系统时产生的响应信号的微分曲线。
3.峰底(peak base):从峰的起点与终点之间的连接直线(见图中的CD)。
4.峰高( h)(peak height):从峰高最大值到峰底的距离(见图中的BE)。
5.峰宽(W)(peak height):在峰两侧拐点(见图中的F,G)处所作切线与峰底相交两点间的距离(见图中的KL)。
6.半高峰宽(Wh/2)(peak width at half height:通过峰高的中点作平行于峰底的直线,此直线与峰两侧相交两点间的距离(见图中的HJ)。
7.峰面积(A)(peak area):峰与峰底之间的面积(见图中的CHEJDC)。
8.拖尾峰(tailing peak):后沿较前沿平缓的不对称峰。
9.前伸峰(leading peak):前沿较后沿平缓的不对称峰。
10.假峰(ghost peak):并非由试样所产生的峰。
11.畸峰(distorted peak):形状不对称的峰,如拖尾峰、前伸峰。
12.基线(haseline):在正常操作条件下仅有流动相通过检测器系统时产生的响应信号的曲线。
13.基线漂移(baseline drift):基线随时间定向的缓慢变化。
气相色谱中常用的术语和参数

1.典型的色谱图在用热导检测器时,往色谱仪中注入带有少量空气的单一样品时,得到图1-3-4的典型气相色谱图。
在图1-3-4中当没有样品进入色谱仪检测器时0t是噪声随时间变化的曲线,一般是一条直线,叫作“基线” 。
h是峰高,其他符号将在后边解释。
2. 区域宽度区域宽度是色谱流出曲线中很重要的参数,它的大小反映色谱柱或所选色谱条件的好坏。
区域宽度有以下三种表示方法:(1)半高峰宽(peak width at half height)(Wh/2)是在峰高一半处的色谱峰的宽度,即图 1-3--2中的CD ,单位可用时间或距离表示。
(2)峰宽(peak width)(W )是在流出曲线拐点处作切线,在图1-3-2中于基线上相交于E,F 处,此两点间的距离叫峰宽,有些色谱书上叫做“基线宽度” 。
(3)标准偏差(σ )在图 1-3-2中AB距离的一半叫标准偏差。
在这三种表示方法中以前两者使用较多,三者的关系是:3. 保留值(retention value)保留值是总称,具体参数的名称有以下一些:(1)死时间(dead time)(tM) 一些不被固定相吸收或吸附的气体通过色谱柱的时间,如用热导池作检测器时,从注射空气样品到空气峰顶出现时的时间,以s或min为单位表示。
(2)死体积(dead volume)(Vm)指色谱柱中不被固定相占据的空间及进样系统管道和检测系统的总体积,等于死时间乘以载气的流速。
(3)死区域(dead zone)( Vg)指色谱柱中不被固定相占据的空间。
(4)保留时间(retention time)( tR)从注射样品到色谱峰顶出现时的时间,以s或min为单位表示。
(5)调整保留时间(adjusted retention time)保留时间减去死时间即为调整保留时间(tR-tM)。
(6)保留体积(retention volume)( Vr)从注射样品到色谱峰顶出现时,通过色谱系统载气的体积,一般可用保留时间乘载气流速求得,以mL为单位表示。
第二节 色谱分析的基本术语

图中O’A’
2. 保留时间(tR)
指组分从进样开始到柱后出现浓度 最大值时所需要的时间。
保留时间取决于色谱过程的热力学因
素,在一定色谱体系和操作条件下,任何 一种化合物都有一个确定的保留时间,这 是色谱定性分析的依据。
图中O’B
3. 调整保留时间(t’R)
指扣除死时间后的保留时间。
t’R= tR- t0
ux u R.......... ......(2)
ms m M ms m M k 1 (3) mM mM mM
(3)代入(1)得 mM 1 R .......... .......( ) 4 mS mM k 1
又:试样通过柱子所时间: 需
tR
L ux L u
(七)几种色谱参数间的关系
设:柱中流动相的流速为 u
试样分子X的平均线速为 ux 色谱柱柱长为 L
试样分子X分配到流动相的分数为 R
则
mM mM R .......... ..........1) ( m总 m S m M
显然,ux的大小取决于样品分子X分配在
流动相中的分数R和流动相的线速度u,即:
' t R t0 t R tR k 1 .......... ........( ) 7 t0 t0 t0
(7) 式提供了从色谱图上直接计算分配比 (k) 的方法。 它指出 k 是组分的调整保留时间与死时间之比。
(八)色谱基本保留方程
VR VM KVS
自己推导 此方程
分配系数不同的各组分具有不同的 保留值,因而在色谱图上有不同位置的 色谱峰。 VS: 固定相的体积 VM: 流动相的体积
最新整理HPLC的常用术语解释

H P L C的常用术语解释高效液相色谱法(H i g h P e r f o r m a n c e L i q u i d C h r o m a t o g r a p h y\H P L C)又称高压液相色谱、高速液相色谱、高分离度液相色谱、近代柱色谱等。
它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。
接下来小编为大家整理了H P L C的常用术语解释,希望对你有帮助哦!第一部分色谱曲线1、色谱图(c h r o m a t o g r a m):色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或流动相流出体积的曲线图,或者通过适当的方法观察到的纸色谱或薄层色谱斑点、谱带的分布图。
2、(色谱)峰(c h r o m a t o g r a p h i c p e a k):色谱柱流出3、峰底(p e a k b a s e):峰的起点与终点之间的连接的直线4、峰高(h,p e a k h e i g h t):色谱峰最大值点到峰底的距离(图1中的B E)。
5、峰宽(W,p e a k w i d t h):在峰两侧拐点(图1中的F,G)处所作切线与峰底相交两点的距离6、半高峰宽(W h/2,p e a k w i t h d a t h a l f h e i g h t):通过峰高的中点作平行于峰底的直线,此直线与峰两侧相交两点之间的距离(图1中的H J)。
7、峰面积(A,p e a k a r e a):峰与峰底之间的面积8、拖尾峰(t a i l i n g p e a k):后沿较前沿平缓的不对称的峰。
9、前伸峰(l e a d i n g p e a k):前沿较后沿平缓的不对称的峰。
(又叫伸舌峰、前延峰)10、假峰(g h o s t p e a k):除组分正常产生的色谱峰外,由于仪器条件的变化等原因而在谱图上出现的色谱峰,即并非由试样所产生的峰。
这种色谱峰并不代表具体某一组分,容易给定性、定量带来误差。
第二章 色谱法的原理

按上述分配过程,对于n=5,k=1,m=1的体系,随 着脉动进入柱中板体积载气的增加,组分分布在柱内任一 板上的总量(气液两相中的总质量),由塔板理论可建流 出曲线方程:
C
m n V 2 exp[ (1 ) ] 2 Vr 2 Vr
n
m为组分质量,Vr为保留体积,n为理论塔板数。 当流动相体积V=Vr 时,C值最大,即
分离度和柱效率
理论需要解决的问题:
塔板理论和速率理论都难 以描述难分离物质对的实 际分离程度。即柱效为多 大时,相邻两组份能够被 完全分离。
难分离物质对分离度的大 小受色谱过程中两种因素 的综合影响:
保留值之差──色谱 过程的热力学因素; 区域宽度──色谱过 程的动力学因素。
色谱分离中的四种情况:
① 柱效较高,△K(分配系数)较 大,完全分离; ② △K不是很大,柱效较高,峰 较窄,基本上完全分离; ③ △K较大,柱效较低,但分离的 不好; ④ △K小,柱效低,分离效果更 差。
分离度:相邻两组分色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽 总和之半的比值,(设W1=W2) 当R<1时,两峰有部分重叠; 当R=1时,分离程度可达98%;
分配系数K与分配比k的关系
cs ms / Vs Vm K k k cm mm / Vm Vs
相比率β:反映各种色谱柱型特点的参数 例如:填充柱,其β值一般为6~35; 毛细管柱,其β值为60~600。
二、 塔板理论(plate
theory)
最早由Martin等人提出塔板理论,把色 谱柱比作一个精馏塔,沿用精馏塔中塔板 的概念来描述组分在两相间的分配行为, 同时引入理论塔板数作为衡量柱效率的指 标。
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(一)色谱参数
1、死时间:不被固定相滞留的组分,从进样到出峰最大之所需的时间。
2、保留时间:组分从进样到出峰最大之所需的时间。
2.1调整保留时间:减去死时间保留时间。
2.2校正保留时间:用压力梯度校正因子修正的保留时间。
2.3净保留时间:用压力梯度校正因子修正的调整保留时间。
3、死体积:不被固定相滞留的组分,从进样到出峰最大之所需的载气体积。
4、保留体积:组分从进样到出先峰最大之所需的载气体积。
4.1调整保留体积:减去死体积的保留体积。
4.2校正保留体积:用压力梯度校正因子修正的保留体积。
4.3净保留体积:用压力梯度校正因子修正的调整保留体积。
5、比保留体积:每克固定液校正到273K时的净保留体积。
6、相对保留值:在相同操作条件下,组分与参比组分的调整保留值之比。
7、分配系数:在平衡状态下,组分在固定液与流动相中的浓度比。
8、容量因子在平衡状态时,组分在固定液与流动相中的质量之比。
9、柱效能:色谱柱在色谱分离过程中主要由动力学因素所决定的分离效能。
通常用理论板数,理论板高或有效板数表示。
9.1理论板数:表示柱效能的物理量。
9.2理论板高:单位理论板的长度。
9.3有效板数:减去死时间后表示柱效能的物理量。
10、分离度:两个相邻色谱峰的分离程度,以两个组分保留值之差与其平均峰宽值之比表示。
11、灵敏度:通过检测器的物理量变化时响应信号的变化率。
12、检测线:随单位体积的载气或在单位时间内进入检测器的组分所产生的信号等于基线噪声二倍时的量。
13、线性范围:检测信号与被测物质的量呈线性关系的范围。
14、载气流速:在色谱柱出口的温度和压力下测得并校正到柱温时的载气体积流速。
(二)色谱图及其他
1、色谱图:色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或载气流出体积
的曲线图。
2、色谱峰:色谱柱流出组分通过检测系统时所产生的响应信号的微分曲线。
3、峰底:从峰的起点与终点之间连接的直线。
4、峰高:从峰最大值到峰底的距离。
5、峰宽:在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点间的距离。
6、半峰宽:通过峰高的中点作平行于峰底的直线,此直线与峰两侧相交两点之间的距
离。
7、峰面积:峰与峰底之间的面积。
8、拖尾峰:后沿较前沿平缓的不对称峰。
9、前伸峰:前檐较后沿平缓的不对称峰。
10、假峰:并非有试样所产生的峰。
11、基线:正常操作条件下,仅有载气通过检测器时所产生的响应信号的曲线
11.1基线漂移:基线随时间定向缓慢的变化。
11.2基线噪声:由于各种因素所引起的基线波动。
12、老化:色谱柱在高于操作温度下用载气处理的过程。
13、柱流失:固定液随载气流出柱外的现象。