结核分枝杆菌
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结核分枝杆菌
结核分枝杆菌及其 治疗性疫苗的研究进展
结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)，
简称结核杆菌，首次由德国科学家Robert Koch于 1882年由肺结核病人的痰液中分离得到，并被证实为结 核病的病原菌核杆菌在分类上隶属于放线菌目、分支杆 菌科、分支杆菌属，是种不能运动、不产芽孢、专性需 氧的短小杆菌。菌体-般细长、略弯曲，端极钝圆，多呈 单个或分枝状排列，大小约1-4×0.4μm。
革兰氏染色呈阳性；Ziehl -neelsen抗酸染色呈红色 ，非抗酸性细菌则呈蓝色。结核杆菌的抗酸性主要取决 于其胞壁内所含的分枝菌酸残基，亦和其胞壁固有层的 完整性有关。
이 문서는 나눔글꼴로 작성되었습니다. 其意义
02 治疗性结核病疫苗的种类 2.1 活载体疫苗 2.2 亚单位疫苗 2.3 DNA疫苗 2.4 全菌灭活疫苗 2.5 其他疫苗 03 结核病治疗性疫苗的研究现状 04 结核病治疗性疫苗的展望
12 / 12
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10 / 12
04 展望
结核疫苗快速发展，并能对致病性结核杆菌产 生保护性免疫应答，为TB的防治带来了希望。然而， 迄今还没有一个重组疫苗能达到BCG的免疫水平。 其原因在于，重组疫苗虽可激活免疫系统，但不能 引起长期特异性的细胞免疫记忆，所以开发一种与B CG协同的、可产生长效免疫应答的疫苗十分重要。 初免-加强免疫策略的出现，有效联合了BCG与新型 结核疫苗，为预防结核、诱导机体产生长期免疫保 护作用提供了可能。
等
MTB肝素结合血凝
素
DNA疫苗
HG85 A/B
临床前 中国人民解放军军事 嵌合 DNA疫苗 A 医学科学院（吴雪琼） g85A/Ag85B 等
结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)，
简称结核杆菌，首次由德国科学家Robert Koch于 1882年由肺结核病人的痰液中分离得到，并被证实为结 核病的病原菌核杆菌在分类上隶属于放线菌目、分支杆 菌科、分支杆菌属，是种不能运动、不产芽孢、专性需 氧的短小杆菌。菌体-般细长、略弯曲，端极钝圆，多呈 单个或分枝状排列，大小约1-4×0.4μm。
革兰氏染色呈阳性；Ziehl -neelsen抗酸染色呈红色 ，非抗酸性细菌则呈蓝色。结核杆菌的抗酸性主要取决 于其胞壁内所含的分枝菌酸残基，亦和其胞壁固有层的 完整性有关。
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02 治疗性结核病疫苗的种类 2.1 活载体疫苗 2.2 亚单位疫苗 2.3 DNA疫苗 2.4 全菌灭活疫苗 2.5 其他疫苗 03 结核病治疗性疫苗的研究现状 04 结核病治疗性疫苗的展望
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04 展望
结核疫苗快速发展，并能对致病性结核杆菌产 生保护性免疫应答，为TB的防治带来了希望。然而， 迄今还没有一个重组疫苗能达到BCG的免疫水平。 其原因在于，重组疫苗虽可激活免疫系统，但不能 引起长期特异性的细胞免疫记忆，所以开发一种与B CG协同的、可产生长效免疫应答的疫苗十分重要。 初免-加强免疫策略的出现，有效联合了BCG与新型 结核疫苗，为预防结核、诱导机体产生长期免疫保 护作用提供了可能。
等
MTB肝素结合血凝
素
DNA疫苗
HG85 A/B
临床前 中国人民解放军军事 嵌合 DNA疫苗 A 医学科学院（吴雪琼） g85A/Ag85B 等
结核分枝杆菌形态结构
结核分枝杆菌形态结构以结核分枝杆菌形态结构为标题，写一篇文章。
结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）是引起结核病的病原体。
它是一种革兰氏阳性杆菌，属于分枝杆菌科。
结核分枝杆菌具有特殊的形态结构，这些结构对其在人体内的生存和传播起着重要作用。
结核分枝杆菌的外形呈细长的杆状。
其杆菌长度约为1-4微米，直径为0.2-0.5微米。
这种细长的形态结构使得结核分枝杆菌能够在宿主细胞内存活，并对抗宿主的免疫系统。
此外，结核分枝杆菌的外表面覆盖有一层特殊的脂质物质，称为结核分枝杆菌脂质。
这种脂质物质能够保护菌体免受宿主细胞的吞噬作用，同时也使得结核分枝杆菌对抗抗生素的能力增强。
结核分枝杆菌的细胞壁也是其重要的形态结构之一。
细胞壁由多层结构组成，主要包含脂质和糖质成分。
其中，糖质成分包括糖胺聚糖和酸性酚胺聚糖。
这些糖质成分赋予了结核分枝杆菌耐酸性的特性，使其能够在酸性环境中存活。
此外，结核分枝杆菌的细胞壁还含有特殊的酶和脂质酰胺，这些物质能够与宿主细胞相互作用，进一步增强其对抗宿主免疫的能力。
除了细胞壁，结核分枝杆菌的细胞质内还含有一些重要的结构。
例如，结核分枝杆菌的染色体位于细胞质中心的一侧。
染色体呈线状，由DNA组成，包含了结核分枝杆菌的遗传信息。
此外，细胞质内还存在一些重要的细胞器，如核糖体和内质网等。
这些细胞器参与了结核分枝杆菌的蛋白质合成和代谢过程，维持了菌体的正常功能。
总结起来，结核分枝杆菌具有细长的杆状形态，外表面覆盖有结核分枝杆菌脂质，细胞壁由多层结构组成，含有特殊的糖质和脂质酰胺，细胞质内含有染色体和重要的细胞器。
这些形态结构使得结核分枝杆菌能够在人体内存活，并对抗宿主的免疫系统。
深入了解结核分枝杆菌的形态结构有助于我们更好地理解其致病机制，并为结核病的防治提供科学依据。
5.50结核分枝杆菌生物学形状
(1)脂质：★
③蜡质D(wax D):可激发迟发型超敏反应。 ④硫酸脑苷脂(sulfatides): 能抑制巨噬细胞吞噬体与溶酶体融合。
抑制吞噬溶酶体融合
3. 菌体成分及作用 (2)蛋白质： 结核菌素:引起迟发型
超敏反应 ★
超敏反应
(3)多糖:中性粒细胞增多 (4)核酸:rRNA,特异性细胞免疫 (5)荚膜
结核分枝杆菌 Mycobacterium tuberculosis
郭霍 我国结核杆菌感染人数居世界第二位
结核分枝杆菌1 ——生物学性状
学习内容
1. 形态染色 2. 培养特点 3. 菌体成分及作用 4. 抵抗力 5. 变异性
1. 形态染色
细长略弯曲,抗酸阳性 ★
结核分枝杆菌
抗酸染色
2. 培养特点 ★
馋,懒,丑 馋:营养要求高(罗氏培养基) 懒:生长缓慢 丑:菌落干燥粗糙
罗氏培养基
菌落
3. 菌体成分及作用
(1)脂质： ★
①磷脂:刺激单核细胞增生,抑 制蛋白酶分解,使病灶组织溶解 不完全,形成结核结节和干酪样 坏死。 ②索状因子:破坏线粒体膜, 抑制白细胞游走,引起慢分及作用
4. 变异性 易产生形态,毒力,耐药变异
Assignment
1. 结核分枝杆菌为何生长缓慢？ 2. 该菌菌落为何粗糙？菌落粗糙程度与细 菌的毒力之间是否有关联？
真诚感谢上述所用图片的所有作者！！
Thanks for your attention！
4. 抵抗力 三耐
四怕
• 耐干燥 • 耐酸碱 • 耐一般消毒剂
• 怕湿热 • 怕紫外线 • 怕乙醇 • 怕抗痨药
5. 变异性
• 毒力变异： 牛结核杆菌经13年230代培 养,制成卡介苗BCG(减毒活
③蜡质D(wax D):可激发迟发型超敏反应。 ④硫酸脑苷脂(sulfatides): 能抑制巨噬细胞吞噬体与溶酶体融合。
抑制吞噬溶酶体融合
3. 菌体成分及作用 (2)蛋白质： 结核菌素:引起迟发型
超敏反应 ★
超敏反应
(3)多糖:中性粒细胞增多 (4)核酸:rRNA,特异性细胞免疫 (5)荚膜
结核分枝杆菌 Mycobacterium tuberculosis
郭霍 我国结核杆菌感染人数居世界第二位
结核分枝杆菌1 ——生物学性状
学习内容
1. 形态染色 2. 培养特点 3. 菌体成分及作用 4. 抵抗力 5. 变异性
1. 形态染色
细长略弯曲,抗酸阳性 ★
结核分枝杆菌
抗酸染色
2. 培养特点 ★
馋,懒,丑 馋:营养要求高(罗氏培养基) 懒:生长缓慢 丑:菌落干燥粗糙
罗氏培养基
菌落
3. 菌体成分及作用
(1)脂质： ★
①磷脂:刺激单核细胞增生,抑 制蛋白酶分解,使病灶组织溶解 不完全,形成结核结节和干酪样 坏死。 ②索状因子:破坏线粒体膜, 抑制白细胞游走,引起慢分及作用
4. 变异性 易产生形态,毒力,耐药变异
Assignment
1. 结核分枝杆菌为何生长缓慢？ 2. 该菌菌落为何粗糙？菌落粗糙程度与细 菌的毒力之间是否有关联？
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4. 抵抗力 三耐
四怕
• 耐干燥 • 耐酸碱 • 耐一般消毒剂
• 怕湿热 • 怕紫外线 • 怕乙醇 • 怕抗痨药
5. 变异性
• 毒力变异： 牛结核杆菌经13年230代培 养,制成卡介苗BCG(减毒活
结核分枝杆菌实验报告
一、实验目的1. 了解结核分枝杆菌的生物学特性及致病机理；2. 掌握结核分枝杆菌的培养、分离、鉴定及检测方法；3. 增强实验室操作技能，提高对结核病的防控能力。
二、实验原理结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）是一种革兰氏阳性细菌，是引起结核病的病原体。
本实验通过培养、分离、鉴定及检测结核分枝杆菌，了解其生物学特性及致病机理。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）结核分枝杆菌菌种；（2）牛肉浸液；（3）鸡蛋；（4）石炭酸复红染液；（5）无菌生理盐水；（6）无菌试管；（7）酒精灯；（8）高压蒸汽灭菌器；（9）显微镜；（10）生物安全柜。
2. 实验仪器：（1）恒温培养箱；（2）电热恒温水浴锅；（3）无菌操作台；（4）超净工作台；（5）显微镜。
四、实验方法与步骤1. 菌种复苏（1）将冷冻保存的结核分枝杆菌菌种复苏于牛肉浸液中，37℃恒温培养24小时；（2）观察菌落生长情况，记录结果。
2. 分离纯化（1）将复苏后的菌液涂布于牛肉浸液琼脂平板上，37℃恒温培养24小时；（2）挑取单菌落进行纯化，重复涂布、培养，直至获得纯化菌落。
3. 鉴定（1）挑取纯化菌落，用无菌生理盐水洗涤，制成菌悬液；（2）将菌悬液滴加于石炭酸复红染液中，37℃恒温染色30分钟；（3）用无菌生理盐水冲洗，观察菌体形态及染色特性；（4）挑取染色阳性菌落，进行生化试验，如氧化酶试验、触酶试验等，以鉴定结核分枝杆菌。
4. 检测（1）挑取纯化菌落，制成菌悬液；（2）将菌悬液滴加于含有药物的琼脂平板上，37℃恒温培养24小时；（3）观察药物对菌落的抑制作用，判断药物对结核分枝杆菌的敏感性。
五、实验结果与分析1. 菌种复苏：复苏后的菌落呈白色，表面光滑，呈干燥状，有明显的溶血现象。
2. 分离纯化：纯化后的菌落呈白色，表面光滑，呈干燥状，有明显的溶血现象。
3. 鉴定：挑取染色阳性菌落，进行生化试验，结果显示氧化酶试验、触酶试验均为阳性，符合结核分枝杆菌的生物学特性。
结核分枝杆菌【17页】
4.结果与分析
红肿硬结直径
（1）阳性反应（＞5mm）-- 机体已感染过结核分枝杆 菌或卡介苗接种成功
（2）强阳性反应（≥15mm）-- 可能有活动性结核,应进 一步做其他检查。
（3）阴性反应（＜5mm）
1）未感染过结核分枝杆菌
2）感染初期
3）严重结核病患者
4）患有其他疾病细胞，如麻疹等导致的细胞免疫功 能低下者；艾滋病；
• 专性需氧 • 生长缓慢(18-24h/代) • 营养要求高
罗氏培养基：乳白色或米黄色，干燥、 表面粗糙呈颗粒样或菜花状菌落。
3.抵抗力
巴氏消毒法能杀灭 结核分枝杆菌吗？
四怕： • 怕湿热 • 怕紫外线 • 怕乙醇 • 怕抗痨药物
四不怕： 不怕干燥 不怕酸碱 不怕碱性染料 不怕青霉素
四、防治原则
1.预防： 卡介苗，结核菌素皮 内试验 2.治疗： 原则:早期 适量 联合 全程 规律 常用药物: 有异烟肼、利福平、链 霉素、乙胺丁醇等。
小结
• 生物学特性：细长略弯 分枝状排列 需氧 生长缓慢 四怕四不怕
• 致病性：脂质 蛋白质 荚膜 • 免疫性：结核菌素试验 • 防治原则：卡介苗 抗痨药物
林黛玉
态生两靥之愁， 娇袭一身之病。
泪光点点， 娇喘微微。 闲静时如姣花照水，
行动时如弱柳扶风。
• 林黛玉到底得的是什么 病？
肺结核
• 结核病是由哪个 致病菌 引起的呢？
结核分枝杆菌
一、生物学性状
1. 形态与染色 • 细长,稍有弯曲 • 抗酸染色红色 • 分枝状排列或聚集成团 • 无鞭毛，无芽胞，有荚膜
4.变异性
• 毒力变异：
– 卡介苗（BCG）：1908年，Calmette和 Guerin将有毒的牛分枝杆菌培养在含甘油、胆 汁、马铃薯的培养基中，经13年230次传代而 获得的减毒活疫苗株，用于预防结核病。
医学微生物学：结核分枝杆菌
结核病
tuberculosisTB
肺部感染
原发感染 原发后感染
肺外感染 ➢传播途径 • 呼吸道 • 消化道 • 皮肤损伤部位等
进入肺泡
肺泡巨噬细胞
炎症-原发灶
淋巴管（炎）肺门淋巴 结肿大
原发综合征
外源性或内源性 原发后感染
90%以上 钙化自愈
肺结核典型临床症状 发热、乏力、咳痰、 咳血、胸水、腹水
第二节 麻风分枝杆菌
（Mycobacteriu leprae）
生物学性状
形态染色：与结核分枝杆菌相似 培养特性：典型胞内菌，不能人工培养 动物模型：犰狳（qiuyu） 抵抗力：较强，耐干燥、耐低温 传播途径：呼吸道和密切接触 潜伏期：数年~数十年
致病性与免疫性
麻风分 枝杆菌 侵入
隐性感 感染 染多见 排出 发病（神经和皮肤）
磷脂 分枝菌酸 蜡质D 硫酸脑苷脂 硫酸多酰基化海藻糖
多糖
局部病灶细胞浸润
所致疾病
结核病（tuberculosis，TB） ➢ 传播途径：呼吸道、消化道、皮肤损伤部位等 ➢ 基本病变：结核结节
• 结核（tubercle）源自 拉丁文tuberculum，意 为“小的肿胀”
• 干酪样坏死
所致疾病
荚膜
粘附,入侵 抗吞噬
蛋白质
迟发型超敏反应 结核结节的形成
脂质：60%
磷脂 分枝菌酸 蜡质D 硫酸脑苷脂 硫酸多酰基化海藻糖
多糖
局部病灶细胞浸润
脂质
➢分枝菌酸 与抗酸性有关 索状因子=分枝菌酸+海藻 糖 • 破坏线粒体膜及酶类 • 抑制白细胞游走 • 引起慢性肉芽肿 ➢蜡 质 D= 分 枝 菌 酸 + 肽 糖 脂 • 佐剂作用 • 引起迟发型超敏反应
结核分枝杆菌
实养法、分子生物 学方法、免疫学方法和噬菌体法。 痰涂片直接镜检是检测抗酸杆菌（AFB）最普遍 的实验室诊断方法，特异性较高，但灵敏性较低， 涂片中分枝杆菌要达到103-104cfu/ml才可检测出 阳性结果，且仅能检出1/2—3/4的活动性结核患 者，漏检率相当高 。
罗氏（LÖwenstein Jensen）培养法是目前检测 MTB的“金标准”，但其检测周期长（8周）， 导致无法及时确诊结核患者，并无法及时治疗； 新近发展起来并广泛使用的快培检测技术无疑大 大缩短了检测周期，但确诊仍需2-3周，依然无 法实现结核病快速诊疗； 基于免疫学的检测方法快速，操作简单，成本低 廉，但灵敏度有限； 基于核酸扩增的检测方法快速、准确，但成本高 昂、技术要求高，难以在发展中国家常规实验室 中广泛开展。
分枝杆菌属
1982年，Robert Koch首次发现结核分枝杆菌为 结核病德致病菌。在微生物分类上，分枝杆菌归 属原核生物界，厚壁菌门，放线菌目，分枝杆菌 科，分枝杆菌属。 临床将分枝杆菌分为结核分枝杆菌，非结核分枝 杆菌，麻风杆菌及腐物寄生性分枝杆菌。
致病性
肺结核是一种因感染结核分枝杆菌（MTB）， 偶尔为牛分枝杆菌，非洲分枝杆菌而引发的传染 病，在低收入地区发病率相对较高。据WHO统 计，全球约1/3的人口感染MTB，每年新增患者 900万，并有300万人死于该病。
结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌
继发感染
➢多发生于成人 ➢病灶局限，不易扩散 ➢易形成结核结节，易发生干酪样坏死和空洞
2、肺外感染
结核分枝杆菌可进入血液循环引起肺内、外播散， 如脑、肾结核、脊柱结核等。 结核分枝杆菌进入消化道可引起肠结核、结核性 腹膜炎等。
（三）免疫性
结核的免疫属于感染免疫，又称有菌免疫。即 此种免疫力随结核分枝杆菌或其成分在体内存 在而存在。一旦体内病菌或其组分全部消失， 免疫力也随之消失。 属胞内感染菌，其免疫主要是以T细胞为主的细 胞免疫。
旧结核菌素（old tuberculin，OT) 每0.1ml含5单位
纯蛋白衍化物(purified protein derivative，PPD) 人结核分枝杆菌制成的PPD-C 卡介苗制成的BCG-PPD 每0.1ml含5单位 目前都用PPD
方法
PPD 5个单位两前臂皮内注射 48～72h后红肿硬结超过5mm者为阳性≥15mm
磷脂：促使单核细胞增生，与结核结节的形成及干酪
样坏死有关。
蜡质D：是肽糖脂和分枝菌酸的复合物，可激发机体产
生迟发型超敏反应。
硫酸脑苷脂：抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合，
使细菌能在吞噬细胞中长期存活。
2、蛋白质
是结核菌素的主要成分，本身无毒，和蜡质D 结合后能使机体发生超敏反应。
在形成结核结节中发挥一定作用。
培养特性
专性需氧，生长缓慢 营养要求高，在罗氏固 体 培 养 基 （ P112 ） 中 生 长良好，2-4周后呈乳白 或米黄色、干燥菜花状 菌落。
花菜样菌落
抵抗力 （四怕） （四不怕）
对乙醇敏感 对湿热敏感 对紫外线敏感 对抗结核药物敏感
抗干燥 抵酸碱 抗碱性染料 对青霉素等抗生素耐药
变异性
➢多发生于成人 ➢病灶局限，不易扩散 ➢易形成结核结节，易发生干酪样坏死和空洞
2、肺外感染
结核分枝杆菌可进入血液循环引起肺内、外播散， 如脑、肾结核、脊柱结核等。 结核分枝杆菌进入消化道可引起肠结核、结核性 腹膜炎等。
（三）免疫性
结核的免疫属于感染免疫，又称有菌免疫。即 此种免疫力随结核分枝杆菌或其成分在体内存 在而存在。一旦体内病菌或其组分全部消失， 免疫力也随之消失。 属胞内感染菌，其免疫主要是以T细胞为主的细 胞免疫。
旧结核菌素（old tuberculin，OT) 每0.1ml含5单位
纯蛋白衍化物(purified protein derivative，PPD) 人结核分枝杆菌制成的PPD-C 卡介苗制成的BCG-PPD 每0.1ml含5单位 目前都用PPD
方法
PPD 5个单位两前臂皮内注射 48～72h后红肿硬结超过5mm者为阳性≥15mm
磷脂：促使单核细胞增生，与结核结节的形成及干酪
样坏死有关。
蜡质D：是肽糖脂和分枝菌酸的复合物，可激发机体产
生迟发型超敏反应。
硫酸脑苷脂：抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合，
使细菌能在吞噬细胞中长期存活。
2、蛋白质
是结核菌素的主要成分，本身无毒，和蜡质D 结合后能使机体发生超敏反应。
在形成结核结节中发挥一定作用。
培养特性
专性需氧，生长缓慢 营养要求高，在罗氏固 体 培 养 基 （ P112 ） 中 生 长良好，2-4周后呈乳白 或米黄色、干燥菜花状 菌落。
花菜样菌落
抵抗力 （四怕） （四不怕）
对乙醇敏感 对湿热敏感 对紫外线敏感 对抗结核药物敏感
抗干燥 抵酸碱 抗碱性染料 对青霉素等抗生素耐药
变异性
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特异性强
操作繁琐 操作简单，反应快 价格便宜，原料省 反应时间短，操作 简便快速，金标试 剂稳定 敏感性、特异性高 具有发展前景
斑点酶免疫渗透法 利用微孔膜的可过滤性，使反应溶液 自膜上迅速通过，从而完成抗原抗体 （DIEFA） 的快速测定 类似于ELISA，只是用胶体金标记IgG， 斑点免疫金结合法 不用加显色底物阳性反应即为红色斑 点
利福平结构式
抗结核药物
药物名称 异烟肼 杀菌剂 利福平 吡嗪酰胺 半杀菌剂 药物类型 副作用 周围神经炎，偶见肝功 能损害 过敏反应，肝功能损害 胃肠道不适，高尿酸血 症，肝功能损害 听力障碍，眩晕，肾功 能损害 视神经炎 抑菌剂 胃肠道不适，肝功能损 害
链霉素
乙胺丁醇
对氨基水杨酸
Q u e s tio n 7
M T B 的免疫逃逸机制
• M T B 能够阻止吞噬溶酶体的酸化，降低磷脂酶D 的活性，抑制活 性氧中间体和活性氮中间体的产生，抑制吞噬溶酶体的成熟，进而 抑制巨噬细胞的氧依赖杀伤作用。
• 细胞壁上的脂阿拉伯甘露糖（LA M ）具有抑制巨噬细胞凋亡功能， 其他成分如分枝菌酸、结核硬脂酸等也可抑制其凋亡
Case B • a 35-ye a r -o ld m a n • a h is to ry o f in tra v e n o u s d ru g u s e • a d ry p e rs is te n t co u g h , fe v e r , m a la is e , a n o re x ia • 15 p o u n d s w e ig h t lo s s , e x p e rie n c e d ch ills a n d sw e a ts • a ch e s t X -ra y re v e a le d p a tc h y in filtra te s th ro u g h o u t th e lu n g fie ld s • b a ct eri al , fun g al , an d m y c o b a ct e ri al c ult ur e s , a s w e ll a s e x a m in a tio n fo r P n e u m o c y s tis o rg a n is m s (肺孢子菌) • H IV p o s itiv e
结核分枝杆菌
——Case 2-3
C a s e 2-3
Case A • a 32-ye a r -o ld w o m a n • co u g h fo r se v e ra l w e e k s , 5 kg w e ig h t lo s s • n ig h t sw e a ts , fe v e rs , fa tig u e d • d e s p ite e ry th ro m y c in (红霉素) tre a tm e n t , h e r co n d itio n g o t w o rs e • co u g h b lo o d -tin g e d sp u tu m • ch e s t X -ra y re v e a le d rig h t u p p e r lo b e in filtra te s
巨噬细胞的天然防御机制
• 识别 M T B 方式： -直接识别：通过其表面激素样受体直接识别侵入机体的M T B -间接识别：通过表达补体受体识别M T B • 巨噬细胞杀菌系统： -氧依赖系统：在抗微生物效应中起决定性作用 -非氧依赖性系统：溶菌酶属于该系统产物
• 能通过自身凋亡来消除M T B 赖以生存的环境，抑制其在宿主体内进 一步生长和繁殖
Q u e s tio n 3
• W h a t is th e m a jo r tra n s m is s io n w a y s o f th is o rg a n is m ? • 传染源：痰中带菌的病人 • 传播途径： 呼吸道（为主） 消化道 泌尿生殖系统 皮肤粘膜伤口 经淋巴血管播散
• 无鞭毛、无芽胞
• 对干燥、酸碱抵抗力强，对乙醇、湿热及紫外线抵抗力弱 • 对利福平、链霉素、卡那霉素等抗结核药敏感，易出现耐药性 • 形态、菌落、毒力及耐药性可发生变异
Q u e s tio n 1
• W h a t i s u n i q u e a b o ut th e c ell wall of my c o b a ct eri al , a n d w h a t b io lo g ic e ffe c ts ca n b e a ttrib u te d to th e ce ll w a ll stru c tu re ? • 由于结核分枝杆菌细胞壁中含有大量脂质，表面呈强疏水性和聚集 生长，导致： • 不易着色， • 对化学物质抵抗力强 • 细菌毒力与其脂质成分有关，脂质含量越高，毒力越强
基因芯片技术
Q u e s tio n 6
• W h y d o m y c o b a c te ria l in fe c tio n s h a v e to b e tre a te d w ith m u ltip le d ru g s fo r 6 m o n th s o r m o re ? • 治疗原则：早期，联用，适量，规律，全程用药 • 两阶段疗法： -强化期（1~ 3个月）：联合应用4~ 5种抗结核药，一边在短时 间内大量杀灭繁殖活跃的敏感菌，减少耐药菌产生 -巩固期（6个月~ ）：继续消灭残留的结核菌，减少和避免复 发机会
• 经过淋巴管道、血流、支气管和消化道扩散可引起： 结核性胸膜炎 全身粟粒性结核病 血源性结核病 肺粟粒性结核病 肺外器官结核病 肠结核病 结核性脑膜炎
Q u e s tio n 5
• H o w to d ia g n o s is th e M y c o b a c te ria l tu b e rc u lo s is in fe c tio n ? D e s c rib e so m e n e w la b o ra to ry d ia g n o s is m e th o d s . • 目前较为常用的方法分为三大类 -细菌学诊断 -免疫学诊断 -分子生物学诊断
DNA序列测定
用于突变的检测，并确定突变的部位 简便快速，自动化， 与性质，其中PCR-DNA序列测定在结核 商品化 分枝杆菌耐药基因研究中应用广泛 将多种探针分子固定于支持物上，与 标记样品分子进行杂交，通过检测每 个探针分子的杂交信号强度获取样品 分子的数量和序列信息 技术操作简单，自 动化程度高，效率 高，但成本高
• H o w is th e d is e a s e m a n a g e d a n d p re v e n te d ?
• 疫苗接种：新生儿接种卡介苗可使 儿童发病率减少，但实验发现此种 疫苗对成人结核病预防几乎起不到 作用，对幼儿的预防也存在一定危 险性，因此急需研制新型疫苗 • 及早发现和治愈传染源 • 防止结核菌的传播：定时开窗通风， 日光照射 • 减少结核菌感染者的发病：增强抵 抗力，戒烟，限酒，生活作息规律 • ……
Q u e s tio n 2
• W h a t a b o u t th e m e c h a n is m s o f h o s t d e fe n s e s fo r m y c o b a c te ria l? • M T B 进入机体首先侵入巨噬细胞，产生非特异性免疫 巨噬细胞与结核分枝杆菌相互作用 -巨噬细胞的天然防御机制 -M T B 的免疫逃逸机制 • 感染后3~ 6 周，产生特异性细胞免疫 细胞免疫的两个阶段 -抗原提呈 -T 细胞的识别、活化、应答
免疫印迹技术
高分离SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳与高敏 感性酶联反应相结合
分子生物学诊断
方法 简介 主要类型：cDNA或rRNA探针，全染色 体DNA探针，克隆DNA或PCR扩增片段 探针，寡核苷酸探针 略（大家都懂的） 特点
核酸探针 聚合酶链反应 （PCR）
特异性强，但敏感 性低且价格昂贵 能早期诊断，检测 时间较短，但假阳 性和假阴性率较高
F in a l a n a ly s is c o n c lu s io n
T h e y w e re a ll in fe c te d w ith
• M Y C O B A C T E R IA L T U B E R C U L O S IS
C h a ra c te ris tic
Q u e s tio n 4
• W h a t is th e ty p ic a l clin ic a l p re s e n ta tio n a n d w h a t co m p lic a tio n s ca n o c c u r?
• 典型临床表现 全身毒性反应：乏力，全身不适，厌食，体重减轻等 全身症状 发热 盗汗 咳嗽、咳痰 局部症状 咯血 胸痛 呼吸功能障碍引起的症状 体征：患侧呼吸运动减低、叩诊闻浊音、听诊有支气管肺泡呼吸音 和湿罗音
• 形态为细长略弯曲、有分枝生长趋势 • 专性需氧菌，最适生长温度37℃，最适酸碱度pH 6.5 - 6.8 ，生长 缓慢 • 细胞壁含有大量脂质，主要是分枝菌酸 • 齐 - 尼（ Zi e h l - N e e l s e n ）抗酸性染色法 , 又名抗酸杆菌（ a ci d fa s t b a c illi ）
菌落为红或紫色， 操作简单，培养时 阳性率不高，结果 染色镜检 间短，无特殊仪器 观察存在主观性 噬菌斑有无 简便、快速、特异 直接检测活菌， 性高、灵敏度高 具有一定的传染性
免疫学诊断
方法 原理 特点
吸附在固相载体上的结核抗原（抗体） 酶联免疫吸附实验 可与待检标本中的结核抗体（抗原） 结合，形成复合物，再与酶标结合， （ELISA） 酶使底物显色 生物素-亲和素-酶 免疫测定法 （BAS-酶免法） 类似于ELISA，只是用BAS来标记酶