土壤铵态氮等测定
土壤铵态氮测定
⼟壤铵态氮测定铵态氮测定原理：以弱碱性氧化镁悬浮液将吸附在⼟壤胶体上的NH4及⽔溶性NH4浸提出来，再⽤MgO蒸馏。
仪器：电⼦天平、滤纸、三⾓瓶（50,100）、移液管（1,10）、漏⽃、玻璃棒、蒸馏器、冷凝管试剂：⼟样10克、2mol/Lkcl、2%硼酸指⽰剂、12%MgO悬浮液、甲基红-溴甲酚绿指⽰剂实验步骤：①称取⼟样10g，放⼊100ml三⾓瓶中②加⼊2mol/Lkcl溶液50ml，⽤橡⽪塞塞紧，震荡30min③⽴即过滤于50ml三⾓瓶中④吸取滤液25ml放⼊半微量氮蒸馏器中⑤把盛有5ml2%硼酸指⽰剂溶液的三⾓瓶放在冷凝管下，加12%MgO 悬浊液10ml于蒸馏器中蒸馏⑥蒸馏完毕，⽤标准酸滴定溶液由蓝绿⾊变⾄紫红⾊为终点⑦计算⼟壤铵态氮含量：W NH4+-N=（V-V。
）*C*14m*KW NH4+-N为铵态氮量，mg/Kg; V为盐酸标准溶液⽤量，ml; V。
为空⽩试验消耗盐酸标准溶液体积，ml；C为盐酸标准溶液浓度，mol/L; 14为氮原⼦的毫摩尔质量，mg/mmol; m为风⼲⼟样质量，g; K 为风⼲⼟样换算成烘⼲⼟样的⽔平换算系数。
硝态氮（酚⼆磺酸⽐⾊法）仪器：电⼦天平、三⾓瓶（带塞500ml）、量筒、漏⽃、滤纸、移液管（10ml）、蒸发⽫、⽔浴锅、玻璃棒、容量瓶（100ml）、分光仪试剂：①酚⼆磺酸试剂。
25g⽩⾊苯酚（C6H5OH）在500ml三⾓瓶中，加⼊225ml浓H2SO4混匀，瓶⼝松松地加塞，置于沸⽔浴中加热6h,再置于密闭的玻塞棕⾊瓶⼦中。
如试剂析出结晶，同时需加热溶解，但切不可加⽔。
②10mg/LNO3-N标准液，0.722g⼲燥的KNO3溶于⽔，定容1L，此夜为100mg/LNO3-N 溶液。
将此液准确稀释10倍，即为10mg/L NO3-N标准溶液。
③⼟样50g④CaSO4.2H2O ⽔⑤CaCO3⑥NH4OH实验原理：⼟壤中的硝态氮极易随⽔流失⽽不易被⼟壤吸附，由于其含量与⼟壤通⽓状况相关，所以硝态氮含量随季节和植物⽣育阶段⽽异。
土壤铵态氮等测定
土壤铵态氮等测定
土壤铵态氮是指土壤中的直接可以被植物利用的氮组分，它可以影响到植物的生长发育和生产力，因此在农业土壤检测和作物肥料管理中具有重要的意义。
测定土壤铵态氮的方法主要有总氮含量测定法和紫外吸收法，实用性较强的是Kjeldhal定氮法和UV-VIS吸收法，下面分别介绍一下。
Kjeldahl定氮法：Kjeldahl定氮法是土壤分析中最常用的测定土壤铵态氮的方法，原理是将氮以氢氧化铵为氢氮，放入铵态氮测定器中，室内加入硫酸和硫酰亚胺溶液，负责水解溶液中的氮。
在给定的温度和时间内，所有的铵态氮都会被氢氧化铵氧化为氮气，此时可以用滴定法测定氮气的浓度，从而计算出氮的含量。
实际应用中，物料质量不同，必须调整配比液的用量，以获得更精确的测定结果。
紫外吸收法：紫外吸收法是一种测定土壤铵态氮的非滴定性方法，它利用光子被吸收的原理，以222、263、280nm为激发波长，将样品中的氮通过新张的反应，通过放射的紫外线，被定量检出。
在实验过程中，土壤样品质量应该控制在0.20-2.00g，铵态氮的检出范围0.02-10mg/L。
紫外吸收法的主要优点是快速准确，但存在污染物干扰检出限低的弊端。
OKeldal定氮法和UV-VIS吸收法是测定土壤铵态氮的两种有效方法，在选择实验方法时应当综合考虑。
Kjeldahl定氮法要求样品质量大，测定结果受污染物干扰小，但实验时间较长；而紫外吸收法实验时间短、效果立竿见影，但容易受吸收中间体所影响，而铵态氮浓度过高时，检出限也会受到影响。
因此，检测时应当根据实际情况，合理选择。
土壤铵态氮测定
土壤铵态氮测定方法原理:用2mol/L KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的N H+4及水溶性NH+4浸提出来土壤浸出液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚。
作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。
在含氮0.05~0.5mg/L的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。
实验步骤：（1）称取10.00g新鲜土样（精确到0.01g），置于200m l三角瓶中，加入KCl溶液100m l，在摇床里振荡30min，取出静置后，取上清液过滤；（2）吸取浸提液5m l放入50m l容量瓶中，后加入KCl溶液10m l、苯酚溶液5m l、次氯酸钠碱性溶液5ml,摇匀；（3）在25℃左右室温下放置1小时后，加入掩蔽剂1m l,然后用水定容至刻度，在625nm波长处进行比色。
工作曲线绘制：分别取0.00 ，0.50 ，1.00 ，2.00 ，3.00 ，4.00 ，5.00ml铵态氮标准溶液于50ml容量瓶中，各加入10m l KCl溶液,然后同(2) (3)步骤进行。
试剂配制：【2mol/L KCl溶液】:称取149.1g KCl(分析纯)溶入水中，稀释至1L。
【苯酚溶液】：称取苯酚（分析纯）10g、NaOH（分析纯）5g和消极铁氰化钠(分析纯)0.1g稀释至1L。
（此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时用酸调节PH酸性）【次氯酸钠碱性溶液】：称取NaOH（分析纯）10g、磷酸氢二钠（分析纯）7.06g、磷酸钠（分析纯）31.8g和52.5g/L次氯酸钠（分析纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀释至1L.(贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时放置至室温)【掩蔽剂】: 将400g/L的酒石酸钾钠（分析纯）与100g/L的EDTA二钠盐溶液等体积混合。
土壤铵态氮的测定
土壤铵态氮的测定A 纳氏试剂比色法1方法提要土壤样品中的NH4+用氯化钾溶液提取，在碱性条件下与纳氏试剂络合生成黄色络合物，进行比色测定。
2适用范围本方法适用于各类土壤铵态氮含量的测定。
3主要仪器设备3.1 分光光度计；3.2 往复式或旋转式振荡机，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果；3.3 塑料瓶，200mL。
4试剂4.1氯化钾提取液［c(KCl)=2mol·L-1］：称取149.1g氯化钾溶于水，稀释至1L；4.2酒石酸钠溶液［ρ(Na2C4H4O4·2H2O)=250g·L-1］：称取25g酒石酸钠（Na2C4H4O4·2H2O）溶于水，稀释至100mL；4.3 纳氏试剂：称取10.0g碘化钾溶于5mL水中，另称取3.5g二氯化汞溶于20mL水中（加热溶解），将二氯化汞溶液慢慢地倒入碘化钾溶液中，边加边搅拌，直至出现微红色的少量沉淀为止。
然后加70mL 300g·L-1氢氧化钾溶液，并搅拌均匀，再滴加二氯化汞溶液至出现红色沉淀为止。
搅匀，静置过夜，倾出清液贮于棕色瓶中，放置暗处保存；4.4 阿拉伯胶溶液［10g·L-1］：称取1g阿拉伯胶溶于100mL沸水中，加入2滴氯仿作为防腐剂（混浊时使其澄清后，倾出上部清液），备用；4.5 铵态氮标准贮备溶液［ρ(N)=500μg·mL-1］：称取1.910g氯化铵（优级纯，经90℃干燥2h）,溶于水中，加入氯仿1mL,定容至1L；4.6 铵态氮标准溶液［ρ(N)=10μg·mL-1］：测定当天吸取铵态氮标准贮备溶液10.00mL，加水定容至500mL。
5分析步骤：称取10.0g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50.0mL 2mol·L-1氯化钾提取液，盖紧瓶盖，摇匀，在振荡机上于20℃～25℃振荡30min（振荡频率：180r/min±20r/min），立即过滤于50mL 三角瓶中。
土壤可溶性有机氮,硝态氮,铵态氮和微生物量氮测定
土壤可溶性有机氮、硝态氮、铵态氮、微生物量氮最方便最简单的测定方法1.母液制样：称取新鲜土壤（30.0g）于放置烧杯中，加约等于田间持水量60%水在25℃下培养7~15d。
取15.0g土于烧杯，置于真空干燥器中，同时内放一装有用100ml精制氯仿的小烧杯，密封真空干燥器，密封好的真空干燥器连到真空泵上，抽真空至氯仿沸腾5分钟，静置5分钟，再抽滤5分钟，同样操作三次。
干燥器放入25℃培养箱中24小时后，抽真空15-30分钟以除尽土壤吸附的氯仿。
按照土：0.5M K2SO4=1:4(烘干土算，一般就是湿土：0.5M K2SO4=1：2)，加入0.5M K2SO4溶液（未熏蒸为空白直接称取15.0g土，加同样比例0.5M K2SO4溶液）震荡30分钟，过滤。
其中熏蒸后的土壤过滤液为A母液，未熏蒸的土壤过滤液为B母液。
母液要是不及时测定，需立即在-15℃以下保存2.测定可溶性有机氮=可溶性全氮-（铵态氮+硝态氮）要是有流动分析仪器还有TOC的话可以利用A母液测得碳氮减去B母液的碳氮含量根据公式计算得出微生物碳氮，可以用B母液测的铵态氮、硝态氮和可溶性全氮，是很方便的。
以下的是用传统的方法测定以上指标，经过852个土壤样品试验结果还是很好的。
土壤可溶性全氮测定氧化剂:将6g NaOH 和30g K2S2O8溶于蒸馏水中并定容至1L(K2S2O8 比较难溶，在低于60℃得瑟水浴中溶解，高于60℃配置的溶液至其氧化性失效，NaOH制成溶液，致其温度达到常温后与K2S2O8溶液混合定容至1L)测定：移取A母液10ml至消化试管，加入10ml氧化剂，水浴中加热，温度升高到120℃后保持90min，使用紫外分光光度计测定A220和A275，空白需加入1ml氧化剂并同时作水浴处理。
（Tips：农化上母液与氧化剂各取25ml，此处取其比例为1:1。
）标准曲线：0.7218g硝酸钾溶于水中，转入1000ml容量瓶中定容摇匀，制得浓度为100mg/L的氮标准贮存液。
astm土壤中铵态氮
ASTM土壤中铵态氮的测定方法如下：
1.土壤样品采集和制备：在准备土壤样品时，要保证采集的样品具有代表性，
能够真实反映土壤中铵态氮的含量。
采集的土壤样品要经过破碎、混合、研磨等步骤，以去除其中的石块、根系等杂质。
2.土壤样品处理：将制备好的土壤样品放入烘箱中，在105℃下烘干2小时，
以去除其中的水分。
烘干后的土壤样品冷却后，称取一定量的样品进行研磨，使其通过100目筛网。
3.土壤样品消解：将研磨后的土壤样品放入消解罐中，加入适量的浓硫酸和催
化剂，在加热条件下进行消解。
消解过程中要控制温度和时间，以免样品烧焦或产生其他副反应。
4.土壤样品测定：消解后的土壤样品冷却后，用蒸馏水稀释，然后加入适量的
指示剂。
将溶液放入蒸馏装置中进行蒸馏，收集馏出液，用标准酸溶液滴定，计算出铵态氮的含量。
需要注意的是，测定土壤中铵态氮的含量时，需要控制实验条件和操作步骤的准确性，以减小误差和不确定性。
同时，也需要根据具体的土壤类型、气候条件等因素综合考虑，制定更加符合实际情况的测定方法和标准。
土壤铵态氮测定、扩散法
FHZDZTR0054 土壤 铵态氮的测定 扩散法F-HZ-DZ-TR-0054土壤—铵态氮的测定—扩散法1 范围本方法适用于土壤铵态氮的测定。
2 原理土样置于扩散皿外室，以弱碱性氧化镁悬浮液交换吸附在土壤胶体上的铵态氮，再40℃保温，释放出的铵被扩散皿内室的硼酸溶液吸收，然后用盐酸标准溶液滴定而计算铵态氮量。
3 试剂3.1 氧化镁溶液：称取17.0g 于500℃~600℃灼烧过的氧化镁，加入100mL 水，用时摇匀。
3.2 硼酸指示剂溶液：称取20g 硼酸（H 3BO 3），溶于1000mL 水中。
使用前每100mL 硼酸溶液中加入2mL 甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，以稀氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节溶液至紫红色（pH4.5），即为硼酸指示剂溶液。
硼酸指示剂溶液如混合过久，将有终点不灵敏的现象发生。
3.3 碱性胶液：称取40g 阿拉伯胶置于100mL 烧杯中，加入50mL 水，调匀，加热至60℃~70℃，搅拌溶解，冷却。
再加入40mL 甘油和20mL 饱和碳酸钾溶液，搅匀，冷却。
离心除去泡沫和不溶物质，放置在盛有硫酸（ρ 1.84g/mL ）的干燥器中除去氨。
3.4 盐酸标准溶液：0.01mol/L ，每1000mL 水中加入0.9mL 盐酸（ρ 1.19g/mL ），混匀。
标定：称取0.9534g 硼砂（Na 2B 4O 7·10H 2O ），精确至0.0001g ，加水溶解后稀释至500mL ，得0.0100mol/L 硼砂标准溶液。
吸取20.00mL 0.0100mol/L 硼砂标准溶液置于100mL 锥形瓶中，加1滴甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，用盐酸标准溶液滴定至溶液由蓝色变为紫红色为终点。
同时做空白试验。
盐酸标准溶液的浓度按下式计算：211V V V C C −×= 式中：C ——盐酸标准溶液浓度，mol/L ；C 1——硼砂标准溶液浓度，mol/L ；V 1——硼砂标准溶液体积，mL ；V 2——盐酸标准溶液用量，mL ；V 0——空白试验消耗盐酸标准溶液体积，mL 。
土壤铵态氮测定
一， 标准曲线制作（1） 溶液配制a ， 2mol •L -1溶液。
称取149.1g 氯化钾（KCl,化学纯）溶于水，稀释至1L 。
b ，苯酚溶液。
称取苯酚（C 6H 5OH,化学纯）10g 和硝基铁氰化钠[Na 2Fe(CN)5NO 2H 2O]100mg 稀释至1L 。
此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4 ℃ 冰箱中保存。
c, 次氯酸钠碱性溶液。
称取氢氧化钠（化学纯）10g 、磷酸氢二钠（Na 2HPO 4﹒7H 2O,化学纯）7.06g 、磷酸钠（Na 3PO 4·12H 2O,化学纯）31.8g 和52.5g ·L -1 次氯酸钠（NaOCl,化学纯，即含5％有效氯漂白粉溶液）10ml 溶于水中，稀释至1L ，贮于棕色瓶中，在4℃ 冰箱中保存。
d ，掩蔽剂。
将400g ·L -1酒石酸钾钠 （KNaC 4H 4O 6·4H 2O,化学纯）于100g ·L -1的EDTA 二钠盐溶液等体积混合。
每100ml 混合液中加入10mol ·L -1氢氧化钠溶液0.5ml.e, 2.50ug ·ml -1铵态氮（NH 4─N ）标准溶液。
称取干燥的硫酸铵[（NH 4）2SO 4, 分析纯]0.4717g 溶于水中，洗入容量瓶中定溶至1L ，制备成含铵态氮（N ）100ug ·Ml -1贮存液；使用前将其加水稀释至40倍，即配制成含铵态氮（N ）2.5ug ·mL -1标准溶液备用.（2） 分别吸取0.00,2.00 ,4.00,6.00,8.00,10.00ml H 4N ─N 标准液于50ml 容量瓶中（最后的铵态氮浓度分别是0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5ukg •ml ），各加10ml KCl 溶液。
然后加苯酚溶液5ml 氯酸钠碱性溶液5ml ，摇匀。
在20℃左右室温下放至1h 后，加掩蔽剂1ml 以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定溶至刻度。
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方法原理:用2mol/L KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH+4及水溶性NH+4浸提出来。
土壤浸出液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。
在含氮0.05~0.5mg/L的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。
实验步骤：（1）称取10.00g新鲜土样（精确到0.01g），置于200ml三角瓶中，加入KCl 溶液100ml，在摇床里振荡30min，取出静置后，取上清液过滤；（2）吸取浸提液5ml放入50ml容量瓶中，后加入KCl溶液10ml、苯酚溶液5ml、次氯酸钠碱性溶液5ml,摇匀；（3）在25℃左右室温下放置1小时后，加入掩蔽剂1ml,然后用水定容至刻度，在625nm波长处进行比色。
工作曲线绘制：分别取0.00 ，0.50 ，1.00 ，2.00 ，3.00 ，4.00 ，5.00ml铵态氮标准溶液于50ml容量瓶中，各加入10ml KCl溶液,然后同(2) (3)步骤进行。
试剂配制：【2mol/L KCl溶液】: 称取149.1g KCl(分析纯)溶入水中，稀释至1L。
【苯酚溶液】：称取苯酚（分析纯）10g、NaOH（分析纯）5g和消极铁氰化钠(分析纯)0.1g稀释至1L。
（此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时用酸调节PH酸性）【次氯酸钠碱性溶液】：称取NaOH（分析纯）10g、磷酸氢二钠（分析纯）7.06g、磷酸钠（分析纯）31.8g和52.5g/L次氯酸钠（分析纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀释至1L.(贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时放置至室温)【掩蔽剂】: 将400g/L的酒石酸钾钠（分析纯）与100g/L的EDTA二钠盐溶液等体积混合。
每100ml混合液中加入10mol/L NaOH溶液0.5ml。
【铵态氮标准溶液】：称取0.4717g于105℃烘2小时的(NH4)2SO4(分析纯)溶于水，定容至1L。
（使用时将标准液稀释20倍即ρ（N）=5ug/mL）一、方法原理土壤铵态氮是土壤速效氮的重要组成部分，测定土壤NH4+-N 的方法主要有直接蒸馏法和浸提法两类，直接蒸馏法是在氧化镁的存在下直接蒸馏土壤，但此法在弱碱性蒸馏时仍可能使一些简单的有机氮微弱水解有NH3蒸出，易使结果偏高，同时该法操作复杂，不适合大批量分析。
故在ASI法中采用氯化钾溶液提取土壤中的NH4+，提取液中的NH4+用靛酚蓝比色法，靛酚蓝比色法的灵敏度高，准确度也较高，适合于大批量样品的自动化分析。
靛酚蓝比色法的基本原理是：土壤胶体上的NH4+被K+交换下来后，在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚反应，生成水溶性染料靛酚蓝，其深浅与溶液中的NH4+-N含量呈正比，线性范围为0.05～0.5mg/L之间。
二、试剂配制1. NaOH溶液将6.75g NaOH、0.75g EDTA二钠、1.25g 醋酸钠溶解于250ml水中，储存于250ml 的容量瓶中。
其中EDTA二钠作为金属离子的掩蔽剂，防止干扰。
醋酸钠可增强颜色的稳定性。
2. 90%苯酚溶液将45g 苯酚溶解于50ml水中，注意苯酚易结块，可加热到60-70℃。
3. 碱性苯酚溶液测定当天，将36ml 90%苯酚溶液加到250ml 溶液中，摇匀。
4. 次氯酸钠溶液在400ml 的水中加入100ml 的NaClO溶液即可。
5. NH4+-N 标准溶液的配制(改进的地方)称取1.9105g NH4Cl（65℃烘4h），于500ml的容量瓶中，加水定容至刻度。
该溶液的浓度为1000mg/L.用移液管吸取1ml于100ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，此时容量瓶中溶液浓度为10mg/ml。
再对该溶液分别取0，0.5，1，2，4，8ml于25ml 的比色皿中，，对应的浓度为0.0，0.2，0.4, 0.8, 1.6，3.2 ppm(mg/L).6. 浸提剂KCl溶液的配制称取74.5g KCl 溶解于500ml 水中，并加0.25g 聚丙烯酰胺至1000ml 容量瓶中。
为1mol/L的溶液。
三、操作步骤1. 样品的处理：用电子分析天平称取约为2.000g土样于锥形瓶中，加入40ml 的KCl 溶液，放于振荡机上，振荡1h，将其过滤于50ml的容量瓶中，同时做空白试验。
2. 向有一定量的NH4+-N溶液中加入4ml碱性苯酚溶液，再用加液器加入10ml 次氯酸钠溶液，用KCl滴至刻度线，摇匀，放置1h后，用分光光度计在630nm 处比色，读取吸光度A。
3. 标准曲线的绘制：从浓度为0.0， 5.0，10.0, 20.0, 40.0 ppm(ug/mL)的NH4+-N标准溶液中各取1.0ml 的溶液于25ml的比色管中，补加KCl溶液至10.0ml,然后按步骤2进行操作。
四、比色条件：（1）碱性介质中反应，要求pH 10.5-11.7。
（2）显色和稳定时间：在室温下（20︒C）一般显色时间约为1小时，但要完全显色约需2-3小时，所以加入试剂后静置1小时即可比色。
稳定时间为24小时，或24小时以上。
为加速显色，也可在40︒C下加热，半小时即可显色。
（3）干扰离子：因在碱性下显色，很多金属离子都有干扰，可用EDTA等螯合剂来掩蔽。
（4）测定范围：0.05-0.5mg/L；（5）比色波长：625nm。
五、评价优点：兰色稳定，比色液为真溶液，灵敏度高；准确度、精密度高；干扰离子可用EDTA掩蔽。
缺点：试剂不稳定，须冷藏，或当天配制；试剂有毒；显色时间稍长。
土壤硝态氮的测定A 紫外分光光度法1、方法提要土壤浸出液中的NO3-，在紫外分光光度计波长210nm处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。
将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-、HCO3-的干扰。
NO2-一般含量极少，也很容易消除。
因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO3-的含量。
待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。
A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。
但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△A)。
2、适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。
3、主要仪器设备3.1紫外—可见分光光度计；3.2石英比色皿；3.3往复式或旋转式振荡机，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果；3.4塑料瓶：200mL。
4、试剂4.1H2SO4溶液(1：9)：取10mL浓硫酸缓缓加入90mL水中。
4.2氯化钙浸提剂[c(CaCl2)=0.01mol·L-1]：称取2.2g氯化钙(CaCl2·6H2O，化学纯)溶于水中，稀释至1L。
4.3 硝态氮标准贮备液[ρ(N)=100mg·L-1]：准确称取0.7217g经105~110℃烘2h的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。
4.4硝态氮标准溶液[ρ(N)=10mg·L-1]：测定当天吸到10.00mL硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。
5、操作步骤称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20℃~25℃振荡30min(180r/min±20r/min)，干过滤。
吸取25.00mL待测液于50mL三角瓶中，加1.00mL1：9 H2SO4溶液酸化，摇匀。
用滴管将此液装入1cm光径的石英比色槽中，分别在210nm和275nm处测读吸光值(A210和A275)，以酸化的浸提剂调节仪器零点。
以NO3-的吸光值(△A)通过标准曲线求得测定液中硝态氮含量。
空白测定除不加试样外，其余均同样品测定。
NO3-的吸光值(△A)可由下式求得：△A= A210- A275×R式中R为校正因数，是土壤浸出液中杂质(主要是有机质)在210nm和275nm处的吸光度的比值。
其确定方法为：A210是波长210nm处浸出液中NO3-的吸收值(A210硝)与杂质(主要是有机质)的吸收值(A210杂)的总和，即A210= A210硝+ A210杂，得出A210杂= A210- A210硝。
选取部分土样用酚二磺酸法测得NO3-—N的含量后，根据土液比和紫外法的工作曲线，即可计算各浸出液应有的A210硝值，即可得出A210杂。
A275是浸出液中杂质(主要是有机质)在275nm处的吸收值(因为NO3-在该波长处已无吸收)，它比A210杂小R倍，即A210杂=R·A275，得出校正因数R=A210杂/ A275。
各不同区域可根据多个土壤测定R值的统计平均值，作为其他土壤测试NO3-—N的校正因数，其可靠性依从于被测土壤的多少，测定的土壤越多，可靠性越大。
标准曲线的绘制：分别吸取10mg·L-1NO3-—N标准溶液0、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00mL，用氯化钙浸提剂定容至50mL，即为0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6mg/L的标准系列溶液。
各取25.00mL于50mL三角瓶中，分别加1mL1：9 H2SO4溶液摇匀后测A210，计算A210对NO3-—N浓度的回归方程，或者绘制工作曲线。
6、计算结果土壤硝态氮，mg·kg-1=()N V Dmρ⋅⋅式中：ρ(N)—查标准曲线或求回归方程而得测定液中NO3-—N的质量浓度，mg·L-1；V—浸提剂体积，mL(50mL)；D—浸出液稀释倍数，或不稀释则D=1；m—土壤质量，g。
7、注释⑴土壤硝态氮含量一般用新鲜样品测定，如需以硝态氮加铵态氮反映无机氮含量，则可用风干样品测定。
⑵一般土壤中NO2-含量很低，不会干扰NO3-的测定。
如果NO2-含量高时，可用氨基磺酸消除(HNO2+NH2SO3H=N2+H2SO4+H2O)，它在210nm处无吸收，不干扰NO3-测定。
⑶浸出液的盐浓度较高，操作时最好用滴管吸取注入槽中，尽量避免溶液溢出槽外，污染槽外壁，影响其透光性。
⑷大批样品测定时，可先测完各液(包括浸出液和标准系列溶液)的A210值，再测A275值，以避免逐次改变波长所产生的仪器误差。
⑸如需同时测定土壤NH4+—N，可选用2 mol·L-1KCl或1 mol·L-1NaCl 溶液制备待测液。
但2 mol·L-1KCl溶液本身在210nm处吸光度较高，因此同时测定土壤NH4+—N和NO3-—N时，可选用吸光度较小的1 mol·L-1NaCl溶液为浸提剂。