各种无机培养基配方
各种无机培养基配方
各种无机培养基配方无机培养基是一种常用的用于微生物培养的基本培养基。
下面我将介绍几种常见的无机培养基配方。
1.液体无机培养基配方（液体培养基）液体培养基的主要成分是水和无机盐。
以下是一种常见的液体无机培养基配方：-硝酸铵：1g-磷酸一氢二铵：0.5g-硫酸镁：0.5g-氯化钠：0.5g-氯化钾：0.5g-磷酸钠：0.1g-氢氧化钠：0.1g-葡萄糖：1g- 蒸馏水：1000ml将以上的化学试剂溶解在蒸馏水中，得到液体无机培养基。
可以根据需要，对不同的微生物进行培养。
2.固体无机培养基配方（琼脂培养基）固体培养基是在液体培养基的基础上添加琼脂，使其凝固成固体。
以下是一种常见的固体无机培养基配方：-硝酸铵：1g-磷酸一氢二铵：0.5g-硫酸镁：0.5g-氯化钠：0.5g-氯化钾：0.5g-磷酸钠：0.1g-氢氧化钠：0.1g-葡萄糖：1g-琼脂：12g- 蒸馏水：1000ml将以上化学试剂溶解在蒸馏水中，加热溶解后，将琼脂加入溶液中，搅拌均匀，然后在滴壶的情况下分装至琼脂培养皿中，使其凝固成固体无机培养基。
选择性无机培养基是通过在无机培养基中添加抗生素或其他抑菌剂，以抑制一些微生物的生长，从而有选择地培养目标微生物。
以下是一种常见的选择性无机培养基配方：-硝酸铵：1g-磷酸一氢二铵：0.5g-硫酸镁：0.5g-氯化钠：0.5g-氯化钾：0.5g-磷酸钠：0.1g-氢氧化钠：0.1g-葡萄糖：1g-抗生素/抑菌剂：根据需要添加- 蒸馏水：1000ml在以上的无机培养基配方中，根据需要添加适当的抗生素或抑菌剂，可以选择性地培养目标微生物而抑制其他微生物的生长。
以上是几种常见的无机培养基配方，可根据需要进行修改和调整，以适用于不同的微生物培养。
无机培养基的配方除了上述所列的成分外，还可以根据具体需求添加其他的营养物质，如氨基酸、维生素等，以满足微生物的生长需求。
MS培养基配方
MS培养基配方成分分子量使用浓度(mg/L)大量元素硝酸钾KNO3 101.11 1900硝酸铵NH4NO3 80.04 1650磷酸二氢钾KH2PO4 136.09 170硫酸镁MgSO4.7H2O 246.47 370氯化钙CaCl2.2H2O 147.02 440微量元素碘化钾KI 166.01 0.83硼酸H3BO3 61.83 6.2硫酸锰MnSO4.4H2O 223.01 22.3硫酸锌ZnSO4.7 H2O 287.54 8.6钼酸钠Na2MoO4.2 H2O 241.95 0.25硫酸铜CuSO4.5 H2O 249.68 0.025氯化钴CoCl2.62 237.93 0.025铁盐乙二胺四乙酸二钠Na2.EDTA 372.25 37.3硫酸亚铁FeSO24.7H2O 278.03 27.8有机成分肌醇100甘氨酸2盐酸硫胺素VB1 0.1盐酸吡哆醇VB6 0.5烟酸VB5或VPP 0.5蔗糖sucrose 342.31 30g/L琼脂agar 7 g/LMS培养基是目前普遍使用的培养基.它有较高的无机盐浓度.对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有利.由于配方中的离子浓度高.在配制.贮存.消毒等过程中.即使有些成分略有出入.也不致影响离子间的平衡.MS固体培养基可用来诱导愈伤组织.或用于胚.茎段.茎尖及花药培养.它的液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功.这种培养基中的无机养分的数量和比例比较合适.足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要.说明:表中各培养基配方中.均未列出铁盐.关于铁盐配方.除尼许培养基为柠檬酸铁10毫克/升外.其余均为:5.57克的FeSO4·7H2O(硫酸亚铁)和7.45克的Na2-EDTA(乙胺四乙酸二钠)溶于1升水的溶液.5毫升/升.须再添加氨基酸.酪蛋白水解物.酵母提取物及椰子汁等有机附加成分.与其它培养基的基本成分相比.MS培养基中的硝酸盐.钾和铵的含量高.这是它的明显特点.植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。
培养基配方及配置
培养基配⽅及配置培养基配⽅及配置根据其作⽤不同，培养基分为：诱导培养基增殖培养基⽣根培养基根据其营养⽔平不同，培养基可分为基本培养基和完全培养基。
基本培养基（就是通常称呼的培养基）主要有MS、White、N6、B5 、改良MS、Heller、Nitsh、SH、Miller等。
完全培养基就是基本培养基的基础上，根据试验的不同需要，附加⼀些物质，如⽣长调节物质和其他复杂有机物质等。
N6培养基特点：1974年朱⾄清等为⽔稻等⽲⾕类作物花药培养⽽设计成分简单KNO3 和(NH4)2SO4含量⾼⼴泛应⽤于⼩麦、⽔稻及其它植物的花药培养等White培养基特点：1943年由Ｗhite为培养番茄根尖⽽设计的。
1963年⼜作了改良，称作Ｗhite改良培养基。
特点：⽆机盐含量较低适⽤：⽣根培养。
B5培养基特点：含较低的铵双⼦叶植物尤其⽊本植物组培可选择MS培养基特点：⽆机盐、离⼦浓度⾼，硝酸盐含量较⾼。
MS培养基是⽬前应⽤最多最普遍的培养基。
⽆机盐的浓度较⾼，能保证组织培⽣长所需的矿物质营养。
并且因为离⼦浓度⾼，在配制、贮存、消毒过程中，即使有些成分略有出⼊，也不致影响培养基中的离⼦平衡培养基配⽅明细表：培养基成分：⼀、⽆机盐：氮枝叶⽣长需要氮素，缺氮⽼叶先发黄；氮过量，枝叶过度茂盛。
磷缺磷，植株⽣长缓慢，⽼叶暗紫⾊。
钾促进花卉⽣长健壮，增强抗性，茎秆挺拔。
缺钾，叶尖、叶缘枯焦，叶⽚呈皱曲状，⽼叶发黄或⽕烧状。
钴缺钴，叶⽚失绿⽽卷曲，整个叶⽚向上弯曲凋枯。
⼆、有机物碳⽔化合物：选⽤种类：蔗糖（或葡萄糖、果糖）等蔗糖浓度：2%～3%，胚培养为4%～15%⼤⽣产时可⽤⽩糖糖在培养基的作⽤：1）为细胞提供合成新物质的碳⾻架2）为细胞的呼吸代谢提供底物和能量3）维持渗透压维⽣素种类：VB1（盐酸硫胺素）、VB6（盐酸吡哆醇）、VB3（烟酸）、Vc（抗坏⾎酸浓度：0.1－1.0mg/L作⽤：VB1 促愈伤组织产⽣，提⾼活⼒VB6 促根⽣长Vc 防组织褐变VB3 与植物代谢和胚的发育有关系氨基酸：⽢氨酸、精氨酸、⾕氨酸、⾕氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等等。
培养基及配制
有机物和激素类等。其中维生素、氨基酸类可以分别
配制，也可以混在一起 配制时注意一些离子之间易发生沉淀，如Ca2+和SO42-， Ca2+、Mg2+和PO43- 一起溶解后，会产生沉淀，一定 要充分溶解再放入母液中。 各种药品先以少量水让其充分溶解，然后依次混合。 母液配好后放冰箱内低温保存，用时再按比例稀释。
4.2 细胞分裂素（CTK）
（1）种类：Kt---激动素
BAP---苄氨基嘌呤 2－iP---异戊烯腺嘌呤 ZT-玉米素 TDZ
（2）作用：启动脱分化、细胞增殖，诱导愈伤组织芽分化、芽 Nhomakorabea殖，丛生芽。
（3）浓度：0.05－10.0mg/L （4）配制：溶于稀酸或稀碱
激素配比模式
生长素与细胞分裂素：它们的比例决定着发育的方向，是愈伤 组织、长根还是长芽。
6.2 抗生素
作用：抑制内生菌； 种类：青霉素、链霉素、庆大霉素、利福平、 卡那霉素等， 用量：用量5~20mg/L 注意：抗生素对组织生长有抑制作用，使 用要慎重。
多数需过滤灭菌。
6.3 抗氧化物
1)常用抗氧化剂：半胱氨酸、VC 2)用量：50－200mg/L， 3)作用：防止氧化 4)注意：可用抗氧化剂洗 涤外植体伤口表面。
不凝原因：①pH<5不凝；②长时间高压灭菌； ③长期存放，易变质；④厂家不同，杂质含量不同 ⑤配制时融解不充分，分装不均匀；
5.2.其它
玻璃纤维 滤纸桥 海绵、卡拉胶等
6 辅 助 性 物 质
6.1 活性炭 6.2 抗氧化物 6.3 抗生素
6.1 活性炭
1)作用：具吸附作用； • 茎尖初代培养可防褐化；促进新梢增殖（浓度0.1 -0.2%）； • 促进生根,根避光生长； • 防止组培苗玻璃化（浓度0.3%）； • 有利于胚胎培养。 2)常用浓度：0.5－10g/L 3)注意：活性炭具副作用。选择 吸附性差，导致营养损耗和 pH↓， 应适当调高营养物质与激素水平， 并加大Agar用量。
培养基的配制
培养基的配制培养基是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。
一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。
培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。
1. 成分配方转换—在容器中加入少量水(蒸馏水、天然水)—按配方称各种药物(依次添加)—加入足够的水(一药一勺，服完药后立即盖上瓶子)。
2. 解散淀粉溶解:少量的冷水进粘贴琼脂融化温度为95-97℃，加热时需搅拌以防烧焦。
3.调整pH值用1n盐酸或1n氢氧化钠将培养基调至所需值。
4. 过滤滤纸或棉。
(有时可以省略)5. 分装一般在烧瓶或试管中灭菌。
(1)三角瓶静态培养时，100ml培养基/ 250ml烧瓶的最大值不应超过150ml 培养基/ 250ml否则，在灭菌过程中，培养基的煮沸极易污染棉塞，造成细菌污染;如果进行瓶培养，15-20ml培养基/ 250ml三角瓶应通风良好。
(2)试管包装液体培养基通常填充4-5ml，约为试管高度的1 / 4;一般固体斜培养基为3-4ml，约为试管高度的1 / 5。
6. 用绷带包扎包装完毕后，塞好棉塞，用牛皮纸包好棉塞，防止灭菌时湿气进入，弄湿棉塞。
7. 灭菌高压蒸汽灭菌按照配方中要求的温度和压力进行。
如果灭菌温度过高，营养成分就会被破坏培养基中的糖和氨基酸会使培养基的颜色变深。
8. 斜灭菌后，需要倾斜的试管应在加热过程中倾斜放置，使其固化成一个斜坡，约占试管长度的1 / 2。
9. 存储中可以使用不污染被放置在30℃后一天。
通常用牛皮纸包好，置于2-8℃冰箱中保存。
培养基制备
培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。
有的培养基还含有抗菌素和色素，激素和血清。
用于单种微生物培养和鉴定。
培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。
一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3~6℃的冰箱内。
由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。
培养基的配制1.配料配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水，自然水〕→按照配方称取各种药品〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺，取药后立即盖上瓶盖》。
2.溶解淀粉溶解：少量冷水调成糊状加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95～97℃，且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3.调PH用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。
4.过滤滤纸或棉花进行过滤。
5.分装一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
(1)三角瓶若作静置培养，则100 ml培养基/250 ml的三角瓶，最多不能超过150 ml培养基/250 ml的三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若作摇瓶培养，则15～20 ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。
(2)试管分装液体培养基一般装4～5 ml，约试管的1/4高度；固体斜面培养基一般装3～4 ml，约试管的1/5高度。
6.包扎分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
7.灭菌按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。
如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
8.摆斜面灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。
9.贮存培养基在30℃下放置一天，无污染的即可使用。
胶质芽孢杆菌
胶质芽孢杆菌的活化、分离纯化、优良菌株的保藏一、培养基的配方1.硅酸盐细菌培养基：酵母浸膏0.3克，蔗糖10.0克，硫酸铵0.5克，碳酸钙0.5克，七水硫酸镁0.5克，磷酸氢二钾1克，蒸馏水1000毫升，pH值7.0-7.2。
2.无机磷培养基：蒸馏水1000毫升，葡萄糖10.0克，硫酸铵0.5克，七水硫酸镁0.3克，氯化钠0.3克，氯化钾0.3克，硫酸亚铁0.036克，一水硫酸锰0.03克，磷酸三钙2.0克，琼脂15克，pH7.0-7.2。
3.钾细菌筛选培养基：蔗糖（10g），酵母膏（0.5g），Na2HPH4（2g），（NH4）2SO4(1g)，MgSO4.7H2O(0.5g)，CaCO3(1g)，钾长石粉（1g），其中K2O质量分数为9.60%，琼脂（15g），去离子水（1L），调节初始pH值为7.0。
二、菌株活化、培育和挑选：将菌种提前从下层冰箱取出，然后接种到硅酸盐细菌培养基中进行28℃恒温培养2天，每隔12小时观察一次，并选取长势优良菌株，实施分离纯化，直到得到生长优良的纯菌落。
三、解磷、解钾能力的测定：将上述所挑选的优良菌种接种于无磷培养基恒温培养七天，采用溶磷圈法进行解磷能力测定。
用溶磷圈直径与菌落直径的比值（HD/CD）大小分析该菌种的解磷能力，比值越大，解磷性能就越好。
把解磷能力优良的胶质芽孢杆菌采用低温斜面保藏法保藏。
四、菌种扩大培养培养液用5个100ml三角瓶分装，高压灭菌或间歇灭菌后，挑选斜面菌种上的菌苔接种到培养液中，25到28℃下培养3天。
培养期间，每天要定时摇瓶3到5次，每次3分钟，以加速菌体繁殖。
然后接种到5个500ml的三角瓶扩大培养。
最后接种到2000ml的塑料壶中培养并保存。
钾细菌在这种以淀粉为能源的培养基中生长繁殖时，它们的夹馍消失，且能大量生成芽孢。
因此培养液没有粘性，菌体是均匀的悬浮在培养液中的，这样的菌悬液很适合作固体菌剂接种的菌种。
培养基配方
维生素B1理学1 mg/L
腺嘌呤8 mg/L
NAA 2 mg/L
蔗糖40g／L
四．MS培养基RM—62(Murashige&Skoog(1962))
1.无机盐类同LS培养基
2．有机物
五.花肥培养基Kano(1963)(Kyoto so1ution)
花肥3g/L
KH2PO4250 mg/L
Ca(NO3)2.4H2O 1000mg/L
Ca(N03)2·4H2O 800mg／L
MgSO4·7H2O 200mg/L
KH2PO4200 mg/L
ZnSO4·7H2O 0.2mg/L
NiCl2·6H2O 0.3 mg/L
MnCl2·H2O 1.8 mg/L
CuSO4·5H2O 0.08mg/L
H2MoO4·H2O 0.02 mg/L
H3BO32.8mg/L
一.White培养基, White(1963)
1.无机盐类
Ca(NO3)2·4H2O 287mg/L
KNO380mg/L
KCl65 mg/L
NaH2PO4·H2O 19.1 mg/L
MgSO4·7H2O 738 mg/L
Na2SO4：·10H2O453 mg/L
MnSO4·4H2O 6.6 mg/L
Na2MoO4·2H2O 0.25 mg/L
2.有机物
维生素H(生物素) 0.05 mg/L
肌醇100 mg/L
维生素B1 0.5mg/L
烟酸5 mg/L
维生素B6 0.5 mg/L
甘氨酸2.0 mg/L
叶酸5 mg/L
蔗糖20 g／L
十.Nielsen(1960)培养基
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1、毕赤酵母表达硒代重组人血清白蛋白：
基础盐培养基BSM:硫酸钙0. 93 g/ L ,硫酸钾18.2 g/ L ,七水硫酸镁14.9 g/ L ,柠檬酸三钠1.47 g/ L ,微量元素2mL/ L ,甘油40 g/ L ,硫酸铵10 g/ L ,磷酸钾缓冲液(pH 6.0) 0.1 mol/ L 。
微量元素主要成分: 五水硫酸铜6.0 g/ L ,碘化钾0.08 g/ L ,一水硫酸锰3.0 g/ L ,二水钼酸钠0.2 g/ L ,硼酸0.02 g/ L ,硫酸钙0.5 g/ L ,氯化钴0.5 g/ L ,氯化锌20.0 g/ L , 七水硫酸亚铁65.0 g/ L , 硫酸5.0 mL/ L ,生物素0.2 g/ L 。
试剂均为国产生化试剂纯或分析纯。
发酵将50μL 种子液接种于5 mL 的YPG培养基中,30 ℃振荡培养18222 h ,转接到装有100mL 基础盐培养基的500 mL 带挡板的摇瓶中。
转速180 r/ min ,温度30 ℃培养,每8 小时用浓氨水调节发酵液pH 值至610 。
约48 h 时,取样检测甘油浓度,待甘油耗尽后加入甲醇开始诱导。
诱导期培养温度为28 ℃,pH 值调节至710[526 ] ,每12 h 补加体积分数015 %的纯甲醇和10 mg/ L 的亚硒酸钠,对照发酵液不添加亚硒酸钠。
诱导96 h 后停止发酵。
2、重组人血清白蛋白在毕赤酵母表达中的降解控制
PBM：甘油40g/L，磷酸（85%）26.7 g/L，二水硫酸钙0.6 g/L，硫酸钾9.5 g/L，七水硫酸镁7.8 g/L，氢氧化钾2.6 g/L，PTM1 2ml/L，生物素0.00004 g/L，硫胺0.00019 g/L，浓氨水调节为所需pH，试剂均为国产生化试剂纯或分析纯。
PTM1：Invitrogen公司提供的标准配方。
发酵：生长期温度为30℃，pH用浓氨水调节，培养期间每4h调节一次维持原pH值，甘油耗尽后甲醇诱导，诱导过程中每12h补加体积分数0.5的纯甲醇，摇床转速180r/min，摇瓶为500ml的底部有挡板的三角瓶，装液量50mml。
3、High-Level Expression of Recombinant Human Serum Albumin from the Methylotrophic Yeast Pichia pastoris with Minimal Protease Production and Activation
Basal Batch Medium
PBM medium
发酵：3L发酵罐装1L Basal Batch Medium或PBM medium，30℃，调节转速保持溶氧大于10%，甘油耗尽后流加PFM（每升含有2ml PTM1-不含生物素的甲醇），手动控制甲醇浓度低于1%（w/w），28%的氨水调节pH为5.85。
4、提高重组毕赤酵母表达hIFNβ-HSA的碳源控制策略
发酵培养基(BSM, g/L)：Glycerol 20.0，(NH4)2SO4 5.0，KH2PO4 42.9，CaSO4⋅2H2O 1.0，K2SO4 14.3, MgSO4⋅7H2O 11.7及1mL/L PTM4 微量元素溶液. PTM4 微量元素溶液(g/L): CuSO4⋅5H2O 2.0，NaI 0.08，MnSO4⋅H2O 3.0，Na2MoO4⋅2H2O 0.2，H3BO3 0.02，CaSO4⋅2H2O 0.5，CoCl2 0.5，ZnCl2 7.0，FeSO4⋅7H2O 22.0，生物素0.2，H2SO4 1.0 mL/L.
诱导培养基(g/L)：(NH4)2SO4 5.0，KH2PO4 42.9，CaSO4⋅2H2O 1.0，K2SO4 14.3，MgSO4⋅7H2O 11.7 及甲醇20 mL/L，PTM4 微量元素溶液1 mL/L.
甘油补料培养基：甘油500 g/L，4 mL/L PTM4 微量元素溶液.
甲醇补料培养基：甲醇100%，4 mL/L PTM4 微量元素溶液.。