兔毛的扫描电镜观察
扫描电镜(材料分析方法)技术指导
第十三章扫描电子显微镜一、扫描电镜的特点和工作原理自从1965年第一台商用扫描电镜问世后，它得到了迅速发展。
其原因在于扫描电镜弥补了透射电镜的缺点，是一种比较理想的表面分析工具。
透射电镜目前达到的性能虽然很高，如分辨本领优于0.2～0.3nm，放大倍数几十万倍，除放大成像外还能进行结构分析等，但其有一个最大的缺点就是对样品要求很高，制备起来非常麻烦。
而且，样品被支撑它的铜网蔽住一部分，不能进行样品欲测区域的连续观察。
扫描电镜则不然，,已可直接观察大块试样，样品制备非常方便。
加之扫描电镜的景深大、放大倍数连续调节范围大，分辨本领比较高等特点，所以它成为固体材料样品表面分析的有效工具，尤其适合于观察比较粗糙的表面如材料断口和显微组织三维形态。
扫描电镜不仅能做表面形貌分析，而且能配置各种附件，做表面成分分析及表层晶体学位向分析等。
扫描电镜的成像原理，和透射电镜大不相同，它不用什么透镜来进行放大成像，而是象闭路电视系统那样，逐点逐行扫描成像。
图1是扫描电镜工作原理示意图。
由三极电子枪发射出来的电子束，在加速电压作用下，经过2～3个电子透镜聚焦后，在样品表面按顺序逐行进行扫描，激发样品产生各种物理信号，如二次电子、背散射电子、吸收电子、X射线、俄歇电子等。
这些物理信号的强度随样品表面特征而变。
它们分别被相应的收集器接受，经放大器按顺序、成比例地放大后，送到显像管的栅极上，用来同步地调制显像管的电子束强度，即显像管荧光屏上的亮度。
由于供给电子光学系统使电子束偏向的扫描线圈的电源也就是供给阴极射线显像管的扫描线圈的电源，此电源发出的锯齿波信号同时控制两束电子束作同步扫描。
因此，样品上电子束的位置与显像管荧光屏上电子束的位置是一一对应的。
这样，在长余辉荧光屏上就形成一幅与样品表面特征相对应的画面一一某种信息图，如二次电子像、背散射电子像等。
画面上亮度的疏密程度表不该信息的强弱分布。
图1 扫描电镜工作原理二、电子束与固体样品作用时产生的信号：扫描电镜成像所用地物理信号是电子束轰击固体样品而激发产生的。
扫描电镜技术在动物毛发微观结构研究上的应用
扫描电镜技术在动物毛发微观结构研究上的应用杨静;徐柏森;王纪【摘要】用6种不同的扫描电镜样品制备方法对动物毛发表面及横断面的超微结构进行观察比较.结果表明:正常、清洁的动物毛发采用常规方法即可得到真实、清晰的超微结构,而脏发和受损毛发,必须进行适当的清洗处理,有效除去覆盖物,真实结构才能完全显示出来.6种方法中用洗涤剂先清洗、无水丙酮浸泡4 h,结合超声波清洗的方法清洗毛发样品效果最好.【期刊名称】《西南林业大学学报》【年(卷),期】2008(028)002【总页数】4页(P45-48)【关键词】扫描电镜;样品制备;动物毛发;微观结构【作者】杨静;徐柏森;王纪【作者单位】南京林业大学,森林资源与环境学院,江苏,南京,210037;南京林业大学,森林资源与环境学院,江苏,南京,210037;南京林业大学,森林资源与环境学院,江苏,南京,210037【正文语种】中文【中图分类】Q954现在已有大量文献讨论把毛发用于法庭科学,诊断疾病以及评定营养状况[1-2].毛发是哺乳动物皮肤表皮部角质层的衍生物,也是哺乳动物的三大特征之一,所有动物的毛发都有其基本的形态和结构,而不同的动物在毛发形态上(如长短、粗细以及色泽等) 又表现出差异[3].毛发形态的差异必定与其微观结构有着紧密的联系，毛发的微观结构主要取决于先天遗传,具有物种的特异性，因此，毛发微观结构也是人们多年来研究的重点[4].人类对毛发微观结构的认识可以追溯到17世纪，但直到1837年, Brewster首次应用光学显微镜发现毛发表面的特异性结构，才标志着毛发微观结构研究的开始[3].之后,有关毛发结构研究的报道大量涌现[5].20世纪50年代中期以后,毛发微观结构研究开始扩展到纺织行业、食性分析[6-8]和法医科学[9-10].80年代,随着电子显微镜在毛发微观结构研究中的广泛应用, 毛发的微观结构研究有了进一步的完善与发展[5] .电子显微镜下，毛发结构的图像更加清晰、精确，并且立体感强，分辨率高，可以从不同的角度进行观察.但由于毛发存在有角原蛋白构成的致密的皮质层[11]，而且容易附着皮脂腺分泌物、吸附灰尘等，电镜的分辨率又很高，采用传统方法难以获得较好的效果.目前，毛发的电镜样品制备在国内外未见系统报道.本文采取几种不同的扫描电镜制样方法对动物毛发的外部形态和横断面特征进行观察比较，以期为毛发的超微结构研究提供最佳的制样方法.1 材料与方法1.1 试验材料正常和受损小白鼠毛发由南京医科大学提供.1.2 试验仪器GG112-HU超声波清洗机，EMITECH K850临界点干燥仪，HITACH E-1010喷金仪，菲利浦 SEM-505扫描电镜.1.3 试验设计将正常毛发和受损毛发分别用锋利刀片切成适当长度的小段，采用以下6种不同方法制备样品.方法Ⅰ 将毛发粘台、喷金，扫描电镜观察表面和横断面.方法Ⅱ 无水丙酮浸泡毛发样品4 h，取出粘台、喷金，扫描电镜观察表面和横断面.方法Ⅲ 无水丙酮浸泡毛发样品4 h，其间超声波清洗两次，取出粘台、喷金，扫描电镜观察表面和横断面.方法Ⅳ 洗涤剂清洗毛发样品之后，无水丙酮浸泡4 h，其间超声波清洗两次，取出粘台、喷金，扫描电镜观察表面和横断面.方法Ⅴ 毛发用洗涤剂清洗之后，无水丙酮浸泡4 h，其间超声波清洗两次，3%戊二醛固定2 h，乙醇梯度脱水，临界点干燥，取出粘台、喷金，扫描电镜观察表面和横断面.方法Ⅵ 毛发用无水丙酮浸泡6 h，其间超声波清洗3 次，取出粘台、喷金，扫描电镜观察表面和横断面.2 结果与分析毛发微观结构一般由毛鳞片层、毛皮质层和毛髓质层构成(少数除外).毛鳞片层很薄,位于毛发的最外面,毛皮质层是由退化的死细胞致密排列而成,呈无结构的均质状，毛髓质层是由气腔和气腔壁构成.(1) 正常组毛发表面整洁、无附着物，直接粘台、喷金，扫描电镜观察到圆柱状毛杆上覆盖着一薄层毛小皮，呈叠瓦状排列，形似鳞片，层次清晰整齐；断面毛皮质层和毛髓质层结构清晰，无覆盖物,见图1-1，2.而对于有些脏发特别是受损毛发，表面不整洁，易附着皮脂腺分泌物以及糜烂物等污物，方法Ⅰ 虽然简单易行，但其真实的结构被附着物掩盖，图1-3，4中，毛发表面和断面都有大量的覆盖物，鳞片层难以看见，断面结构模糊，因此，这类毛发需要先清洗以除去污物.由于本试验中正常的毛发比较干净，进行常规制备即可观察到真实结构，而受损毛发表面覆盖物较多，因此方法Ⅱ 至Ⅵ 主要对受损毛发的超微结构进行观察、比较. (2) 方法Ⅱ 使用丙酮浸泡4 h，但收效甚微，见图1-5，6，覆盖层依然清晰可见，图6中的横断面上有一些碎屑状物存在.(3) 方法Ⅲ 在丙酮浸泡期间，借助超声波清洗，取得了一定成效，有些毛段能清洗干净，有些毛段还可见污物存在，图1-7所取的一段毛发上可见受损毛发的鳞片层出现紊乱排列，甚至重叠翘起，图1-8的断面结构能看出毛皮质层和毛髓质层，但看不到图1-2中的孔腔结构.(4) 方法Ⅳ 先用洗涤剂洗去部分污物，再结合丙酮和超声波清洗，去污效果相当好，发现图1-9中的受损毛发，毛鳞片排列紊乱不规整，有的鳞片稍翘起，有的断裂或有缺口，多分布在游离端，较少波及基部，有些区域毛小皮排列疏松，个别鳞片状小皮皱缩.断面平整、清晰，毛皮质层和毛髓质层结构分明，无覆盖物，孔腔清晰可见，见图1-10.(5) 方法Ⅴ 在方法Ⅳ的基础上，对毛发进行了固定、脱水和临界点干燥，结果发现与方法Ⅳ没有显著区别.(6) 方法Ⅵ中丙酮浸泡时间过长，毛发表面出现大量突起、凹陷以及鳞片脱落，局部膨大，说明毛发结构受到影响和腐蚀，见图1-11，12.3 结论与讨论3.1 毛发样品的清洗处理本试验中，正常组毛发比较干净、无附着物，常规制备方法即方法I可得到真实、清晰的结构.由此可见，干净的毛发进行常规制备即可.而受损组毛发有较多覆盖物，掩盖了毛发的结构.脏发特别是受损毛发的前期清洗处理至关重要，否则难以见到庐山真面目.因其表面附着有皮脂腺分泌物、灰尘等污物，遮盖了毛发的真实结构，普通的水洗难以除去，所以，必须采用既有效又不损伤毛发结构的清洗方法，才能观察到毛发的真实结构，为疾病诊断，法医鉴定，分类等提供科学的依据.本试验中的方法Ⅴ，洗涤剂清洗毛发之后，适当时间的丙酮浸泡，结合超声波清洗，效果很好，适用于较脏毛发的扫描电镜样品的制备.但丙酮浸泡时间不宜过长，否则会破坏毛发本身的结构，如方法Ⅵ的结果.3.2 毛发样品横断面的切取由于毛发的基本成分主要是角质蛋白，角质蛋白由氨基酸组成.氨基酸提供了毛发生长所需的营养成分.各种原纤维通过螺旋式、弹簧式的结构相互缠绕交联,形成角质蛋白的强度和柔韧度，故而毛发具有一定的刚韧性.针对毛发这种特性, 必须要使用锋利刀片，动作稳而准，用力要均匀，才能切出较平整的断面，否则会因参差不齐而掩盖真实的断面结构.3.3 毛发样品的导电处理毛发样品本身不导电，需要在扫描电镜观察之前进行导电处理.合适的导电处理能够提高扫描电镜分析中的图像质量, 最大限度地避免样品的失真和变形等问题[12].导电膜应该是均匀和连续的，膜太厚，会因蒸发时间长而使试样受热损伤, 用扫描电镜观察时，容易产生龟裂以及掩盖试样表面细节；膜太薄，试样表面各个部分膜厚显著不均，扫描电镜观察时, 常会产生局部荷电[13].一般采用离子溅射技术对样品表面镀膜效果较好.离子溅射法可以实现对样品不需作任何旋转而在样品各个面上形成平坦连续的覆盖层,这是因为被溅射出来的靶原子在相对较高的气压环境中, 其所形成的覆盖层颗粒细小而均匀, 能产生高分辨率的电镜图像, 另外溅射覆盖层的厚度相对于真空喷涂来说也容易控制.因此，采用离子溅射法对样品实施镀膜,产生的电镜图像细腻、清晰度高.对于毛发，因其质地相对较硬，结构细微，金离子溅射的厚度宜薄，但要均匀、连续，否则会掩盖一些细节，影响到结果分析.[参考文献]【相关文献】[1] 孔祥瑞. 必需微量元素的营养、生理及临床意义[M].合肥:安徽科学技术出版社,1982.[2] 翟丽屏,叶平,黄居梅,等. 低温碱溶解试样测定毛发中的氟[J]. 中国卫生检验，2007，17(7)： 1 312-1 313 .[3] 孙中武，高海钰，毕冰，等. 鹿类动物毛的扫描电镜分析[J ].东北林业大学学报，2003，31(4)：29- 32.[4] 张艺，陈蓉，于恩艳，等. 动物毛发石蜡切片的制作[J ].生物技术，2007，17(2)：49-51.[5] 张伟，徐艳春. 毛发微观结构研究的回顾与展望[J].兽类学报，2003，23(4)：339-345.[6] LEVER R J A W. Diet of the fox since myxomatosis [J].Journal Animal Ecology, 1959, 28: 359-375.[7] LOCKIE J D. The estimating of the food of foxes [J].Journal of Wildlife Management, 1959, 23: 224-227.[8] LOCKIE J D. The food of pine marten (Martes martes) in West Ross-Shire, Scotland[J]. Proceeding of Zoology Society of London, 1961, 136: 187-195.[9] WALL R A. Normal adult hair-structure and properties [J].Cos-met Perfume, 1974, 89:31-36.[10] BROWN A C. Hair breakage: The scanning electron microscope as a diagnostic tool [J].Journal Society Cosmet Chemistry, 1975, 26: 289-297.[11] DAY M G. Identification of hair and feather remains in the gut and faeces of stoats and weasels[J ].Journal of Zool ,1966, 148: 201 - 217.[12] 徐柏森.生物电镜技术[M].北京：中国林业出版社，2000.[13] 彭伟良，蒋耀兴，钱镇海.丝绸材料的扫描电镜样品镀膜技术研究[J].四川丝绸，2002(1)：30-33.。
共聚焦激光扫描显微镜活体观察动脉粥样硬化家兔模型大脑皮质血管内
・组织光学・共聚焦激光扫描显微镜活体观察动脉粥样硬化家兔模型大脑皮质血管内血液缘流厚度的改变Ξ乡志雄1,谢泽宇1,庄明华1,唐永红2,邢 达2(1.汕头大学医学院第二附属医院神经外科,中国广东汕头515041;2.华南师范大学激光生命科学研究所,中国广东广州510631)摘 要:目的:探讨在兔脑皮层动脉粥样硬化时血管内缘流厚度的变化。
方法:用共聚焦激光扫描显微镜比较家兔脑皮质动脉内缘流厚度在正常、粥样硬化病理状态下的不同。
结果:在血管直径为74.87±3.26μm 的血管中血液缘流厚度在病理状态下随血管的舒张、收缩而发生改变;而在血管直径为94.33±2.84μm 的缘流厚度在血管收缩时发生改变。
结论:动脉粥样硬化的家兔模型中血液缘流厚度随血液的流变性质改变而改变。
关键词:激光共聚焦扫描显微镜;血液动力学;动脉粥样硬化;血液缘流保护性屏障中图分类号:Q631;R318.51文献标识码:A文章编号:100727146(2004)0320190204Observe the Changing of Edge 2flowing B lood Protective B arrierunder the Confocal Laser Scanning Microscopy within the CerebralCortex Arteries of R abbit with Atherosclerosis in VivoXIANG Zhi 2xiong 1,XIE Ze 2yu 1,ZHUANG Ming 2hua 1,T ANG Yong 2hong 2,XING Da2(1.Department of Neurosurger ,Second A ffiliated H ospital of Medicine C ollege ,Shantou University ,Shantou 515041,G uangdong ,China ;ser Life Science Institute ,S outh China N ormal University ,G uangzhou 510631,G uangdong ,China)Abstract :Objective :T o observed the m orphological and thickness changing of the protective barrier formed by the edge 2flowingblood in vessels within the cerebral cortex arteries with atherosclerosis.Method :We have used con focal laser scanning microsco 2py ,dynamically measure the thickness of the protective barrier formed by the cedge 2flowing blood in vessels within the cerebral cortical arteries of rabbits in the normal contrast group and atherosclerotic group under sitmulation with Ligustrazine (or T etrameth 2ylpyrazine )or N oradrenalin.R esult :In the vessel which diameter is 74.87±3.26μm ,the thickness of the protective barrierformed by the edge 2flowing blood in vessels was difference between the pathological group and the control group.And the thickness of the edge 2flowing blood layerchanged between the vessels were constricting or diastolic in the vessel that diameter was 94.33±2.84μm.C onclusion :The thickness of protective barrier formed by the dge 2flowing blood in vessels is closely related to atheroscle 2rosis.K ey w ords :con focal laser scanning microscopy ;blood kinetics ;atherosclerosis ;edge 2flowing blood protective barrier 脑动脉粥样硬化(atherosclerosis )是严重危害人类健康的常见病,其致死率及致残率均位于各种疾第13卷第3期2004年6月 激 光 生 物 学 报ACT A LASER BI O LOGY SI NICA V ol.13N o.3Jun.2004Ξ基金项目:广东省科技计划项目课题(200044)收稿日期:2004202223病的前列,给社会带来了严重的负担。
实验5 扫描电镜及其观察
实验5 扫描电镜及其观察一、实验目的和任务1 .了解扫描电镜的基本结构和原理2 .了解扫描电镜试样的制备方法3 .了解二次电子象，被散射电子像和吸收电子像观察记录操作的全过程机及其在形貌组织观察中的应用二、扫描电镜的构造扫描电镜是由电子枪发射并经过聚焦的电子束在样品表面扫描，激发样品产生各种物理信号，经过检测、视频放大和信号处理，在荧光屏上获得能反映样品表面各种特征的扫描图像。
扫描电镜由下列五部分组成，如图1（a）所示。
各部分主要作用简介如下：（a）（b）图1 扫描电子显微镜构造示意图1.电子光学系统它由电子枪、电磁透镜、光阑、样品室等部件组成，如图1（b）所示。
为了获得较高的信号强度和扫描像，由电子枪发射的扫描电子束应具有较高的亮度和尽可能小的束斑直径。
常用的电子枪有三种形式：普通热阴极三极电子枪、六硼化镧阴极电子枪和场发射电子枪，其性能如表1所示。
前两种属于热发射电子枪，后一种则属于冷发射电子枪，也叫场发射电子枪。
由表可以看出场发射电子枪的亮度最高、电子源直径最小，是高分辨本领扫描电镜的理想电子源。
电磁透镜的功能是把电子枪的束斑逐级聚焦缩小，因照射到样品上的电子束斑越小，其分辨率就越高。
扫描电镜通常有三个磁透镜，前两个是强透镜，缩小束斑，第三个透镜是弱透镜，焦距长，便于在样品室和聚光镜之间装入各种信号探测器。
为了降低电子束的发散程度，每级磁透镜都装有光阑；为了消除像散，装有消像散器。
表1 几种类型电子枪性能普通热阴极三极电子枪104～105 20～50 ≈50 10－2六硼化镧阴极电子枪105～1061～10 ≈500 10－4场发射电子枪107～108 0.01～0.1 ≈5000 10-7～10－8 样品室中有样品台和信号探测器，样品台还能使样品做平移、倾斜、转动等运动。
2.扫描系统扫描系统的作用是提供入射电子束在样品表面上以及阴极射线管电子束在荧光屏上的同步扫描信号。
3.信号检测、放大系统样品在入射电子作用下会产生各种物理信号、有二次电子、背散射电子、特征X射线、阴极荧光和透射电子。
扫描电镜操作注意事项
2. 取材准确、固定及时：尽可能保存原貌， 大小适宜（10mm2高5mm左右），对样品表面 用无菌Dhankes液清洗2次，迅速用2.5%戍二 醛4度下前固定4h以上。 3. 观察样品前两天，PBS洗20分钟/次×2次， 以下均在室温下，通风橱中进行。 4．1%四氧化锇酸后固定2h。
缺插图 托上加图片 饿酸固定加图片 单宁酸 加图片
5．重复步骤3。 6. 2%单宁酸过滤后洗2次，每次30min。 7．重复步骤3。 8. 梯度乙醇脱水（50 75 90 100）%×2次， 每 次30min，也可在75或90%乙醇中过夜。 9. 醋酸异戊酯置换乙醇40min。
10. 六甲基二硅胺烷原液（HMDS）5-10min替 代临界点干燥，放青霉素瓶中抽真空后密 封。 11. 样品用导电胶贴牢贴平，正面朝上，大小 适宜。置蒸空干燥器内过夜。 12. 第三天早晨，用离子溅射真空镀膜法喷镀 导电金属。 13. 上机观察样品，照相获得二次电子图像。
4. 样品脱水干燥贴牢后，需放置玻璃密封真空（加干 燥剂）干燥器皿内。样品喷镀后，最好当天观察， 照相,如看不完，还需放干燥器中密封真空保存，防 灰尘潮气进入。最好勿超过3个月。 5. 因条件有限，无临界点干燥仪，我们采用六甲基二 胺烷（HMDS）代替临界点干燥仪，优点是快速经 济，不受仪器限制，看普通标本，组织细胞支架材 料，与常规临界点干燥处理效果基本一致；看精细 材料（ECM）的分辨率还是有差距。 6. 胶原纤维样品梯度脱水前的漂洗液我们采用无菌的 三蒸水洗2次，防止盐结晶沉积在样品表面，影响 与超微纳米胶原的混淆。
扫描电镜样品的制做与观察
解放军总医院骨科研究所 黄靖香
目的
随着组织工程技术的发展兴起，如支架材料 的制作后，需观察样品中的孔径大小 ，与细 胞的相融性，生长形态变化等。用扫描电镜 观察获得清晰图像，是重要的检测手段之一。
扫描电镜操作注意事项
猪ECM胶原 ECM胶原
犬神经胶原
脐带ECM胶原 脐带ECM胶原
背根神经节基质
F. 常规脱水临界点干燥处理后的样品和六甲 基=硅胺烷（HMDS）处理的比较 硅胺烷（HMDS）处理的比较
常规处理
HMDS处理 HMDS处理
三． 注意事项和要求
1. 取材大小适宜，准确定位，首先洗去赘生物 后立即固定，防组织细胞的结构自溶或变形。 污染物造成图像表面出现絮状物，轮廓不清。 2. 根据不同样品，采用不同的干燥方法，防止 因干燥时间过长，压力过大造成样品过度收缩 和断裂。样品厚而贴不牢不平，造成喷镀不均， 样品边缘空白，发亮而出现充电现象和边缘效 应。图像漂移。为此可降低电压（1-5 KV）减 应。图像漂移。为此可降低电压（1 KV）减 少充电和边缘效应。 3. 用单宁酸的目的为提高二次电子发射率，耐 受电子轰击，防止玻璃器皿需泡酸、蒸溜水清冼后灭菌备用。 2）磷酸缓冲液（PBS-0.1M PH-7.4）配制：磷 ）磷酸缓冲液（PBSPH-7.4）配制：磷 酸二氢钠2.964g 磷酸氢二钠29.011g加三蒸水 酸二氢钠2.964g , 磷酸氢二钠29.011g加三蒸水 1000ml，也可用不加酚红无菌Dhankes液代替。 1000ml，也可用不加酚红无菌Dhankes液代替。 3）固定液的配制：用PBS缓冲液配成2.5%戍 ）固定液的配制：用PBS缓冲液配成2.5%戍 二醛和1%的四氧化锇。 二醛和1%的四氧化锇。
4. 样品脱水干燥贴牢后，需放置玻璃密封真空（加干 燥剂）干燥器皿内。样品喷镀后，最好当天观察， 照相, 照相,如看不完，还需放干燥器中密封真空保存，防 灰尘潮气进入。最好勿超过3 灰尘潮气进入。最好勿超过3个月。 5. 因条件有限，无临界点干燥仪，我们采用六甲基二 胺烷（HMDS）代替临界点干燥仪，优点是快速经 胺烷（HMDS）代替临界点干燥仪，优点是快速经 济，不受仪器限制，看普通标本，组织细胞支架材 料，与常规临界点干燥处理效果基本一致；看精细 材料（ECM）的分辨率还是有差距。 材料（ECM）的分辨率还是有差距。 6. 胶原纤维样品梯度脱水前的漂洗液我们采用无菌的 三蒸水洗2 三蒸水洗2次，防止盐结晶沉积在样品表面，影响 与超微纳米胶原的混淆。
国外羊毛试验方法标准综述之九_毛绒纤维鉴别_扫描电子显微镜法_张保国
一、前言羊毛和特种纤维!山羊绒、马海毛、羊驼毛、驼绒、安哥拉兔毛等"是毛纺工业的重要原料，尤其是山羊绒纤维，由于它具有轻、暖、柔、滑等其他纤维所不及的特性，被誉为“纤维宝石”。
我国是山羊绒重要生产国之一，产量占世界总产量的#$%左右，是重要的出口创汇产品，但是近几年来，在纤维流通领域中，一些不法分子将细羊毛或脱鳞羊毛混为山羊绒，以牟取暴利，破坏了宝贵的山羊绒资源。
在纺织成品领域，根据国家标准严格对纺织产品标识的强制要求，制造商必须要标明其产品中的纤维类型，还要注明其产品中各纤维组分的重量百分率。
虽然受到标识法规的约束，但由于羊毛和特种动物纤维!尤其是山羊绒"之间存在的价差很大，许多不法商人依然在其产品上标注虚假含量信息，借以谋求暴利。
羊毛长期以来都是在珍稀动物纤维如马海毛和山羊绒中掺杂使假的主要材料。
因此，准确地鉴别绵羊毛与山羊绒纤维等特种动物纤维，对于充分利用纤维资源，保证正常市场秩序是非常必要的。
羊毛和特种纤维!山羊绒、马海毛、羊驼毛、驼绒、安哥拉兔毛等"在物理和化学性能上非常接近，所以它们的混合物无法用机械或化学的方法分离开。
最传统的纤维鉴别和混合物成分分析方法是采用光学显微镜，美国&’()*#+,-,.《纺织品定量测试方法》和&&(//+$&《纤维分析：定量法》都包括使用光学显微镜进行定量分析的内容。
在欧洲，使用光学显微镜进行羊毛和特种动物纤维成分分析的标准化工作一直未能进行，主要是欧共体认为该方法受测试人员目光、经验影响较大，存在测试结果不稳定的问题，并且在多次混纺产品含量巡回测试中未能取得良好成绩。
为弥补光学显微镜测试方法的不足，德国羊毛研究院!*01"在2$年代和,$年代开发了一项使用电子扫描显微镜!’3)"来区分羊毛和其他特种动物纤维的技术，这种技术主要基于纤维鳞片厚度来评判。
基于该技术10(4于+$$$年发布了10(4-.2-$$《利用扫描电子显微镜对特种动物纤维和绵羊毛及其混合物含量进行分析》的方法标准。
兔毛、狐狸毛、貉子毛和水貂毛鉴别的研究
兔毛、狐狸毛、貉子毛和水貂毛鉴别的研究廖帼英【摘要】兔毛、狐狸毛、貉子毛和水貂毛的毛皮有不同的外观特征,在纤维投影仪和电子显微镜下的形态特征也不相同.本文结合感官检验法、光学显微镜法、电镜法、细度法和髓腔比例法5种方法进行对四类动物毛进行鉴别.结果表明:感官检验可以大概辨别兔毛、狐狸毛、貉子毛和水貂毛.四种动物毛在纤维投影仪和电镜下的表面形态特征有区别.四种动物毛中狐狸毛平均直径最大,兔毛和水貂毛的平均直径较小.貉子毛髓腔占整根纤维的比例最小,仅为21.59%.兔毛、狐狸毛和貂毛髓腔占整根纤维的比例几乎相同,大概为整根纤维的40%.通过感官检验方法、显微投影仪法、电镜法、细度法和髓腔比例法的结合可以辨别出四种动物毛.【期刊名称】《中国纤检》【年(卷),期】2015(000)017【总页数】4页(P80-83)【关键词】兔毛;狐狸毛;水貂毛;貉子毛【作者】廖帼英【作者单位】广州纤维产品检测研究院,国家纺织品服装服饰产品质量监督检验中心广州【正文语种】中文近几年，特种动物毛的服装和服饰产品越来越受到消费者的青睐。
对于羊毛、山羊绒的鉴别方法做了较多研究，测试也日益成熟。
但是兔毛、狐狸毛、貉子毛和水貂毛的研究相对较少[1]。
如何准确、有效地辨别此类皮毛一直是一个备受争议的热点和难点。
本文通过感官检验法对四种动物毛初步进行鉴别。
然后使用纤维细度仪观察四种动物毛的纵截面和横截面形态特征，并按要求测量各种纤维细度、髓腔占整根纤维比例。
最后使用电镜观察四种动物毛。
感官检验法、光学显微镜法和电镜法三种方法创新性的结合能更准确和高效地鉴别四种动物毛。
2.1 仪器CU—Ⅱ纤维细度仪（北京和众视野科技有限公司），Y172型纤维切片器（国营常州纺织仪器厂）、电子显微镜(日立S-3000N）、火棉胶、液体石蜡、无水乙醇、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子等。
2.2 材料狐狸皮毛、貉子皮毛、兔毛皮和水貂毛皮购自国内毛皮市场。
2.3 测试方法按标准FZ/T 01057.3—2007《纺织纤维鉴别试验方法第三部分：显微镜法》和FZ/T 01101—2008《纺织品纤维含量的测定物理法》制作纤维横截面和纵截面切片，观察四种动物毛的横截面、纵截面形态特征[2-3]。
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2011 年 12 月（ 上） 7
兔毛的扫描电镜观察
李维红1，2 ，席 斌1，2 ，郭天芬1，2 ，王宏博1，2 ，牛春娥1，2
（ 1． 中国农业科学院 兰州畜牧与兽药研究所，兰州 730050； 2． 农业部动物毛皮及制品质量监督 检验测试中心，兰州 730050）
中图分类号： S829． 1
文献标识码： A
文章编号： 1004-7034（ 2011） 12 － 0007 － 03
关键词：兔毛； 扫描电镜； 超微结构 摘 要：为了观察 4 种兔毛纤维的超微结构，试验以野兔、安哥拉兔、獭兔、家兔兔毛为材料，利用扫描电 镜观察并比较其鳞片层的结构特征。结果表明： 家兔粗毛鳞片翘角与安哥拉兔粗毛鳞片翘角之间差异 不显著（ P ＞ 0． 05） ，而与獭兔相比差异显著（ P ＜ 0． 05） ，二者绒毛的鳞片翘角之间差异不显著（ P ＞ 0． 05） ； 安哥拉兔毛、绒鳞片高度与其他 3 种相比差异极显著（ P ＜ 0． 01） ，而其他 3 种免毛之间两两相比 差异不显著（ P ＞ 0． 05） ； 安哥拉兔毛、绒鳞片厚度与其他 3 种相比差异极显著（ P ＜ 0． 01） ，野兔免毛与其 他 2 种相比差异显著（ P ＜ 0． 05） ，獭兔与家兔免毛相比差异不显著（ P ＞ 0． 05） 。4 种兔毛、绒之间的碳元 素含量差异均不显著（ P ＞ 0． 05） ，安哥拉兔粗毛氧元素含量与其他3 种相比差异显著（ P ＜ 0． 05） ，其他 3 种两两相比差异均不显著（ P ＞ 0． 05） ； 野兔硫元素含量与家兔绒毛中较低，与其他品种相比差异显著 （ P ＜ 0． 05） ，其他品种之间两两相比差异均不显著（ P ＞ 0． 05） ； 4 种兔毛、绒钙元素含量均差异显著（ P ＜ 0． 05） 或极显著（ P ＜ 0． 01） 。说明不同种的动物纤维具有独特的形态特征，在超微结构上存在明显的差别。
随着人们物质生活水平的不断提高，兔皮制品已
收稿日期：2011-01-17；修回日期：2011-11-02 基金项目：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金（ 中 国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所） 项目（ 1610322011008） 作者简介： 李 维 红 （ 1978 － ） ，女，助 理 研 究 员，博 士 研 究 生， lwh0923@ 163． com．
鳞片高
度 / μm 6． 52Aa ± 0． 46 7． 63Aa ± 0． 65 40． 09B ± 3． 59 13． 49Ab ± 1． 12 7． 53Aa ± 0． 59 8． 02Aa ± 0． 74 7． 03Aa ± 0． 61 8． 09Aa ± 0． 72
鳞片厚
度 / μm 0． 56Aa ± 0． 03 0． 42Ab ± 0． 06 0． 77B ± 0． 16 0． 81B ± 0． 10 0． 32Ad ± 0． 02 0． 36Ad ± 0． 05 0． 36Ad ± 0． 04 0． 31Ad ± 0． 07
随处可见［1］。 由 獭 兔 皮 制 成 的 毛 领、围 巾、披 肩、毛 条饰边等毛皮制品，以其高贵、典雅享有盛誉［2］。兔 毛以轻、细、软、保暖性强、价格便宜等特点而受人们 喜爱［3］。它是 由 细 软 的 绒 毛 和 粗 毛 组 成 的［4］，主 要 有普通家兔毛、安哥拉兔毛、野兔毛和獭兔毛。它们
使用扫描电镜观察兔毛纤维的鳞片层结构特征。 1． 2 试剂
乙醇、洗涤剂，市购。 1． 3 毛皮
野兔、安哥拉兔、獭兔、家兔 4 种兔皮均为正季节 皮，且都是经过鞣制的熟皮，均购自河北省留史毛皮 交易市场，分别从 4 种皮子的体测部位随机采取试验 用毛和绒。
1． 4 扫描电镜观察方法 将毛样放入 0． 5% 的洗涤剂中，用超声波清 洗
的毛肉眼很难区别，尤其是加工成饰品以后就更加难 以辨认。笔者研究了上述 4 种兔毛的超微结构，在电
Heilongjiang Animal Science
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and Veterinary Medicine
№ 12 2011
镜下观察其鳞片结构及高度、厚度和角度等特征，供 大家参考。 1 材料与方法 1． 1 原理
detection of the scale structure of hairs and villus from four kinds of rabbits
品种 野兔 安哥拉兔 獭兔 家兔
项目
粗毛 绒毛 粗毛 绒毛 灰毛 白毛 粗毛 绒毛
鳞片翘角 /°
－ － 28． 0a ± 2． 1 25． 1b ± 2． 6 23． 3b ± 1． 8 － 31． 2a ± 3． 2 23． 5b ± 2． 3
采用 SPSS13． 0 统计分析软件对试验数据进行 分析。 2 结果（见表 1）与分析
表 1 4 种兔毛、绒鳞片结构的角度、高度、厚度和能谱测定结果的统计 Table 1 The statistical results for the angle，height，thickness and energy － dispersive X － ray spectroscopy
3 min，除去毛表面的污染物，用纯化水冲洗多次，至 无泡沫。在无水乙醇中浸泡 5 min，真空干燥，把清洁 的毛平贴 在 有 双 面 胶 带 的 扫 描 电 镜 样 品 台 上，置 于 IB5 型离 子 溅 射 仪 中 喷 金 属 膜 （ 厚 5 × 10 － 9 ～ 1 × 10 － 8 m，约 40 s） 。用高真空分析型扫描电子显微镜 观察，加速电压为 10 kV［5 － 6］。 1． 5 数据分析
Байду номын сангаас
Scanning electron microscopic observation of rabbit hair
LI Wei － hong1，2 ，XI Bin1，2 ，GUO Tian － fen1，2 ，WANG Hong － bo1，2 ，NIU Chun － e1，2
（ 1． Lanzhou Institute of Animal Science and Veterinary Pharmaceutics，CAAS，Lanzhou 730050，China； 2． Quality Supervising， Inspecting and Testing Center for Animal Fiber，Fur，Leather and Products （ Lanzhou） ，MOA，P． R． ，Lanzhou 730050，China） Key words： rabbit hair； scanning electron microscopy（ SEM） ； microstructure Abstract： To observe the ultrastructure from four kinds of rabbit fibers，the hairs and villus of hare，Angola rabbit，Rex rabbit and rabbit were used as the experiment materials，and scanning electron microscopy was used to observe their scale structure ． The results showed that there was no significant difference（ P ＞ 0． 05） in the rake angle of hairs between rabbit and Angola rabbit，and a significant difference （ P ＜ 0． 05） compared with the Rex rabbit，and no significant difference （ P ＞ 0． 05） in the rake angle of villus between rabbit and Angola rabbit． There were highly significant differences （ P ＜ 0． 01） in the scale height of villus and hairs from Angola rabbit compared with the other three kinds of rabbits，and no significant differences （ P ＞ 0． 05） compared with each other among the other three kinds of rabbits． There were highly significant differences （ P ＜ 0． 01） in the scale thickness of villus from Angola rabbit compared with the other three kinds of rabbits，and significant differences （ P ＜ 0． 05） among hare and the other two kinds of rabbits，and no significant difference （ P ＞ 0． 05） between Rex rabbit and rabbit． The results from energy － dispersive X － ray spectroscopy revealed that there were no significant differences （ P ＞ 0． 05） for the content of C element in the hairs and villus from all four kinds of rabbits，and significant differences （ P ＜ 0． 05） for the content of O element in the hairs from Angola rabbit compared with the other three kinds of rabbits，and no significant differences （ P ＞ 0． 05） compared to each other among the other three kinds of rabbits． The contents of S element were lower in the hairs from hare and rabbit，and there were significant difference （ P ＜ 0． 05） compared with other two kinds of rabbit，and no significant differences （ P ＞ 0． 05） compared to each other between other two kinds of rabbit． There were significant differences （ P ＜ 0． 05） or highly significant differences （ P ＜ 0． 01） for the content of Ca element in the hairs and villus from all four kinds of rabbits． It indicates that the fibers from different animals had some unique morphological characteristics and obvious differences on their inner ultrastructure ． It provides a reliable basis for the discrimination of different fibers and distinguishing of the generic term for animal．