3培养基灭菌
实验三：培养基的制备与灭菌
实验三：培养基的制备与灭菌一、实验目的与要求：（1）熟悉玻璃器皿的洗涤包装和灭菌前的准备工作。
（2）学习微生物培养基和无菌水的制备，了解培养基配方中各成分的作用、制备流程及各环节的操作技术与应用。
（3）学习并掌握培养基的高压蒸气灭菌原理、操作关键技术和灭菌技术。
二、实验原理培养基的制备原理培养基是按照微生物生长发育的需要，用不同组分的营养物质调制而成的营养基质。
人工制备培养基的目的，在于给微生物创造一个良好的营养条件。
把一定的培养基放入一定的器皿中，就提供了人工繁殖微生物的环境和场所。
自然界中，微生物种类繁多，由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究上的目的不同，所以培养基在组成原料上也各有差异。
但是，不同种类和不同组成的培养基中，均应含有满足微生物生长发育的水分、碳源、氮源、无机盐和生长素以及某些特需的微量元素等。
此外，培养基还应具有适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力及一定的氧化还原电位和合适的渗透压。
根据制备培养基对所选用的营养物质的来源，可将培养基分为天然培养基、半合成培养基和合成培养基三类。
按照培养基的形态可将培养基分为液体培养基和固体培养基。
根据培养基使用目的，可将培养基分为选择培养基、加富培养基及鉴别培养基等。
培养基的类型和种类是多种多样的，必须根据不同的微生物和不同的目的进行选择配制，本实验分别配制常用培养细菌、放线菌和真菌的牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号合成培养基和马铃薯蔗糖培养基等固体培养基。
固体培养基是在液体培养基中添加凝固剂制成的，常用的凝固剂有琼脂、明胶和硅酸钠，其中以琼脂最为常用，其主要成份为多糖类物质，性质较稳定，一般微生物不能分解，故用凝固剂而不致引起化学成份变化。
琼脂在95℃的热水中才开始融化，融化后的琼脂冷却到45℃才重新凝固。
因此用琼脂制成的固体培养基在一般微生物的培养温度范围内(25℃-37℃)不会融化而保持固体状态。
高压蒸气灭菌原理高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。
培养基用什么方法灭菌
培养基用什么方法灭菌培养基在微生物实验室中是必不可少的，但是在使用培养基前，我们需要对其进行灭菌处理，以确保实验结果的准确性和可靠性。
那么，培养基用什么方法进行灭菌呢？下面将为大家详细介绍几种常见的培养基灭菌方法。
首先，我们可以选择高压蒸汽灭菌法。
这是一种常见的培养基灭菌方法，其原理是利用高温高压的蒸汽对培养基进行灭菌。
在实验室中，我们通常会使用高压灭菌器来进行这一操作。
在进行高压蒸汽灭菌时，需要将培养基装入专用的培养皿或试管中，然后放入高压灭菌器中进行灭菌处理。
这种方法能够有效地杀灭培养基中的各类细菌、真菌和孢子，确保培养基的无菌状态。
其次，还可以选择紫外线灭菌法。
紫外线灭菌是一种简单、快速的灭菌方法，适用于一些对高温高压敏感的培养基。
在进行紫外线灭菌时，我们需要将培养基暴露在紫外线灭菌箱中，利用紫外线的杀菌作用对培养基进行灭菌处理。
需要注意的是，在进行紫外线灭菌时，要确保培养基暴露在紫外线下的时间足够长，以确保彻底灭菌。
另外，还可以选择化学灭菌法。
化学灭菌法是利用化学药剂对培养基进行灭菌处理的方法。
常用的化学灭菌剂包括过氧化氢、乙醛等，这些化学物质能够有效地杀灭培养基中的各类微生物。
在进行化学灭菌时，需要将适量的化学灭菌剂加入培养基中，然后进行充分混合，确保培养基受到均匀的灭菌处理。
除了以上几种方法外，还有一些其他的培养基灭菌方法，如滤过灭菌法、辐射灭菌法等。
在选择培养基灭菌方法时，需要根据实验需求和培养基的特性进行合理选择，以确保灭菌效果和实验结果的准确性。
总的来说，培养基的灭菌是微生物实验中非常重要的一环，选择合适的灭菌方法能够有效地保证培养基的无菌状态，确保实验结果的可靠性。
在进行培养基灭菌时，需要严格按照操作规程进行，确保每一步都符合要求，以避免因灭菌不彻底而导致实验结果的偏差。
希望本文所介绍的培养基灭菌方法能够对大家有所帮助，也希望大家在进行微生物实验时能够严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。
培养基配置和灭菌的注意事项
培养基配置和灭菌的注意事项一、培养基配置1.选用适当的培养基组成：根据实验的需要选择适当的培养基成分，包括碳源、氮源、矿质盐、维生素等。
根据不同微生物的要求，可以选择不同的培养基，如富集培养基、选择性培养基等。
2.正确计量和混合培养基成分：根据实验需要和比例，精确地称取和混合培养基成分。
注意避免污染和交叉污染，使用干燥器、称重纸和清洁器具等进行操作。
3.正确调节培养基的pH值：根据不同微生物的偏好，调节培养基的pH值。
使用pH计和相应的酸碱溶液进行调节，确保培养基的pH值符合微生物的需求。
4.加热溶解和固化培养基：将培养基成分加入适量的蒸馏水中，加热搅拌溶解，然后分装到培养皿或试管中。
对于固化培养基，需要加入适量的琼脂或琼脂糖，在混合均匀后加热至溶解，然后分装到培养皿或试管中。
二、培养基灭菌1.选择合适的灭菌方法：有常见的三种灭菌方法，包括热处理（如蒸汽灭菌、热风灭菌）、化学灭菌和滤器灭菌。
根据实验需求和培养基的性质选择合适的灭菌方法。
2.准备合适的灭菌器具：根据实验需求和培养基的量，选择合适的灭菌器具，如蒸馏锅、高压灭菌器、紫外线灭菌箱等。
3.正确操作灭菌设备：根据灭菌设备的说明和操作指南，正确操作和调节灭菌设备。
4.合理选择灭菌时间和温度：根据不同培养基的特性和实验需求，合理选择灭菌时间和温度。
通常情况下，蒸汽灭菌的时间为15-30分钟，温度为121摄氏度；热风灭菌的时间为1-2小时，温度为160摄氏度。
5.注意灭菌后的处理：在灭菌后，及时关闭灭菌设备，避免灭菌后的污染。
将培养基冷却后，进行温度验证，然后保存在合适的温度和条件下。
常用培养基制备灭菌与消毒方法
消毒与灭菌
消毒：消灭病原菌和有害微生物的营养体 灭菌：杀灭一切微生物的营养体，芽胞和孢子。
方法：
物理的方法：加热、过滤、辐射 化学的方法：用化学试剂抑制或杀灭微生物。主要破
坏细菌代谢机能。如重金属离子，磺胺类药物及抗 生素等。
常用培养基制备灭菌和消毒方法
加热法：
干热法：火焰灼烧灭菌和热空气灭菌
常用培养基制备灭菌和消毒方法
常用培养基制备灭菌和消毒方法
常压蒸汽灭菌：
对于不宜用高压蒸汽灭菌的培养基如明胶培养基、牛乳 培养基，含糖培养基等可采用此法。彻底灭菌则采用 间歇灭菌方法。 煮沸灭菌法： 适用注射器和解剖器皿，时间10－15min， 超高温杀菌 135-150°C和2-8s对牛乳和其它液态食品灭菌。
常用培养基制备灭菌和消毒方法
常用培养基制备灭菌和消毒方法
湿热法 ：
原理：因为湿热中菌体吸水，蛋白质容易凝固， 因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低；湿 热的蒸气有潜热存在。所以效果比同温度下干 热好。
高压蒸汽灭菌法： 1、设备：高压灭菌锅 2、时间长短根据灭菌物品的种类和数量不同有
所变化。 3、适用于养基、工作服、橡胶物品等的灭菌，
养箱 中培养将生长好的菌种用牛皮纸包好，置4℃
高氏1号培养基是用于分离和培养放线菌的 合成培养基。其配方如下：
可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g， K2HPO4·3H2O 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，琼脂15～ 20g，水1000mL，pH7.4～7.6。
常用培养基制备灭菌和消毒方法
也可用于玻璃器皿的灭菌。 4、注意事项：
1）冷空气彻底排除；2）加水；3）压力降为 “0”时方可打开。
高中生物选择性必修三知识点积累背诵版
高中生物选择性必修三知识点积累1、酿醋用醋酸杆菌，好氧细菌，要持续通入无菌空气，发酵过程中无气体释放。
2、酿酒用酵母菌，单细胞真菌，先有氧呼吸使酵母菌数量增多，再无氧呼吸进行酒精发酵3、泡菜，酸奶用乳酸杆菌是厌氧细菌，发酵过程严格控制无氧环境。
4、腐乳用毛霉是好氧真菌。
5、培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，固体培养基加了琼脂，琼脂不提供碳源和氮源。
6、灭菌方法:湿热灭菌法、干热灭菌法，灼烧灭菌法7、培养基灭菌用高压蒸汽灭菌法8、将单个微生物分散在固体培养基上的方法有:平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用来对微生物计数，此方法为活菌计数法，得到的菌落数比实际活菌数少，原因:当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
对微生物计数还可用显微镜直接计数法，该方法的统计结果一般是活菌数和死菌数的总和因此比实际活菌数目偏大。
9、发酵工程的中心环节:发酵罐内发酵10、植物组织培养的原理:植物细胞的全能性，经历了脱分化和再分化的过程植物细胞培养的原理:植物细胞增殖，选择愈伤组织中的高产细胞系进行培养。
动物细胞培养的原理:细胞增殖诱导植物细胞融合和诱导动物细胞的融合的原理都是:细胞膜有一定的流动性诱导动物细胞融合特有的方法:用灭活的病毒诱导11、利用动物细胞融合的方法可以使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，该诱导过程经历了两次筛选，第一次用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次用抗体检测的方法筛选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞杂交瘤细胞的特点:能产生专一抗体也能无限增殖杂交瘤细胞产生的抗体为单克隆抗体，单克隆抗体的特点是特异性强，灵敏度高，可大量制备。
12、植物体细胞杂交:先诱导两种植物细胞融合形成杂种细胞，再用植物组织培养技术把杂种细胞培育成杂种植株。
植物体细胞杂交技术在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等方面展示出独特优势。
13、动物细胞工程包括：动物细胞培养，动物细胞融合和动物细胞核移植，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
3第三章-灭菌
第一节 灭菌的原理和方法
一、常用的灭菌方法 1 化学物质灭菌 内容：苯酚、高锰酸钾、新洁尔灭、过氧乙酸、
漂白粉等化学药剂易于微生物细胞中的某些成分 发生化学反应，使蛋白质变性、酶类失活、细胞 膜透性发生改变等，导致微生物死亡。 特点：化学物质灭菌法比较适于生产环境或小型 器具的灭菌，可采用浸泡、添加、擦拭、喷洒、 气态熏蒸等方式进行。可用于无法用加热方法灭 菌的物品。 注意：由于培养基中蛋白质等营养物质也容易与 上述化学药剂发生反应，且药物加入培养基后很 难去除，因此化学物质不适于培养基的灭菌。
待灭菌的培养基原料介待灭菌的培养基原料介质用泵打入喷射加热器质用泵打入喷射加热器加热蒸汽以较高的速度加热蒸汽以较高的速度从喷嘴喷出借高速流体从喷嘴喷出借高速流体的抽吸作用与培养基的抽吸作用与培养基直接混合加热升温至预定灭直接混合加热升温至预定灭菌温度菌温度140140后进后进入管式维持器保温一段时间入管式维持器保温一段时间23min23min进行灭菌
相对热阻 1.0
3 000 000 2~10 1~5
如上图示，细菌芽孢较其他类型的微生物对湿热的 热阻大得多。因此，在设计灭菌操作时常以能否杀 死热阻大的细菌芽孢为指标，只有杀死了芽孢，才 可认为是彻底灭菌。
UV指紫外线灭菌
2 微生物的热死规律
热死：微生物的热死是指微生物受热失 活。
研究表明，在一定温度下微生物的热死 遵循分子反应速度理论。在微生物受热 失活的过程中，微生物不断地被杀死， 活菌数不断减少，其死亡速率与任何瞬 间残存的活菌数成正比。这就是“对数 残留定律”，可用下式表示：
4①--B热空气灭菌
内容：利用干热空气在一定设备内对各种 用具、物品进行杀菌。160~170℃ 1~1.5h （电热干燥箱）
培养基制作实训报告总结
一、实训目的通过本次培养基制作实训，使学生掌握培养基的配制、灭菌、接种、培养等基本操作技能，提高学生对微生物实验操作的熟练程度，培养学生的实验操作规范和科学思维。
二、实训内容1. 培养基的配制（1）原料的选择与称量：根据培养基配方，选择合适的原料，使用电子天平准确称量。
（2）混合溶解：将称量好的原料放入烧杯或其他容器中，加入适量的水，加热溶解，不断搅拌。
（3）调整pH值：用pH试纸或pH计测定培养基的pH值，用NaOH或HCl溶液调节至所需范围。
（4）加指示剂：对某些培养基，按要求加入一定量的指示剂。
2. 培养基的灭菌（1）高压蒸汽灭菌：将培养基分装于试管或三角瓶内，塞好棉塞，用牛皮纸包扎好，放入高压蒸汽灭菌锅中，121-126℃灭菌30分钟。
（2）干热灭菌：将培养基放入干燥箱中，160℃灭菌2小时。
3. 培养基的接种与培养（1）接种：用无菌接种环或接种针，将菌株接种到培养基上。
（2）培养：将接种好的培养基放入恒温培养箱中，根据菌株生长条件进行培养。
三、实训结果与分析1. 培养基的配制通过本次实训，我们掌握了培养基的配制方法，包括原料的选择、称量、混合溶解、调整pH值等步骤。
在操作过程中，我们注意了无菌操作，确保了培养基的质量。
2. 培养基的灭菌在灭菌过程中，我们使用了高压蒸汽灭菌和干热灭菌两种方法。
高压蒸汽灭菌效果较好，能够有效杀灭培养基中的细菌、芽胞等微生物。
干热灭菌适用于不耐高温的培养基。
3. 培养基的接种与培养在接种过程中，我们注意了无菌操作，防止了污染。
在培养过程中，根据菌株的生长条件，我们成功培养出了所需的微生物。
四、实训体会与收获1. 通过本次实训，我们掌握了培养基的配制、灭菌、接种、培养等基本操作技能，提高了实验操作规范和科学思维能力。
2. 实训过程中，我们学会了如何根据实验目的选择合适的培养基，以及如何调整培养基的配方。
3. 在操作过程中，我们注意了无菌操作，防止了污染，保证了实验结果的准确性。
培养基用什么方法灭菌
培养基用什么方法灭菌
培养基在微生物实验中起着至关重要的作用，而培养基的灭菌则是确保实验结
果准确性的关键步骤。
那么，培养基用什么方法灭菌呢？接下来，我们将详细介绍几种常用的培养基灭菌方法，以及它们各自的优缺点。
首先，常见的培养基灭菌方法之一是高压蒸汽灭菌。
这是一种常用的灭菌方法，其原理是利用高温高压的蒸汽对培养基进行灭菌。
这种方法的优点是能够灭杀各类微生物，包括芽孢菌和病毒等，灭菌效果好，且操作相对简单。
然而，高压蒸汽灭菌设备价格昂贵，对实验室条件要求较高。
其次，干热灭菌是另一种常用的培养基灭菌方法。
这种方法的原理是利用高温
对培养基进行灭菌，其优点是不会使培养基受潮，灭菌效果好且操作简便。
然而，干热灭菌需要较长时间来达到灭菌效果，且对部分热敏感物质有破坏作用。
另外，化学灭菌也是一种常见的培养基灭菌方法。
这种方法的原理是利用化学
药剂对培养基进行灭菌，其优点是操作简便，不需要高压设备，且能够有效灭杀各类微生物。
然而，化学灭菌对某些化学药剂敏感的微生物可能产生抗药性，且残留的化学药剂可能对实验结果产生影响。
最后，紫外线灭菌是一种常用的表面灭菌方法。
这种方法的原理是利用紫外线
对培养基表面进行灭菌，其优点是操作简便，不会产生化学污染，且灭杀效果明显。
然而，紫外线灭菌只能对表面进行灭菌，对深层微生物的灭杀效果较差。
综上所述，不同的培养基灭菌方法各有优缺点，实验室在选择灭菌方法时需要
根据实际情况进行综合考虑。
在进行培养基灭菌时，要严格按照操作规程进行，确保实验结果的准确性和可靠性。
希望本文对您有所帮助，谢谢阅读！。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
将上式积分得： 将上式积分得： 两边取对数： 两边取对数：
dN = k tdt ∫No − N ∫0 No ln = kt Nt
Nt
对数残留规律公式： 对数残留规律公式：
2.303 No t= log k Nt
开始灭菌时原有活菌数（ 开始灭菌时原有活菌数 No —开始灭菌时原有活菌数（个） 经过t 经过 时间灭菌后的残留菌数（ Nt —经过 时间灭菌后的残留菌数（个）
pH值对灭菌时间的影响 值对灭菌时间的影响
灭菌时间（ 温度 孢子数 灭菌时间（min） ） （℃） （个/mL) pH6.1 pH5.3 pH5.0 pH4.7 pH4.5 3 7 5 3 8 120 10000 13 13 12 25 25 115 10000 24 65 35 30 70 110 10000 180 150 150 720 100 10000 740
3.反应速度常数k
在相同温度下， 值愈小， 在相同温度下 ， k 值愈小 ， 则此微生物愈耐 同一种微生物在不同温度下， 值也不相同， 热。同一种微生物在不同温度下，k值也不相同， 灭菌温度愈低， 值愈小， 温度愈高， 值愈大。 灭菌温度愈低 ， k 值愈小 ， 温度愈高 ， k 值愈大 。 121℃ 121℃某些细菌芽孢的k 值 细菌芽孢名称 枯草芽孢杆菌FS5230 枯草芽孢杆菌 硬脂嗜热芽孢杆菌FS1518 硬脂嗜热芽孢杆菌 硬脂嗜热芽孢杆菌FS617 硬脂嗜热芽孢杆菌 产气梭状芽孢杆菌PA3679 产气梭状芽孢杆菌 K 值min-1 3.8～2.6 ～ 0.77 2.9 1.8
沫较少。 沫较少。
2. 分批灭菌 实消 (Batch sterilization) 分批灭菌(实消 实消):
指培养基在发酵罐中灭菌。 指培养基在发酵罐中灭菌。
优点：无需专一灭菌设备， 优点：无需专一灭菌设备，但易发生局部过热而 破坏营养成分的现象。 破坏营养成分的现象。 适用条件： 适用条件：当培养基中含有固体颗粒或培养基有 较多泡沫时，以采用分批灭菌为好。 较多泡沫时，以采用分批灭菌为好。对于容积 小的发酵罐，连续灭菌的优点不明显， 小的发酵罐，连续灭菌的优点不明显，而采用 分批灭菌比较方便。 分批灭菌比较方便。
菌的死亡率（活菌的减少率） 菌的死亡率（活菌的减少率）:
dN 与任何时候残留的活菌数N 成正比。 与任何时候残留的活菌数 成正比。 − dt
对数残留定律： 对数残留定律：
dN − = kN dt
N—残留的活菌数（个） t—受热时间（min) 残留的活菌数（ 受热时间（ 残留的活菌数 受热时间 K—反应速度常数（minБайду номын сангаас1) 反应速度常数（ 反应速度常数
100 110 115 120
400 30 15 4
99.3 67 50 27
130 140 150
0.5 0.08 0.01
8 2 ＜1
在实际生产中为了既达到灭菌目的又较好地保存营 养成分，最好采用高温快速灭菌法。 养成分，最好采用高温快速灭菌法。
三、影响培养基灭菌的其它因素 影响培养基灭菌的其它因素 1．培养基成分 ． 2．PH值 ． 值
微生物的热死规律——对数残留定律 2. 微生物的热死规律 对数残留定律 100℃时不同时间微生物存活数 100℃时不同时间微生物存活数
时间 （min） ） 0 6 7 9 11 存活数 （个/mL) 9×107 × 1.2×107 × 8×106 × 5×106 × 3×106 × 时间 （min） ） 15 20 25 30 存活数 （个/mL) 1×106 × 2×105 × 2×104 × ≈0
致死时间： 致死时间：在致死温度下杀死全部微生物 所需要的时间。 所需要的时间。 1.微生物的热阻 1.微生物的热阻 热阻：微生物对热的抵抗力。 热阻：微生物对热的抵抗力。
微生物对湿热的相对抵抗力 微生物名称 相对抵抗力 大肠杆菌 1 细菌芽孢 3 ×106 霉菌孢子 2～10 ～ 病毒 1～5 ～
工业生产上的灭菌方法有加热灭菌、化学药剂灭菌、 工业生产上的灭菌方法有加热灭菌、化学药剂灭菌、 射线灭菌等 射线灭菌等。 化学药剂灭菌、射线灭菌用于无菌间 用于无菌间、 化学药剂灭菌、射线灭菌用于无菌间、培养室及车间 空气灭菌。 空气灭菌。 干热灭菌：火焰灭菌、 干热灭菌：火焰灭菌、烘箱灭菌 加热灭菌 湿热灭菌：巴氏灭菌、间歇灭菌、 湿热灭菌：巴氏灭菌、间歇灭菌、 高压蒸汽灭菌 二、湿热灭菌原理 致死温度：指杀死微生物的最低温度。 致死温度：指杀死微生物的最低温度。
3．培养基中的颗粒 培养基中的颗粒 4．泡沫 泡沫 四、工业灭菌方法 1．连续灭菌（连消）(Continuous sterilization): 是采用专 ．连续灭菌（连消）
一灭菌设备—-连消塔， 一灭菌设备 连消塔，在高温下对液体培养基进行短时间加 连消塔 热灭菌。 热灭菌。 优点：（ 1）培养基受热时间短（可在20～30s达到预定灭菌温 优点： ） 培养基受热时间短（ 可在 ～ 达到预定灭菌温 营养成分破坏少； 度 ） ， 营养成分破坏少 ； （ 2）质量均匀 ； （ 3） 适用于自动 ） 质量均匀； ） 控制。 控制。 适用条件： 大规模生产， 适用条件 ： 大规模生产 ， 培养基中不含有固体颗粒或泡
4．培养基灭菌温度的选择 ．
实验测定：加热温度每升高 ℃ 实验测定：加热温度每升高10℃
物质化学反应 芽孢热死反应 1.5～2 ～ 5～10 ～ 35
微生物营养细胞热死反应
结论：温度升高， 结论：温度升高，菌死亡速率大于培养基成分破坏的 速率。 速率。
不同温度灭菌时间及培养基破坏情况 温度 灭菌时间 营养成分破坏 温度 灭菌时间 营养成分破坏 （%） ） （%） ） （℃） （min) （℃） （min)
第三章
灭菌与无菌空气的制备
第一节 培养基和发酵设备的灭菌
一、消毒与灭菌方法
(Sterilization)
消毒：指用物理或化学方法杀死物料 、 容器 、 器具 消毒 ： 指用物理或化学方法杀死物料、容器、 内外的病原微生物。 内外的病原微生物。 灭菌： 灭菌 ： 指用物理或化学方法杀死或除去环境中所有 微生物。 微生物。
3.设备灭菌 (Stearilization of fermenter) 设备灭菌 实罐灭菌时，发酵罐与培养基一起灭菌。 实罐灭菌时，发酵罐与培养基一起灭菌。 培养基采用连续灭菌时， 培养基采用连续灭菌时，发酵罐需在培养基灭 菌前，直接用蒸汽进行空罐灭菌，用无菌空气 菌前，直接用蒸汽进行空罐灭菌， 保压，待培养基流入罐后，开始冷却。 保压，待培养基流入罐后，开始冷却。其他设 备一般采用蒸汽灭菌。有些设备也可采用 备一般采用蒸汽灭菌。有些设备也可采用SO2 熏蒸灭菌，如葡萄酒发酵池、罐等。 熏蒸灭菌，如葡萄酒发酵池、罐等。