基因工程总结
基因工程知识点总结
基因工程总结一．概念(1)原理：。
(2)优点：与杂交育种相比，；与诱变育种相比，。
（3）基因工程成功的原因：①成功拼接的原因：②成功表达的原因：二．基本工具1、两种酶：(1)：作用特点：。
(2)：E ·coli DNA 连接酶与T 4 DNA 连接酶的区别：2、一种运载体（1）条件：①；②；③具有特殊的标记基因（作用：）（2）种类：最常用；其他动植物病毒、三、操作程序(1)：方法：①：不知道脱氧核苷酸序列②：已知目的基因两端一小段序列，便于③利用化学方法人工合成：知道全部序列，且基因比较小。
这种方法不需要模板。
(2)——基因工程的核心基因表达载体的组成：(3)生物种类常用方法受体细胞将目的基因插入到Ti 植物动物受精卵将含有目的基因的表＋微生物原核细胞Ca 2处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA 分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA 分子质粒的T-DNA 上→农达载体提纯→取卵转化过程杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得色体的DNA 上→表达具有新性状的动物(4)①目的基因是否插入到转基因生物的染色体DNA 上：②是否转录：③是否翻译：④个体水平鉴定：抗虫、抗病接种实验易错点说明：1、切割目的基因和运载体的要求：用限制酶。
目的是：。
同种的含义是：同一种或相同两种，即单酶切或双酶切。
选择双酶切的原因是。
2、工具≠工具酶；运载体≠质粒。
3、启动子≠起始密码子，终止子≠终止密码子起始密码子和终止密码子位于mRNA上，分别控制翻译过程的启动和终止。
启动子：。
终止子：一段有特殊结构的DNA短片段，位于基因的尾端，作用是使转录过程停止。
4、基因探针的要求：①单链②有③5、农杆菌转化法中的“2”次导入：第一次：将含有目的基因的T—DNA的质粒导入农杆菌；第二次（非人工操作）：将含有目的基因的T—DNA导入受体细胞并整合到植物细胞的染色体DNA上。
6、转化：。
基因工程知识点总结高三
基因工程知识点总结高三基因工程知识点总结基因工程是一门研究基因结构和功能的学科，它涉及到对生物体的基因进行重组和改造，以实现对生物体特征和功能的调控。
在高三生物学学习中，基因工程是一个重要的知识点，下面将对基因工程的相关知识进行总结。
一、基因工程的定义和发展历程基因工程是指通过对基因进行改造和修饰，以实现对生物体遗传特征和功能的调控的技术和方法。
基因工程起源于20世纪70年代，经过几十年的发展，已经成为现代生物学和生命科学中一项重要的技术和领域。
二、基因工程的基本原理基因工程主要依靠DNA重组技术，即将不同生物体中的基因从一个生物体中提取出来，然后将其导入到另一个生物体中，使其表达特定的基因或产生特定的蛋白质。
基因工程的基本原理如下：1. DNA提取：从目标生物体中获取DNA，并纯化出所需的基因片段。
2. 载体选择：选择合适的载体，如质粒或病毒，并将目标基因插入载体中。
3. DNA转化：将重组的DNA导入到宿主生物体中，使其拥有目标基因。
4. 基因表达：通过转录和翻译过程，使宿主生物体表达出目标基因的蛋白质。
三、基因工程的应用领域基因工程技术在各个领域都有广泛的应用，包括：1. 农业领域：通过转基因技术改良农作物，提高产量和抗病能力，开发转基因植物。
2. 医药领域：利用基因工程技术生产重组蛋白质药物，如胰岛素、生长激素等。
3. 环境治理领域：应用基因工程技术处理废水和污染物，以及修复环境中的有害物质。
4. 生物科学研究领域：通过基因工程技术研究基因的功能和作用机制，深入了解生物的遗传变异。
四、基因工程的伦理和法律问题基因工程涉及到许多伦理和法律问题，如生物安全、知识产权等。
应该遵守相关的法律法规和伦理准则，确保基因工程的研究和应用在道德和法律的框架内进行。
五、基因工程的前景和挑战基因工程技术的不断进步和创新，为人类带来了许多机遇和挑战。
随着技术的发展，基因工程有望在医学、农业、环境等领域发挥更大的作用，但也需要面对伦理、安全性以及公众关注等方面的挑战。
初中生物基因工程知识点总结
初中生物基因工程知识点总结基因工程是一门研究如何改变生物体遗传物质的科学技术，它广泛应用于医学、农业、工业等领域。
初中阶段的生物学学习中，我们通常会接触到基因工程的基础概念和应用，下面我将对初中生物基因工程的知识点进行总结。
1. DNA 的结构和功能DNA（脱氧核糖核酸）是生物体遗传信息的存储介质，负责遗传物质的传递。
DNA由磷酸、脱氧核糖和四种碱基（腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鸟嘧啶）组成。
它的双链结构呈螺旋状，由两个互补的碱基对相连（A与T，C与G）。
DNA的功能包括复制、转录和翻译，从而实现基因的传递和表达。
2. 基因的定义和作用基因是生物体的遗传单位，它是决定生物特征的基本单位。
基因通过编码蛋白质来实现遗传信息的传递和表达。
一个基因通常对应一个蛋白质，而蛋白质决定了生物体的形态和功能特征。
3. 基因工程的基本原理基因工程通过改变基因的结构和功能，实现对生物体遗传物质的人工操控。
它的基本原理包括：选择目标基因、截取目标基因、将目标基因插入宿主生物体、表达目标基因并获得所需产物。
4. 基因工程的应用（1）农业领域：基因工程可以用于改良农作物的品质和产量，提高作物的抗病虫害能力。
例如，通过转基因技术将具有抗虫特性的基因导入作物中，从而减少对农药的依赖，提高农作物产量和质量。
（2）医学领域：基因工程可以用于生产药物、治疗疾病和基因诊断。
例如，通过转基因技术将含有特定疾病治疗基因的载体导入人体细胞中，修复或替代受损的基因，达到治疗疾病的目的。
（3）工业领域：基因工程可以用于生物制造，生产一些有用的物质。
例如，通过转基因技术将具有特定功能的基因导入微生物中，使其能够大量合成人类需要的蛋白质、酶等。
这种生物制造方式相对传统工业方法更环保和可持续。
5. 转基因技术转基因技术是基因工程的一项重要技术，指将外源基因导入目标生物体中并使其稳定遗传。
转基因技术的步骤包括：截取目标基因、将目标基因插入载体（如质粒）、导入宿主生物体并实现目标基因的稳定遗传。
高中生物选修三基因工程知识点总结
高中生物选修三基因工程知识点总结
高中生物选修三(基因工程)知识点总结如下:
1. 基因工程的基本步骤:
- 分离基因:从目标DNA序列中分离特定的基因。
- 转录:将分离得到的基因转录成RNA。
- 修饰:对转录后的基因进行修饰,使其更具表达效果。
- 克隆:用适当的载体将修饰过的基因导入目标细胞中。
- 表达:使目标细胞中导入的基因表达。
2. 基因工程的主要方法:
- 重组DNA技术:包括文库制备、扩增和筛选。
- 外源DNA片段导入技术:包括限制性内切酶消化、连接、转化、融合等。
- 自组织培养技术:包括离心、培养基选择、细胞培养等。
- 基因编辑技术:包括CRISPR/Cas9、CRISPR-Cas13a等。
3. 基因工程的应用:
- 细胞治疗:通过基因工程手段治疗一些遗传性疾病。
- 农业育种:通过基因工程技术改良作物品质和产量。
- 生物恐怖袭击防御:通过基因工程技术检测和防御生物恐怖袭击。
- 环境污染治理:通过基因工程技术处理污染物。
4. 基因工程的限制:
- 伦理和道德问题:基因工程技术可能会带来未知的伦理和道德
问题。
- 技术成本:基因工程技术相对其他技术更为复杂,成本较高。
- 技术安全:基因工程技术的安全性需要持续进行研究和维护。
5. 基因工程的安全性问题:
- 基因突变:基因工程过程中可能会引发基因突变,导致不良后果。
- 质量控制:基因工程技术的产品需要进行质量控制,以确保其质量和稳定性。
基因工程知识点总结归纳(更新版)
基因工程绪论1、克隆（clone）：作名词：含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。
作动词：基因的分离和重组的过程。
2、基因工程（gene engineering）：体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中，构成遗传物质的新组合，并使之掺入到原先没有这些基因的宿主细胞内，且能稳定的遗传。
供体、受体和载体是基因工程的三大要素。
3、基因工程诞生的基础三大理论基础：40年代发现了生物的遗传物质是DNA；50年代弄清楚DNA 的双螺旋结构和半保留复制机理；60年代确定遗传信息的遗传方式。
以密码方式每三个核苷酸组成一个密码子代表一个氨基酸。
三大技术基础：限制性内切酶的发现；DNA连接酶的发现；载体的发现3、基因工程的技术路线：切：DNA片段的获得；接：DNA片段与载体的连接；转：外源DNA片段进出受体细胞；选：选择基因；表达：目的基因的表达；基因工程的工具酶1、限制性内切酶（restriction enzymes）：主要是从原核生物中分离纯化出来的，是一类能识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链的核酸内切酶。
2、限制酶的命名：属名（斜体）+种名+株系+序数3、II型限制性内切酶识别特定序列并在特定位点切割4、同裂酶：来源不同，其识别位点与切割位点均相同的限制酶。
5、同尾酶：来源不同，识别的靶序列不同，但产生相同的黏性末端的酶形成的新位点不能被原来的酶识别。
6、限制性内切酶的活性：在适当反应条件下，1小时内完全酶解1ug特定的DNA 底物，所需要的限制性内切酶的量为1个酶活力单位。
7、星号活性：改变反应条件，导致限制酶的专一性和酶活力的改变。
8、DNA连接酶的特点：具有双链特异性，不能连接两条单链DNA分子或闭合单链DNA，连接反应是吸能反应，最适反应温度是4至15度，最常用的是T4连接酶。
9、S1核酸酶：特异性降解单链DNA或RNA。
10、RNAH降解与DNA杂交的RNA，用于cDNA文库建立时除去RNA以进行第二链的合成。
生物基因工程知识点总结
生物基因工程知识点总结生物基因工程是一种通过改变生物体的遗传物质来改变其性状的技术。
它涉及到许多关键的知识点，如下：1. 基因：基因是生物体内控制特定性状的遗传信息单位。
它是DNA分子中的一个特定序列，负责编码产生蛋白质。
2. DNA：脱氧核糖核酸（DNA）是生物体内存储遗传信息的分子。
它由四种碱基（腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶）组成的两条螺旋状链结构。
3. 基因表达：基因表达是指基因通过转录和翻译的过程将DNA的遗传信息转化为蛋白质的过程。
4. 转基因：转基因是指将外源基因导入到另一种生物体的基因组中，使其表达新的性状。
转基因技术是生物基因工程的核心。
5. 基因编辑：基因编辑是一种通过直接修改组织或细胞中的基因序列来改变生物体遗传信息的技术。
常用的基因编辑工具包括CRISPR/Cas9、TALENs和ZFNs。
6. 载体：载体是一种用于将外源基因导入到生物体中的工具。
常用的载体包括质粒、病毒和细胞。
7. 克隆：克隆是指通过人工手段复制一个生物个体的基因组。
克隆技术可以用于繁殖优良的动植物品种和疾病模型的制备。
8. 基因检测：基因检测是一种用于检测个体的遗传信息的技术。
它可以用于遗传病的筛查、个体的亲缘关系鉴定和种群遗传学的研究。
9. 合成生物学：合成生物学是一种基于工程原理设计和构建新的生物系统的学科。
它通过组合基因和其他生物部件来设计具有特定功能的新生物体。
10. 生物安全：生物安全是指在进行生物基因工程研究和应用时保护人类和环境的安全。
它包括对实验室条件的控制、对转基因生物体的监管和对风险评估的实施。
以上是生物基因工程的一些主要知识点，它们一起构成了生物基因工程这个学科的基础和核心。
基因工程知识点总结
基因工程知识点总结基因工程是一门现代生物学领域的重要学科，它通过改造生物体的遗传物质，实现对生物体基因的精确操控和改良。
下面将对基因工程的相关知识点进行总结，以帮助读者更好地了解该领域的基本概念和技术应用。
一、基因工程的基本概念和原理基因工程是指通过人为手段修改生物体的基因组，以改变其性状和功能的技术。
其实现的基本原理包括基因定位、基因克隆和基因传递。
1. 基因定位：基因定位是指确定感兴趣的基因在基因组中的位置。
常用的方法有FISH（荧光原位杂交）和PCR（聚合酶链反应）等。
2. 基因克隆：基因克隆是指将感兴趣的基因从一个生物体中复制到另一个生物体中，使其在目标生物体中表达。
常用的方法有限制酶切、连接酶切和DNA合成等。
3. 基因传递：基因传递是指将经过克隆的基因导入到目标生物体中，并使其在目标生物体中稳定遗传。
常用的方法有基因枪、电穿孔和冷冻贮存等。
二、基因工程的应用领域基因工程技术在农业、医学和工业等领域有着广泛的应用，下面将分别介绍其主要应用领域。
1. 农业应用：基因工程技术在农业领域的应用主要包括转基因作物的培育和遗传改良。
通过导入特定基因，转基因作物可以获得抗病虫害、耐逆性或提高产量等特点，从而增加农作物的产量和质量。
2. 医学应用：基因工程技术在医学领域的应用主要包括基因诊断、基因治疗和生物药物的生产。
通过基因诊断，可以准确检测遗传病的基因突变，为疾病的早期预测和治疗提供依据。
基因治疗则通过修复或替代患者体内的异常基因，治疗遗传性疾病。
此外，基因工程技术还被用于生产重组蛋白和抗体等生物药物。
3. 工业应用：基因工程技术在工业领域的应用主要包括酶的生产和环境修复。
通过基因工程技术，可以大量生产具有特定功能的酶，用于工业生产和制药领域。
此外，基因工程技术还可以改造微生物，使其能够降解有机物污染物，用于环境修复和生物能源开发。
三、基因工程的伦理和安全问题尽管基因工程技术具有重要的应用前景，但也带来了一些伦理和安全问题。
基因工程知识点总结
基因工程知识点总结基因工程，这个在现代生物学中熠熠生辉的领域，正以惊人的速度改变着我们的生活和对生命的认知。
它就像是一把神奇的钥匙，开启了无数未知的大门，为解决人类面临的诸多问题带来了前所未有的希望和可能。
一、基因工程的定义与基本原理基因工程，简单来说，就是按照人们的意愿，将一种生物的基因在体外进行切割、拼接和重组，然后导入另一种生物的细胞内，使之稳定遗传并表达出相应产物的技术。
其基本原理基于三个重要的步骤：首先是获取目的基因，这就像是在茫茫基因海洋中找到我们想要的那一颗珍珠；其次是构建基因表达载体，相当于给这颗珍珠打造一个合适的盒子，使其能够安全、有效地传递；最后是将重组 DNA 分子导入受体细胞，并使其在受体细胞中稳定存在和表达。
二、获取目的基因的方法1、从基因文库中获取基因文库就像是一个巨大的基因仓库，里面存储着各种各样的基因。
我们可以根据已知的信息，从这个文库中筛选出我们需要的目的基因。
2、利用 PCR 技术扩增目的基因PCR 技术就像是一个基因的复印机，能够以极少量的基因片段为模板，快速大量地复制出我们想要的基因。
3、人工合成法如果已知目的基因的核苷酸序列，或者其氨基酸序列，我们可以通过化学方法直接人工合成目的基因。
三、基因表达载体的构建基因表达载体是基因工程的核心部分，它就像是一辆专门运输基因的列车，需要具备多个关键组件。
1、启动子启动子是基因表达的“开关”，它能够控制基因在何时何地开始表达。
2、终止子终止子则是基因表达的“刹车”，告诉基因在何处停止表达。
3、标记基因标记基因就像是一个个小标签，帮助我们筛选出成功导入目的基因的受体细胞。
4、目的基因这是我们最终想要表达的基因片段。
四、将目的基因导入受体细胞1、导入植物细胞（1）农杆菌转化法农杆菌就像是一个天然的基因运输工具，能够将其携带的基因转移到植物细胞中。
（2）基因枪法通过高速的微粒将目的基因直接打入植物细胞。
（3）花粉管通道法利用花粉管通道将目的基因导入植物的受精卵中。
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简述Southern blot,northern blot,western blot的原理，比较它们的不同.答：Southern Blot 原理：将待检测的DNA分子用/不用限制性内切酶消化后，通过琼脂糖凝胶电泳进行分离，继而将其变性并按其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上，固定后再与同位素或其它标记物标记的DNA或RNA探针进行反应。
如果待检物中含有与探针互补的序列，则二者通过碱基互补的原理进行结合，游离探针洗涤后用自显影或其它合适的技术进行检测，从而显示出待检的片段及其相对大小。
用途：检测样品中的DNA及其含量，了解基因的状态, 如是否有点突变、扩增重排等。
DNA => 琼脂糖电泳=> 印迹转移=> 预杂交=> 杂交（变性探针）=> 洗膜=> 放射自显影或显色Northern Blot原理：在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，继而按照同Southern Blot相同的原理进行转膜和用探针进行杂交检测。
用途：检测样品中是否含有基因的转录产物（mRNA）及其含量。
mRNA提取=> 甲醛变性电泳=> 印迹转移=> 预杂交=> 杂交（变性探针）=> 洗膜=> 放射自显影或化学发光Western Blot与 Southern Blot或 Northern Blot杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。
经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。
不同：所用于分析的对象不同。
Northern杂交用于分析RNA；Southern杂交用于分析DNA；Western杂交用于分析蛋白质。
转基因动物与转基因植物的产生有什么不同？答：技术原理相同，用转基因技术将具体特殊经济价格的外源基因导入动植物体内，不但表达出人类所需要的优良性状（如抗虫，抗病，抗除草剂，抗倒伏，产肉，产蛋量高）,还可以通过蛋白质重新组合得到新的品种。
但是，对动物和植物进行目的基因导入的方法不同。
动物一般采用显微注射法将带有目的基因的病毒注入细胞；而植物一般采用农杆菌转化法或基因枪法将目的基因导入受体细胞。
限制性内切酶的种类？答：限制性内切酶是一类能识别双链DNA特定序列，并使磷酸二酯键断开的内切脱氧核糖核酸酶，限制性内切酶根据酶的组成，裂解方式和所需因子的不同分为三种类型，分别是Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。
Ⅰ型酶主要指的是：一类兼有限制性内切酶和修饰酶活性的多亚基蛋白复合体。
它们可在远离识别位点处任意切割DNA 链。
能识别特异性的DNA 序列, 但没有固定的切割位点Ⅱ型酶主要指的是：能在其识别序列内部或附近特异地切开DNA 链。
它们产生确定的限制性片段和凝胶电泳条带，因此是唯一一类用于DNA分析和克隆的限制性内切酶，分子量较小。
Ⅲ型酶主要指癿是：一类较大癿兼有限制-修饰两种功能癿酶。
它在识别位点之外切开DNA 链，并且要求同一DNA分子中存在两个反向癿识别序列以完成切割。
酶切反应条件：答：1．缓冲液常规缓冲液一般包括提供稳定pH值的缓冲剂、Mg++ 、DTT（二硫苏糖醇）以及BSA （小牛血请白蛋白）。
pH经常为7.0-7.9（在25℃时），用Tris-HCl 或乙酸调节；Mg++作为酶的活性中心，由MgCl2 和MgAc 提供；浓度常为10mM；DTT 浓度常为1mM 。
有时缓冲液中还要加入100g/ml BSA，但只是少数反应需要。
不同的酶对离子强度的要求差异很大，并依次将限制酶缓冲液按离子强度的差异分为高、中、低三种类型，离子强度以NaCl来满足，浓度分别为100mM 、50mM 和0mM 。
要对DNA 进行双酶切时，如何选择缓冲液是相当重要的。
一方面可选用都合适的缓冲液或通用缓冲液；若找不到共用的缓冲液则先用低浓度的，再加适量NaCl 和第二种酶；或先用低盐缓冲液再用高盐缓冲液（DNA 可纯化或不纯化）。
2．反应温度反应温度大多数为37℃，一部分为50-65℃，少数25-30℃。
高温作用酶在37℃下的活性会下降，多数仅为最适条件下的10-50% 。
如Taq 限制酶（正常反应温度为65℃），在37℃只有在65℃活性的10%；ApoⅠ（正常反应温度为50℃），37℃只有在50℃时活性的50% 。
销售商在产品说明中都会标明最佳反应温度。
3．反应时间反应时间通常为1小时或更多，许多酶延长反应时间可减少酶的用量。
EcoRⅠ若反应16小时，所需酶量为正常酶切时间的1/8，即若反应时间为16小时，则所用酶量为只切1小时的1/8 。
其它一些酶也有类似情况，如HindⅢ为1/8；KpnⅠ为1/4；BamHⅠ为1/2。
4．终止酶切的方法EDTA 可鏊合镁离子，从而可终止酶切反应，终止浓度为10mM ；加热是常用的方法，对于最佳反应温度为37℃的酶，在65℃或80℃处理20 分钟可使酶活性大部分丧失。
但是对于在80℃作用20分钟也有不失活的酶，如最佳反应温度为37℃的酶Bg1Ⅱ、HpaⅠ和PvuⅡ，65℃酶Tth111Ⅰ和TspRⅠ，以及50℃酶Bc1Ⅰ，可用苯酚抽提去除蛋白，或用试剂盒纯化DNA 。
柯斯质粒载体的特点：答：第一、具有λ噬菌体的特性。
柯斯质粒载体克隆了合适长度的外源DNA，并在体外被包装成噬菌体颗粒后，可以高效地转导对λ噬菌体敏感的大肠杆菌寄主细胞。
但该载体不包含λ噬菌体的全部必要基因，因此不能够通过溶菌周期，无法形成子代噬菌体颗粒二、具有质粒载体的特性柯斯质粒载体具有质粒复制子，能够在寄主细胞中象质粒DNA 一样进行复制，通常具有抗菌素抗性基因，可作为重组体分子表型选择标记，其中一些还带有基因插入失活的克隆位点。
第三、具有高容量的克隆能力柯斯质粒载体的分子仅具有一个复制起点，一两个选择记号和cos位点等三个组成部分，其分子量较小，一般只有5～7kb左右，及柯斯质粒载体的克隆极限可达45kb左右。
第四、具有与同源序列的质粒进行重组的能力一旦柯斯质粒与一种带有同源序列的质粒共存在同一个寄主细胞当中时，它们之间便会形成共合体。
转基因动物的主要目的：一名词解释转基因动物：是指以人工方法导入外源基因，在染色体内稳定整合并能遗传给后代的一类动物。
转基因生物：在生物基因组中带有用转基因技术插入的外源基因，生物个体能将它遗传给后代并表达出该基因的生物活性物质，从而使受体生物获得新的性状。
核酶：是具有催化功能的RNA分子，是生物催化剂，可降解特异的mRNA序列。
核酶又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。
插入失活：当外源DNA插入到载体的某一基因中间时，该基因就不能表达，这种现象称为插入失活。
结构基因：包括以5端mRNA转录位点开始到3端mRNA终止信号结束的全部功能单位。
目的基因：决定生物的优良性状，具有应用价值的应用前景，并被用于构建物种新特性的基因。
操纵子：功能密切相关的基因聚集在一起，处于同一转录启动的调控之下，并且有相同的转录终止区。
启动区：RNA聚合酶识别，结合和开始转录的一段DNA序列。
终止子：原核生物基因在转录终止前的一段提供转录终止信号的DNA序列。
终止因子：帮助RNA聚合酶识别终止信号的辅助因子。
双元载体：即能在宿主自我复制，又能转化感染其它宿主的载体。
温和噬菌体：λDNA可以整合到宿主细胞染色体，以溶源状态存在并随染色体的复制而复制。
插入型载体：当外源DNA片段插入后使载体所具有的合成活性阻遏物的功能遭受破坏，而不能进入溶菌周期。
表达序列标签：EST是从一个随机选择的cDNA 克隆进行5’端和3’端单一次测序获得的短的cDNA 部分序列，代表一个完整基因的一小部分，在数据库中其长度一般从20 到7000bp 不等，平均长度为360 ±120bp。
EST 来源于一定环境下一个组织总mRNA 所构建的cDNA 文库，因此EST也能说明该组织中各基因的表达水平。
基因文库：是指将某种生物的全部基因组的遗传信息贮存在可以长期保存的稳定的重组体中，以备需要时能够随时应用它分离所需要的目的基因，这种保存基因遗传信息的材料称为基因文库。
移动基因：能从染色体的一个位置转移到另外一个位置，甚至在不同的染色体之间跳跃的基因。
断裂基因：基因内部插入有与氨基酸编码无关的DNA间隔区，使一个基因分隔成不连续的若干片段。
重叠基因：两个基因内部存在重叠的读码框。
二考点整理1、常用植物基因转化方法特点比较。
2、插入失活例子PBR322有四环素抗性基因和氨卡青霉素抗性基因，在四环素抗性基因内有BamHⅠ和Sal Ⅰ两种限制酶切位点，如果在这两个位点中有外源DNA插入，都会导致四环素抗性基因失活。
将转化后的细胞分别培养在含氨卡青霉素和四环素的培养基中，便可检出转化子细胞。
3、TAC载体的蔗糖致死和卡那霉素抗性。
4,、蓝白斑筛选蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法：是根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。
现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。
在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它并不破坏读框，但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能，这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。
因此，宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性，但它们同时存在时，可形成具有酶学活性的蛋白质。
这样，lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补，称为α-互补。
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下，在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落，因而易于识别。
然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。
如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后，有重组质粒的细菌形成白色菌落。
设计适用于蓝白斑筛选的基因工程菌为β-半乳糖苷酶缺陷型菌株。
这种宿主菌的染色体基因组中编码β-半乳糖苷酶的基因突变，造成其编码的β-半乳糖苷酶失去正常N段一个146个氨基酸的短肽（即α肽链），从而不具有生物活性，即无法作用于X-gal产生蓝色物质。