结核分枝杆菌
结核分枝杆菌菌落特征
结核分枝杆菌菌落特征浅析
结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）是引起肺结核的
主要病原体，由于其生长缓慢、抗药性强而且易滋生成株，对于它的
研究需要对其菌落特征有所了解。
观察结核分枝杆菌的菌落可以看出，其形态呈不规则的凹凸形状，边缘不规则而且很粗糙，色泽呈暗黄色或灰白色，质地较硬，且会随
着时间的推移逐渐变硬而脆，同时会释放出一种木香味道。
此外，结
核分枝杆菌的菌落侵袭能力较强，容易扩散并感染周围组织。
对于结核分枝杆菌的研究，菌落特征是了解其生长情况的重要工具。
针对菌落特征，我们可以从以下几个方面进行研究：菌落形态、
边缘形态、色泽及质地、味道等。
掌握这些细节，可以更好地了解结
核分枝杆菌的生长情况，为各类研究提供更多的参考。
此外，还应当
清洗好实验器材和保障实验室质量，保证研究结果的准确性和科学性。
医学微生物学：结核分枝杆菌
结核病
tuberculosisTB
肺部感染
原发感染 原发后感染
肺外感染 ➢传播途径 • 呼吸道 • 消化道 • 皮肤损伤部位等
进入肺泡
肺泡巨噬细胞
炎症-原发灶
淋巴管（炎）肺门淋巴 结肿大
原发综合征
外源性或内源性 原发后感染
90%以上 钙化自愈
肺结核典型临床症状 发热、乏力、咳痰、 咳血、胸水、腹水
第二节 麻风分枝杆菌
（Mycobacteriu leprae）
生物学性状
形态染色：与结核分枝杆菌相似 培养特性：典型胞内菌，不能人工培养 动物模型：犰狳（qiuyu） 抵抗力：较强，耐干燥、耐低温 传播途径：呼吸道和密切接触 潜伏期：数年~数十年
致病性与免疫性
麻风分 枝杆菌 侵入
隐性感 感染 染多见 排出 发病（神经和皮肤）
磷脂 分枝菌酸 蜡质D 硫酸脑苷脂 硫酸多酰基化海藻糖
多糖
局部病灶细胞浸润
所致疾病
结核病（tuberculosis，TB） ➢ 传播途径：呼吸道、消化道、皮肤损伤部位等 ➢ 基本病变：结核结节
• 结核（tubercle）源自 拉丁文tuberculum，意 为“小的肿胀”
• 干酪样坏死
所致疾病
荚膜
粘附,入侵 抗吞噬
蛋白质
迟发型超敏反应 结核结节的形成
脂质：60%
磷脂 分枝菌酸 蜡质D 硫酸脑苷脂 硫酸多酰基化海藻糖
多糖
局部病灶细胞浸润
脂质
➢分枝菌酸 与抗酸性有关 索状因子=分枝菌酸+海藻 糖 • 破坏线粒体膜及酶类 • 抑制白细胞游走 • 引起慢性肉芽肿 ➢蜡 质 D= 分 枝 菌 酸 + 肽 糖 脂 • 佐剂作用 • 引起迟发型超敏反应
细菌学---结核分枝杆菌
结核分枝杆菌一.概述结核分枝杆菌（M. tuberculosis）简称为结核杆菌（tubercle bacilli）。
早在1882年，德国细菌学家郭霍（Robert Koch，1843-1910）就已证明结核分枝杆菌是结核病的病原菌。
本菌可侵犯全身各组织器官，但以肺部感染最多见。
随着抗结核药物的不断发展和卫生生活状况的改善，结核的发病率和死亡率曾一度大幅下降。
20世纪80年代后，由于艾滋病和结核分枝杆菌耐药菌株的出现、免疫抑制剂的应用、吸毒、贫困及人口流动等因素，全球范围内结核病的疫情骤然恶化。
据WHO统计，全世界约每3个人中就有1个人感染了结核分枝杆菌，在某些发展中国家成人中结核分枝杆菌携带率高达80%，其中约5%～10%携带者可发展为活动性结核病。
近二十年,由于艾滋病的流行，感染了HIV的结核分枝杆菌携带者，由于病毒破坏了机体的免疫功能，发展为活动性结核病的可能性比未感染HIV者高30～50倍，且结核的病程发展更快。
此外，在HIV感染的发展进程中，结核是最早发生的一种机会性感染，结核病加重了HIV感染者或艾滋病人的疾病负担，使其更易死亡。
目前全球每年约出现8百万结核新病例，并导致约3百万人死亡。
中国每年死于结核病的人约25万之多，是各类传染病死亡人数总和的两倍多。
因此，结核病又成为了威胁人类健康的全球性卫生问题，并成为某些发展中国家和地区，特别是艾滋病高发区人群的首要死因。
1.结核分枝杆菌为分枝杆菌属，本属分类较多，其中结核分枝杆菌，麻风分枝杆菌和某些非结核分枝杆菌，生长较慢对人有致病性，非结核分枝杆菌根据生长速度和产色等不同又分为4组。
2.表形特性：结核分枝杆菌为细长略带弯曲的杆菌，大小1～4X0.4μm。
牛分枝杆菌则比较粗短。
分枝杆菌属的细菌细胞壁脂质含量较高，约占干重的60%，特别是有大量分枝菌酸（mycolic acid）包围在肽聚糖层的外面，可影响染料的穿入。
分枝杆菌一般用齐尼（Ziehl- Neelsen）抗酸染色法，以5% 石炭酸复红加温染色后可以染上，但用3%盐酸乙醇不易脱色。
结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌
➢多发生于成人 ➢病灶局限，不易扩散 ➢易形成结核结节，易发生干酪样坏死和空洞
2、肺外感染
结核分枝杆菌可进入血液循环引起肺内、外播散， 如脑、肾结核、脊柱结核等。 结核分枝杆菌进入消化道可引起肠结核、结核性 腹膜炎等。
（三）免疫性
结核的免疫属于感染免疫，又称有菌免疫。即 此种免疫力随结核分枝杆菌或其成分在体内存 在而存在。一旦体内病菌或其组分全部消失， 免疫力也随之消失。 属胞内感染菌，其免疫主要是以T细胞为主的细 胞免疫。
旧结核菌素（old tuberculin，OT) 每0.1ml含5单位
纯蛋白衍化物(purified protein derivative，PPD) 人结核分枝杆菌制成的PPD-C 卡介苗制成的BCG-PPD 每0.1ml含5单位 目前都用PPD
方法
PPD 5个单位两前臂皮内注射 48～72h后红肿硬结超过5mm者为阳性≥15mm
磷脂：促使单核细胞增生，与结核结节的形成及干酪
样坏死有关。
蜡质D：是肽糖脂和分枝菌酸的复合物，可激发机体产
生迟发型超敏反应。
硫酸脑苷脂：抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合，
使细菌能在吞噬细胞中长期存活。
2、蛋白质
是结核菌素的主要成分，本身无毒，和蜡质D 结合后能使机体发生超敏反应。
在形成结核结节中发挥一定作用。
培养特性
专性需氧，生长缓慢 营养要求高，在罗氏固 体 培 养 基 （ P112 ） 中 生 长良好，2-4周后呈乳白 或米黄色、干燥菜花状 菌落。
花菜样菌落
抵抗力 （四怕） （四不怕）
对乙醇敏感 对湿热敏感 对紫外线敏感 对抗结核药物敏感
抗干燥 抵酸碱 抗碱性染料 对青霉素等抗生素耐药
变异性
结核分枝杆菌的培养要求
结核分枝杆菌的培养要求结核病是一种罕见但严重的疾病，其病原体是结核分枝杆菌。
为了对这种病原体进行研究和诊断，需要进行结核分枝杆菌的培养。
下面就来介绍一下结核分枝杆菌的培养要求。
1. 培养基的选择结核分枝杆菌是一种嗜氧菌，因此需要在含有足够氧气的培养基上进行培养。
同时，由于这种菌对酸碱度比较敏感，因此需要选择pH值在6.5至7.5之间的培养基。
MIddlebrook培养基被广泛用于结核分枝杆菌的培养，它含有牛肉提取物、蛋白胨、甘油和酚红等成分。
2. 消毒和净化在进行结核分枝杆菌的培养前，需要对培养器具进行消毒和净化，以避免外来微生物的污染。
通常使用高温高压法或者化学消毒法进行消毒，然后用无菌水或酒精进行净化。
3. 脱毒由于结核分枝杆菌会产生毒素，因此在培养前需要将菌体中的毒素去除。
使用热牛血清进行脱毒是一种常用的方法。
先将菌体用热水清洗干净，再用热牛血清进行淹洗，最后用无菌水洗净。
4. 接种量和温度结核分枝杆菌的接种量和温度对其生长和繁殖起着至关重要的作用。
一般来说，接种量应当足够，不过也不能太多。
高密度接种会导致细菌之间竞争，从而导致细菌繁殖速度减缓。
温度应当控制在35-37度之间，这样才能创造出适合细菌繁殖的环境。
5. 培养时间结核分枝杆菌是一种生长缓慢的细菌，在进行培养时需要耐心等待。
在使用Middlebrook培养基进行培养时，需要约4至6周的时间。
在培养过程中，需要对菌落进行观察，以了解其生长情况。
以上就是结核分枝杆菌的培养要求，希望对大家有所帮助。
想要更好地对结核分枝杆菌进行研究和诊断，需要加强对这些培养要求的了解和掌握。
结核分枝杆菌的微生物学诊断方法
结核分枝杆菌的微生物学诊断方法
1.痰液涂片染色：这是最常用的方法之一、将痰液制备成涂片，进行
酸性染色，如抗酸杆菌染色和耐酸染色。
结核分枝杆菌是抗酸杆菌，其细
胞壁富含脂质，可以抵抗酸性染料的脱色作用。
这种方法可以快速检测出
结核分枝杆菌的存在。
2.结核分枝杆菌的培养：这是鉴定结核分枝杆菌的“金标准”。
痰样
品通常会涂在含有富含营养物质的培养基上，并在适当的温度和湿度条件
下孵育。
结核分枝杆菌需要一个相对较长的孵育时间（通常需要数周）才
能生长和生成可见的菌落。
分枝杆菌的培养是确诊结核病的关键步骤，同
时还可以进行对特定抗结核药物的药敏试验。
3.伊红染色：这种方法旨在鉴定酸酒杆菌属分枝杆菌和其他酸杆菌的
超微结构。
伊红染色可使细胞壁和细胞内储存的色素显现为红色或粉红色。
该方法可以帮助确定分枝杆菌的类属。
4.PCR检测：聚合酶链反应（PCR）能够通过扩增目标基因片段来检
测和诊断结核分枝杆菌。
这种方法具有高度特异性和灵敏度，并可以通过
荧光标记的探针来定量检测。
5.蛋白质组学：蛋白质组学技术通过检测和分析结核分枝杆菌内部蛋
白质的组成和变化，可以为诊断和治疗提供信息。
质谱法是一种常用的蛋
白质组学技术，可以通过检测菌落样品中的特定蛋白质来鉴定结核分枝杆菌。
总的来说，微生物学诊断方法在结核分枝杆菌检测和鉴定中起着至关
重要的作用。
这些方法可以帮助医生确定结核病的诊断和治疗方案，并对
结核分枝杆菌的流行病学研究和控制提供重要的科学依据。
结核分枝杆菌的代谢途径及其致病机制
结核分枝杆菌的代谢途径及其致病机制结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）是引起肺结核病的主要病原体。
其生存于寄主机体内，依靠利用不同的代谢途径获取所需的营养物质来生存和繁殖。
本篇文章将介绍结核分枝杆菌的代谢途径及其致病机制。
一、碳代谢途径碳代谢途径是细菌体内获得能量和营养物质的重要途径之一。
结核分枝杆菌有三种主要的碳代谢途径，包括三羧酸循环（TCA循环）、吲哚乙酸途径和甘露醇磷酸途径。
其中，TCA循环是主要的代谢途径，包括能够将糖类、脂肪酸和氨基酸等营养物质转化为能量的关键酶类。
而吲哚乙酸途径则是通过利用色氨酸来进行生长和代谢的，而甘露醇磷酸途径则是通过转化鸟氨酸和甘露醇来获得能量和营养物质。
二、氮代谢途径氮代谢途径是细菌体内获得氮元素和合成必需氨基酸的重要途径之一。
结核分枝杆菌的氮代谢途径包括谷氨酸合成途径、谷氨酰胺合成途径、天冬氨酸合成途径和尿素循环途径等。
其中，谷氨酸合成途径是细菌体内获得重要氨基酸的主要途径，而尿素循环途径则是将嘌呤碱基氨基酸分解为能够利用的氮元素的途径。
三、脂代谢途径脂代谢途径是细菌体内获得能量和脂类营养物质的重要途径之一。
结核分枝杆菌的脂代谢途径包括β-氧化途径、β-氧化酶途径、异十四酰辅酶A途径等。
其中，β-氧化途径是最主要的脂代谢途径，其主要作用是将长链脂肪酸转化为丙酮酸来进行代谢。
四、致病机制结核分枝杆菌引起病症的主要机制是其能够干净利落地侵入宿主细胞并且幸存其中。
在细胞内，它通过特殊的逃逸机制和免疫逃逸机制来避免免疫系统的攻击和清除。
同时，结核分枝杆菌也能够通过调节代谢途径来适应宿主内特殊的环境，比如低氧和低营养状态。
这一能力有助于保持其在宿主体内的存活和传播，从而引起肺结核病等严重感染和疾病。
五、结语结核分枝杆菌的代谢途径和致病机制是其生命活动和病理过程的重要组成部分。
对其代谢途径的深入研究和对其致病机制的理解可以为肺结核病的预防和治疗提供重要的科学依据。
结核分枝杆菌的知识点总结
结核分枝杆菌的知识点总结一、结核分枝杆菌的基本信息结核分枝杆菌是一种革兰氏阳性细菌，是一种非运动、非芽孢形成的细菌。
其形态呈直杆状，细胞壁富含脂质，对于抗生素具有较高的抵抗力。
结核分枝杆菌主要引起肺结核，但也可以引起其他部位的结核病，如淋巴结结核、骨骼结核等。
结核分枝杆菌具有慢生长的特点，一般需要2-3个星期才能在培养基上形成典型的结核分枝杆菌菌落。
结核分枝杆菌的感染途径是通过空气传播，患者咳嗽或打喷嚏时，细菌悬浮在空气中的飞沫中，被其他人吸入后导致感染。
此外，结核分枝杆菌也可以通过食物和饮水传播，但这种途径相对较少见。
结核分枝杆菌感染的主要危险因素包括个体免疫力、疾病的发病情况、环境卫生条件等。
二、结核分枝杆菌的病理生理特点结核分枝杆菌引起肺结核的病理生理特点主要包括以下几个方面：1. 在细胞内感染：结核分枝杆菌主要在巨噬细胞内繁殖，利用巨噬细胞的保护作用来避免宿主的免疫攻击。
细菌在巨噬细胞内形成结核病灶，保护细菌免受免疫系统的攻击，并在宿主体内长期存在。
2. 小核苷糖的调控：研究发现，结核分枝杆菌中一种名为小核苷糖的分子在病原菌毒力中发挥重要作用。
小核苷糖可以调节多种生理活动，包括生长、代谢和对宿主的致病性。
3. 对宿主免疫的影响：结核分枝杆菌具有多种机制来逃避宿主的免疫攻击。
细菌的细胞壁富含脂质，可以抵抗宿主免疫系统的攻击。
此外，结核分枝杆菌还可以通过干扰宿主的免疫正常功能来逃避宿主的免疫攻击。
4. 耐药性：结核分枝杆菌对抗生素具有较强的耐药性，使得治疗结核病变得更加困难。
目前已经发现了多种耐药结核分枝杆菌，如多药耐药结核菌、广谱耐药结核菌等。
三、结核分枝杆菌的诊断方法诊断结核病的方法主要包括临床表现、实验室检查和影像学检查。
临床上，结核病患者通常表现为长期咳嗽、咳痰、乏力、低热等症状。
在实验室检查中，可以通过培养结核分枝杆菌、酸杆菌涂片检查、结核分枝杆菌DNA提取和PCR检测等方法来确诊结核病。
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病例讨论
问题：
2. 最可能的诊断是什么？ 3. 如何选择该疾病的抗菌药物治疗？ 有耐药性的问题吗？ 4. 该菌是怎样传播的？ 5. 怎样在实验室培养该菌？目前常用 的该菌快速诊断法是什么？ 6. 对于他的家庭成员应做哪些预防？
肺结核
肺结核是一种慢性消耗性传染病。 结核杆菌不断侵蚀肺组织，引起肺 部各种炎性细胞的浸润，使肺组织发生 炎症，造成渗出、增生、坏死及纤维钙 化等病变。
作
硫酸脑苷脂 （抑制吞噬体与溶酶体结合）
用
蜡质D（引起迟发性过敏反应）
蛋白质 引起迟发性过敏反应
二、结核杆菌的致病性
的上壁胞细菌杆核结
致 病 物 质
蛋白质
脂质
磷脂 蜡质D 索状因子 分枝菌酸 硫酸脑苷脂
二、结核杆菌的致病性
二、结核杆菌的致病性
2.传染源与传播途径
传染源：患者和带菌者
传播途径：
呼吸道 结核杆菌 消化道
破损皮 肤粘膜
肺结核 肺内感染
肠结核
皮肤结 肺外感染 核病
二、结核杆菌的致病性 3.所致主要疾病
二、结核杆菌的致病性
１）原发感染 多发生于儿童
原发病灶： 结核杆菌侵入肺泡 后，首先被吞噬细胞吞噬，并在其 中生存和繁殖，引起肺内渗出性炎 性病灶－原发灶。
二、结核杆菌的致病性
淋巴节病变：吞噬细胞将结核 杆菌沿淋巴管带至肺门淋巴结，引 起淋巴管炎和肺门淋巴结肿大，X 片显示哑铃状阴影。
一、结核杆菌的生物学特性
抗酸染色阳性，分枝状排列的细长杆菌
一、结核杆菌的生物学特性
培养特性
培养特点：馋、懒、丑。
馋--营养要求较高，必须在含血清、卵黄、马铃 薯、甘油以及含某些无机盐类的特殊培养基（罗氏） 上才能生长良好。
懒--生长缓慢， 12～24h分裂1次，在固体培养基 上2～4w才出现肉眼可见的菌落。
多糖（与蜡质结合）： 中性粒细胞增多，引起局部病灶
细胞浸润。
核酸（核糖体核糖核酸rRNA ）： 刺激机体产生特异性细胞免疫。
二、结核杆菌的致病性
荚膜 与细胞表面受体结合（粘附与入侵作用）
致
含多种酶（分解利用营养物质）
病
保护（阻止有害物质的进入菌体）
物 脂质
质
索状因子 （破坏细胞，引起肉芽肿）
的
磷脂（形成结核结节）
分枝菌酸 (mycolic acid) ： 可游离存在或与多糖结合成糖脂。
二、结核杆菌的致病性
脂肪酸： 索状因子（cord factor ，6,6双分枝
菌酸海藻糖 ），破坏线粒体膜及酶类 , 抑制粒胞游走,引起慢性肉芽肿等作用
二、结核杆菌的致病性
蜡质D (wax-D) ： 肽糖脂与分枝菌酸的复合物,可引起
一、结核杆菌的生物学特性
抵抗力：
抗干燥
四抗
抗酸碱
抗青霉素等
抗碱性染料
一、结核杆菌的生物ห้องสมุดไป่ตู้特性
抵抗力：
怕湿热
四怕
怕痨药物
怕酒精
怕紫外线
一、结核杆菌的生物学特性
杀灭结菌的方法：
1、阳光下暴晒2h； 2、5%-12%来苏作用5min-2h； 3、75%酒精接触2min； 4、煮沸1min； 5、焚烧—是最简便的灭菌方法
态生两靥之愁， 娇袭一身之病。 泪光点点， 娇喘微微。 闲静时如姣花照水， 行动时如弱柳扶风。
病例讨论
主诉：男，20岁，咳嗽数周。
病史： 病人是新近来自东南亚的 移民，1个月前开始 疲乏，食欲不振 。 过1周左右，他感觉 发热并开始咳嗽， 起初为干咳，但过去的 1周，他每天咳 几勺绿色 带血丝的痰 。近1个月内， 体 重减轻 10磅。患者不吸烟，没有接触 过工业呼吸道污染物。
我国有活动性肺结核病人500 多万，占全球的四分之一，每年约 有25万死于结核病。
结核病
全球已处于结核病紧急状态！
一、结核杆菌的生物学特性
抗酸染色法 用5% 石炭酸复红初染时，结核 杆菌的分枝菌酸易与酸性复红牢固结 合，加上腊质包膜的完整性，可抵抗 盐酸酒精脱色，用美蓝复染时，被染 成红色，即结核杆菌为抗酸性细菌。 非分枝结核杆菌则被染成蓝色。
结核病
结核病危害人类健康已经有几 千年的历史了。
结核病
20世纪80年代以来，由于HIV 与结核杆菌混合感染、移民以及耐 药结核杆菌的出现，结核病又在全 球全面复活。
目前，结核病已成为传染病中 的第一杀手和最大死因。
结核病
全球现有结核病人2000多万。 每年新增1000万病人，死亡人数高 达300－400万人。
一、结核杆菌的生物学特性
变异性
? 形态和菌落变异：L型细菌 ? 毒力变异：卡介苗（BCG） ? 耐药性变异：多重耐药性菌株
二、结核杆菌的致病性
可能致病机制： ①细菌在组织细胞内大量繁殖 引起的炎症； ②菌体成分和代谢产物的毒性 作用； ③机体对菌体成分产生的免疫 损伤。
二、结核杆菌的致病性
磷脂
分枝菌酸
脂质 索状因子
致
蜡质D
病
硫酸脑苷脂
物
蛋白质 结核菌素最重要
质 多糖与核酸
二、结核杆菌的致病性
脂质主要为磷脂、脂肪酸和腊质D等。 脂质含量与细菌的毒力呈平行关系。
二、结核杆菌的致病性
磷脂(phosphatide) ： 刺激单核细胞增生，抑制蛋白酶
对组织的分解作用，形成结核结节和 干酪样坏死。
病例讨论
查 体 ： T38℃ ， BP120/70mm Hg ，P80 次/分， R16 次/分。患者非 急性病病容。右上肺叶可闻及啰音。 叩诊无浊音。 胸部X光：右上肺叶后 段浸润提示空洞。
病例讨论
问题： 1. 应做哪二项痰液检查，才能 提供有关疾病病原的快速诊断？
病程记录：痰的革兰染色法显 示，无优势细菌的混合菌群。抗酸 染色法显示有大量细长、粉红色杆 菌。痰标本送去做分离培养。
迟发型超敏反应, 并具有佐剂的作用。
二、结核杆菌的致病性
硫酸脑苷脂 硫酸多酰基化海澡塘：
有毒株，抑制吞噬细胞中的吞噬体 与溶酶体融合，在细胞内存活。
二、结核杆菌的致病性
蛋白质（如结核菌素）：
+ Protein
Wax-D
机体致敏
对结核菌素产生迟发型超敏反应
蛋白质也可刺激机体产生相应抗体。
二、结核杆菌的致病性
丑--典型菌落为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，不 透明，乳白色或淡黄色，如菜花样。
一、结核杆菌的生物学特性
罗氏固体培养基 中生长良好，呈 菜花状
一、结核杆菌的生物学特性
生化反应：不活泼 ? 糖发酵（-） ? 人型可合成烟酸和还原硝酸盐，而牛
型不能。 ? 结核杆菌触酶（+）、热触酶（-），
而非结核分枝杆菌均为（+）