纤细薯蓣皂苷说明书
实验三 穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离与鉴定
实验三 穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离与鉴定一、概述穿山龙为薯蓣科穿龙薯蓣（Dioscorea nipponica Makino ）的干燥根茎。
具有活血化瘀、祛风除湿、清肺化痰等功效。
穿山龙中主要化学成分的结构及物理性质：薯蓣皂苷（dioscin ）为无定形粉未或针状结晶，mp275～277℃。
可溶于甲醇、乙醇、甲酸，难溶于丙酮和弱极性有机溶剂，不溶于水。
薯蓣皂苷元（diosgenin ）为白色粉末，mp204～207℃，[]25D α -129。
（C ＝1.4三氯甲烷）。
可溶于有机溶剂及醋酸中，不溶于水。
薯蓣皂苷元 D －葡萄糖 L －鼠李糖 薯蓣皂苷二、实验部分 （一）实验目的要求1、掌握穿山龙中薯蓣皂苷元的提取和精制方法。
2、熟悉薯蓣皂苷及皂苷元的性质和检识方法。
（二）实验原理薯蓣皂苷元在植物体内与糖结合成苷，经水解（酸水解、酶水解）可得薯蓣皂苷元和糖。
利用薯蓣皂苷元不溶于水，溶于有机溶剂的性质，用石油醚连续回流提取，将其从原植物中提取出来。
（三）实验药材、仪器与试剂 1、药材：穿山龙粗粉70g （每组）2、仪器：电热套、圆底烧瓶、冷凝管、纱布、乳钵、PH 试纸、烘箱、试管、水浴锅、索氏提取器等。
HOOOH OCH 3OHOH OHOOHOHOH CH 2OHH,OHH,OH++3、试剂: 浓H2SO4、Na2CO3粉末、蒸馏水、95%乙醇、1%磷钼酸乙醇溶液、石油醚（60-90℃）、醋酐、浓硫酸、三氯甲烷、浓硫酸等。
（三）实验内容1、薯蓣皂苷元的提取、分离和精制穿山龙粗粉（70g）置圆底烧瓶中，加水350ml、浓H2SO430ml，室温浸泡24小时，文火加热回流4～6小时，放冷，倾出酸水液酸性药渣用清水反复漂洗除去余酸，然后将药渣倒入乳钵中，加Na2CO3粉末，反复研磨调PH至中性（用PH试纸测试）、水洗、抽干中性药渣低温（80℃）干燥12小时干燥药渣置乳钵中研成细粉，置索氏提取器中，以石油醚（60-90℃）150 ml为溶剂，连续回流提取4-5小时10-15ml，迅速倾入48h），抽滤用少量冷石油醚洗二次，抽干薯蓣皂苷元粗品置圆底烧瓶中，加50ml甲醇，在沸水浴上加热回流至完全溶解，趁热抽滤，滤液放入冰箱析晶。
薯蓣皂苷片使用说明书
薯蓣皂苷片使用说明书
请仔细阅读说明书并在医师指导下使用薯蓣皂苷片使用说明书
【药品名称】
通用名称：薯蓣皂苷片
英文名称：Dioscornin Tablets
汉语拼音：Shuyu Zaogan Pian
【成份】穿山龙水溶性总皂苷
【性状】本品为薄膜衣片，除去薄膜衣显棕色，味微甜而苦。
【适应症】
用于冠心病、心绞痛的辅助治疗。
亦可用于并发高血压、高甘油三酯、高胆固醇等症的患者。
【规格】80mg
【用法用量】口服。
一次0.12g（1.5片）～0.16g（2片），一日3次。
【不良反应】偶有胃肠道不适。
【禁忌】对本品过敏者禁用。
【注意事项】当药品性状发生改变时禁止使用。
【孕妇及哺乳期妇女用药】未进行该项实验且无可靠参考文献。
【儿童用药】未进行该项实验且无可靠参考文献。
【老年用药】未进行该项实验且无可靠参考文献。
【药物相互作用】未进行该项实验且无可靠参考文献。
【药物过量】未进行该项实验且无可靠参考文献。
【药理毒理】本品能增加冠脉血流量，减少心肌耗氧量，改善心肌缺血，缓解心绞痛，并对心肌缺血和缺血再灌注损伤产生保护作用；还具有调节脂质代谢、改善血液流变性的作用，可降低血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和氧化修饰低密度脂蛋白含量，降低高、低切变率下的全黏度，因此可减轻动脉壁脂质润及斑块形成，从而防治动脉粥样硬化。
【药代动力学】未进行该项实验且无可靠参考文献。
【贮藏】密闭，在干燥处保存。
【包装】药用PVC硬片/药品包装用PTP铝箔；12片/板，4板/盒
【有效期】24个月说明书字数：734。
穿山龙中药材详细说明书
穿山龙药材名称：穿山龙拼音名称：CHUANSHANLONG别名：穿龙薯蓣、野山药、地龙骨、鸡骨头、龙萆、穿地龙、狗山药、山常山、穿山骨、火藤根、粉萆薢、黄姜、土山薯、竹根薯、铁根薯、雄姜、黄鞭、山花啦、金刚骨、串山龙。
科属：薯蓣科薯蓣属植物穿龙薯蓣的根状茎。
产地：辽宁、吉林、黑龙江、河北、内蒙古、山西、陕西、湖南。
性味：[性味、归经]苦，微寒。
归肝、肺经功效：祛风湿，活血通络，清肺化痰。
中成药：共有32种中成药使用穿山龙:薯蓣皂苷片桂龙益肾通络口服液风湿圣药胶囊骨龙胶囊桂龙益肾通络口服液骨骼风痛片人参天麻药酒穿龙骨刺片骨刺丸跌打止痛散等。
应用：1、风湿痹证。
本品能祛风湿，入肝经活血通络，常用于风湿痹痛，腰腿疼痛，肢体麻木。
因其微寒，以治热痹为多，可水浸或酒浸服，或与桑枝、络石藤、忍冬藤等同用。
2、痰热咳嗽。
本品苦降泄，微寒清热，入肺经清肺化痰，止咳平喘，治咳喘痰多，可与瓜蒌仁、杏仁、黄芩等同用。
此外，本品还可治疗胸痹、跌打损伤、痈肿疮毒等。
用法用量：煎服，10～15G，或酒浸服。
外用适量。
采收加工：春秋采挖，去掉外皮及须根，切片晒干。
炮制工艺：除去杂质，洗净，润透，切片，干燥。
现代研究：1、化学成分：本品主要含薯蓣皂甙等多种甾体皂甙。
穿山龙含薯蓣皂甙、纤细薯蓣皂甙、穗菝葜甾甙、25-D-螺甾-3，5-二烯及对羟基苄基酒石酸。
2、药理作用：穿山龙有显著的平喘作用，总皂苷、水溶性及水不溶性皂苷有明显镇咳、祛痰作用；水煎剂对细胞免疫和体液免疫功能均有抑制作用，而对巨噬细胞吞噬功能有增强作用；对金黄色葡萄球菌等多种球菌及流感病毒有抑制作用；总皂苷能增强心肌收缩力，减慢心率，降低动脉压，改善冠脉血液循环，增加尿量，并能显著降低血清总胆固醇及Β/Α脂蛋白比例。
临床应用：1、治腰腿酸痛，筋骨麻木：鲜穿山龙根茎二两，水一壶，可煎用五，六次，加红糖效力更佳。
（选自《东北药植志》）2、治劳损：穿山龙五钱。
水煎冲红糖、黄酒。
设计性试验 穿山龙薯蓣皂苷的提制和鉴识
设计性试验穿山龙薯蓣皂苷的提制和鉴识穿山龙为薯蓣科薯蓣属植物穿龙薯蓣Dioscorea nipponica Makino的根状茎，又名穿龙薯蓣、野山药、串地龙，能舒筋活血，止咳化痰，祛风止痛。
中医用于腰腿疼痛、风湿关节痛、筋骨麻木、跌打损伤、气管炎、支气管炎。
穿山龙的有效成分主要是是甾体皂甙（薯蓣皂苷：dioscin C45H72O16；纤细薯蓣皂苷：gracillin C45H72O17）和水溶性皂苷。
其总皂苷含量在3%左右本实验经提取，可得到薯蓣皂苷。
他们的物理性质如下：薯蓣皂苷，白色粉末，熔点294～296℃，薯蓣皂苷不溶于水、石油醚、苯，可溶于甲醇、乙醇、醋酸，微溶于丙酮、戊醇。
纤细薯蓣皂苷，白色粉末，熔点287～289℃(分解);298～302℃; 290～293℃。
纤细薯蓣皂苷不溶于水、石油醚。
一、实验目的1．掌握各种苷与苷元的分离纯化方法，包括水溶性苷与水难溶性苷分离，不同极性水难溶性苷的分离，水难溶性苷与苷元的分离。
2．学习苷与苷元的各种鉴识方法，包括：层析方法（TLC），沉淀反应等。
3．学习各种实验技能提取：超声提取分离：柱层析鉴识：层析法、化学法二、实验原理根据薯蓣皂苷不溶于水、石油醚、苯，可溶于甲醇、乙醇的特性，提取分离脂溶性总皂苷和水溶性蛋白质、多糖，利用薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷结构上的差别，用吸附柱层析分离二者。
本实验涉及的知识点有：溶剂提取法、色谱法等。
三、实验流程穿山龙药材总皂苷薯蓣皂苷四、实验步骤1.总皂苷的提取称取穿山龙药材200g ，研碎，量取80%乙醇溶液500mL ，浸泡20min,超声提取1h,T=70℃，减压抽滤至无醇味。
第二次提取，加400mL 乙醇，二次超声30min,减压抽滤至无醇味，合并滤液。
滤液用正丁醇萃取（50ml ×3），回收正丁醇，得穿山龙中总皂苷粗品。
2.总皂苷的分离（无水条件）干燥：烧杯（100ml,2个）、锥形瓶（500ml,1个、50ml,20个）、蒸发皿、玻璃棒（2支）、量筒（100ml,1个、10ml ，1个），色谱柱、滴管2支。
中国薯蓣属植物中的甾体皂苷及甾体皂苷元_唐世蓉
中国薯蓣属 (D ioscorea L. )植物含甾体皂苷元 的种类约有 17种 ,均为根茎组 ( Sect. S tenophora)种 类 ,所含的主要皂苷元为薯蓣皂苷元 ( diosgenin) ,为 合成激素类药物的重要原料 [ 1 ] 。近年来 ,有研究发 现 ,该类皂苷成分还有抗炎 、平喘 、扩冠 、降血脂及抗 肿瘤等生理活性作用 [ 2, 3 ] ; 一些种类所含的水溶性 皂苷可治疗冠心病和心绞痛 , 并已有制剂用于临 床 [ 4～7 ] 。为了寻找优质高含量的新资源 、筛选新的 生理活性成分 ,中国学者做了大量的研究工作 。作 者根据自己的研究成果 ,结合相关的文献资料 ,对中 国薯蓣属植物所含的甾体皂苷和甾体皂苷元成分进 行了归纳和综述 。
igagen in d io tigen in iso tenu ip egen in neotokorogenin sarsasapogenin
约茂皂苷元 约茂皂苷元乙酸酯 约茂皂苷元棕榈酸酯 菝葜皂苷酮
24α - 羟基 - 约茂皂苷元 (盾叶皂苷元 )
衣蓋皂苷元 地奥惕皂苷元 异细柄皂苷元 新山萆薢皂苷元 知母皂苷元
植物资源与环境学报 2007, 16 (2) : 64 - 72 综述 No. 22
J ou rna l of P lan t R esou rces and Environm en t R eview A rticle
表 2 中国薯蓣属植物所含的甾体皂苷 Table 2 Stero ida l sapon in s in Ch inese D ioscorea L. plan ts
英文名 English name
中文名 Chinese name
英文名 English name
中文名 Ch蓉 ① , 杨如同 , 潘福生 , 赵爱明 , 庞自洁
薯蓣皂苷的药理作用研究进展
高志捷等［源］按 酝燥泽皂葬灶灶 氏 酝栽栽 比色法略加改 进，观察薯蓣皂苷对指数生长期的白血病细胞的抑 制率，并设 长 春 新 碱 为 对 照 组。 实 验 结 果 显 示，薯 蓣皂苷 圆源援 园 μ早 辕 皂蕴 对 匀蕴远园、酝园苑藻、运缘远圆 细胞的抑 制率分别为 怨怨援 远豫 、愿缘援 苑豫 、苑怨援 源豫 。这一结果可 以说明，薯 蓣 皂 苷 可 明 显 抑 制 白 血 病 细 胞 增 殖，并 对白血病细胞类型无明显选择性，其对白血病细胞 的抑制作用与长春新碱比较，有明显优势。
摇 ·摇 摇缘源摇 源摇·摇 摇 摇 摇 摇 世界中西医结合杂志 圆园员园 年第 缘 卷第 远 期摇 宰燥则造凿 允燥怎则灶葬造 燥枣 陨灶贼藻早则葬贼藻凿 栽则葬凿蚤贼蚤燥灶葬造 葬灶凿 宰藻泽贼藻则灶 酝藻凿蚤糟蚤灶藻摇 圆园员园，灾燥造郾 缘，晕燥郾 远
鼠 陨砸 损伤心肌起到保护作用。 倪岚等［苑］通 过 离 体 培 养 的 原 代 大 鼠 乳 鼠 心 肌
细胞，制造 心 肌 细 胞 损 伤 模 型，检 测 细 胞 培 养 液 中 超氧化物歧化酶（ 杂韵阅）、丙二醛（ 酝阅粤）和一氧化氮 （ 晕韵）的含量，探讨薯蓣皂苷保护心肌细胞的抗氧 化作用机制，研究结果表明：杂韵阅 活性在缺氧时受 到抑制，自由基的大量产生造成内源性抗氧化系统 的大量消耗，故而在复氧时 杂韵阅 活性亦受到显著抑 制。薯蓣皂苷能显著升高缺氧 辕 复氧后离体心肌细 胞的 杂韵阅 活性，降低 酝阅粤 和 晕韵 含量，并具有一定 的剂量依 赖 性，说 明 薯 蓣 皂 苷 有 提 高 抗 氧 化 酶 活 性，抑制自 由 基 产 生 的 抗 氧 化 能 力，从 而 证 实 薯 蓣 皂苷可通过抗氧化作用发挥对缺氧 辕 复氧心肌细胞 的保护作用。
纤细薯蓣皂苷诱导肺癌A549细胞自噬的作用及机制
·药学研究·纤细薯蓣皂苷诱导肺癌A 549细胞自噬的作用及机制Δ李燕 1＊，李亚梅 2，雷歌燕 1，康佳兰 3，刘明轩 1，张敏鸿 2，杨建琼 2 #（1.赣南医学院第一附属医院药学部，江西 赣州 341000；2.赣南医学院第一附属医院临床医学研究中心，江西 赣州 341000；3.泰和县人民医院药剂科，江西 吉安 343700）中图分类号 R 965；R 285 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2024）08-0912-06DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2024.08.03摘要 目的 探讨吉祥草中纤细薯蓣皂苷（gracillin ）诱导人非小细胞肺癌A 549细胞自噬的作用及机制。
方法 以A 549细胞为对象，采用CCK-8法检测不同浓度（0.25、0.5、1、2、4 μmol/L ）gracillin 作用不同时间（12、24、48 h ）对细胞增殖的影响。
与不加药物的对照组进行比较，采用生物透射电子显微镜观察gracillin （2 μmol/L ）作用24 h 对细胞自噬小体形成的影响；通过GFP-LC 3质粒转染实验检测gracillin （0.25、0.5、1、2 μmol/L ）作用24 h 后GFP-LC 3在细胞自噬小体膜上的聚集情况；采用实时定量聚合酶链式反应法和Western blot 法检测gracillin （0.25、0.5、1、2 μmol/L ）作用24 h 后A 549细胞中序列相似性家族102成员A （FAM 102A ） mRNA 和蛋白的表达水平，以及自噬相关蛋白[p 62、Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3B （LC 3B ）]和磷脂酰肌醇3激酶（PI 3K ）/蛋白激酶B （又名Akt ）信号通路相关蛋白的表达水平。
结果 gracillin 对A 549细胞具有一定的增殖抑制作用，且呈浓度和时间依赖趋势；其作用24 h 的半数抑制浓度为2.55 μmol/L 。
薯蓣皂苷
来源
在植物界主要分布在薯蓣科薯蓣属（Dioscorea）植物中，我国的薯蓣 属植物有80余种，其中只有薯蓣根茎组（Stenophora）的17种、I亚种及
一变种才含有甾体皂苷元，其它则含有多量淀粉，无皂苷元。已用于生
产的主要有盾叶薯蓣（D.Zingiberensis C. H. Wright），穿龙薯蓣 （D.nipponica Makino），黄山药（D.panthaica prain et Burkil）,紫黄姜
(D.nipponica Makinovar rosthani prain et Burk)等。
存在
在植物体内薯蓣皂苷元是与葡萄糖、鼠李糖结合成薯蓣 皂苷而存在。提取分离时，一般是先用稀酸将薯蓣皂苷水解 成薯蓣皂苷元与单糖（葡萄糖、鼠李糖）。因薯蓣皂苷元不
溶于水，混存于植物残渣中，故可用有机溶剂（如石油醚）
不同的极位。常用溶剂有石油醚、环己烷、乙醚、氯仿、乙酸乙酯、甲
醇和正丁醇。将低极性部分用硅胶柱层析，以氯仿．丙酮或环己烷．乙 酸乙酯进行梯度洗脱，得薯蓣皂苷元。
提取流程：
样品（薯蓣地下部分） 粉碎 粗粉（50g） 置圆底烧瓶中，加 10%H2SO4 200ml， 室温浸泡 24 小时，文火加热回流 4～6 小时， 放冷，倾出酸水液 酸性药渣 用清水反复漂洗除去余酸，然后将药渣倒入 乳钵中，加 Na2CO3 粉末，反复研 磨调 PH 至中性（用 PH 试纸测试） 、水洗、抽干 中性药渣 低温（80℃）干燥 12 小时 干燥药渣 置乳钵中研成细粉，置索氏提取器中， 以石油醚（60-90℃）150 ml 为溶剂，连 续回流提取 4-5 小时 石油醚提取液 回收石油醚至剩 10-15ml，迅速倾入 小烧瓶中、密盖，置于冰箱中析晶（48h） ，抽滤
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【中文名称】：纤细薯蓣皂苷
【中文别名】：纤细薯蓣皂甙
【英文名称】：Gracillin
【英文别名】：DulcamarinC；LilioglycosideG
【CAS编号】：19083-00-2
【分子式】：C45H72O17
【分子量】：885.04
【分子结构】：
【提取来源】：提取来源：薯蓣科植物穿龙薯蓣Dioscorea Nipponica。
多年生缠绕草本，长达5m。
根茎横生，圆柱形，木质，多分枝，栓皮层显著剥离。
茎左旋，圆柱形，近无毛。
单叶互生；叶长10-20cm；叶片掌状心形，变化较大，茎基部叶长10-15cm，宽9-13cm，边缘作不等大的三角状浅裂、中裂或深裂，先端叶片小，近于全缘，叶表面黄绿色，有光泽，无毛或有稀疏的白色细柔毛，尤以脉上较密。
花单性，雌雄异株。
雄花序为腋生的穗状花序，花序基部常由2-4朵集成小伞状，花序顶端常为单花；苞片披针形，先端渐尖，短于花被；花被碟形，6裂，裂片先端钝圆；雄蕊6，着生于花被裂片的中央，花药内向。
雌花序穗状，单生；花被6裂，裂片披针形；雌蕊柱头3裂，裂片再2裂。
蒴果成熟后枯黄色，三棱形，先端凹入，基部近圆形，每棱翅状，大小不一，一般长约2cm，宽约1.5cm。
种子每室2，有时仅1颗发育，着生于中轴基部，四周有不等的薄膜状翅，上方呈长方形，长约比宽大2倍。
花期6-8月。
用途：用于含量测定、鉴定、药理实验等。
【物理性状】：白色结晶
【产品熔点】：295~297℃
【测定方法】：高效液相色谱
【贮存条件】：4℃冷藏、密封、避光
【所属类别】：植物提取物
【药理药效】：纤细薯蓣皂苷具极强的溶血作用
【包装情况】：20mg, 50mg, 100mg, 1g,10g,100g，1kg，50kg...。