乌原鲤的胚胎发育特征
扁吻鱼胚胎发育及仔稚鱼形态与生长观察研究

DOI: 10.12131/20200177文章编号: 2095 − 0780 −(2021)01 − 0059 − 08扁吻鱼胚胎发育及仔稚鱼形态与生长观察研究韩军军,贺疆滔,陈 朋,胡江伟,祁 峰,封永辉,蔡林钢,时春明,张人铭(新疆维吾尔自治区水产科学研究所/农业农村部西北地区渔业资源环境科学观测实验站,新疆 乌鲁木齐 830000)摘要: 文章采用干法受精获取受精卵的方法,对扁吻鱼(Aspiorhynchus laticeps )胚胎发育和仔稚鱼的形态变化进行观察。
研究结果表明,扁吻鱼卵为沉性卵,卵细胞呈青灰色、微黏性。
该次孵化共获取成熟卵21.45×104粒,受精率88.95%,孵化率93.27%。
扁吻鱼成熟卵卵径 (2.46±0.13) mm ,受精卵吸水后膨胀,卵径 (3.42±0.15) mm 。
根据胚胎发育的外部形态和典型特征将其分为受精卵、胚盘形成、卵裂、囊胚、原肠、神经胚、器官分化和孵化共8个阶段,整个胚胎发育耗时115.72 h ,所需积温3 765.42 ℃·h 。
初孵仔鱼全长 (7.58±0.31) mm ,从初孵到卵黄吸收完全历时9 d ,全长特定生长率为 (3.63±0.68)%。
仔鱼后期历时36 d ,全长特定生长率为 (3.51±2.10)%。
稚鱼期历时63 d ,全长特定生长率为 (1.32±0.17)%,与仔鱼前期和仔鱼后期差异显著 (P <0.05)。
1年后幼鱼全长 (15.71±0.89) cm ,体质量 (28.29±6.15) g ,体色和体型接近成鱼。
关键词: 扁吻鱼;胚胎发育;仔鱼;稚鱼中图分类号: S 961.2+3文献标志码: A 开放科学(资源服务)标识码(OSID ):Observation on embryonic development, morphology and growth oflarvae and juveniles of Aspiorhynchus laticepsHAN Junjun, HE Jiangtao, CHEN Peng, HU Jiangwei, QI Feng,FENG Yonghui, CAI Lingang, SHI Chunming, ZHANG Renming(Institute of Fisheries Research of Xinjiang Uygur Autonomous Region/Fishery Resources and Environment inNorthwest China , Ministry of Agriculture and Rural Affairs , Urumqi 830000, China )Abstract: In this study, the embryonic development and morphological changes of larvae and juveniles of Aspiorhynchus laticepswere observed by dry fertilization. The results show that the eggs were sinking eggs, and the color of egg cells was bluish gray and slightly sticky. A total of 21.45×104mature eggs were obtained and the average of fertilization rate and hatching rate were 88.95%and 93.27%, respectively. The diameter of mature eggs was (2.46±0.13) mm, and that of fertilized eggs was (3.42±0.15) mm. Ac-cording to the external morphology and typical characteristics of embryo development, it can be divided into eight stages: fertiliza-tion, cleavage, blastocyst, gastrula, neuroembryo, organ differentiation and hatching. It took 115.5 h for the whole embryo to deve-lop, and the total accumulative temperature was 3 765.42 ℃·h. The total length of newly hatched larvae was (7.58±0.31) mm. The development of prelarva from hatching to yolk absorption took approximately 9 d, and the specific growth rate (SGR) of total length was (3.63±0.68)% and that of total length was (3.51±2.10)%. The juvenile period lasted 63 d and the SGR of total length was (1.32±0.17)%, significantly different from those of early and late larval stages (P <0.05). The total length and body mass of第 17 卷第 1 期南 方 水 产 科 学Vol.17,No.12021 年 2 月South China Fisheries ScienceFeb. ,2021收稿日期:2020-08-23;修回日期:2020-11-02资助项目:农业农村部财政专项“西北地区重点水域渔业资源与环境调查”作者简介:韩军军(1990—),男,硕士,工程师,从事水生生物繁育和生态修复研究。
鲈鲤胚胎发育特征观察

1 材 料 与 方 法
1 . 1试 验材料
2 0 1 3 年4 月从 国 电大渡 河流 域珍稀 鱼类 保 护研
精 卵开始至胚胎孵化出膜历时 1 2 6 h , 经过受精卵 、 卵裂 、 囊胚 、 原肠 胚 、 神经胚 、 器 官 发生 和 出膜 7 个 连 续 阶段 。根 据 发 育顺 序 及 形 态特 征 变 化 , 将7 个 阶 段 划分 为 3 2 个 时期 ( 表1 ) 。 2 . 2鲈 鲤胚胎 发 育分期 及特 征 2 . 2 . 1 受精 卵 成 熟 的鲈 鲤 卵外 观 呈 圆球 形 , 桔黄色 , 卵 黄 丰 富, 具黏性 , 为沉性卵 , 平均卵径 2 . 2 m m t 1 。 卵受 精 后, 卵膜 吸水 膨 胀 , 卵径约 3 . 2 ~ 3 . 8 a r m; 动物极 向上 , 植 物极 向下 , 细 胞 质 从 植 物极 向动 物 极 流 动 , 使得 动物极 出现 一个 暗斑 。 2 . 2 . 2卵裂期 受精后 2 h 2 8 m i n , 受精卵第 1 次经裂。在动物极 出现一条分裂沟 , 分裂沟与胚盘垂直 , 将 动物极分 裂 成两个大 小基本相 等的细胞 , 此 时 为 二 细 胞 期 ( 图版 3 ) 。受 精 后 3 h l 5 m i n , 开 始 第 2次分 裂 , 为经 裂; 分裂 沟 与第 一 条垂 直 , 并 逐渐 增 深 , 将 动物 极分 为 4个 大 小 基 本 相 等 的 细 胞 ( 图版 4 ) 。 受 精 后 3 h 5 7 mi n , 开 始第 3 次分 裂 , 仍 为经裂 ; 两 个分 裂 沟与 第2 次分裂沟垂直 , 将动物极分为 8 个分裂球 ( 图版 5 ) 。受 精后 4 h 2 3 m i n , 开始第 4 次分 裂 , 仍是 经裂 ; 两 分 裂 沟位 于第 2 次 分裂 沟 的两 侧 , 即与 第 1 次 和第 3 次 分 裂 面相 垂 直 , 动物 极 分 裂 成 十 六个 分 裂球 ( 图 版6 ) 。受精 后 4 h 4 5 mi n , 开 始第 5 次分裂 , 胚 胎被 分 为大小相 近的 3 2个 分 裂 球 ( 图版 7 ) 。此 后 , 每 隔 3 0 mi n 左 右 出 现 一 次 分裂 , 经历 6 4细胞 期 和 1 2 8 细 胞期( 图版 8 - 9 ) 。受 精 1 1 h 后, 经 过 连续 分裂 , 分 裂
乌鲤养殖技术

乌鲤养殖技术乌鲤是一种常见的鱼类,受到很多消费者的喜欢。
乌鲤营养丰富,是一种高蛋白低脂肪的健康食品,经济价值也非常高。
因此,现在很多人开始养殖乌鲤,这里为大家介绍一下乌鲤养殖技术。
1.选购优质种苗选购优质种苗是乌鲤养殖技术的重要一环。
优质种苗生长健康,免疫力强,出栏率高。
一般来说,种苗要选择2-3个月龄的,身体肥大、鱼鳞亮丽,活动灵活,有一定的公母比例。
2.场地的选址在选址时首先需要选择水源充足,水质清洁的地点,其次需要注意日照充足、适宜的土壤类型和地形条件等。
场地要选好后,需要对场地进行测量,预先规划好养殖池的数量和大小,以保证后续的养殖工作的顺利进行。
3.池塘的建设池塘的建设要考虑到防渗、防漏、通水和出水等因素。
池塘要选用坚固耐用的材料进行修建,建成后还要进行清理和消毒,以保证乌鲤的健康生长。
4.养殖池的环境调节在乌鲤的生长过程中,环境因素对其生长发育有着重要的影响。
合理调节养殖池的温度、PH值、溶氧量、池水流速和水质等因素,可以提高乌鲤的生长速度和出栏率。
5.饲料的配给和投喂乌鲤在不同的生长阶段,需要摄取不同种类和含量的饲料。
基础饲料一般为鱼粉、豆粕、玉米、大麦、糠等,可以根据乌鲤的生长状况进行组合搭配,以满足其营养需求。
6.疾病防控乌鲤养殖中经常会出现各种疾病,因此疾病防控是十分重要的。
应该定期对乌鲤的生长情况进行监测,症状异常时及时采取相应的处理措施,同时加强各项卫生管理工作,保证池水的清洁卫生。
以上就是乌鲤养殖技术的基本介绍。
在实际操作中,还需要根据当地气候、土壤特点等因素进行灵活调整和实践,以确保乌鲤养殖的效益和产量。
鲤科

鲌亚科
鲌亚科 Culterinae
中国有16属55种。体侧扁,有腹棱。一般无口须。臀鳍长,分支鳍条9~32,多为15枚以上。鳊Parabramis pekinensis体长为体高的三倍以下,腹棱完全,中下层鱼类,以水生植物为食;团头鲂Megalobrama amblycephala体长小于三倍体高,腹棱不完全,尾柄长小于或等于尾柄高,背鳍硬刺一般小于头长,中下层鱼类, 以水生植物为食,卵粘性,分布于长江中游的湖泊中,为重要养殖对象;鲂Megalobrama terminalis尾柄长大 于尾柄高,背鳍硬刺一般大于头长,腹膜白色,自然分布广,南北均有;红鳍鲌(短尾鲌)Culter erythropterus体长大于三倍体高,腹棱完全,口上位,尾柄长等于尾柄高,中上层凶猛鱼类,以小鱼为主食; 翘嘴红鲌Erythroculter ilishaeformis体长大于三倍体高,腹棱不完全,口上位,口裂几垂直,中上层凶猛鱼 类,可达10~15千克;歺又鱼Hemiculter leucisculus体长大于三倍体高,腹棱完全,侧线在胸鳍基部上方急 剧向下弯折成一明显角度,主食浮游生物。
生长繁殖
生长繁殖
到了产卵期就会出现婚姻色,雌雄并排游动,雌鱼将卵产在水草等附着物即鱼巢上。受精卵约在1~2天内孵 化出仔鱼,仔鱼仍依附在鱼巢上,由体内卵黄囊供给营养,经2~3天,仔鱼消耗卵黄囊的养分后开始游动觅食。 亲鱼有吞卵习性,不懂得爱护幼仔。
分类
01
鿕亚科
02
雅罗鱼亚科
04
鲴亚科
06
鲃亚科
03
鲌亚科
05
鳑鮍亚科
01
野鲮亚科
02
鮈亚科
04
鲤亚科
ห้องสมุดไป่ตู้
黑龙江水产研究所鲤育种概要

黑龙江水产研究所鲤育种概要石连玉;李池陶;葛彦龙;胡雪松【摘要】本文主要概述黑龙江水产研究所鲤Cyprinus carpio育种工作历史,介绍杂交选育亲本的来源与生物学特点以及育成品种的选育方法、技术路线和优良性状.通过引入国内外名优鲤,采用常规杂交选育、多性状遗传分析和分子辅助育种等方法,本土化培育出多个适合北方寒冷地区养殖的鲤新品种.采用的亲本包括黑龙江鲤C.C.amurensis、荷包红鲤C.C.var.wu yuane ns is、散鳞镜鲤C.C.vat.specularis amurensis、德国镜鲤C.C.var.S.germanensis和大头鲤C.pellegrini.育成品种包括荷包红鲤抗寒品系、松浦鲤C.C.‘Songpu’、松荷鲤C.C.'Songhe、松浦红镜鲤C.C.‘Songpu red mirror’、德国镜鲤选育系F4、松浦镜鲤C.C.var.S.‘Songpu’和易捕鲤.这些品种都具有抗寒、抗逆、易捕和快速生长等特性,适合北方以及全国各地养殖,其中松荷鲤、松浦镜鲤占有很大的市场份额,为我国的渔业发展做出了巨大的贡献.【期刊名称】《水产学杂志》【年(卷),期】2016(029)003【总页数】8页(P1-8)【关键词】鲤;育种;荷包红鲤;松浦镜鲤;易捕鲤【作者】石连玉;李池陶;葛彦龙;胡雪松【作者单位】中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨150070;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨150070;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨150070;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨150070【正文语种】中文【中图分类】S917鲤Cyprinus carpio是世界主要养殖鱼类之一,也是世界鱼类育种工作最有成效的种类。
全世界鱼类育种专家为培育适合本地养殖的鲤选育种或杂交种进行了上百年的努力。
我国和苏联是鲤育种工作开展最早、取得效果最显著的国家[1-4]。
小鲤鱼生长发育评估

小鲤鱼生长发育评估小鲤鱼是一种常见的淡水鱼类,其生长发育评估是判断鲤鱼是否正常生长的重要指标之一。
下面将从外观特征、行为表现以及饲养环境等方面对小鲤鱼的生长发育进行评估。
首先,观察小鲤鱼的外观特征可以初步评估其生长发育情况。
正常生长的小鲤鱼应具备鲤鱼的标准外形,包括身体呈椭圆形,体色鲜艳,鳞片完整有光泽。
鳍尤其是背鳍应挺拔,没有明显弯曲。
鱼体应肥壮且有弹性,不应出现明显的腹胀或消瘦现象。
此外,小鲤鱼的头部和口部也需要注意观察,健康的小鲤鱼头部与身体相协调,眼睛明亮,上下颌结构完整。
其次,观察小鲤鱼的行为表现也是评估其生长发育的重要指标之一。
正常生长的小鲤鱼活泼好动,游动自如,不会出现游动不正常或游动不灵活的情况。
它们应有较强的觅食能力和逃避能力,会主动追逐食物并能够快速逃离危险。
另外,正常生长的小鲤鱼在同一水域中与同伴的关系较和谐,不会出现明显的争斗现象。
最后,饲养环境也会直接影响小鲤鱼的生长发育。
鲤鱼对水质要求较高,所以观察水质状况也是评估小鲤鱼生长发育的重要指标之一。
水质应清澈透明,PH值应接近中性,水温应适宜,过高或过低都会影响小鲤鱼的生长发育。
此外,水中氧气含量也需要注意,过低的氧含量会导致鱼类生长迟缓或异常。
饲养环境的空间也会影响小鲤鱼的生长发育,合理的饲养密度有利于小鲤鱼的健康生长。
综上所述,通过观察小鲤鱼的外观特征、行为表现以及饲养环境等方面的情况,可以初步评估小鲤鱼的生长发育情况。
当小鲤鱼的外形健康、行为活泼并且饲养环境良好时,可以判断其生长发育正常。
对于发现异常情况的小鲤鱼,可以及时调整饲养条件,保障其正常的生长发育。
岩原鲤繁殖生物学研究综述

岩原鲤繁殖生物学研究综述
庹云
【期刊名称】《安徽农学通报》
【年(卷),期】2008(014)019
【摘要】时岩原鲤的雌雄鱼鉴剔、繁殖季节、性成熟年龄与繁殖力、产卵类型、产卵行为、精卵形态以及受精、胚胎发育、胚后发育进行了综述,提出人工育苗期间应该注意的问题.
【总页数】2页(P141-142)
【作者】庹云
【作者单位】宜春学院,江西宜春,336000
【正文语种】中文
【中图分类】S965.116
【相关文献】
1.岩原鲤形态性状与体质量的相关性及通径分析 [J], 曲焕韬;杨元金;鲁雪报;刘勇
2.岩原鲤遗传多样性和种群历史动态研究 [J], 张晓宇; 张富铁; 姚富城; 王剑伟
3.岩原鲤仔稚鱼生长发育过程中消化酶活性的变化 [J], 王垂瑾;王尧;孙悦佳;高煜杰
4.基于线粒体DNA控制区序列的重庆岩原鲤人工养殖群体遗传多样性分析 [J], 岳华梅;阮瑞;曹宏;周莉;蒋伟;李双;李创举
5.一株岩原鲤源致病性ST-251型嗜水气单胞菌的分离与生物学特性研究 [J], 陈梦竹;康振亚;郭向辉;耿毅;白明焕;欧阳萍;陈德芳;黄小丽;赖为民
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乌原鲤的表型性状及繁殖力特征

韩耀全,何安尤,蓝家湖,等.乌原鲤的表型性状及繁殖力特征[J].江苏农业科学,2018,46(6):134-137.doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2018.06.034乌原鲤的表型性状及繁殖力特征韩耀全1,何安尤1,蓝家湖2,吴伟军1,李育森1(1.广西水产科学研究院/广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;2.广西都安瑶族自治县水产技术推广站,广西都安530700) 摘要:基于鱼类传统形态学和现代框架特征以及鱼类繁殖性能分析方法,研究乌原鲤(ProcyprismerusLin)的表型结构及繁殖能力特征。
结果表明,乌原鲤侧线鳞41~45、侧线上鳞7~9、侧线下鳞5~7、背鳍鳍条15~18、背鳍鳍棘ⅳ、胸鳍鳍条17~20、胸鳍鳍棘ⅰ、腹鳍鳍条9、腹鳍鳍棘ⅰ~ⅱ、臀鳍鳍条5~7、臀鳍鳍棘ⅲ、围尾柄鳞16~18、背鳍前鳞14~18;体长是体高的2.6~3.2倍、头长的3.6~4.2倍、尾柄长的5.3~6.0倍、尾柄高的7.1~7.9倍,头长是吻长的2.1~3.2倍、眼径的3.0~4.7倍、眼间距的1.9~3.0倍、尾柄长的1.3~1.9倍、尾柄高的1.7~2.1倍,尾柄长是尾柄高的1.1~1.4倍;5~8龄乌原鲤的绝对繁殖力平均为49774粒卵,绝对繁殖力和卵巢质量有随着体质量增加而增大的趋势,性腺成熟系数18.5、体长相对繁殖力139.9粒/mm、体质量相对繁殖力43.9粒/g、净体质量相对繁殖力53.4粒/g,均随着其体质量和体长增大而降低。
乌原鲤繁殖力较低,为每年一次性产卵鱼类,人工繁殖应遵循乌原鲤的繁殖习性,充分利用其繁殖力,为乌原鲤自然资源增殖与保护作贡献。
关键词:乌原鲤;表型性状;繁殖力;体长;体质量;卵巢质量 中图分类号:S917;S961 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2018)06-0134-04收稿日期:2016-11-03基金项目:广西科学研究与技术开发计划(编号:桂科攻15248003-1);广西重点实验室建设项目(编号:16-A-02-01)。
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乌原鲤的胚胎发育特征韩耀全;何安尤;蓝家湖;吴伟军;李育森;王大鹏;雷建军;施军【摘要】通过干法授精获得乌原鲤受精卵,对其胚胎发育全过程进行连续观察.结果显示,乌原鲤成熟卵子呈圆球形、亮黄色、具黏性,卵径1.68~1.98 mm,吸水膨胀后卵径2.28~2.57 mm.水温(20 ± 1)℃时,受精卵至出膜时长为80.8 h,积温1616.0 ℃ ·h.乌原鲤胚胎发育与其他鱼类胚胎发育过程相似,历经受精卵、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官形成至出膜6阶段,各发育阶段所需积温分别为44.4、136.0、127.0、130.2、55.0、1123.4 ℃ ·h.出膜阶段历时47.45 h,初孵仔鱼自尾部破膜孵出,全长约6.10 mm,体高1.60 mm.温度对乌原鲤胚胎发育及出膜阶段影响明显,水温(20 ± 1)℃比水温(15 ± 1)℃胚胎仔鱼出膜时间更早、出膜更同步、出膜时段更集中.%The embryonic development was observed in fertilized eggs of Chinese ink carp Procypris merus by dry artificial fertilization under a microscope.It was found that Chinese ink carp had spherical,yellow and adhesive eggs with diameter of 1.68—1.98 mm,which were changed to2.28—2.57 mm in diameter due to water absorption.It took 80.8 h that the fertilized eggs were hatched from fertilization with an ac-cumulative temperatures of 1616.0 ℃ ·h at water temperature of(20 ± 1)℃.Like other fishes,the em-bryonic development of Chinese ink carp were divided into 6 stages:fertilized egg,cleavage,blastula,gas-trula,neurula and organogenesis,with accumulative temperatures of44.4,136.0,127.0,130.2,55.0 and 1123.4 ℃ ·h,respectively.The fertilized eggs were hatched first from tail in 47 h 27 min,and the newly hatched larvae had mean total length of 6.10 mm and body height of 1.60 mm.Theembryonic de-velopment and the hatching of Chinese ink carp were affected by water temperature,the earlier hatching and more synchronous and aggregation at water temperature of(20 ± 1)℃ than at(15 ± 1)℃.【期刊名称】《水产科学》【年(卷),期】2018(037)003【总页数】6页(P368-373)【关键词】乌原鲤;人工繁殖;胚胎发育【作者】韩耀全;何安尤;蓝家湖;吴伟军;李育森;王大鹏;雷建军;施军【作者单位】广西水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西都安瑶族自治县水产畜牧兽医局,广西都安530700;广西水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021【正文语种】中文【中图分类】S917.4乌原鲤(Procypris merus)俗名乌鲤、乌钩、黑鲤、墨鲤等,属鲤形目、鲤科、鲤亚科、原鲤属,是珠江水系特有鱼类,仅分布于珠江流域西江水域部分干流及支流[1-2]。
由于众多致危因素导致其自然资源日渐枯竭,已列为《中国濒危动物红皮书》濒危物种和《世界自然保护联盟濒危物种红色名录》易危物种[3]。
国内外关于乌原鲤的研究极少,仅见有乌原鲤精子活力的影响[4]和寄生于乌原鲤鳃指环虫(Dactylogyrus)新种等[5]少量报道。
近年来乌原鲤的资源保护工作受到重视,鱼类培育及繁殖工作已陆续开展,但有关乌原鲤生理生化、遗传学和人工繁殖及养殖增殖的研究成果少有公开发表报道。
为了开展乌原鲤资源养护与增殖,笔者自2014年起展开了乌原鲤性腺发育及人工繁殖相关技术研究,2016年3月成功人工繁育出乌原鲤仔鱼3批次。
全程观察乌原鲤胚胎发育过程,为乌原鲤资源保护增殖工作和相关研究提供参考。
1 材料与方法1.1 亲鱼催产、人工授精与孵化乌原鲤亲本来自渔民捕获出售的成熟亲鱼及野生鱼苗池塘培育成熟的亲鱼,雌亲鱼体质量1.0~2.0 kg,雄亲鱼体质量0.8~2.5 kg。
2016年3月8日、10日和26日,3次进行乌原鲤人工催产及胚胎发育观察。
筛选性腺发育良好的亲鱼,按每千克体质量对雌鱼注射催产,催产药物为:1 mg鲤鱼脑垂体+20 μg促黄体素释放激素类似物+3 mg马来酸地欧酮,用0.9%氯化钠注射液研磨、溶解约至每尾鱼1 mL剂量。
采取胸鳍基部1次性注射,注射后放入催产池中,流水刺激促产。
试验雄鱼性腺发育良好,未注射催产药物。
待发现催产池中亲鱼出现追逐,有产卵迹象时进行人工干法授精。
受精卵置于微流水、连续充氧孵化桶中孵化,水温为(20±1) ℃和(15±1) ℃、溶解氧>7 mg/L。
1.2 胚胎发育观察参考鱼类胚胎发育相关研究成果,描述乌原鲤胚胎各个发育阶段不同时期的发育特征[6-12]。
通过OLYMPUS CX31生物显微镜和OLYMPUS SZ61体视显微镜对胚胎发育过程进行连续活体观察,利用OLYMPUS DP73显微镜成像系统和OLYMPUS cellSens Standard 1.6显微镜图像程序对各发育时期胚胎进行成像和采集。
受精后至囊胚期前每隔10 min、囊胚期后至原肠晚期每30 min、原肠晚期后每60 min观察拍摄记录1次。
随机取样20粒以上,观察,拍摄,记录各发育阶段的形态特征及发育时间,以50%胚胎进入某个发育阶段为该发育阶段的起始时间,自前一个发育阶段至下一个发育阶段的时间间隔为该阶段的持续发育时长。
发育积温为某发育期平均水温与此发育期持续发育时长的乘积。
为清晰观察及拍摄胚胎发育图像,并观察经去膜处理胚胎的发育情况,试验同步观察未处理及经去膜处理胚胎的发育情况。
乌原鲤卵膜不易通过物理方法剥离,采用Solarbio胰蛋白酶0.1%、0.25%、0.35%水解液对受精卵进行消化,消化3~10 min,消化时间达到后用Holtfreter培养液清洗并在培养液中继续培养发育,直至出膜。
Holtfreter培养液为3.5 g NaCl+0.05 g KCl+0.1 g CaCl2+0.2 g NaHCO3溶解至1000 mL双蒸水中配制而成。
1.3 数据处理和分析受精卵卵径、胚胎及出膜仔鱼等相关长度数据使用OLYMPUS DP73显微镜成像系统和OLYMPUS cellSens Standard 1.6显微镜图像软件内置测量程序采集及测量。
选取3次试验观察拍摄获得的典型照片通过Adobe Photoshop CS 8.0.1软件处理后,作为各乌原鲤胚胎各发育阶段的特征模版照片。
2 结果乌原鲤约4龄性成熟,为一次性产卵型鱼类[13],产卵期2—4月。
成熟卵子呈圆球形,亮黄色,卵径1.68~1.98 mm,具较强黏性。
受精卵吸水膨胀后,卵径2.28~2.57 mm。
乌原鲤胚胎发育与其他鱼类胚胎发育过程相似,历经受精、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官形成及孵化出膜6阶段,每个发育阶段又有若干个发育时期[9-19]。
在水温(20±1) ℃、溶解氧>7.0 mg/L条件下,乌原鲤受精至出膜时长为80.8 h,胚胎发育所需总积温为1616.0 ℃·h。
受精卵阶段:受精后1.50 h,胚盘隆起。
本阶段历时2.22 h,积温44.4 ℃·h。
卵裂阶段:受精后2.22、3.07、3.93、4.82、5.90 h和7.13 h,分别进入2细胞期、4细胞期、8细胞期、16细胞期、32细胞期和多细胞期。
本阶段2.22~9.02 h,历时6.80 h,积温136.0 ℃·h。
囊胚阶段:受精后9.02、10.42、12.17 h,分别进入囊胚早期、囊胚中期和囊胚晚期。
本阶段9.02~15.37 h,历时6.35 h,积温127.0 ℃·h。
原肠胚阶段:受精后15.37、19.25、21.27 h,分别进入原肠早期、原肠中期和原肠晚期。
本阶段15.37~21.88 h,历时6.51 h,积温130.2 ℃·h。
神经胚阶段:受精后21.88、22.47 h,分别进入神经胚期和胚孔封闭期。
本阶段21.88~24.63 h,历时2.75,积温55.0 ℃·h。
器官形成阶段:受精后24.63 h肌节出现,26.42、28.55、30.85、31.77 h,眼基、眼囊、尾芽和尾鳍相继形成,34.97 h眼晶体出现,37.73 h进入肌肉效应期,40.37 h耳石出现,43.53心脏形成,52.38 h进入心脏搏动期。
本阶段24.63~80.80 h,历时56.17 h,积温1123.4 ℃·h。
孵化出膜阶段:受精后80.80 h,仔鱼孵化出膜。
本阶段历时47.45 h。
其中初始出膜时间为71.33 h,25%出膜时间为78.60 h, 50%出膜时间80.80 h, 75%出膜时间为87.72 h,最迟出膜时间为128.25 h;水温(15±1) ℃时,乌原鲤受精卵至出膜时长为116.5 h,初始出膜时间为100.50 h,25%出膜时间为110.33 h,50%出膜时间为116.50 h,75%出膜时间为134.33 h,最迟出膜时间为164.50 h。