脓血症或外伤患者白细胞变形和全血流变性的一系列变化
烧伤后的白细胞流变行为及其调控

IAM. C 1的相 互作 用 主要 介 导 上 皮 细 胞 与髓 系细 胞 的黏 附 。 C 1 b C 1 D l / D 8亦 能 与 补 体 蛋 白 C b作 3 用 。C 1 cC 1 D 1/ D 8主要参 与细 胞 与 内皮 细胞 的相 互
引起 白细胞 发 流动。正常状态下 的微静脉, 因其血流速度 较微 动 管 内皮细胞 并 激 活 白细 胞 和 血 小板 , 生流 变行 为异 常 。血 管 内皮 细胞 、 白细 胞 结 构 和 脉减 慢 , 时可看 见 白细胞 在微 静脉 内流 动 , 有 主要 呈 功 能 改变及 血 液 微 环境 变化 的共 同作 用 下 , 引起 白 贴壁 翻滚样 流 动 , 滚 的速 度 较快 , 翻滚 的 白细胞 翻 且 细胞 趋边 性增 强 , 为 之 后 的 白细 胞 与 内皮 细 胞 间 也 通 常不变 形 , 不 与血管壁 黏 附 , 也 一般 所见 到 的 白细 黏 附打 下 了基 础 。 胞数 量较 少 。 白细胞 在 微 血 流 中不 是 均 匀分 布 的 , 2 .白细胞 黏 附性及 其 在 烧伤 后 的变化 : 细 胞 从 其分 布 主要 受血 流切 应力 影 响 , 当微 血 管 内血 流 处 流 变学 的角度 分析 , 白细 胞黏 附 受两种 力 的 影响 , 一 于低 切应 力 时 , 白细 胞 主要 出现在 血流 柱 的最 外 层 , 是血液在流动时与血管壁 间产 生的切应力, 阻碍 是 随 着切应 力不 断增加 , 白细胞 则 逐 渐 向血 流 中心 层 白细胞 贴壁黏 附 的主 要 力量 ; 二是 血 液 流 动过 程 中 集 中。 另外 , 流 中 白细胞 分 布 与其 周 围 的红 细 胞 血 白细胞 与血 管 内皮 细胞 间产 生 的黏 附 力 , 促 进 白 是 状 态有 一定 关系 , 高切 应 力和 ( ) 红 细胞 聚 集 在 或 无 细胞贴壁黏附的主要力量 引。在正常情况下, 血管 时, 细胞 主要分布在血流 中心, 白 即轴流 区; 而在切 内不存 在促进 白细胞 黏 附 的 因 素 , 因而微 动脉 及 微 应力降低和( 红细胞聚集增加 时, 或) 白细胞分布在 静脉 内均 见不到 白细胞 贴 壁黏 附。观 察 正 常 家兔 肠 血流边缘, 即缘流区。因此, 内微动脉和毛细血管 体 系膜 微 循环 , 可见 微 动 脉 流速 快 , 白细胞 黏 附 、 无 嵌 中难以见到 白细胞的流动, 而在毛细血管后微静脉 , 塞 及 白微栓形 成 ; 微静脉 流速 慢于 微 动脉 , 见少 量 可 白细胞 贴 壁 翻 滚 而过 , 见 白微 栓 形 成 …。然 而 , 未 D I1 .8 7 c ..sn 17  ̄4 0 2 1 .6 0 4 O :0 3 7/ maji .6 3 5 .0 10 .o s 烧伤 后机体 发 生一 系列 的改 变 , 应激 反 应、 血 容 如 低 基金项 目: 河北省 自然科 N ̄ (o 5 1C 0 10 00 32 5 、 2 12 6 8 ) 量、 炎症 反应 等 , 白细胞 黏 附力 增 加 , 当黏 附力 高 于 作者 单位 :50 1 石 家庄 , 北医科 大学第一 医 院烧 伤整 形 00 3 河 切 应力 时 , 白细胞 出现附壁 现 象。在 动 物烧 伤 早期 ,
化脓性感染的病理过程和治疗要点

化脓性感染的病理过程和治疗要点⾮特异性感染:⼜称化脓性感染或⼀般感染,如疖、痈、丹毒、急性乳腺炎、急性阑尾炎等。
化脓性感染的病理过程1. 早期浸润阶段:化脓性细菌侵⼊早期,⾎管通透性增加、渗出增加、组织⽔肿。
2. 化脓坏死阶段:病灶⾎液循环障碍加重,组织营养障碍、变性、液化、坏死。
3. 吸收修复阶段:炎症局限、坏死组织被清除后,病灶边缘⾁芽再⽣,长⼊脓腔填补缺损组织,创缘上⽪⽣长覆盖创⾯⽽愈合。
4. 慢性迁延阶段:急性感染不能彻底消散,持续存在,迁延2个⽉以上成为慢性感染。
慢性感染可形成溃疡、窦道或瘘管。
1、溃疡:体表软组织感染后坏死脱落,引流不畅,坏死组织不能及时清除,创⾯经久不愈。
2、窦道:脓肿穿破或切⼝引流不畅,脓腔内留有坏死组织,⾁芽和纤维组织增⽣形成细长的弯曲或分⽀状的管状组织缺损,⼀端开⼝于体表,另⼀端为盲端,经久不愈。
3、瘘管:软组织或内脏的脓肿向外穿破后所形成的管状组织缺损,⼀端开⼝于体表,另⼀端通达脏腔者。
影响病程演变的因素1. 致病菌的毒⼒:由致病菌的种类、菌株、数量、繁殖速度和毒素的性质⽽定。
2. 局部抵抗⼒:包括伤⼝的⼤⼩、深浅、有⽆异物、死腔、⾎肿和坏死组织等。
3. 全⾝抵抗⼒4. 及时正确的治疗感染的结局1. 局限化、吸收或形成脓肿:当机体抵抗⼒占优势,感染易局限化,可⾃⾏吸收,或形成脓肿。
2. 转为慢性感染:当机体抵抗⼒与致病菌毒⼒处于相持状态,感染病灶被局限,形成溃疡、瘘或窦、硬结,不易愈合。
病灶内仍有致病菌。
3. 感染扩散:在致病菌的毒⼒超过⼈体抵抗⼒时,感染不能局限,可迅速扩散或进⼊淋巴系统、⾎液循环,引起严重的全⾝性感染。
临床表现1. 局部症状:红肿热痛和功能障碍是化脓性感染的五个典型症状。
2. 全⾝症状:感染轻者可⽆全⾝症状。
感染重者常有发热、头痛、全⾝不适、乏⼒、⾷欲减退等。
治疗要点消除感染病因和毒性物质(脓液、坏死组织等),增强⼈体的抗感染和修复能⼒。
脓毒性休克患者血脂及血清前白蛋白水平变化及意义

及P A B水平均低于存 活组( P均 < 0 . 0 5 ) 。结论
中图分类号 : R 6 3 1
文献标志码 : B
文章 编 号 : 1 0 0 2 — 2 6 6 X( 2 0 1 3 ) 3 6 - 0 0 4 7 — 0 3
脓 毒性 休 克是 指严 重 脓毒 症患 者 经足 量液 体 复 苏后 仍 持续 低 血压 ( 收 缩 压 <9 0 m mH g或 较 基 础水 平下 降 幅度 超 过 4 0 mm Hg ) , 伴 有 低灌 流 状 态 ( 乳酸 性 酸 中毒 、 少 尿或急性 意识改变 ) 或 器 官 功 能 障 碍 的一 组 临床综 合 征 。脓 毒性 休克 患 者多 处 于严 重 的 感染 、 创伤 、 重 症 中毒 等 严 重 应 激 反 应 状 态 , 机 体 产 生 全 身性 炎症 反 应 , 机体 代谢 如糖 代 谢 、 蛋 白质代 谢
女2 0 例, 年龄 5 9~ 7 6岁。脓毒性休克 的诊 断依 据
2 0 0 1 年 美 国胸 科 医 师 协 会/ 危重病 医学会 ( A C C P /
和 脂代 谢 发生 变 化 , 可影 响 到全 身 多个 器 官 、 系统 ,
曾服用 过对血 脂 代谢 有 影 响 的 药物 者 , 有 肿 瘤 病 史
者 。计算 入选 患 者入住 综合 I C U第 1个 2 4 h的 A — P A C H E 1 1 评 分值 , 按照 A P A C HE I 1 评分 值 将 患 者 分
脓毒性休克患者外周血NLRPLR与凝血指标的变化及其临床意义

脓毒性休克患者外周血NLRPLR与凝血指标的变化及其临床意义脓毒性休克是一种由于感染导致全身炎症反应过度而引起的严重疾病,常常威胁患者的生命。
外周血中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)和血小板淋巴细胞比值(PLR)是反映炎症状态的重要指标,而凝血指标又直接反映了炎症状态引起的凝血功能异常。
本文将探讨脓毒性休克患者外周血NLR、PLR与凝血指标的变化及其临床意义。
一、外周血NLR、PLR与脓毒性休克1. NLR和PLR的概念NLR是指外周血中细胞计数中性粒细胞和淋巴细胞比值,而PLR则是指血小板与淋巴细胞比值。
NLR和PLR是近年来广泛关注的炎症指标,其高低与炎症反应的程度密切相关。
2. NLR、PLR与脓毒性休克研究表明,脓毒性休克患者的外周血NLR和PLR常常明显升高。
这与病原微生物引起的强烈炎症反应有关,炎症状态的加剧导致外周血的中性粒细胞和血小板数量增加,而淋巴细胞数量减少,从而导致NLR和PLR的升高。
1. 凝血指标的含义凝血功能是机体抵御外界损伤的关键生理过程,凝血功能异常在炎症反应状态下常常发生变化。
常见的凝血指标包括凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、血小板计数以及凝血酶原活动度等。
2. NLR、PLR与凝血指标的关系研究发现,外周血NLR和PLR的升高与凝血指标的异常有一定的相关性。
在脓毒性休克患者中,外周血NLR和PLR的升高往往伴随着PT、APTT的延长以及血小板计数的下降,凝血酶原活动度的降低等现象。
三、临床意义1. NLR、PLR与脓毒性休克的诊断外周血NLR和PLR的升高可作为脓毒性休克的辅助诊断指标之一,尤其适用于疑难病例的诊断。
结合其他临床表现和检查结果,有助于提高诊断的准确性。
2. NLR、PLR与预后评估一些研究表明,脓毒性休克患者外周血NLR和PLR的高低与预后有一定的关联。
NLR 和PLR的升高与患者的病情严重程度密切相关,同时也与患者的预后有一定的预测价值。
2022年临床执业医师《第二单元》试题(网友回忆版)

2022年临床执业医师《第二单元》试题(网友回忆版)[单选题]1.属于不完全性骨折的是()。
A.斜形骨折B.裂缝骨折C.(江南博哥)嵌插骨折D.横行骨折E.压缩骨折参考答案:B参考解析:不完全性骨折包括青枝骨折和裂缝骨折。
[单选题]2.冻结肩,活动受限,以下处理错误的是()。
A.理疗B.制动C.热敷D.观察E.冷敷参考答案:E参考解析:冻结肩一般指肩关节周围炎,冻结肩患者在发病期间需要患处的制动,而且要定期对患处进行热敷,也可采取保守治疗如理疗、针灸等。
冻结肩具有自限性,可以采取观察的处理。
[单选题]3.中性粒细胞碱性磷酸酶阴性的是()。
A.急性淋巴细胞白血病B.慢性淋巴细胞白血病C.急性髓系白血病D.类白血病E.慢性髓系白血病参考答案:E参考解析:慢性髓系白血病的中性粒细胞碱性磷酸酶为阴性。
[单选题]4.鉴别肾性和中枢性尿崩症的方法是()。
A.加压素实验B.禁水试验C.测定尿渗透压和血钠D.测定尿渗透压和比重E.测定血浆和尿渗透压参考答案:A参考解析:加压素实验可鉴别垂体性尿崩症与肾性尿崩症,尿量、尿比重及尿渗透压稳定后给患者注射垂体加压素,可发现垂体性尿崩症用后效果明显,尿量下降,尿比重、渗透压上升,而肾性尿崩症对之反应不明显。
[单选题]5.肺动脉楔压25mmHg,左心室舒张末压3mmHg,最可能的诊断是()。
A.主动脉狭窄B.二尖瓣狭窄C.主动脉关闭不全D.二尖瓣关闭不全E.肺动脉瓣关闭不全参考答案:B参考解析:患者肺动脉楔压25mmHg↑,左心室舒张末压正常,最可能的诊断是二尖瓣狭窄。
[单选题]6.诊断失代偿期休克必备的标准()。
A.收缩压<90mmHgB.脉压<20mmHgC.四肢湿冷D.脉率>90次/分E.谵妄参考答案:A参考解析:若病人出现神志淡漠、反应迟钝、皮肤苍白、呼吸浅快、收缩压降至90mmHg以下及尿少或无尿者,则标志病人已进入休克失代偿期。
因此诊断失代偿期休克必备的标准是收缩压<90mmHg。
白细胞的流变特性

白细胞的流变特性白细胞是人体免疫系统中的重要组成部分,主要负责抵御外来病原体,参与免疫反应和维持机体内环境的稳定。
白细胞不仅在体内起到重要的作用,它们也具有一些独特的生理特性,称为流变特性。
流变特性是指液体在流动中所表现出的特性,包括粘度、变形能力和聚集性等方面。
本文将对白细胞的流变特性进行探讨。
一、白细胞的粘度白细胞的粘度是指其阻碍流动的程度。
由于白细胞的形态多样,大多数白细胞都是不规则形状,表面具有突起和伪足等结构。
这些结构会降低流体的速度,并增加阻力。
此外,白细胞表面的黏附分子也会与血液中的其他成分发生相互作用,进一步增加了粘度。
研究表明,在炎症等疾病状态下,白细胞的粘度明显增加,进而影响了血液的流动性。
二、白细胞的变形能力白细胞的变形能力是其在流动中调整形态以通过狭窄的血管间隙的能力。
正常情况下,白细胞具有较好的变形能力,可以通过血管壁的微小孔隙进入组织间隙,以执行其免疫功能。
然而,在一些疾病状态下,如白血病等,白细胞的变形能力可能受到影响,使其无法正常穿过血管壁,从而导致炎症反应的发生。
三、白细胞的聚集性白细胞的聚集性是指它们在流动中相互聚集的倾向。
这种聚集性主要是通过白细胞表面的黏附分子相互作用所引起的。
在炎症反应或感染状态下,白细胞的聚集性会增加,形成白细胞聚集体,进一步促进炎症反应的进行。
另外,白细胞的聚集性还与体内的某些细胞因子和化学物质密切相关,这些物质可以通过调节白细胞的聚集性来影响免疫反应的进行。
总结:白细胞作为免疫系统的重要组成部分,具有一系列流变特性,包括粘度、变形能力和聚集性等方面。
这些特性直接影响白细胞在体内的功能和生理活动。
研究白细胞的流变特性不仅对于深入理解免疫反应的机制具有重要意义,也为疾病的诊断和治疗提供了新的视角和方法。
需要进一步深入研究白细胞的流变特性,以更好地认识其与疾病的关系,并为临床应用提供有效的指导。
级七制诊断学试题

01级七年制诊断学试题2001级七年制B卷一.? ? ?名词解释:(每题4分,共20分)1、Myeloid:Erythroid2、Reticulocyte:3、Capillary resistance test (CRT):4、Microscopic pyuria :5、Tarry stool:二.? ? ?多选题:(每题1分,共20分。
每题至少有1个答案是正确的,漏选、多选、少选均不得分。
)1.多尿可见于A.严重的心力衰竭?B.急性肾小管坏死C.尿路梗阻D.慢性肾衰竭早期2.下列哪项属于肾功能不全的衰竭期:A.GFR>50ml/min,Cr>445μmol/L,BUN<9mmol/LB.GFR20~50ml/min,Cr>178μmol/L,BUN<9mmol/LC.GFR<25ml/min,Cr>178μmol/L,BUN>20mmol/LD.GFR<25ml/min,Cr>445μmol/L,BUN>20mmol/L 3.检测内源性凝血系统是否正常最敏感的指标是:? A.出血时间(BT)? B.凝血时间(CT)? C.活化部分凝血活酶时间(APTT)? D.血浆凝血酶原时间(PT)4.血浆凝血酶原时间(PT)延长可能是以下凝血因子缺乏,除了()? A.Ⅱ? B.Ⅴ? C.Ⅶ? D.Ⅷ5、? ? ?NAP活性增高见于:i. ? ? ?慢性粒细胞白血病ii. ? ? ?急性粒细胞白血病iii. ? ? ?再生障碍性贫血iv. ? ? ?病毒感染6、? ? ?下列说法哪项是错误的:i. ? ? ?肾小球性蛋白尿以白蛋白为主ii. ? ? ?剧烈运动后可出现肾小球性蛋白尿iii. ? ? ?肾小管性蛋白尿以大分子球蛋白为主iv. ? ? ?中毒性肾病时可出现肾小管性蛋白尿7、? ? ?下列说法哪项是错误的:i. ? ? ?肾功能衰竭患者CCr常<20ml/minii. ? ? ?肾功能衰竭患者血肌酐常超过200μmol/Liii. ? ? ?消化道大出血病人可出现血肌酐和血尿素氮的升高iv. ? ? ?CH2O是慢性肾功能衰竭早期诊断的灵敏指标。
脓毒血症

脓毒血症一.相关定义感染:致病性病原体侵入宿主体内,在体内获得必需的养料,然后繁殖,增生,产生局部组织损伤而引发炎症反应,并分泌毒素或毒性产物,或在宿主体内产生抗原—抗体反应。
菌血症:在血液中存在活的细菌。
败血症:在血液中存在微生物和其毒素。
全身炎症反应综合症:机体对致炎刺激的一种普通的,生理性的反应,一般是非破坏性,不需要特殊的临床干预。
脓毒症:由于微生物或其他病原体侵入人体而诱发的激烈全身炎症反应,并对组织具有损伤的病理生理过程及一组临床表现。
感染+感染的全身表现。
二.发病机制感染创伤休克↓局部炎症↓全身炎症↓适度反应胃肠道功能紊乱免疫反应紊乱血液高凝↓↓↓痊愈脓毒症DIC 脓毒症休克↓MODS MSOF三.诊断目前,临床上诊断脓毒症要求有明确感染或可疑感染加上以下全身炎症反应综合征(SIRS)的指标:1. 一般指标:①发热(>38.3C°);②低体温(<36C°);③心率>90次/分;④气促>30次/分;⑤意识改变;⑥明显水肿或液体正平衡>20 ml/kg超过24小时;⑦高血糖症(血糖>110 mg/dl,而无糖尿病史)。
2. 炎症指标:①白细胞增多(>12×109/L);②白细胞减少(<4×109/L);③白细胞正常但杆状核>10%;④血浆C反应蛋白>正常值2个标准差; ⑤降钙素原>正常值2个标准差。
3. 血流动力学指标:①低血压(收缩压<90 mmHg,舒张压<70 mmHg或成人血压下降>40 mmHg,或按年龄下降>2个标准差);②混合静脉血氧饱和度>70%;心排指数>3.5 L/(min·m2)。
4. 器官功能障碍参数:①低血氧症[氧合指数(PaO2/FiO2)<300];②急性少尿[尿量<0.5 ml/(kg·h)];③肌酐增加≥0.5 mg/dl;④凝血异常(国际标准化比值>1.5或活化部分凝血活酶时间>60秒);⑤腹胀(肠鸣音消失);⑥血小板减少(<10万/mm2);⑦高胆红素血症(总胆红素>4 mg/L)。
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显大于 ISS<25 的病人或是健康志愿者。在 ISS≥25 的外伤患者中,在住院的第 3 到 6 和 7
到 14 天比之住院的第 0 到 2 天,其 NOM 有着明显的下降。在住院的第 3 到 6 天或 7 到 14 天里,ISS<25 和 ISS≥25 的病人的 NOM 并无显著不同。在住院的第 0 到 2 天,ISS≥25 的 病人的 TT 比之健康志愿者或 ISS<25 的患者明显为长。在患者住院的第 3 到 6 天和 7 到 14 天的 TT 比起住院的第 0 到 2 天明显下降。在住院的第 3 到 6 天或 7 到 14 天,ISS<25 和 ISS ≥25 的病患的 TT 值并无显著区别。输血和 NOM(r=0.24)或 TT(r=0.19)并无明显关系 (未显示数据)。
人康复后,NOM 降低到 1(图.1C)。脓血症患者 NOM 的改变如图 2 所示。在第 0 到第 2 天,病人的 NOM 比健康志愿者的 NOM 明显要高,但是在康复者和未康复者间并无明显差 距。在住院的第 3 到 6 天和 7 到 14 天上脓血病康复者的 NOM 比起住院第 0 到第 2 天明显 下降。在住院的 7-14 天,未康复者的 NOM 明显比康复者的 NOM 高。脓血症患者的 TT 变 化如图.3 所示。在脓血症发作的时候(0-2),脓血症患者的 TT 比之健康志愿者的 TT 明显 为高。在住院期的第 0 到 2 天和 3 到 6 天,治愈者和未愈者的 TT 并无显著不同。但是在住 院的第 7 到 14 天,未愈者的 TT 明显比治愈者的 TT 高。治愈者在住院的第 7 到 14 天的 TT 之比住院的 0 到 2 天的有着明显的下降。
数据分析
数据表示为平均值±SD。病人特征、氧化活性和嗜中性粒细胞的 F 肌动蛋白含量通过单
因素方差分析(ANOVA)和多重比较(post hoc test)进行比较。在 NOM 和 TT 的一些列变
化通过双因素方差分析来进行比较。p 值<0.05 为有效值。
表 1 脓血症病人特征
治愈者
未治愈者
(n=12)
图.3 病人在住院的 14 天中 TT 的变化。参比值范围如阴影区域所示。*p<0.05 对应相关治愈 者,#p<0.05 对应住院 0 到 2 天的治愈者(脓血病诊断)
图.4 外伤病人的堵塞微通道数量变化。阴影区域代表健康参比水平。*p<0.05 对应 ISS<25 的外伤患者及健康志愿者。#p<0.05 代表对应的入院 0 到 2 天的 ISS≥25 的病人
在脓血症、感染性休克、和ARDS等多种病理条件下已经观察到嗜中性粒细胞变形性的 下降。但是,嗜中性粒细胞变形性引起的一系列变化还未得到临床研究。测定嗜中性粒细胞 变形性的惯用方法需要细胞分离,但这可能激活细胞并影响其变形性。8-11因而,我们开发 了不用进行细胞分离而检测白细胞的变形性和全血血液流变特性的方法。
脓血症或外伤患者白细胞变形性和全血血液流变性的一系列变化
背景:本研究的目的是 发现脓血症患者或外伤患 者在白细胞变形性和全血 血液流变性的一系列变化。
方法:实验有 17 名脓 血症患者和 22 名外伤患者 参加。本试验使用刻在单晶 硅芯片上的微通道模拟微 动脉来研究白细胞变形性 和全血血液流变性。阻塞的 微通道数量(NOM)可以 作为评价白细胞变形的方 法。通过时间(TT),比如
当前研究的课题是观测脓血症或外伤患者白细胞变形性和全血血液流变性的一系列变 化,并且找到脓血症患者的白细胞变形性、氧化活性、F 肌动蛋白含量之间的关系。
患者和方法 患者
样本由在大阪大学医院的创伤部和紧急护理医学部的 17 名脓血症患者和 22 名外创患 者组成。脓血症患者在 1998 年 12 月到 2000 年 9 月之间的入选,并符合以下条件:脓血症 症状符合美国胸科医师学院和危重病急救协会委员13的定义,并且其血浆C反应蛋白浓度超 过 10mg/dl。患有外创的患者在 1998 年 12 月到 1999 年 8 月间入选。这些患者都是在受伤 后一小时之内参加研究的,其损伤严重数值(ISS)在 15 以上。在此期间总共有伤患 118 名。 其中 23 人死于去医院的路上,73 人在 6 天内出院或其ISS指数低于 15。因此共有 22 名外伤 患者参与研究。所有患有脓血症或有外伤的患者分别以抗生素或外科治疗进行诊治。我们已 经报道过粒细胞集落刺激因子(Granulocyte colony-stimulating factor)(G-CSF)会造成白细 胞变硬。研究中不对患者使用蛋白酶抑制剂、类固醇或G-CSF等会影响白细胞变形性的药剂。 在实验中,有 12 名志愿者作为参比项。其中有来自我们部门 9 名男性和 3 名女性医师;他 们的平均±SD年龄为 35±12.3 岁。
嗜中性粒细胞的 F 肌动蛋白含量
嗜中性粒细胞的F肌动蛋白含量根据陈等报道的方法进行检测。16简单地讲,用生理盐 水或 10-5M的FMLP培养 100μl的全血。60 秒钟培养后,将FACS细胞溶解溶液(Becton Dickinson Immunocytometry Systems,San Jose,CA)添加到溶解红细胞中,用磷酸(盐)缓冲液 (PBS)冲洗细胞两次。之后加入 600μl溶血磷脂酰胆碱(Sigma)和 1.11×10-7M 7-硝基苯 -2-氧-1,3-二唑(NBD)-类鬼笔环肽将剩下的嗜中性粒细胞一次性进行透化处理及退色处理。
识别血细胞。志愿者的 NOM 为 0;TT 为 40.0 秒。在所有 12 名健康志愿者中 NOM 为 2.0±0.7 (范围,0-3),TT 为 47.0±7.3 秒(范围,35-55 秒)。
脓血症患者的白细胞变形性和全血流变特性 脓血症患者的的典型血流变图像如图.1B 所示。大而坚硬的白细胞堵塞了微通道。当病
100μl 的全血通过微通道的 时间就是测量血液流变性 的一个方法。研究中还测量 了患有脓血症患者的嗜中 性粒细胞的氧化活性和 F 肌 动蛋白含量。
结果:在诊断中患有脓 血症的患者的 NOM 和 TT 明显上升。脓血症康复者的 NOM 和 TT 都会下降,但是 非康复者的数值仍然很高。 在白细胞变形性下降时,嗜 中性粒细胞的氧化活性和 F
然后室温下将细胞以 2000rpm的速度离心 10 分钟,这时细胞再次浮在PBS中。在用NBD-类 鬼笔环肽退色不到一个小时后,即可完成F肌动蛋白的流式分析。通过流式分析可以得到门 控式中性粒细胞的荧光密度。利用波长在 488nm的氩光激活细胞,通过long-pass滤镜得到其 为 522nm的散射光。细胞内的F肌动蛋白分布通过使用荧光显微镜照相得到(BX-51, Olympus,Tokyo,Japan)。
肌动蛋白含量都会显著上 升。在有严重外伤的病人 上,NOM 和 TT 都会在伤后 上升,而在康复时下降。
结论:有着脓血者或严 重外伤的患者白细胞变形 性下降,这会对血液流变性 起负面效果。
关键词:白细胞变性 性,外伤,脓血症,过氧化 产物,F 肌动蛋白,血液流 变性。
一般认为,活性嗜中性粒细胞封闭在肺或其他器官的微血管中是导致脓血症或外伤者产 生呼吸窘迫综合症(ARDS)的一个原因。1-3嗜中性粒细胞活化的首要结果就是嗜中性粒细 胞变形性的迅速下降和粘附度的上升。过氧化物的产生,脂质调节物的产生和细胞的脱粒都 有可能是嗜中性粒细胞活化的结果。硬度较大的嗜中性粒细胞可能造成微血管的阻塞,对全 血的流变特性有着负面影响4,有时会造成脑缺血或组织损伤。5
血样
脓血症患者确诊后的 48 小时内采集血样,并在病程中检测白细胞变形性、过氧化产物 和 F 肌动蛋白的含量。外伤患者的血样在伤后 48 小时内进行采集,此后在 3~6 天和 7~14 天进行白细胞变形性的检测。对照组也按相同方式进行采血。我们用 21Fr 导管在动脉采集 2ml 全血,并加入 heparin(1000 单位/ml;1.0 份 heparin,9.0 份血样)。在采样后的 10 分钟 内测定白细胞的变形性。研究经过大阪大学项目检审事务所批准,并得到了每个参与者或其 家庭成员的同意。
(n=5)
平均年龄
50.8+19.7
70.4+7.6a
年龄范围
19-74
58-78
性别(男/女)
9/3
3/2
造成脓血症原因
筋膜坏死
9
1
腹膜炎
1
2
肺炎
11ຫໍສະໝຸດ 其它11感染源
格氏阳性球菌
8
5
格氏阴性杆菌
6
4
其它
2
2
如无其它标注,患者数量如所示
A 表示和治愈者有明显不同
结果 病患特征
脓血症的成因包括筋膜坏死(n=10),腹膜炎(n=3),肺炎(n=2)和其它情况(n=2)。 脓血症患者由 12 名男性和 5 名女性组成,平均±SD年龄为 57.3±18.9 岁。分析中将其分为治 愈者(n=12)和未愈者(n=5)(表 1)。造成外伤的原因包括钝伤(n=17)、烧伤(n=3)和 刺伤(n=2)。外伤病人包括 16 名男性和 6 名女性,其平均±SD年龄为 43.8±23.7 岁。ISS≥ 25 的,接受六单位以上输血的病人表现为多器官损伤。17因而,根据其ISS,我们将外伤病 人分为两组:ISS<25 的病人(n=12)和ISS≥25 的病人(n=10)(表 2)。其中 21 名外伤病 患获救,一人由于严重头部损伤在监护 15 天后死亡。
表 1 脓血症病人特征 平均年龄
ISS<25 (n=12) 45.8+15.0
ISS≥25 (n=10) 43.0+22.4
年龄范围 性别(男/女) 平均 ISS ISS 范围 致伤原因
交通事故 摔伤 其它 如无其它标注,患者数量如所示 A 表示 ISS<25 的患者有明显不同