裸鼠成瘤实验注意事项
裸鼠皮下移植瘤实验造模步骤
裸鼠皮下移植瘤实验造模步骤顾名思义，这种模型的建立是将肿瘤细胞或肿瘤组织直接种植在小鼠的皮下。
种植的点也有讲究，一般选择血运淋巴回流丰富的腹股沟和腋窝。
可根据实验设计选择移植点，统一移植点的位置，除了遵守实验统一的条件外，待肿瘤成熟后收集肿瘤时留下照片证据也显得美观。
裸鼠（Balb/c 鼠，无毛发， T 淋巴细胞缺陷）是比较常见和常用的实验用鼠，尤其是在皮下移植瘤肿瘤模型的建立中起到重要作用。
裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。
当然，这种肿瘤模型也有缺陷，即不能很准确的模拟正常人体肿瘤发生发展的过程。
☞肿瘤细胞移植时的简要步骤首先准备好要移植的肿瘤细胞（细胞量根据不同肿瘤略有不同，我们所用的前列腺癌细胞系每个移植点一般选择1x106 左右；肿瘤细胞可与基质胶 1:1 混匀后用 1 ml 注射器吸取，基质胶能够给肿瘤细胞提供营养环境，有助于肿瘤细胞生长）。
戴无菌手套后，将小鼠用左手大拇指和食指捏住颈部皮肤，然后将鼠尾用左手无名指和小指固定于左手大鱼际。
将腋窝或腹股沟用75% 酒精消毒3 次。
右手持吸有肿瘤细胞和基质胶混合液的注射器，在腹股沟或腋窝的位置，45 度斜角进针，注意不要突破腹膜，将针头保持于皮下位置。
然后近水平位置将针头几乎完全插入皮下，将混有基质胶的肿瘤细胞注射入皮下（肿瘤细胞量约1x106），快速退针，左手食指轻压针孔约1 min 后将小鼠放回饲养笼中，注意将小鼠侧放于垫料上，放置其不适呕吐时呕吐物误入呼吸道引起窒息。
2～3 h 后观察小鼠是否苏醒。
如果是利用肿瘤组织（人体肿瘤标本或小鼠移植瘤传代）建立裸鼠皮下移植瘤模型，则需要首先将肿瘤组织用无菌PBS（或1640 培养基）洗涤3 次，然后在无菌平皿上切成或用无菌剪刀剪成<1 mm3体积的小块（种植前可裹基质胶）备用。
将小鼠用水合氯醛麻醉后平卧于解剖板上，四肢用胶带固定，将腋窝或腹股沟用 75% 酒精消毒 3 次，然后用眼科剪剪开约 0.5 cm 小口，小镊子将皮下筋膜与皮肤分开，然后将肿瘤组织放入贴近腹股沟或腋窝的深部，每个位置放置 2～3 块肿瘤组织，注意不同组间统一放置肿瘤组织块数以保持一致。
裸鼠移植瘤造模的注意事项
３．肿 瘤 细胞株 皮 下接种 时要 取对 数 生长期 细胞 ，活细 胞数 大于 ９５％ ，用 无血 清 的培养 基 、ＰＢＳ或生 理 盐 水 调 整细胞 浓 度 ，制 备 成所需 的细胞 悬液 ，每 只小 鼠接 种体 积通 常为 ０．１—０．２ ｍＬ；
９２
中 国 比较 医 学杂 志 ２０１７年 ３月 第 ２７卷 第 ３期 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｃ。ｍｐ Ｍｅｄ Ｍ ａ ｃｈ ２０１７ ，ｖ。Ｉ．２７．Ｎ。． ３ ，
· 专 家 问答 ·
问 ：裸 鼠移植 瘤造模 的注意 事项 答 ：１．实 验要严 格遵 照无 菌 操作 原则 ，所有 手 术器 械 和 物 品要 在 使 用 前严 格 消 毒灭 菌 ，且 实 验 要 在超 净 工 作 台 内完成பைடு நூலகம்；
４．肿 瘤 细胞 株皮 下移植 的部位 较 多 ，可选 择 接 种皮 肤 松 弛 、血 供 良好 、肿瘤 生 长 后 圆 整度 好 、且 易于 实 验操 作 和观察 、便 于测 量肿 瘤体 积 的部位 ，如 腋窝 、大 腿外侧 、颈背部 等 皮下 部位 ；
５．肿瘤 组织 接种 时要 注 意 ，所 取 的肿瘤 组织 需新 鲜 、生长 良好 ，尽 可能 剔 除包膜 和坏 死 的肿瘤 组织 ； ６．实 验 中如需 使用麻 醉 剂 ，要 根据 实 验时 间长 短选择 适 当 的麻醉 剂 ，同时需 要 注意 麻 醉剂 的用量 ，以达 到 对动 物机体 干扰最 小而 疼痛 抑制 效果 最 大为最 佳 ； ７．裸 鼠需 要原 位 移植肿 瘤 时 ，脏 器手 术应使 用较 细 的 可 吸 收缝 合 线 以减 少 对 脏 器 的损 伤 ，术 后 应 连续 三天 给予抗 生 素 以防感 染 ； ８．手 术 后 的动物 要与 清醒 的动 物分 开饲 养 ，以 免挤 压 、踩 踏 、咬伤 ，待 小 鼠度 过术 后 恢 复期 后 按 实 验需 要 分 组 饲 养 ； ９．移植 肿瘤 后要 加强 对动 物 的护理 ，应 注意 保持 动物 实验 室合 适 的温度 、湿 度 ，以及 笼 具 、垫料 、饲 料 和 饮水 等 物 品的洁净 ； ｌ０．裸 鼠皮 下 移 植 瘤 模 型 利 于 观 察 肿 瘤 的生 长 情 况 ，注 意 肿 瘤 生 长 不 宜 太 大 （直 径 应 小 于 ＜１．５ ｅｌｎ）。
裸鼠成瘤实验注意事项
相关裸鼠皮下成瘤的建议
1、裸鼠的品系。 2、裸鼠成瘤用的材料：细胞的选择。 3、客户的具体要求：比如说肿瘤形成部位，是否需要详细
记录肿瘤的大小变化，是否需要取材后需要怎么拍摄裸鼠 的照片等等。
谢谢大家！
感谢观看
• 裸大鼠(基因符号rnu )：
一般特征似裸小鼠，但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全无 毛，头部及四肢毛更多。裸大鼠易患呼吸道疾病。
裸鼠的选择
虽然说以裸大鼠代替裸小鼠，具有移植肿瘤大，取血 量多，可行某些外科小手术等优点。因此比裸小鼠有一定 优越性，其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高，另外裸大 鼠目前不怎么流行。所以我们实验室常用的是BALB/c-nu 裸小鼠。
-
A549 +
裸鼠成瘤
细胞培养：
细胞的状态以及数量是裸鼠皮下成瘤很关键的一步。细胞 状态良好，对数生长期，接种很容易形成肿瘤，反之则会 导致失败。即浪费了细胞，又错过了裸鼠成瘤的最佳时期
-
+
裸鼠成瘤
细胞接种：
接种的细胞量：无血清培养基重悬成1*107个/ml的悬液，只/针。也 就是一只裸鼠最少要用200W个细胞，有的细胞需求可能会达到 1000W个/只。
裸鼠（纯合子nu/nu突变鼠）主要表现为无毛（但可看到一 种细毛组织学证明有被毛滤泡）以及缺乏正常胸腺。杂合子小 鼠（nn/+）各方面表现都正常。
小鼠中有若干突变基因，它可产生一种为无毛的表现型（ phenotype），例如无胸腺裸鼠（Nude）、裸鼠（Naked）、无 毛鼠（Hairless）、无鼻毛鼠（Rhinol），不要把这些突变鼠基 因相互混淆。裸鼠的唯一特性是胸腺缺陷表现型，因此，不能 将“裸鼠”与“无毛鼠”两词交换使用。
裸鼠肿瘤接种技术实验操作方法
裸鼠肿瘤接种技术实验操作方法裸鼠肿瘤接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式，接种取材有手术活检标本、癌性胸腹水标本和体外培养的细胞系三种。
l楼主看来是做体外培养的细胞的裸鼠接种，一般用带6号针头的注射器取适量细胞悬液注射于裸鼠的皮下，部位看试验要求而定，一般在腋下或背部皮下，每个接种部位注射0.1-0.2ml。
就是将培养的细胞收集起来调整到适宜浓度重悬于不含血清的培养液或PBS中，放于冰盒中携至动物房，直接注射即可。
是牵涉到细胞株的成瘤性问题，可以通过增大细胞悬液浓度的办法来解决。
一般细胞浓度可在1*10的6次方到5*10的7次方之间，浓度再大就可能打不进去了。
具体浓度需要查相关文献。
如果成瘤率太低，可以通过把瘤块在裸鼠身上传2—3代的方法提高成瘤率，即将已成瘤鼠的瘤块取出接种于新鼠身上，成瘤后再取出接种新鼠，如此传几代，肿瘤性质稳定后，再将肿瘤取出，剪碎、研磨、匀浆成为细胞悬液后再接种。
一、可移植性肿瘤的建立方法1．腹水瘤的建立将动物实体瘤细胞注入受体动物腹腔内，或将实体疤移植于受体动物的腹壁内，肿瘤生长后引起腹水，腹水内含高大量瘤细胞可移植传代．即为腹水瘤。
建议腹水瘤初期、腹水往往是血性，多次传代后逐渐变为乳白色的瘤性腹水。
腹水如培养基一样供给瘤细胞生长所需的营养。
若将腹水瘤细胞注入皮下，又可形成实体瘤。
由于瘤细胞游离在腹水内，因此总呈圆形，体积可有大、中、小之分c：r．在一些细胞边缘偶见大小不等的泡状突起，称之为“鼓泡”。
一般在接种后第5天时核分裂相达高峰。
偶见三吸或四极分裂。
二、肿癌移植方法1．常规保种传代方法(1)腹水瘤移植方法：瘤源一般用接种后第5～6天的腹水，抽出的腹水以乳白色为佳。
接种应从下腹部件入受体动物腹腔，一般接种o．1一o．2m1。
可在腹水内加适量的抗凝药物。
(2)实体型肿瘤接种法：1)小块接种法：将瘤取出后，切开，选出生长良好而无变性坏死、呈谈红色、鱼肉状的瘤组织，切成小块(约5*5*5mm)；在受体动物腹部外例剪开—个小口，用无钩眼科镊子夹取小块，送入切口内皮下。
肝胆胰脾裸鼠皮下成瘤及原位瘤动物实验方案
裸鼠皮下成瘤及原位瘤动物实验方案分组:正常细胞组、EGFR1转染无关siRNA组、EGFR1转染目的基因（每组6只）。
细胞准备及注射裸鼠方法：到动物室准备实验。
取出未作处理的小鼠和处理后小鼠用鼠笼，顺序摆放在超净台中。
选体形较大的小鼠称重，以3μl/g剂量，腹腔注射10％水合氯醛麻醉小鼠。
约5分钟，小鼠开始进入安静状态，将其仰卧固定。
切忌麻醉剂过量使用。
(1)铺白布于鼠板上，仰卧位固定小鼠四爪，碘伏棉球消毒腹侧面上至颈部、下至腹股沟、后至腋后线。
消毒两次。
铺手术巾于小鼠上，在其左侧剪口（4*4cm），暴露其左侧腹部, 用碘伏消毒一次。
在左侧肋弓下缘1cm处向下剪开2cm皮肤，暴露腹壁肌肉，镊子牵拉腹壁肌肉，避开腹腔内脾脏，剪开腹壁肌肉，暴露内脏。
用棉签蘸PBS，拨出脾脏下极，切忌牵拉，以免损伤脾脏和胰腺。
(2)找到脾脏同时，用25微升Matrigel混合于细胞管中，打悬细胞沉淀，使细胞分散均匀成单细胞悬液。
用BD针吸净EP管中的单细胞悬液，稍退针芯，打出气泡，在脾脏下极内侧（凹面）进针向脾门方向约2mm开始注射细胞，注射完毕停留约30秒钟，缓慢退出针，以防细胞渗出。
同时用蘸PBS的棉球压迫周围出血点止血。
(3)用注射器吸取庆大霉素注射液（用生理盐水250：1稀释）约400微升，注入腹腔，棉球蘸干皮缘渗出的抗生素。
开始缝合腹壁肌肉（连续缝合4针）。
再次用注射器吸取庆大霉素注射液约400微升冲洗缝合口，棉球蘸干。
缝合皮肤（间断缝合4针）。
碘伏棉球消毒缝合口。
撤除固定，使小鼠处于自然体位，放于鼠笼中。
(4)所有细胞注射完毕，剪耳标记，记录剪耳标记及分组情况。
Day5-7：注意小鼠的状态，及时发现小鼠是否有因手术刺激、胰腺损伤、感染等死亡的情况。
Day42：颈椎离断，处死小鼠，解剖尸体，观察脾脏肿瘤生长状况，肝脏、肺脏及其他器官是否有转移瘤形成。
所有可疑组织均做好标记，拍照，若有表面结节，计数后，冻于液氮中。
裸鼠成瘤实验安全操作及保养规程
裸鼠成瘤实验安全操作及保养规程引言近年来，裸鼠成瘤实验逐渐成为一种常见的实验手段，被广泛应用于生物医学领域的基础、药物研究。
然而，由于实验过程中需要使用大量的化学试剂和高度精密的操作，所以如果在实验操作过程中未能注意安全问题，会带来诸多安全隐患。
因此，为了确保实验的顺利进行，有效避免实验操作中出现意外情况，本文将针对裸鼠成瘤实验，列出相应的安全操作及保养规程。
裸鼠成瘤实验前的准备工作在进行裸鼠成瘤实验时，需要提前准备充足的实验器材和生化试剂，同时也需要对实验室的环境进行合理的调整。
下面列出相应的注意事项：1.实验室环境要求实验室环境需保持干净整洁，避免有任何因素干扰实验的进行。
库房要求干燥、通风，实验区不得放置一切与实验无关的器械、试剂或物品，以确保实验室内部的清洁程度，并保持实验设备的灭菌。
2.实验器材和试剂的准备裸鼠成瘤实验器材需保证正常功能，严格按照使用说明使用，并对每种器材进行标注。
在实验前，应对涉及到的试剂进行检查，确保其没有已失效或污染，充分消毒。
对于不同类型的裸鼠成瘤实验所需要的各种器材和试剂的使用方法进行预见性的了解，将可在实验操作之前大幅降低因操作不当而产生的误差和成本。
3.人员准备实行裸鼠成瘤实验的操作人员应具有科学背景，拥有必要的实验技能和实验安全意识。
在实验操作之前，必须全面了解实验流程及实验器材的使用，以及实验操作过程中所需要的基本操作技能并保证其全面掌握。
裸鼠成瘤实验中的关键操作技能为了确保裸鼠成瘤实验的成功，降低实验操作中产生的偏差，必须合理掌握实验中的关键操作技能。
下面分别介绍实验中的几个关键操作技能：1.裸鼠的饲养和保养保证裸鼠进食和饮水的质量和数量，确保空气清洁，为其提供足够的光源和温度环境，定期检查和清理它们的笼子和环境等都是保证裸鼠安全、健康和成瘤的关键操作技能。
2.药物的制备及添加药物的选择要合理，必须进行初步检测。
准确制备药物，严格按照说明书添加化学试剂，安全量。
裸鼠荷瘤方法及注意事项
关于肿瘤细胞株的选择，确实是一个很麻烦的问题，各类文献中提到过的细胞株有很多，但是一般而言，我觉得，对于我们做裸鼠肿瘤模型，细胞株的选择应该考虑一下几个方面：1. 国际公认度，虽然SFDA的指导原则上表示只要是建株细胞株均可以，但是一般来说，还是应该尽量考虑国际上比较公认的细胞株。
2. 体内生长情况，很多细胞株，在文献中有很高的出镜率，但是实际上，基本都是从体外开始有名，所以很多人就硬生生的往体内套，结果就是吃力不讨好，比如楼主提到的A549，还有MCF-7，都是很有名气的细胞株，但是在体内却不是一个好的试验对象，成瘤率低，生长慢，均一度差。
现在国内的很多研发单位，特别是一些公司的领导们，缺乏这方面的认识，动不动就把这些著名的细胞株挂在嘴边，硬压着一线的研究人员去花功夫做这些细胞株，作的不好，就怀疑大家的水平如何如何的，奶奶的，对此非常生气！3. 药物的敏感性，这一点常常被大家忽视，大部分的裸鼠肿瘤模型都是为抗肿瘤药物的筛选以及研究服务的，但是常常大家只考虑了这个细胞株是不是好做，但是没有考虑到细胞株本身对于药物的敏感性，比如Lovo细胞，国际公认度也还可以，体内生长情况也很棒，但是对于药物的敏感性不佳，大部分的常规化疗药物到了它这里，抑瘤率都会下降，显而易见，对于抗肿瘤药物的筛选来说，它不是一个好的选择。
另外说一点，体内与体外的关系，现在做体内的人，常常被体外的人牵着鼻子走，体外做出来什么什么细胞株敏感，体内的人就得吭哧吭哧的去做这个，但是却死活做不好，其实，现在我和一些老前辈们的观点是，体内和体外应该协调好细胞株的选择问题，体外的人手上有大把的细胞株可以选择，如果，体内的人不去和他们协调，那么将永远被牵着鼻子走，受累还不讨好，应该大家坐下来，一起选择20~30种细胞株作为常规的筛选细胞株，这就足够了，细胞株选择的时候考虑好方向（胃癌、肝癌、肺癌什么的）、靶点（EGF、vEGF等等），不能漫无边际的抓着哪个体内就的做哪个，谁也没有这个本事啊。
裸鼠成瘤实验
裸鼠成瘤实验裸鼠服务流程1、操作方案设计2、方法开发3、细胞制备4、裸鼠成瘤裸鼠皮下成瘤动物实验方法分组:SW620细胞组、SW620转染无关siRNA组、SW620转染目的基因（每组6只）。
细胞准备及注射裸鼠方法：到动物室准备实验。
取出未作处理的小鼠和处理后小鼠用鼠笼，顺序摆放在超净台中。
选体形较大的小鼠称重，以3μl/g剂量，腹腔注射10％水合氯醛麻醉小鼠。
约5分钟，小鼠开始进入安静状态，将其仰卧固定。
切忌麻醉剂过量使用。
(1)铺白布于鼠板上，仰卧位固定小鼠四爪，碘伏棉球消毒腹侧面上至颈部、下至腹股沟、后至腋后线。
消毒两次。
铺手术巾于小鼠上，在其左侧剪口（4*4cm），暴露其左侧腹部, 用碘伏消毒一次。
在左侧肋弓下缘1cm处向下剪开2cm皮肤，暴露腹壁肌肉，镊子牵拉腹壁肌肉，避开腹腔内脾脏，剪开腹壁肌肉，暴露内脏。
用棉签蘸PBS，拨出脾脏下极，切忌牵拉，以免损伤脾脏和胰腺。
(2)找到脾脏同时，用25微升Matrigel混合于细胞管中，打悬细胞沉淀，使细胞分散均匀成单细胞悬液。
用BD针吸净EP管中的单细胞悬液，稍退针芯，打出气泡，在脾脏下极内侧（凹面）进针向脾门方向约2mm开始注射细胞，注射完毕停留约30秒钟，缓慢退出针，以防细胞渗出。
同时用蘸PBS的棉球压迫周围出血点止血。
(3)用注射器吸取庆大霉素注射液（用生理盐水250：1稀释）约400微升，注入腹腔，棉球蘸干皮缘渗出的抗生素。
开始缝合腹壁肌肉（连续缝合4针）。
再次用注射器吸取庆大霉素注射液约400微升冲洗缝合口，棉球蘸干。
缝合皮肤（间断缝合4针）。
碘伏棉球消毒缝合口。
撤除固定，使小鼠处于自然体位，放于鼠笼中。
(4)所有细胞注射完毕，剪耳标记，记录剪耳标记及分组情况。
Day5-7：注意小鼠的状态，及时发现小鼠是否有因手术刺激、胰腺损伤、感染等死亡的情况。
Day42：颈椎离断，处死小鼠，解剖尸体，观察脾脏肿瘤生长状况，肝脏、肺脏及其他器官是否有转移瘤形成。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
谢谢大家！
另外裸鼠理论上是1个裸鼠只能接种1针，形成1个肿瘤。因为2个或 者以上的肿瘤是会相互影响的。
裸鼠成瘤
附：我们实验一些裸鼠成瘤的成功案例
Hep-G2细胞
A375细胞
一些其他情况下的裸鼠成瘤 裸鼠皮下成瘤后，除了一些常规的检测外 我们一般可进行以下一些实验操作：
裸鼠活体荧光
相关裸鼠皮下成瘤的建议 1、裸鼠的品系。 2、裸鼠成瘤用的材料：细胞的选择。 3、客户的具体要求：比如说肿瘤形成部位，是否需要详细 记录肿瘤的大小变化，是否需要取材后需要怎么拍摄裸鼠 的照片等等。
细胞慢病毒感染
附：一些细胞的慢病毒感染效果图
K562
A549
裸鼠成瘤
细胞培养：
细胞的状态以及数量是裸鼠皮下成瘤很关键的一步。细胞 状态良好，对数生长期，接种很容易形成肿瘤，反之则会 导致失败。即浪费了细胞，又错过了裸鼠成瘤的最佳时期
-
+
裸鼠成瘤
细胞接种：
接种的细胞量：无血清培养基重悬成1*107个/ml的悬液，0.2ml/只/ 针。也就是一只裸鼠最少要用200W个细胞，有的细胞需求可能会 达到1000W个/只。 接种的部位大部分颈部和腋下皮下。血丰富，能提供大量的营养。 当然，这个也是可以调整的。
细胞株的选择 细胞的选择大致有一下几个方面：
1.国际公认度较高的细胞株。 2.根据体内生长情况来确定，很多细胞株，在文献中有 很高的出镜率，但是实际上，基本都是从体外开始有名。
当然，我们对于细胞株的选择是没有选择的！
常见的细胞株
常规较容易成瘤的细胞：
Hep-G2（肝癌，Hep2（喉癌），NCI-H460(大细胞肺)，A431(表皮 癌),SK-OV-3（卵巢癌），MCF-7（乳腺癌），A375/B16-F10（人黑 色素瘤细胞）。
裸鼠成瘤方式
1.人体原发癌
裸 鼠 成 瘤
结肠癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、黑色素瘤 、淋巴瘤、白血病、肾癌、宫颈癌、软组织 肉瘤和骨肉瘤等移植于裸鼠、获得了一定百 分比（35.7%）的良好生长，并可传代。
2.建株的人体肿瘤组织培养细胞
理论上建株的肿瘤细胞均可以
我们实验室均采用细胞株作为材料，这个方式是 性价比最高的，操作简便，材料安全且容易获取。
• 裸大鼠(基因符号rnu )：
一般特征似裸小鼠，但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全无 毛，头部及四肢毛更多。裸大鼠易患呼吸道疾病。
裸鼠的选择 虽然说以裸大鼠代替裸小鼠，具有移植肿瘤大，取血 量多，可行某些外科小手术等优点。因此比裸小鼠有一定 优越性，其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高，另外裸大 鼠目前不怎么流行。所以我们实验室常用的是BALB/c-nu 裸小鼠。 随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响(如病毒感染), 裸鼠体内正常T细胞会增加，故接种肿瘤实验一般采用4-6周龄基因符号nu):
无毛(hair less),无胸腺(athymus).幼鼠(3－4周龄),成年鼠(6－8周龄。 抵抗力差，易在SPF环境下可生存，所用的笼具、垫料、饲料、 饮水 患病毒性肝炎和肺炎，因而饲养和繁殖要求条件比较严格，等都要求 经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养，以保证长期存活并进行繁殖。
2、MOI值
细胞感染达到80%以上所需MOI值，这个大部分细胞是可以 查到，不过因为因为慢病毒感染细胞是很灵活的，因此MOI 值的选择也是很有差异性的，具体情况具体分析。
细胞慢病毒感染 附：慢病毒使用量的相关计算公式 MOI=（慢病毒使用的体积*慢病毒滴度）/ 需要感染的细胞数 其中：慢病毒使用体积单位为ml 慢病毒滴度单位为TU/ml 例如： Hep-G2细胞，MOI=20，慢病毒滴度=1.0*108 TU/ml, 24孔板的细胞总数：2.0*105个。 因此：感染24孔板中1孔的HEP-G2细胞所需要的慢病毒体积 为： (20* 2.0*105)/ 1.0*108 =0.04ml
裸鼠皮下成瘤
---慢病毒感染后的细胞
威斯腾生物技术中心
2014-9-1
裸鼠
无胸腺裸鼠（Nude Mouse，简称裸鼠）。目前已成为医学 生物学研究领域中不可缺少的实验动物模型。特别是在肿瘤学 、免疫学、药品与生物制品的安全性评价及有效药品的筛选等 实验方面，它有着特殊的价值。 裸鼠（纯合子nu/nu突变鼠）主要表现为无毛（但可看到一 种细毛组织学证明有被毛滤泡）以及缺乏正常胸腺。杂合子小 鼠（nn/+）各方面表现都正常。 小鼠中有若干突变基因，它可产生一种为无毛的表现型（ phenotype），例如无胸腺裸鼠（Nude）、裸鼠（Naked）、无 毛鼠（Hairless）、无鼻毛鼠（Rhinol），不要把这些突变鼠基 因相互混淆。裸鼠的唯一特性是胸腺缺陷表现型，因此，不能 将“裸鼠”与“无毛鼠”两词交换使用。
可以成瘤但是比较慢的细胞：
CNE（鼻咽癌），A549（肺癌），SPC-A-1（肺腺癌）。HT-29 （结肠癌），EL-7402（肝癌）。
一些比较有争议的细胞：
Hela（宫颈癌），HCT（人回盲肠癌细胞/人结直肠癌腺癌细胞）。
细胞慢病毒感染
1、慢病毒保存
理论上慢病毒可在-80℃保存6个月，在4℃可保存3天。因为 慢病毒每次冻融会降低病毒滴度10%，因此慢病毒实验最好 是提前分装。