药物分析第五章芳酸及其酯类药物分析-2

W
式中 V: 氢氧化钠滴定液消耗的体积，ml； T：滴定度（18.02mg）； F: 滴定液浓度校正系数； W：供试品取样量。
第五章 芳酸及其酯类药物分析
注意事项： （1）中性乙醇：阿司匹林在乙醇中溶解度大，不易水解；乙
醇中有微量乙酸等物质，故应制成中性（对酚酞指示液 显中性）； （2）为防止阿司匹林在滴定过程中水解，一要快速滴定，二 要剧烈振摇，防止局部碱过浓； （4）滴定终点后，因乙酰水杨酸钠逐渐水解，会使粉红色褪 去，所以要注意判断终点
第二节 水杨酸类药物分析
原则上，制剂不必重复检查原料药项下检查的杂质，但 在制剂制备或制剂贮存过程中，有可能再引入的杂质，应 检查控制。 阿司匹林片在制备或贮存过程中，因酯键易水 解，而生成水杨酸，故阿司匹林片剂、栓剂均要检查水杨 酸。
第五章 芳酸及其酯类药物分析
第二节 水杨酸类药物分析
3.易炭化物 本项目检查被硫酸碳化而呈色的低分子有机杂质
第五章 芳酸及其酯类药物分析
第二节 水杨酸类药物分析
二、杂质检查
（一）阿司匹林的杂质检查 阿司匹林原料主要控制的特殊杂质有 “溶液的澄清度” “水杨酸” “易炭化物”
第五章 芳酸及其酯类药物分析
第二节 水杨酸类药物分析
1.溶液的澄清度
本项目主要检查碳酸钠试液中不溶性杂质。这些杂质是未
反应的酚类、或副反应产生的无游离羧基的醋酸苯酯、水杨酸
加硫酸铁铵指示液2ml后，再加水适量使成 100ml〕1ml ，摇
匀；30秒钟内如显色，与对照液（精密称取水杨酸0.1g，加
水溶解后，加冰醋酸1ml ，摇匀，再加水使成1000ml，摇匀， 精密量取1ml ，加乙醇1ml 、水48ml与上述新制的稀硫酸铁 铵溶液1ml ，摇匀）比较，不得更深(0.1％)。
第五章 芳酸及其酯类药物分析
COONa OCOCH 3
COONa OH
CH2COONa C(OH)COONa
CH2COONa
CH3COONa
第五章 芳酸及其酯类药物分析
（2）水解与测定：精密加氢氧化钠滴定液 (0.1mol/L)40.00ml，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅 速放冷至室温，用硫酸滴定液(0.05013mol/L)滴定至红色消 失，消耗硫酸滴定液(0.05013mol/L) 22.24ml，并将滴定的 结果用空白试验校正，已知消耗硫酸滴定液 (0.05013mol/L)38.79ml。每1ml 氢氧化钠滴定液(0.1mol/L) 相当于18.02mg C9H8O10
【实例分析】阿司匹林原料的含量测定
取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液 显中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液 (0.1mol/L)滴定。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于
18.02mg 的C9H8O4。 阿司匹林的百分含量％＝ V T F 100%
检查原理:水杨酸有酚羟基，可与Fe3＋反应呈紫堇色，而 阿司匹林没有酚羟基，不能发生此反应。
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第二节 水杨酸类药物分析
【实例分析】阿司匹林中游离水杨酸检查 取本品0.10g ，加乙醇1ml溶解后，加冷水适量使成50ml，
立即加新制的稀硫酸铁铵溶液〔取盐酸溶液(9→100)1ml ，
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第二节 水杨酸类药物分析
（二）对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查 间氨基酚易被氧化，氧化产物导致药物变色，并且对
人体有毒性作用，应严格控制其限量 间氨基酚引入的途径有二：一是未反应完全的原料；
二是对氨基水杨酸钠遇热或日光照射脱羧
第五章 芳酸及其酯类药物分析
第二节 水杨酸类药物分析
第五章 芳酸及其酯类药物分析
（二）阿司匹林片剂的两步酸碱法 基本原理：片剂中加入少量酒石酸或枸橼酸作为稳定剂，
以抑制阿司匹林水解。在直接酸碱滴定时，这些物质会产生 干扰。故先中和供试品中的酸，利用阿司匹林独有的酯结构， 在碱性条件下定量水解，而测定阿司匹林的含量
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【实例分析】阿司匹林片的含量测定 （1）中和：取0.3g/片的阿司匹林片10片，精称4.3752g。 研细，用中性乙醇70ml，分数次研磨，并移入100ml量瓶中， 定容。摇匀，滤过，精密量取滤液10ml置锥形瓶中，加中性 乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，振摇，使阿司匹林溶解， 加酚酞指示液3 滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)至溶液 显粉红色，此时所有羧基均成为钠盐。
（三）阿司匹林栓的高效液相色谱法测定含量 《中国药典》 （2010年版）采用高效液相色谱法测定栓剂中
阿司匹林的含量。 色谱条件：C18烷基硅烷键合硅胶为固定相；甲醇－0.1％
二乙胺水溶液－冰醋酸（40∶60∶4）为流动相；紫外检测波 长280nm。
色谱系统适用性试验：理论塔板数按阿司匹林峰计算不低 于2000，阿司匹林峰、水杨酸峰和内标物峰分离度应大于1.5。
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内标液：4mg/ml的咖啡因乙醇溶液。 阿司匹林对照品液：取阿司匹林对照品约0.15g,精密称定， 置50ml量瓶中，精密加入内标溶液5ml,用乙醇溶解并稀释至刻 度，摇匀，精密量取2ml,置50ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度， 摇匀。
第五章 芳酸及其酯类药物分析
阿司匹林供试液： ①取样，混匀样品：取本品5 粒，精密称定，置小烧杯中， 在40～50℃水浴上微温熔融，在不断搅拌下冷却至室温； ②制备供试液：精密称出适量（约相当于阿司匹林0.15g ） 置50ml量瓶中，精密加入内标溶液5ml 和乙醇适量，在40～ 50℃水浴中充分振摇使供试品溶解，用乙醇稀释至刻度，置
液1滴，呈紫堇色。
（3）贝诺酯：加入氢氧化钠试液，煮沸，放冷，滤液调成微
酸性，加三氯化铁试液2滴，呈紫堇色。
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第二节 水杨酸类药物分析
反应式如下：
COOH
OH + 4FeCl3 中性或微酸性
COO
O Fe Fe + 2HCl 23
（紫堇色）
贝诺酯和阿司匹林需水解，生成水杨酸，才能发生该反应
苯酯和乙酰水杨酸苯酯等。阿司匹林有羧基，溶解于碳酸钠试
液。
OCOCH 3
OH COO
OCOCH3 COO
醋酸苯酯
水杨酸苯酯
乙酰水杨酸苯酯
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第二节 水杨酸类药物分析
2.游离水杨酸 水杨酸可由合成过程中乙酰化不完全或阿司匹林在贮藏
过程中水解产生。水杨酸对人体有毒，并有刺激性，其进一 步氧化产物使药物变色，影响药物的质量。故应严格控制阿 司匹林中的水杨酸。
橙作指示剂
第五章 芳酸及其酯类药物分析
三、含量测定
（一）阿司匹林的直接酸碱滴定法 1.基本原理：阿司匹林结构中有羧基有酸性（Ka＞10－5），
可用氢氧化钠滴定液直接滴定。滴定生成的乙酰水杨酸钠偏碱 性，故用酚酞为指示剂
COOH OCOCH 3
+ NaOH
COONa
OCOCH3 + H2O
第五章 芳酸及其酯类药物分析
冰浴中冷却1 小时，取出迅速滤过，精密量取续滤液2ml，
置50ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。
第五章 芳酸及其酯类药物分析
测定法：分别量取10μl 的对照液和供试液注入液相色谱
仪，记录色谱图。按内标法以峰面积计算，即得。
Ai 根据对照液计算校正因子：f＝ Ci
Ar Cr
A：峰面积 C：浓度 i：内标物 r：对照品 X：供试品
COO
NHCOCH 3
OCOCH 3
苯环
苯环
贝诺酯
酯键：水解，可生成酚羟 基和醋酸
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第二节 水杨酸类药物分析
一、鉴别试验
（一）三氯化铁反应 含酚羟基结构的药物在中性或弱酸性条件下，可与Fe3＋
反应，形成有色配位化合物。
（1） 水杨酸：加三氯化铁试液1滴，即呈紫色。 （2） 阿司匹林：煮沸水解后，放冷，加三氯化铁试
根据供试液计算供试液浓度：Cx＝ f Ax Ci ' Ai '
第五章 芳酸及其酯类药物分析
⑤
①在乙醇中易溶，在水中溶解度小， 多以醇为溶剂进行分析； ②具游离羧基，呈酸性； ③含酯键，不稳定，易水解 ；
④水解后生成游离的酚羟基，可与 铁离子发生呈色反应
⑤有苯环，在紫外光区有吸收
第五章 芳酸及其酯药物分析
第二节 水杨酸类药物分析
酸性：用于定性、定量反应
COOH OH
酚羟基：FeCl3呈色反应
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第二节 水杨酸类药物分析
（二）水解反应 阿司匹林酯键在碱性条件下水解后，生成水杨酸钠和醋酸
钠，溶解度明显改变，故可利用溶解度差异观察溶解与沉淀的 的现象；酸化反应液时，可闻到醋酸臭味。
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第二节 水杨酸类药物分析
COOH OCOCH 3
+ Na2CO3
稀盐酸，煮沸，放冷，滤过
亚硝酸钠、碱性β-萘酚
供试品
滤液
猩红色
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第二节 水杨酸类药物分析
COO
HCl
OCOCH 3 +H2O
Δ
COOH
OH
+
OH
+ 2CH3COOH
NH2
OH
+ NaNO2
HCl
NH2
OH N NCl
OH
, OH
OH
NN
HO
猩红色
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第二节 水杨酸类药物分析
分析：限量计算：
L% V C 1 0.01%