9实验九 果蝇的三点测交

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六、实验报告
将观察到的F2 F2代 包括正交和反交） 1、将观察到的F2代（包括正交和反交）各表 型个体数填入书本P17表5-1中，确定基因间 型个体数填入书本P17表 P17 重组发生的情况； 重组发生的情况； 计算基因间的重组值及双交换值； 2、计算基因间的重组值及双交换值； 根据计算结果画出遗传学图。 3、根据计算结果画出遗传学图。注意用双交 换值对位于两端的基因间距离进行校正； 换值对位于两端的基因间距离进行校正； 4、计算并发系数和干涉值。 计算并发系数和干涉值。 七、思考题 正交组合F2统计为什么只需统计雄性个体？ F2统计为什么只需统计雄性个体 正交组合F2统计为什么只需统计雄性个体？其 雌性个体F2代个体的表型如何？ F2代个体的表型如何 雌性个体F2代个体的表型如何？
二、实验材料
黑腹果蝇( 黑腹果蝇(Drosophila
melanogaster)品系： 品系：
野生型果蝇（+++）： 红眼、长翅、 野生型果蝇（+++）： 红眼、长翅、直刚毛 型果蝇 三隐性果蝇（ ）：白眼 小翅、 白眼、 三隐性果蝇（wmsn3）：白眼、小翅、焦刚毛 果蝇
三隐性个体： 三隐性个体： 白眼（ ）、小翅 小翅（ ）、焦刚毛 焦刚毛（ 白眼（w）、小翅（m）、焦刚毛（sn3）， 这三个基因都位于X染色体上。 这三个基因都位于X染色体上
实验九 果蝇的三点测交
雌
雄
湖州师范学院 生命科学学院生物系
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一、实验目的
1、掌握三点测交的原理及方法； 掌握三点测交的原理及方法； 2、学习三点测交的数据统计处理及分析方法； 学习三点测交的数据统计处理及分析方法； 3、了解绘制遗传学图的原理和方法
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四、实验原理
位于同一条染色体上的基因是连锁的， 位于同一条染色体上的基因是连锁的，而同源染色体上 的基因之间会发生一定频率的交换， 的基因之间会发生一定频率的交换，使子代中出现一定数 量的重组型。 量的重组型。 重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。 重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。 而根据基因在染色体上直线排列的原理， 而根据基因在染色体上直线排列的原理，基因交换频率 的高低与基因间的距离有一定的对应关系。 的高低与基因间的距离有一定的对应关系。 基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的。 基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的。 如果基因座位相距很近，重组率与交换率的值相等， 如果基因座位相距很近，重组率与交换率的值相等，直 接将重组值作为基因图距；如果基因间相距较远， 接将重组值作为基因图距；如果基因间相距较远，两个基 因间往往发生两次以上的交换，必须进行校正， 因间往往发生两次以上的交换，必须进行校正，来求出基 因图距。 因图距。 《遗 传 学》校 级 精 品 课 程
观察到的双交换频率 观察到的双交换频率 并发率＝ 两个单交换频率的乘积 两个单交换频率的 频率的乘积
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四、实验原理
P：
♀
m m
sn3 sn3
w
×
+
+
+
（♂）
w
+ × 测交） （测交）
w m
+
F1： F1：
♀
sn3
+
m
sn3
w
（♂）
雌蝇X 雌蝇X染色体上三对基因之间 发生交换重组，产生8 发生交换重组，产生8种雌配子
m
+
sn3
+
w
+ +
m
sn3
+
w
+
m
+ + + +
sn3
+ + + +
w
+ + + Ʊ w + +
m m +
+
sn3 sn3 +
+
w + w
+
m m +
+
sn3 + sn3
+
w w +
+
雄蝇产生两种配子
m
sn3 w
sn3 w
+ +
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四、实验原理 因为F1代雄蝇为三隐性个体，所以F1代雌 因为F1代雄蝇为三隐性个体，所以F1代雌 F1代雄蝇为三隐性个体 F1 雄蝇自交时，即测交，F2（Ft）代可以得到8 雄蝇自交时，即测交，F2（Ft）代可以得到8 种表型。 种表型。 Ft）中亲组合最多， F2 （Ft）中亲组合最多，而发生双交换 的表现型个体数应最少。 的表现型个体数应最少。
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五、实验步骤
选处女蝇：每组正、反交各1 12h内收集 1、选处女蝇：每组正、反交各1瓶，在8-12h内收集 处女蝇5 可提前2 天收集。 处女蝇5-6只，可提前2-3天收集。 杂交：将处女蝇、雄蝇各5 麻醉、 2、杂交：将处女蝇、雄蝇各5-6只，麻醉、转移到新 的杂交瓶中，确保杂交瓶中各只果蝇完全苏醒， 的杂交瓶中，确保杂交瓶中各只果蝇完全苏醒， 没有死蝇。贴好标签，注明杂交组合、日期、 没有死蝇。贴好标签，注明杂交组合、日期、姓 25℃培养 培养； 名，于25℃培养； 释放亲本：7d后 处死杂交亲本（一定要干净） 3、释放亲本：7d后，处死杂交亲本（一定要干净） 。 观察F1 再过4 F1： F1成蝇出现 连续观察2 3 成蝇出现， 4、观察F1：再过4-5天，F1成蝇出现，连续观察2—3 或在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型。 F1表型 天，或在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型。 要求每组至少统计250只果蝇。 250只果蝇 要求每组至少统计250只果蝇。
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三、实验仪器设备、药品 实验仪器设备、
体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、 体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、 麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿等。 麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿等。 乙醚、玉米粉、琼脂、红塘、酵母粉、 乙醚、玉米粉、琼脂、红塘、酵母粉、 丙酸等。 丙酸等。
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五、实验步骤 4、 F1互交：选取5-10对F1果蝇，转入一新培养瓶 F1互交：选取5 10对F1果蝇， 互交 果蝇 不需处女蝇，正交和反交F1不能混），贴好标签， F1不能混），贴好标签 （不需处女蝇，正交和反交F1不能混），贴好标签， 25℃培养 培养。 于25℃培养。 释放亲本： 7d后 杀死F1代亲本果蝇。 F1代亲本果蝇 5、释放亲本： 7d后，杀死F1代亲本果蝇。 观察F2 再过4 5d，F2成蝇出现 F2： 成蝇出现， 6、观察F2： 再过4-5d，F2成蝇出现，开始观察眼 翅形及刚毛形态，同时记录F2 F2各种性状果蝇的 色，翅形及刚毛形态，同时记录F2各种性状果蝇的 连续统计7 8d。 数目 ，连续统计7-8d。 注意： 要求每组至少统计250只果蝇。 250只果蝇 注意：（1）要求每组至少统计250只果蝇。 如果做正交只需统计雄性个体。 （2）如果做正交只需统计雄性个体。 （3）统计过的果蝇放入酒精瓶中，杀死 。 统计过的果蝇放入酒精瓶中，
四、实验原理
三点测交：用野生型纯合体与三隐性个体杂交， 三点测交：用野生型纯合体与三隐性个体杂交， 获得三因子杂种（F1），再使F1 ），再使F1与三隐性基因 获得三因子杂种（F1），再使F1与三隐性基因 纯合体测交，通过对测交后（Ft） 纯合体测交，通过对测交后（Ft）代表现型及 其数目的分析， 其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的 交换值， 交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上 顺序和距离。 的顺序和距离。 通过一次三点测验可以同时确定三个连锁 基因的位置，即相当于进行三次两点测验， 基因的位置，即相当于进行三次两点测验，而 且能在试验中检测到所发生的双交换。 且能在试验中检测到所发生的双交换。
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四、实验原理
如果两个基因间的单交换并不影响邻近两 个基因的单交换， 个基因的单交换，那么预期的双交换频率应 当等于两个单交换频率的乘积， 实际上观 当等于两个单交换频率的乘积，但实际上观 察到的双交换值往往低于预期 低于预期值 察到的双交换值往往低于预期值，因为每一 次发生单交换， 次发生单交换，它邻近也发生一次交换的机 会就减少，这叫干涉。一般用并发率表示干 会就减少，这叫干涉。一般用并发率表示干 干涉 并发率 涉的大小。 涉的大小。
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