肌酐检测试剂盒(PA速率比色法)
肌酐的测定实验报告

一、实验目的1. 了解肌酐测定的原理和方法。
2. 掌握肌酐测定的操作步骤。
3. 学会使用肌酐测定试剂盒,并对其结果进行分析。
二、实验原理肌酐是人体肌肉代谢的终产物,主要由外源性和内源性两种组成。
外源性肌酐主要来源于食物中的肉类,内源性肌酐则是由人体肌肉代谢产生。
在正常情况下,肌酐主要通过肾脏滤过排出体外。
因此,通过测定血液或尿液中肌酐的浓度,可以评估肾脏的滤过功能。
本实验采用肌酐测定试剂盒,通过碱性苦味酸终点比色法测定血清肌酐浓度。
三、实验材料1. 肌酐测定试剂盒2. 血清样品3. 移液器4. 一次性吸管5. 比色皿6. 移液器吸头7. 混匀器8. 水浴锅9. 移液器吸头10. 洗耳球11. 计时器四、实验步骤1. 标准曲线的制备(1)取6个比色皿,分别加入不同浓度的肌酐标准溶液。
(2)在每个比色皿中加入适量的肌酐测定试剂A和B,混匀。
(3)将比色皿放入水浴锅中,加热至50℃恒温反应10分钟。
(4)取出比色皿,用洗耳球吹洗内壁,使其充分混合。
(5)用移液器取标准溶液和样品,分别加入比色皿中,混匀。
(6)用移液器将样品转移到比色皿中,立即放入比色仪中测定吸光度。
2. 样品测定(1)取3个比色皿,分别加入血清样品、试剂A和B,混匀。
(2)将比色皿放入水浴锅中,加热至50℃恒温反应10分钟。
(3)取出比色皿,用洗耳球吹洗内壁,使其充分混合。
(4)用移液器取样品,分别加入比色皿中,混匀。
(5)用移液器将样品转移到比色皿中,立即放入比色仪中测定吸光度。
3. 结果计算根据标准曲线,将样品的吸光度对应到肌酐浓度,即可得到样品的肌酐浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制备根据实验数据,绘制标准曲线,得出线性方程:Y = 0.0162X - 0.0178(R² = 0.9989)2. 样品测定通过测定样品的吸光度,根据标准曲线计算得出样品的肌酐浓度为XX mg/dL。
六、实验结论本实验通过碱性苦味酸终点比色法测定血清肌酐浓度,操作简便,结果准确。
小鼠血肌酐(S-Cr)ELISA检测试剂盒使用说明书

小鼠血肌酐(S—Cr)ELISA检测试剂盒使用说明书小鼠血肌酐(SCr)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采纳双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被血肌酐(SCr)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最后的黄色。
颜色的深浅和样品中的血肌酐(SCr)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避开任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:假如样本收集后不适时检测,请按一次用量分装,冻存于20℃,避开反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。
试验中不用的板条应立刻放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白;依照说明书操作时样本已经稀释5倍,最结束果乘以5才是样本实际浓度。
严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。
全部液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒构成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无停止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0S5)浓度依次为:0、7.5、15、30、60、120μmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
肌酐测定试剂盒(肌氨酸氧化酶法)标准化操作规程

肌酐测定试剂盒(肌氨酸氧化酶法)标准化操作规程1目的规范实验室操作,保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2授权操作人经培训且考核通过的临床检验人员。
3适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清、血浆或尿液中肌酐的浓度。
4检验方法本试剂采用酶法测定肌酐的浓度。
5检验原理样本中的肌酐在试剂中肌酐酰胺水解酶的催化下水解成肌酸,肌酸在试剂中肌酸脒基水解酶的催化作用下,被水解成肌氨酸和尿素,肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下,生成的肌氨酸与水和氧反应,产生甘氨酸、甲醛和过氧化氢,生成的过氧化氢在过氧化物酶的催化下与苯胺类色原物质和4-氨基安替比林作用产生水和醍亚胺色素,醍亚胺色素的生成量与样本中总肌酐的含量成正比,通过测定特定波长处反应最终生成的色素量,可以计算出样品中总肌酐的浓度。
肌酐H O肌酐酰胺水解酶肌酸2"肌酸H O肌酸脒基水解酶,肌氨酸+尿素2肌氨酸+H O+O 肌氨酸氧化酶甘氨酸甲醛H O22'22H O +4-氨基安替比林+苯胺类色原物质过氧化物酶醌亚胺色素+H O22*26检验标本要求6.1样本为血清、血浆或尿液。
6.2血浆样本采用EDTA抗凝,应不溶血。
样本采集后应尽快分析。
6.3肌酐样本在2°C〜8°C可稳定7天。
7试剂及配套品7. 1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司肌酐试剂盒(酶法)7.2试剂组成7.3试剂的稳定性与贮存:7.3.1试剂在2C8C条件下,干燥、避光、密封贮存,有效期为12个月。
7.3.2试剂开封后在2C8C条件下可稳定30天。
7.4试剂的变质指示:若试剂混浊,不能再使用。
8实验仪器及性能指标8.1实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1空白吸光度:A<0.1o8.2.2分析灵敏度:测试1pnol/L被测物时,吸光度变化△ A>0.01。
8.2.3线性范围:30pnol/L〜25 pnol/L区间内,线性相关系数I r > 0.99;[30, 70] pnol/L区间内,线性偏差应不超过±7 mol/L; (70, 25] pnol/L区间内,线性偏差不超过±10%。
血清肌酐(Creatine)苦味酸法测定作业指导书

血清肌酐(Creatine)苦味酸法测定作业指导书1.实验原理不去除蛋白的Jaffe碱性苦味酸连续监测比色法。
肌酐与苦味酸在碱性条件下形成橙红色复合物,在固定的时间内吸光度增加速率与样品中肌酐浓度呈正比。
肌酐+ 苦味酸肌酐苦味酸复合物2. 标本采集2.1 病人准备:早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
2.2 类型:血清,肝素血浆,尿液。
3. 标本存放:血清、血浆的稳定性:4~25℃保存可稳定7天;-20℃保存至少可稳定3个月。
尿液的稳定性:20~25℃保存可稳定2天;4~8℃保存可稳定6天;-20℃保存可稳定6个月对尿液用蒸馏水作1:49稀释后检测,结果乘50后报告。
4. 标本运输:常温条件下运输5. 标本拒收的标准:细菌污染的标本不能作测定。
6. 实验材料6.1 上海申能肌酐检测试剂盒(142 1717170 1 试剂1:6×64ml+试剂2:6×16ml)。
6.1.1 试剂组成:试剂1(R1):氢氧化钠0.16mol/L试剂2(R2):苦味酸 4.0mmol/L6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于2~25℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。
6.1.5 注意事项:试剂1中含氢氧化钠。
请按以下条例处理:R36/38: 刺激眼睛和皮肤。
S26:如与眼睛接触应立即用大量水冲洗并请医生诊视。
S37/39:戴上手套并采取合适的眼/脸的防护。
S45:如发生事故或感觉不适立即请医生诊视。
试剂2中含苦味酸。
吸入、接触皮肤、吞咽将会中毒。
戴上手套并采取合适的眼/脸的防护。
如与皮肤接触应立即用聚乙二醇400(DAB8)或大量水冲洗。
如情况严重,立即请医生诊视。
使用实验室试剂应采取必要的预防。
6.2 校准品:使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
肌酐测定标准操作规程

肌酐测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:血清肌酐测定(缩写CRE),尿液肌酐测定;组合项目申请:肾功能测定,内生肌酐清除率测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定一天,普通冰箱中(2~8℃)稳定3天。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2.3.2 不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐的抗凝剂是肝素。
3 方法原理肌酐酶肌酐 + H2O -------------- 肌酸肌酸酶肌酸 + H2O -------------- 肌氨酸 + urea肌氨酸氧化酶肌氨酸 + H2O + O2 ------------------氨基乙酸 + H2O2 + 甲醛过氧化物酶F-DAOS+H2O2 + 4-氨基安替比林------------------蓝色染料该染料在600nm波长下吸光度的变化与样品中肌酐浓度成正比4 试剂及其他用品4.1试剂:肌酐测定试剂盒(货号CR6113),由北京利德曼生化股份有限公司出品。
【word】酶法与Jaffe’s速率法测定血清肌酐的方法学评价

酶法与Jaffe’s速率法测定血清肌酐的方法学评价954?国际检验医学杂志2007年1O月第28卷第1O期lntJ1.abMed,Octo~r2007,V o1.28,No.10酶法与JaffeS速率法测定血清肌酐的方法学评价薛邦禄徐维家林韶华【摘要】目的通过对酶法和JaffeS速率法测定血清肌酐的结果进行方法学比较,寻找一种简便,特异,准确的检测肌酐的方法.方法使用酶法(肌氨酸氧化酶法)和JaffeS速率法(Fixed)在0一lympusAU2700全自动生化分析仪上测定血清肌酐,并对测定结果进行方法学评价,包括精密度实验,回收实验,干扰实验,对比实验.结果精密度实验显示,酶法和Jaffes 速率法批内变异系数分别为1.69和2.77,批间变异系数分别为2.37和3.14.对比实验结果显示,两种方法有良好的相关性,且无显着性差异(P)0.05),相关系数r=0.9873.回收试验显示,JaffeS速率法的回收率分别为95.7,102.1和106.8,平均回收率为i01.5;酶法的回收率分别为96.4,97.9和103.4,平均回收率为99.2.干扰试验结果显示,JaffeS速率法特异性不强,容易受到许多非特异性物质的干扰,尤其是临床黄疸患者的血清肌酐测得值偏差较大,而酶法从方法学上克服了肌酐测定中干扰物的影响.溶血及黄疸标本对酶法几乎无干扰,Jaffes速率法出现负干扰.结论酶法在重复性和抗干扰能力方面优于JaffeS速率法,酶法是目前测定血清肌酐的最好方法.【关键词】肌酐;酶法;JaffeS速率法中图分类号:R457.4文献标识码:B文章编号:1673-4130(2007)1O一954一O2肌酐(creatinine)是肌酸代谢的最终产物,血清中肌酐来源于肌肉中的肌酸和磷酸肌酸,由磷酸肌酸通过脱磷酸基并闭合成环而形成的内脱水物.肌酐是肌肉组织代谢产生的废物,通常情况下人体内形成的肌酐量是恒定的.游离肌酐在人体代谢中不能被重复利用,并主要通过肾小球滤过后随尿液排出.肌酐测定方法可分为化学法和酶法两大类.化学法有多种,但大都以Jaffe氏建立的碱性苦味酸法为基础.酶法测定肌酐有4种途径,其中3种为紫外线测定,1种为比色测定,相比之下,比色法具有灵敏度高,线性范围宽,试剂稳定性强等优越性.目前,我国l临床实验室测定血清肌酐主要采用JaffeS速率法和酶法.其中,JaffeS速率法测定血清肌酐易受内源性物质的影响,但由于试剂价格较低,国内仍在使用.酶法是近几年推出的一种新方法,本组对JaffeS速率法和酶法测定血清肌酐进行方法学比较,酶法相比JaffeS速率法具有线性范围宽, 抗干扰能力强,没有试剂毒性等优点,特别适合于自动分析. 资料与方法1.试剂:酶法试剂:肌氨酸氧化酶一PAP肌酐试剂盒,由上海科华东菱诊断用品有限公司提供.Jaffes速率法试剂:试剂盒由伊利康生物技术有限公司提供.2.标准液:上海科华一东菱诊断用品有限公司生产浓度为265mol/L肌酐标准液.伊利康生物技术有限公司生产浓度为442”mol/I肌酐标准液.3.标本:血清标本:来源于大连市中心医院临床患者.血红蛋白液:临床收集正常新鲜EDTA—Kz抗凝血,生理盐水洗涤红细胞,离心,弃上清,加蒸馏水溶血测定血红蛋白含量(配制成0.25,0.50,0.75,1.00g/L).质控血清:由日本Olympus公司提供.4.仪器:OlympusAU2700全自动生化分析仪.作者单位116033大连市中心医院检验科(薛邦禄,徐维家); 116013大连市中山区妇幼保健所(林韶华)经验交流?5.测定参数:(1)酶法:主波546nm,副波700nm,温度37C,双试剂,样本为试剂1:试剂2—4:120:40(td),测光点为9点和27点,终点法(End).(2)JaffeS速率法:主波520 nm,副波660nm,温度37.C,双试剂,样本为试剂1:试剂2—15:120:30(I),测光点为14点和21点,速率法(Fixed).结果1.精密度试验:用酶法和JaffeS速率法对质控血清分别进行批内和批间精密度试验.酶法:批内2O例,批间2O例,平均值分别为103.3~mol/I和105.5~mol/I,CV值分别为1.69%和2.37.JaffeS速率法:批内2O例,批间2O例,平均值分别为l14.7tLmol/L和111.8tLmol/L,CV值分别为2.77和3.14%.2.对比试验:随机收集4O例临床患者血清标本(包括溶血,黄疸,脂血等).在OlympusAU27OO全自动生化分析仪上用酶法和JaffeS速率法分别测定血清肌酐,并计算相关系数, 结果如下:相关系数r一0.9873,查Rs界值表P%0.05,说明此两种方法有相关性.查t值表P>O.05,说明此两种方法无显着差异.3.回收试验:取1m1混合血清(取自临床体检样本),加入一定浓度的肌酐标准液0.05ml(66,133,265tLmol/L),分别进行回收试验.其结果分别为:(1)酶法:96.4,97.9,103.4;(2)JaffeS速率法:95.7,102.1,106.8.平均回收率分别为99.2和101.5.4.干扰试验:等体积的混合血清加入等体积的蒸馏水和血红蛋白液(O.25,0.50,0.75,1.O0g/L).测定结果表明,酶法几乎无干扰;Jaffes速率法,血红蛋白在0.25g/L以上时有明显负干扰.随机选取1O份黄疸血清用两种方法分别测定肌酐,结果显示胆红素对JaffeS速率法有明显的负干扰.讨论肌酐别名肌乙酸内酰胺,是生物体肌肉组织中储能物质肌国际检验医学杂志2007年lO月第28卷第lO期IntJLabMed,October2007,V o1.28,No.10酸(creatine)的代谢终产物.一般来说,机体每20g肌肉,每日代谢产生1mg肌酐,肌酐主要通过尿液排出体外.当人体肾功能低下或衰竭时,血液中便积累了远高于正常浓度的肌酐(15mg/L),尿素(200mg/L)等代谢废物,在疾病终末期,就会产生尿毒症的一系列症状.目前血清肌酐临床检测方法主要有JaffeS速率法和酶法,而国内大多数实验室仍采用JaffeS速率法来测定血清肌酐.经典的Jaffe方法测定血清肌酐的主要缺点是特异性差,反应受许多非特异性”色源”物质(如丙酮酸钠等)的干扰,其误差可达到2O_2].Jocelyn根据Jaffe方法符合一级动力学机制建立的JaffeS速率法测定血清肌酐比经典的Jaffe方法是一大进步.JaffeS速率法在一定程度上改进了Jaffe方法的非特异性,减少了非肌酐色源干扰,并适用于自动生化分析仪. 但由于JaffeS速率法也是一种非特异性反应,易受假肌酐化合物干扰,尽管在测定中采用速率带标准的方法来测定,但测定结果与其他项目相比在准确性方面有一定的差异.同时,碱性苦味酸是一种强腐蚀剂,对全自动生化分析仪有很大的腐蚀性作用.另外,苦味酸色素对比色杯的污染是长期使用全自动生化分析仪的一个主要问题,清洗液效力低,温度不够就不能有效地去除肌酐与碱性苦味酸化合物污染,不仅对测定结果有影响,还大大地缩短了自动分析仪的使用寿命_3].近年来,多采用抗干扰能力较强的”两点法”来测定血清肌酐(亦属于JaffeS速率法),它巧妙地利用真假肌酐二者反应时间差来消除快,慢反应中假肌酐的干扰,使特异性提高,但仍然不能全面地消除非肌酐色素的干扰,尤其是胆红素对血清肌酐测定的负干扰].目前多数学者认为胆红素干扰肌酐测定机制可能为:在955?500~520nrn处胆红素有较强吸收,并且在NaOH的作用下,胆红素转变为620nlTl处有较强吸收的胆绿素而使原吸收减弱,这样就掩饰了肌酐与苦味酸的显色反应,使肌酐测定值偏低.本研究结果显示,JaffeS速率法与酶法相比,其明显劣势表现在抗干扰能力方面,Jaffes速率法血红蛋白在0.25g/L以上时即有明显的负干扰,胆红素也有不同程度的负干扰.酶法从方法学上克服了肌酐测定中干扰物的影响,准确度高,且精密度试验优于JaffeS速率法,对仪器及比色杯无腐蚀性和污染性,与Jaffes速率法相关性良好.两种方法回收试验均符合方法学评价要求,无差异.但酶法试剂价格昂贵,不利于中小型医院开展.总之,JaffeS速率法虽经不断改良,但其抗干扰能力无法与酶法相提并论.酶法测定血清肌酐是目前国内临床比较客观,准确的一种方法,特别适合自动化分析.参考文献[1]朱鸿,孙国华,孙树馨,等.利用酶法检测肌酐的方法学评价[J].大连医科大学,2002,24(1):5051.[2]居漪,曾芝如.酶法和Jaffe速率法测定血清肌酐方法学比较[J]. 上海医学检验杂志,2002,17(1):24—25.[3]金哗,苏建荣.酶法与Jaffe反应速率法测定肌酐的比较及干扰分析[J].首都医科大学,2002,23(4):344—345.[4]韩志钧,黄志锋,卢业成,等主编.临床化学常用项目自动分析法[M].第3版.沈阳:辽宁科技出版社,1995.[5]石凌波,林龙顺.常见肌酐测定方法中存在的干扰[J].中华检验医学杂志,2001,24(2):102104.(收稿日期:2006—1l一04)(上接第953页)下细胞释放的一氧化氮量是很少的,但是有免疫调节,神经传递,血压生理调控和血小板凝集的抑制等生理功能.在病理情况下巨噬细胞和多形核细胞能产生大量的诱导型一氧化氮合酶和超氧化物阴离子自由基,从而合成大量的NO和Hz0z.过量的NO和H0对心血管系统,免疫系统,呼吸系统,神经系统,消化系统等均有损伤作用,引起多器官组织损伤.结果表明,INF-a和IL一6两种促炎细胞因子明显升高,提示炎症反应参与了创伤性休克的发病过程.NO活性升高,提示NO作为活性很强的自由基的氧化还原反应参与了创伤性休克的发展过程,可能是引起大顽固性休克低血压的主要原因.内毒素,细胞因子,NO协同作用,使休克向不可逆转化.综上所述,NO,INF-a,I1一6参与了创伤性休克的发生,发展过程,动态检测外周血NO,TNF-a,IL-6含量对评价创伤性休克的病情,预后和治疗有指导意义.参考文献[1]GiannoudisPV,HildebrandF,PapeHC.Inflammatoryserum markersinpatientswithmultipletrauma.CantheypredictOut—come[J]?JBoneJointSurgBr,2004,86(3):313—323.r2]Schroder0,IaunRA,HeldB,eta1.Associationofinterleukin一10promoterpolymorphismwiththeincidenceofmultipleorgan dysfunctionfollowingmajortrauma:resultsofaprospectivepilot study[J].Shock,2004,21(4):306—310.[3]RussellDH,Barretojc,KlemmK,eta1.Hemorrhagicshockin—creasesgutmacromolecularpermeabilityintherat[J].Shock, 1995,4(1):5O一55.[4]BoneHO,FischerSR,SchenartsPJ,eta1.Continuousinfusion ofpyridoxalatedhemoglobinp0ly0xyethykneconjugateinhyper—dynamicsepticsheep[J].Shock,1998,10(1):69—76.(收稿日期:2007—03—04)。
Roche P模块 肌酐(苦味酸)说明书

质控: 质控使用“订单信息”中列出的材料。 可添加其他适用的质控品。 血清/血浆 使用上面列出的未稀释血清质控材料进行 质控。 可添加其他适用的质控品。 尿液 使用上面列出的 Precinorm PUC 和 Precipath PUC 进行质控。 可添加其他适用的质控品。 应根据各实验室的具体要求采用适合的质 控间隔和限值。检测值应在设定的范围 内。若质控值在设定范围外,各实验室应 采取相应措施。 按可用的政府规章和地方法规进行质控。
稀释液 (NaCl)
6µL 144µL
2µL 180µL
10µL 115µL
cobas c 111 系统-检测设定
血清、血浆和尿液应用参数
测定模式
吸光度
Abs.计算模式
动态
反应方向
上升
波长 A/B
512/583 nm
计算结果 第一次/最后一次 21/26
血清/血浆
补偿
-18µmol/L (-0.2mg/dL)
波长(副/主) 反应方向
单位
试剂移液 R1 R3
样本 样本容量
正常 减少 增加
10µL 10µL 10µL
速率法 A
10/27-37-15-23 (STAT 4/12-19)
570/505nm
上升
µmol/L (mg/dL,mmol/L)
稀释 样本稀释
样本
30µL
样本
样本稀释
样本容量
样本
稀释液 (NaCl)
正常
10µL 6µL 144µL
减少
10µL 2µL 180µL
增加
10µL 10µL 115µL
cobas c 311 系统-检测设定 血清和血浆应用参数
一种干片式血清肌酐检测试剂条及其制备方法[发明专利]
![一种干片式血清肌酐检测试剂条及其制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/a21805dc5ff7ba0d4a7302768e9951e79b8969ee.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610694942.3(22)申请日 2016.08.19(71)申请人 基蛋生物科技股份有限公司地址 211505 江苏省南京市六合区沿江工业开发区博富路9号(72)发明人 童鎏 刘佳 苏恩本 (51)Int.Cl.G01N 33/70(2006.01)(54)发明名称一种干片式血清肌酐检测试剂条及其制备方法(57)摘要本发明公开一种干片式血清肌酐检测试剂条及其制备方法,属于体外诊断领域。
该试剂条所包含的肌酐反应膜、过滤膜、扩散层均以适当重叠关系固定于塑料底板上,其特征在于该反应膜上包括稀释液和反应试剂,其中稀释液包含缓冲液、表面活性剂、稳定剂、粘合剂、辅酶因子以及防腐剂;反应试剂包含肌酐酶、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、过氧化物酶,4-氨基安替比林和N-乙基-N(2-羟基-3-丙磺基)-3,5-二甲基苯胺。
利用Trinder反应试剂作为指示探针,被测物通过各种酶作用最终产生有色的醌化物,以醌化物显色程度间接检测样品中肌酐含量。
本发明将液相反应转移到固相载体上,实现了操作简单、快速方便检测样品中肌酐含量的目的,且灵敏度高、精确度好,便于推广应用。
权利要求书1页 说明书3页 附图1页CN 106383237 A 2017.02.08C N 106383237A1.一种干片式血清肌酐检测试剂条及其制备方法,在塑料底板上,扩散层、血液过滤膜、肌酐反应膜按照适当的重叠关系固定,其特征在于该反应膜上包括稀释剂和反应试剂。
2.其中稀释液包含缓冲液、表面活性剂、稳定剂、粘合剂、辅酶因子以及防腐剂。
3.反应试剂包含肌酐酶、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、过氧化物酶,4-氨基安替比林和N-乙基-N(2-羟基-3-丙磺基)-3,5-二甲基苯胺。
4.稀释液组成成分:缓冲液(pH6.0-8.5)50-100mmol/L、表面活性剂1%-10%(质量百分比)、稳定剂25-100g/L、粘合剂1%-10%、防腐剂0.1-1g/L、辅酶因子1-5g/L。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
肌酐(Cr)检测试剂盒(PA 速率比色法)
简介:
肌酐(Cr)检测试剂盒(PA 速率比色法)检测原理是血清、血浆、尿液中的肌酐与苦味酸盐反应,生成橘红色的苦味酸肌酐复合物的反应速率,选择适宜的速率监测时间,避开干扰物质对肌酐与苦味酸反应的干扰,通过分光光度比色法(分光光度计)测定510nm 处吸光度。
该试剂盒可用于检测人体、动物的血浆、血清、尿液样品中肌酐含量。
该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 准备样品:血浆、血清按照常规方法制备,-20℃冻存。
尿液中肌酐含量较高,应先用
蒸馏水作1:200稀释后再测。
2、 配制标准品工作液:取肌酐标准(10mmol/L),按肌酐标准(10mmol/L):肌酐标准稀释
液=1:99的比例混合,使浓度达到100μmol/L ,即为标准品工作液-肌酐标准(100μmol/L)。
3、 Cr 比色操作:按照下表设置标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免
产生气泡。
如果样品中的Cr 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
4、Cr 检测:反应温度,充分混匀后准确反应,分光光度计检测510nm 吸光度,比色杯光径1.0cm ,读取各管吸光度(A 标准1、A 测定1);待反应进行至准确,再读取各管吸光度(A
标准2、
A 测定2)。
计算:
编号 名称
TC1189 100T Storage
试剂(A): 肌酐标准(10mmol/L) 1ml 4℃ 避光 试剂(C): Cr 显色液 100ml RT 避光 试剂(D): Cr assay buffer 100ml
RT 使用说明书
1份
加入物(ml)
标准管 测定管 肌酐标准(100μmol/L) 0.1 — 血清、血浆、稀释尿液 — 0.1 Cr 工作显色液
1.0
1.0
肌酐(μmol/L)=(A测定2-A测定1)/(A标准2-A标准1)×100
参考区间:
成年人男性肌酐62-115mmol/L(0.7-1.3mg/dl)
成年人女性肌酐53-97mmol/L(0.6-1.1mg/dl)
注意事项:
1、测定各管时,各管温度均需达到室温,否则影响结果。
2、轻度溶血样本对肌酐测定无影响。
3、尿液样品中一般肌酐含量较高,样品需用1:200稀释,如果显色后吸光度仍超过本法
的线性范围,还需将稀释尿液,再行稀释重新检测。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。