喜格干细胞库建设之操作规范
干细胞培养实验室建设指南
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储存干细胞的使用流程
储存干细胞的使用流程概述储存干细胞是一种新兴的医学技术，它可以在生物体内存储干细胞，以备将来的医疗使用。
本文将介绍储存干细胞的使用流程。
流程步骤1.选择合适的干细胞库–储存干细胞需要选择合适的干细胞库。
干细胞库应该是经过认证和监管的机构，确保干细胞的质量和安全性。
2.咨询与登记–在选择好干细胞库后，用户需要咨询并与干细胞库进行登记。
咨询过程中，用户需要提供个人相关信息以及家族病史等。
3.采集干细胞–干细胞的采集通常在婴儿出生后的医院进行。
常见的采集方式包括脐血和脐带组织的采集。
脐血采集需要在婴儿出生后尽早进行，而脐带组织的采集则需要在剪断脐带后进行。
4.运送与储存–采集到的干细胞需经过特殊处理后，放入专用的冷冻存储盒中，并使用液氮进行冷冻保存。
干细胞会在冷冻过程中被转变为低温状态，以延缓细胞老化和维持细胞的活性。
5.储存合同签署–用户需要与干细胞库签署储存合同，明确储存期限、费用、隐私保护等相关事项。
6.储存与维护–干细胞库负责储存和维护储存的干细胞。
储存期限通常为几十年。
干细胞库会定期检查干细胞的质量和完整性，并更新存储技术以确保干细胞长期保存的有效性。
7.医疗使用–当需要使用存储的干细胞时，用户需要按照干细胞库的规定进行申请。
干细胞库会根据用户的申请和医生的指导，提供干细胞供医疗使用。
储存干细胞的好处•个人化医疗储存干细胞可以为个人提供个性化医疗的可能性。
医生可以使用储存的干细胞进行治疗，避免免疫排斥等问题。
•未来的医学进展干细胞具有很大的潜力，可以用于治疗多种疾病和损伤。
储存干细胞可以在未来出现的医学进展中充分利用这些潜力。
•家族病史的预防储存干细胞可以帮助家庭成员预防一些体质遗传的疾病。
当某一代家庭成员患有某种疾病时，其他家庭成员可以使用干细胞进行治疗，减少疾病的风险。
注意事项1.选择可信的干细胞库–用户需要选择经过认证和监管的干细胞库，以确保干细胞的质量和安全性。
2.及时采集与储存–干细胞的采集应在合适的时间内进行，以保证干细胞的质量。
喜格干细胞库建设之设计要求
《人间充质干细胞库建设与管理规范》DB33/T2030—2017SICOLAB干细胞库建设之设计要求范围：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库的建设、操作规范、质量管理的基本方法。
适用：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库建设与管理。
一、喜格选址要求1、选择周围环境较好的场地，空气质量标准应符合GB3095标准分级二级标准；2、不能建设在易发生自然灾害（地震、洪水、海啸等）的地区；3、不能建设在将要拆迁的建筑；不能建设在市政规划不明确区域。
二、建设基本要求1、干细胞库实验室建设与设计应与GB19489、GB50346、GB50591规定相符2、干细胞库实验室应包括业务区与办公区。
①业务区包括：样本接收室、干细胞制备室、配液室、检验室、干细胞存储室、更衣室、缓冲室、物料存储室、医疗垃圾存放室、消毒清洗室等（应标识洁净和风险级别）。
②办公区包括办公室、会议室、档案室和监控室等。
3、设计注意①洁净区、非洁净区完全分开。
②办公区域与实验区域的通风系统应独立分开；③不同科室应设有防污染措施，如缓冲间、气闸室和传递窗等。
4、人流、物流通道应独立设置，避免混杂和交叉污染。
5、物料、废弃物应设专用传递窗，并具备消毒灭菌功能。
6、办公区域与实验区域应进行物理隔离，工作人员由专用通道进入实验区。
7、门、窗、压差①洁净室内的密闭门应朝空气洁净度较高的房间开启并加设闭门器；②无窗洁净室的密闭门上宜设观察窗；③不同等级的洁净室、洁净区与非洁净区的压差，应不小于5Pa；④洁净区与室外的压差，应不小于10Pa。
8、建设材料应防渗漏、防火、耐腐蚀、防水和不起尘等，易于清洁和消毒灭菌。
9、库内所有窗户应为密闭窗，玻璃耐撞击、防破碎。
10、洁净室内不宜安装水池和地漏。
三、设施系统1、消防要求①应符合GB50016要求。
②干细胞库内宜安装火灾自动烟感报警装置、消防疏散警示标识、紧急逃生通道、安全出口；③安全出口（全封闭的玻璃门，并备有安全锤），安全出口设计应能够使仪器设备进出。
干细胞制剂机构相关设施、环境和安全管理规范
干细胞制剂机构相关设施、环境和安全管理规范干细胞制剂机构相关设施、环境和安全管理规范：1、机构内应设立限制区，制备、贮存、检测、包装等可能影响细胞质量与安全的工作应在限制区域内进行。
限制区域应设立人员准入授权制度和登记制度，进入人员和进入时间应有记录。
加装门禁：卡、指纹识别，自动记录2、机构内应设置功能区。
功能区可包括细胞制备区、质量检测区、细胞贮存区、物料库区、医疗废物存放区、行政区、辅助区等。
各功能区总体布局应合理且不得互相妨碍。
其他：工作人员洗浴，重复应用的器皿洗刷消毒。
3、机构应建立在远离严重空气污染、水质污染、病原微生物（含未知或无检测手段的病原微生物）丰富的场所，应远离辐射、振动或噪声干扰的区域。
4、机构应采用高可靠性供电方式供电。
双路供电5、机构的内环境应清洁，地面、路面及运输等不应对细胞的制备和贮存造成污染。
不要养花6、细胞制备区、细胞贮存区、质量检测区应为相互独立或相互物理隔离的区域。
7、进入洁净区（室）的空气必须经过净化，并根据制备工艺要求划分空气洁净度级别，应符合协会质量管自律理规范要求。
8、与细胞制备和细胞贮存的质量要求相关的、在非完全密封状态下的细胞操作应在B级背景下的A级洁净等级进行。
9、洁净区内人员净化用室和制备用室的建筑面积应与工艺要求、空气洁净度等级和工作人员数量相适应。
10、细胞制备区中的有菌操作区和无菌操作区应有各自独立的空气净化系统，应配置状态标识（如工作中、消毒中等）。
11、洁净区的出风口和回风口设置应合理，不应产生空气流通的死角。
可能涉及高危致病因子的操作，其空气系统等设施应符合特殊要求。
正压全排、负压。
12、洁净区应配备良好的加湿、除湿、排风、除尘、降温、升温、消毒等设施。
臭氧、UV13、机构应建立洁净区环境监测的标准操作规程，应定期监测洁净区动态条件下的环境温度、湿度、尘埃粒子数和微生物数，监测结果应符合设计要求并记录存档。
14、洁净区与非洁净区之间应设置缓冲间。
喜格干细胞库建设之干细胞质量检验要求
《人间充质干细胞库建设与管理规范》DB33/T2030—2017SICOLAB干细胞库建设之干细胞质量检验要求范围：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库的建设、操作规范、质量管理的基本方法。
适用：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库建设与管理。
一、干细胞质量检验1、存储质量检验及基本要求①人干细胞入库储存前应完成相应的质量检验，达到质量要求的方能入库存储。
②人间充质干细胞存储质量基本要求如表1。
表1人间充质干细胞存储质量基本要求质量指标最低标准检验方法细胞形态贴壁生长，伸展呈长梭形，形态均一显微镜下观察细胞数量每毫升1×106个细胞，每管1毫升参照《全国临床检验操作规程》第3版白细胞计数方法执行细胞活率不得低于90%台盼蓝拒染法微生物检测细菌和真菌检测结果应为阴性参照《中华人民共和国药典》2015年版四部通则1101无菌检测法执行支原体结果应为阴性参照《中华人民共和国药典》2015年版四部通则3301支原体检查法执行。
内毒素≤0.5EU/ml 参照中国药品检验标准操作规程2010版细菌内毒素检查法执行。
表2人胎盘造血干细胞存储质量基本要求病毒检测HIV 抗体、HBsAg、HCV 抗体、TP 抗体、CMV-IgM、HTLV 抗体、EBV 抗体检测应为阴性；HCV、HBV、HIV 病毒核酸检测应为阴性。
血清ELISA 检测核酸检测细胞表型CD73、CD90和CD105阳性率不低于95％；CD45、CD34、CD14、CD19和HLA-DR 阳性率不高于2％。
采用流式细胞术进行测定染色体核型染色体数量应为46，XX/XY，无染色体缺失、异位和重排现象采用G 带分析法进行测定三系分化能力在体外条件培养基诱导培养下，能够分化成脂肪、成骨和软骨细胞采用国际惯用（条件培养基）方法质量指标最低标准检验方法有核细胞数量总数应不少于5×108个参照《全国临床检验操作规程》第3版血细胞自动分析仪检测有核细胞数量细胞活率不得低于90%台盼蓝拒染法微生物检测细菌和真菌检测结果应为阴性参照《中华人民共和国药典》2015年版四部通则1101无菌检测法执行支原体结果应为阴性参照《中华人民共和国药典》2015年版四部通则3301支原体检查法执行。
glp实验室建设标准-喜格实验室
随着科技的不断发展，GLP实验室的建设标准备受到越来越多科研工作者的关注和重视。
那么，GLP实验室到底应该如何建设才能更好地保证实验的准确性和可靠性呢?今天，我们就一起来揭秘GLP实验室的建设标准，让科研更加精准!
一、GLP实验室的建设需要符合相关的法律法规和标准。
在建设过程中，必须严格按照国家和行业相关部门的规定进行规划和设计，确保实验室的环境和设备符合安全、卫生和科学的要求。
二、GLP实验室的建设还需要考虑实验室的实际需求和功能布局。
在选择实验室的位置、建筑结构、设备配置等方面，需要根据实验的具体要求进行合理的规划和设计，保证实验室的功能完备、设备齐全。
三、GLP实验室的建设还需关注实验室的管理和操作规范。
在实验室的日常管理和操作中，必须遵守相关的操作规程和标准操作程序，确保实验操作的准确性和一致性，同时加强实验室的质量控制和质量保证。
四、GLP实验室的建设标准是一个综合性的问题，需要综合考虑实验室的环境、设备、管理等多个方面。
只有严格按照标准要求进行建设和管理，才能保证实验的准确性和可靠性，推动科研工作的进步和发展。
在未来的科研工作中，GLP实验室的建设标准将继续受到广泛关注和重视。
科研工作者们也将不断努力，提高实验室的建设水平，为科学研究的深入发展提供更好的保障和支持。
让我们共同期待GLP实验室建设标准的不断完善和提高，为科研事业的蓬勃发展贡献自己的力量!。
干细胞库管理制度
干细胞库管理制度第一章总则第一条为了规范干细胞库的管理工作，促进科学研究的顺利开展，保护干细胞样本的隐私和安全，特制定本制度。
第二条干细胞库管理制度是针对干细胞采集、保存、利用以及相关活动进行管理的规范性文件，适用于所有进行干细胞研究和应用的单位。
第三条干细胞库管理制度的主要内容包括干细胞采集管理、干细胞保存管理、干细胞利用管理、干细胞库安全管理、干细胞库信息管理等方面的规定。
第四条干细胞库管理制度的遵循性和执行力为干细胞库实际运营提供了有力的支持，也是干细胞库综合管理的基础。
第二章干细胞采集管理第五条干细胞库应当确保干细胞样本的采集过程符合伦理规范和法律法规的要求，确保采集程序的合法、科学和公正性。
第六条干细胞采集工作应当在具备相应资质和技术水平的医疗机构开展，确保干细胞的采集过程和设备符合相关标准和规范。
第七条干细胞采集对象应当签署知情同意书，对采集过程和可能产生的风险有清晰的了解，且应当尊重干细胞采集者的自愿原则。
第八条干细胞采集单位应当对采集、识别、分类和标记进行规范管理，确保采集样本的准确性、一致性和完整性。
第九条干细胞采集工作应当及时记录相关信息，包括采集时间、采集地点、采集操作人员、采集过程等，以确保数据的真实性和可追踪性。
第三章干细胞保存管理第十条干细胞库应当建立健全的干细胞保存体系，确保干细胞样本的安全、稳定和长期保存。
第十一条干细胞保存条件应当符合相关规范和标准，包括温度、湿度、光照等方面的要求，以确保干细胞样本的生物学特性不受影响。
第十二条干细胞库应当对保存的干细胞样本进行定期检测和评估，确保保存的干细胞样本质量的稳定和可靠性。
第十三条干细胞库应当建立样本储存和检索系统，明确干细胞样本的位置、数量、状态等信息，以便随时进行查询和管理。
第十四条干细胞库应当建立失效样本的处理机制，对长期未被利用或失效的干细胞样本进行安全销毁和记录，确保废弃样本的安全处理。
第四章干细胞利用管理第十五条干细胞库应当严格遵守相关法律法规和伦理准则，对干细胞的利用行为进行规范和管理。
喜格｜生物制品洁净车间设计与建设(详细要求)
喜格｜生物制品洁净车间设计与建设（详细要求）一、当原辅料的检验周期较长时，允许检验完成前投入使用，但只有全部检验结果符合标准时，成品才能放行。
｜喜格二、生产和检定用细胞需建立完善的细胞库系统（原始细胞库、主代细胞库和工作细胞库）。
细胞库系统的建立、维护和检定应当符合《中华人民共和国药典》的要求。
三、生产和检定用菌毒种应当建立完善的种子批系统（原始种子批、主代种子批和工作种子批）。
菌毒种种子批系统的建立、维护、保存和检定应当符合《中华人民共和国药典》的要求。
四、应当通过连续批次产品的一致性确认种子批、细胞库的适用性。
种子批和细胞库建立、保存和使用的方式，应当能够避免污染或变异的风险。
五、种子批或细胞库和成品之间的传代数目（倍增次数、传代次数）应当与已批准注册资料中的规定一致，不应随生产规模变化而改变。
六、应当在适当受控环境下建立种子批和细胞库，以保护种子批、细胞库以及操作人员。
在建立种子批和细胞库的过程中，操作人员不得在同一区域同时处理不同活性或具有传染性的物料（如病毒、细胞系或细胞株）。
｜喜格七、在指定人员的监督下，经批准的人员才能进行种子批和细胞库操作。
未经批准不得接触种子批和细胞库。
八、种子批与细胞库的来源、制备、贮存及其稳定性和复苏情况应当有记录。
储藏容器应当在适当温度下保存，并有明确的标签。
冷藏库的温度应当有连续记录，液氮贮存条件应当有适当的监测。
任何偏离贮存条件的情况及纠正措施都应记录。
库存台帐应当长期保存。
九、不同种子批或细胞库的贮存方式应当能够防止差错、混淆或交叉污染。
生产用种子批、细胞库应当在规定的贮存条件下在不同地点分别保存，避免丢失。
｜喜格十、在贮存期间，主代种子批和工作种子批储存条件应当一致；主代细胞库和工作细胞库的储存条件应当一致。
一旦取出使用，不得再返回库内贮存。
十一、应当按照《中华人民共和国药典》中的“生物制品分批规程”对生物制品分批并编制批号。
十二、应当进行培养基适用性检查试验。
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《人间充质干细胞库建设与管理规范》
DB33/T2030—2017
SICOLAB干细胞库建设之操作规范
范围：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库的建设、操作规范、质量管理的基本方法。
适用：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库建设与管理。
一、概要
1、符合GB/T22278要求，并严格按照标准和规范执行；
2、制定相应标准和管理规范（样本采集、运输、接收、分离、培养、冻存和复苏等涉及干细胞操作所有过程）；
3、人组织样本采集由专业的医护人员完成，样本制备由经过专业培训的人员完成。
二、样本采集场所
1、洁净手术室（无菌采集）：人组织样本。
2、无洁净级别要求：人月经血样本、乳牙样本（并保持个人基本卫生）。
3、Ⅱ级洁净手术室要求：新生儿脐带、胎盘、骨髓样本。
4、Ⅲ级洁净手术室要求：脂肪组织样本。
三、样本采集方法
1、新生儿脐带来源间充质干细胞
①胎儿分娩后，在距胎儿脐部5cm至8cm处，用止血钳分别夹住脐带上下两端，消毒剂消毒脐带。
②用消毒剪刀于两钳中间断脐，截取至少15cm无针孔的脐带置于无菌采集瓶中，同时加入保存液以浸没脐带组织。
贴条形码作为唯一标识。
③脐带的两端需要用手术线结扎。
2、新生儿胎盘来源间充质干细胞或造血干细胞
①胎儿娩出后，待胎盘与母体完全分离，用生理盐水充分清洗胎盘，再用75%医用酒精快速冲洗表面。
②迅速将胎盘放入胎盘采集盒，再加入保存液予以全部浸没。
③采集盒密闭包装，并贴上条形码作为唯一标识。
3、人脂肪来源间充质干细胞
①脂肪组织采集过程由整形科医生实施，需制定抽脂方案和术前术后的防感染措施。
②行脂肪抽吸术时应尽可能保证抽脂过程无菌，采集完毕转移至采集瓶中，确保密封，并贴上条形码作为唯一标识。
4、人骨髓来源间充质干细胞
①骨髓组织采集前应联系负责骨髓采集医师，制定骨髓穿刺方案和术前术后的防感染措施。
②行骨髓穿刺术，抽取骨髓液，即时转移至无菌采集瓶中保存，确保密封，并贴上条形码作为唯一标识。
5、人子宫内膜来源间充质干细胞
①组织来源：手术切除成年女性子宫内膜增厚组织或子宫内膜异位组织，置于采集液中保存，并贴上条形码作为唯一标识。
②月经血来源：成年女性月经期第二天开始采集，将月事杯消毒后置于阴道内，收集月经血。
约6h～10h 将收集满月经血后的月事杯取出，将月经血转移至采集液中保存，并贴上条形码作为唯一标识。
6、人乳牙来源间充质干细胞
①收集没有牙体和牙髓病变、自然脱落的乳牙。
②将乳牙置入采集液中保存，并贴上条形码作为唯一标识。
四、样本运输
1、运输装置在设计与用材上须防渗漏、防辐射、抗震动、耐压、耐热等，并标识清楚。
2、新生儿脐带或胎盘、人脂肪、骨髓、子宫内膜和乳牙样本的运输温度为2℃～8℃,运输时间不超过36h。
3、运输须采用平稳、安全、快速的运输途径。
4、运输人员应是经过培训合格的专门人员。
五、样本接收
1、样本接收应遵从安全与准确的原则，做到样本与供者一一对应。
2、样本接收时，应做好自我防护工作，接触样本之前应佩戴手套与口罩。
3、接收样本后应先观察样本容器外包装的外观，检查有无破损并记录。
4、检查外观后，工作人员再检查样本采集信息记录表是否齐全，同时确认记录表上信息已经填写完整，检查信息记录表信息是否与样本信息一一对应，样本及记录表上应贴有一致对应的条形码，确认无误后进行接收。
5、样本接收后，使用医用酒精消毒清理容器外表面，如不能及时对样本进行处理，需把样本保存在2℃～8℃条件下，最长时间不超过12h。
6、样本量应能够满足制备方和检测方的最低要求。
7、样本接收后应及时将信息反馈给样本发送方。
8、干细胞库应制定样本拒收标准，按照样本拒收标准拒收样本，并及时通知有关部门或负责人，同时做好相应记录。
六、人间充质干细胞分离与原代培养方法
1、新生儿脐带间充质干细胞
新生儿脐带组织剥取华通氏胶，以组织块贴壁法或胶原酶消化法分离新生儿脐带间充质干细胞，使用贴壁法进行原代培养。
2、新生儿胎盘间充质干细胞
去除胎盘羊膜及母体面组织，剪取脐带近端的胎盘组织以酶消化法分离胎盘间充质干细胞，贴壁法进行原代培养。
3、新生儿胎盘造血干细胞
去除胎盘羊膜及母体面组织后，将剩下的胎盘组织剪碎至糜状，再用胶原酶消化获取有核细胞，经分离纯化步骤后进一步获得造血干细胞。
4、人脂肪间充质干细胞
成人脂肪组织剪碎至糜状，以胶原酶消化法分离脂肪间充质干细胞，贴壁法进行原代培养。
5、人骨髓间充质干细胞
人骨髓液样本，以密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞，贴壁法进行原代培养。
6、人宫内膜间充质干细胞
宫内膜组织样本通过胶原酶消化法分离宫内膜干细胞，贴壁法进行原代培养。
月经血样本以密度梯度离心法，通过人淋巴细胞分离液获取宫内膜干细胞，贴壁法进行原代培养。
7、干细胞换液
为了确保干细胞生长所必须的营养水平和消除代谢物毒害作用，换液需根据干细胞生长情况及培养基状态进行综合判断，换液操作通常是移走培养瓶中原有的部分或全部培养液，再加入新鲜培养液。
首次换液需要在镜下观察到原代细胞完全贴壁和延展后方可进行，不得超过一周。
换液操作需符合GMP要求。
8、干细胞传代
原代干细胞一般情况在达到80%～90%融合度可进行传代操作，传代操作应即时、迅速、密度适宜。
整个操作应符合GMP要求，并有严格的质量控制措施，保证无外源微生物污染。