实验一 紫外-可见分光光度计的性能检验
1紫外可见分光光度计期间核查方法
1紫外可见分光光度计期间核查方法紫外可见分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测量物质在紫外可见光区域的吸光度。
在实验室中，对仪器的准确性和稳定性进行定期核查十分重要，以确保测量结果的准确性和可靠性。
以下是紫外可见分光光度计核查的方法和步骤。
1.校准仪器首先，需要使用校准溶液对紫外可见分光光度计进行校准。
选择一种已知浓度和吸光度的参考溶液，如工作曲线中的标准溶液。
在不同浓度下测量吸光度，并利用标准曲线进行校准。
确保校准过程中环境条件的稳定性，如温度、湿度等。
2.检查光源检查和确保光源的正常运行。
使用光源检测器来测量光源的强度和稳定性。
将光源放置在所需波长下进行测量，并记录测量结果。
比较测量结果与光源的规格要求，确保光源的工作正常。
3.检查检测器使用检测器标定溶液进行检测器的校准。
使用已知浓度的参考溶液，测量吸光度，并利用已知的吸光度值对检测器进行校准。
确保检测器的灵敏度和线性范围。
4.检查光学路径使用标定溶液检查和校正光学路径。
在没有样品的情况下，使用标定溶液进行测量，并根据标准吸光度值进行校正。
确保光学路径的准确性和一致性，以提高测量结果的精确性。
5.检查进样系统检查进样系统的正常运行。
确保进样系统能够正确吸取和释放样品，并且不会产生干扰或污染。
使用已知浓度的标准溶液进行进样系统的校准，以确保准确的进样和测量。
6.清洁和维护定期清洁和维护仪器，以确保仪器的性能和工作效率。
定期清洁光学元件，如光栅、镜片等，以去除灰尘和污垢。
定期校正仪器以保持其工作性能和准确性。
总结：在使用紫外可见分光光度计之前和定期使用期间，进行核查并校准仪器是保证测量结果准确性和可靠性的关键。
通过校准仪器、检查光源和检测器、检查光学路径和进样系统，并定期进行清洁和维护，可以确保仪器的正常运行和测量结果的准确性。
实验一紫外-可见分光光度计的性能检验
11.关闭工作站，关闭输液泵电源，关闭检测器电源、 关闭仪器电源
练习液相色谱仪使用的色谱条件、样品溶液和 进样量
色谱条件 流动相为甲醇∶水（80∶20）； 固定相:C18反相键合色谱柱；
检测波长为254nm；
流速：1ml/min。 样品溶液 含苯、甲苯、萘浓度分别为
1μg/ml的甲醇溶液。
进样量 ：10μl。
四、思考题
流动相在洗脱前为何要进行脱气？
实验七、高效液相色谱定性及定量分 析—中药赤芍中芍药苷的定性鉴别和
含量测定
一、实验目的
1.掌握利用高效液相色谱法进行定性 及定量分析。
2.巩固高效液相色谱仪的使用方法。
二、实验原理
1.采用与已知化合物对照,对组分进行定 性分析。
A
0.4
0.2
0
500
800
λ(nm)
3、重复性的检查
以0.02mol/L的H2SO4为 空白
在257nm处 测定
同一K2Cr2O7溶液的T，连续测定7 求出极差 次
若极差 <0.5%
仪器的重复性符合 使用要求
4.吸收值准确度的检查
以0.02mol/L的H2SO4为 空白
(T＝100%）
λ＝235nm、 257n3m13nm、
实验二
吸收曲线的测绘及 吸收系数的测定
一、实验目的
1、掌握测绘吸收曲线的方法 2、学会测定吸收系数
二、实验原理
1、若溶剂固定不变，化合物吸收曲线所出现的λmax、 λmin或λ(S)为一定值，且数目也一定，为鉴别化合物提供 了有力的证据。
2、百分吸收系数是指当溶液浓度为1%，液层厚度为
1cm时的吸光度。
紫外-可见分光光度计的检测实验报告
分子光谱实训报告班级：----------------学号：_______________________ 姓名：______________________指导教师：_______________2015年10月紫外■可见分光光度计的检测实训日期______ 年_____ 月 ____ 日教师评定：________________【仪器概况】仪器名称：紫外-可见分光型号：UV1801厂家：北京瑞利编号：090953、【仪器结构】三、【实验项目】波长准确度检查仪器零点稳定性检查光电流稳定度检查吸光度准确度检查紫外区透色比检查杂散光合格性检查吸收池配套性检查皿差四、【仪器及试剂准备单】1、试剂清单（以1个小组6人为例）H2SO3、K2Cr3O7、HCI04、碘化钠、蒸馏水、亚硝酸钠、无水乙醇、苯、硫酸铜。
2、仪器清单（以1个小组6人为例）UV1801紫外分光光度计、烧杯14个、容量瓶9个、玻璃棒、滤纸、洗瓶、错钕滤光片、比色皿、胶头滴管、洗耳球、移液管、表面皿、移液管架。
五、【检测步骤】开机自检（5个ok）（一）、波长准确度可见分光光度（空气）1 、按1、波长扫描；按F1,参数设置（E、波长范围460--680nm、间隔0.1nm、换灯点800nm）按返回键。
2 、按F2,根据显示屏提醒，确定键；出现两个峰，分别记录两个峰值的波长和吸光值。
（重复3次；参比和样品都是空气）。
错钕滤光片1 、按F1,参数设置（A、波长范围500--540nm、间隔1nm换灯点360nm）按返回键。
2 、把错钕滤光片放在第二格，关盖；按F2,根据显示屏提醒，拉入参比，确定键；再拉入样品，确定键；出现一个峰，记录读数。
紫外分光光度1 、按F1,参数设置（A、波长范围200--270nm、间隔0.1nm、换灯点360nm）按返回键。
2 、力口3滴苯在石英比色皿中，盖上比色皿盖，放在第二格，关盖；按F2,根据显示屏提醒，拉入参比，确定键；再拉入样品，确定键；出现五指峰，分别记录五个不同峰的波长和吸光值。
紫外可见分光光度计实验报告
紫外可见分光光度计实验报告实验目的：1.学习操作紫外可见分光光度计，并了解其原理和使用方法。
2.通过测量不同溶液的吸光度，了解溶液的浓度与吸光度之间的关系。
3.掌握分光光度计的标定方法。
实验原理：紫外可见分光光度计是一种常用的光谱仪器，可用于测定溶液吸光度。
其原理是通过将入射光分光为不同波长的光束，经过被测溶液后，测量出透射光强度与入射光强度的比值，即吸光度。
吸光度与溶液浓度之间通常存在一定的线性关系。
实验步骤：1.打开紫外可见分光光度计的电源，待仪器启动后进行预热。
2.调节光电倍增管的位置，使得入射光线居中。
3.根据实验要求选择合适的波长范围和检测波长。
4.调节样品舱盖，将待测样品放入样品舱内。
5.按下“调零”按钮，将吸光度调零。
6.按下“测量”按钮，记录下测量的吸光度数值。
7.将待测样品取出，用试剂喷洒清洗样品舱。
8.重复步骤4-7，测量其他样品的吸光度。
实验结果与讨论：1.测量了一系列浓度不同的对苯二酚溶液的吸光度，并绘制了吸光度与浓度之间的曲线。
通过拟合可以得到该溶液的吸光度与浓度的线性关系，这为后续测量其他溶液的浓度提供了基础。
2.在测量过程中，注意避免样品舱残留上一次测量的溶液，以免影响测量结果。
3.在选择波长时，应根据被测样品的特性和需要，选择合适的波长范围和检测波长，以提高测量精度。
实验体会：通过这次实验，我初步掌握了紫外可见分光光度计的使用方法和原理，了解了溶液浓度与吸光度之间的关系。
实验中需要注意操作的细节，如样品舱的清洗、选择合适的波长等。
在实验过程中，我也遇到了一些问题，但在指导老师的帮助下，逐渐解决了这些问题。
总的来说，这次实验对我深化了对光谱仪器的理解，并提高了我的实验操作能力。
紫外-可见分光光度计的校正
实验一紫外-可见分光光度计的校正及使用分光光度计定性分析一、实验目的1. 了解紫外和可见光光度计的构造；2. 学会分光光度计的波长准确度和吸收池配套性检验方法；3. 了解紫外和可见光光度计的校正基本方法；4. 掌握利用分光光度计对物质进行定性分析。
二、实验学时3学时三、仪器与试剂1、仪器紫外-可见分光光度计；镨钕滤过片；容量瓶（50mL）；天平；烧杯（200mL）；2、试剂去离子水； 95%乙醇；防晒霜；苯；质量分数0.006000%重铬酸钾的0.001mol/L高氯酸标准溶液：称取已经干燥过的重铬酸钾60.00mg，移入1L容量瓶中，用蒸馏水溶解，加入1mL的1.0mol/L高氯酸，再用蒸馏水稀释溶液质量为1000.0g，避光密封保存。
四、实验原理紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。
通过测定分子对紫外光的吸收，可以对物质进行定性和定量测定。
利用紫外分光光度法对物质进行定性分析：选择合适的溶剂（非极性），使用有足够纯度单色光的分光光度计，在相同的条件下测定相近浓度的待测试样和标准品的溶液的吸收光谱，然后比较二者吸收光谱特征：吸收峰数目及位置、吸收谷及肩峰所在的位置等；分子结构相同的化合物应有完全相同的吸收光谱。
紫外-可见分光光度计的主要部件包括光源、波长选择器、吸收池、检测器及测量系统等。
1. 光源：能发射所需波长范围的光的器件。
可见光源常用钨丝灯(或碘钨灯)，波长范围约为320～2500nm；紫外光源常用氢灯(或氘灯)，波长范围约为200～350nm。
2. 波长选择器：能从光源辐射光中分离出一定波长范围光的器件。
通常为滤光片、棱镜或光栅。
固定波长选择器常用滤光片，连续变化波长选择器常用棱镜或光栅。
3. 吸收池：盛放待测样品溶液的容器。
该容器应具有两面互相平行、透光且有精确厚度的平面。
按材质可分为玻璃和石英两种。
玻璃吸收池用于可见光波长范围的测定；石英吸收池用于紫外光及可见光波长范围的测定。
紫外可见分光光度计技术与检定
紫外可见分光光度计技术与检定随着分析化学的不断发展，分光光度法已成为一种常用的分析方法。
其中，紫外可见分光光度计是一种基于分子电子能级的吸收原理进行定量分析的仪器，广泛应用于医药、环保、生化分析等领域。
本文将重点介绍紫外可见分光光度计的技术原理、检定方法以及常见问题及解决方法。
紫外可见分光光度计是利用样品中的颜色和吸收性质定量分析的仪器。
在分光光度计中，样品被分别照射在可见光和紫外线的光源下，分别探测它在这两个范围内的光的强度。
简单来说，就是采用一束宽谱的白光或滤过可见光或紫外线，使样品吸收特定波长的光线而得到吸收光的强度值。
下面是紫外可见分光光度计的各部分功能描述：1. 光源紫外可见分光光度计的光源有两种，一种是氢氖灯，适用于360-780nm的波长范围，另一种是钨灯，适用于200-800nm的波长范围。
2. 分光器分光器用于将光线分为两束——参比光和样品光，以确保样品和参比光在相同的条件下测量。
两束光线从分光器出来后，经过不同的道（即光谱），分别接触到检测器。
光谱可以是单色光通道或带通滤光片通道。
3. 检测器检测器用于将光信号转化为电信号，电信号被计算机进行数字化处理并输出到显示器上，形成光谱图。
光谱图可用于定量分析光谱中的化合物。
4. 数据分析软件数据分析软件将检测器输出的光信号转化为数字信号，然后可以通过公式计算样品浓度。
同时可以用于更高级的数据分析，如光谱分解和样品分类。
紫外可见分光光度计的准确性和可靠性对于分析化学实验室的研究和诊断非常关键。
根据ISO 17025：2005标准，检验员必须定期检测光度计的性能以确保其准确可靠。
下面是检定紫外可见分光光度计的步骤：1. 清洁光学系统光学系统包括光谱仪，样品池和检测器。
必须确保光学系统干净且无灰尘。
使用干净的棉棒和无水酒精（IPA）清洁样品池和检测器窗口。
2. 灵敏度检定在可见光波段，研制标准液，并测量一组不同的光强度值。
以强度和浓度的负对数作为横纵坐标根据Lamber-Beer定律绘制标准曲线。
实验一 可见-紫外分光光度计检查
实验一可见-紫外分光光度计检查一、实验目的1、了解紫外-可见分光光度法对溶剂的要求；2、熟悉可见-紫外分光光度计杂散光的检测方法；3、掌握可见-紫外分光光度计吸收度准确度的测定方法；4、掌握不同检测波长下分光光度计对光源和比色皿的要求。
二、实验原理1、对溶剂的要求含有杂原子的有机溶剂通常均有具有很强的末端吸收。
因此，当作溶剂使用时，它们的使用范围均不能小于截止使用波长。
如：甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。
另外，当溶剂不纯时，也可能增加干扰吸收。
因此，在测定供试品前，应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求。
2、杂散光由于仪器元件表面对光的反射和散射，单色光中含有一定的杂散光。
杂散光可影响摩尔吸收系数与吸光度间的直线关系。
3、吸收度准确度检测朗伯比尔定律：A=lg1/T=ECLA：吸光度T：透过率E：吸收系数，表示方法为E1%1cm，其物理意义为溶液的浓度为1％（g/mL）液层厚度为1cm时的吸光度系数。
C：溶液浓度（g/100mL）L：液层厚度三、实验仪器UV755B型可见-紫外分光光度计。
四、实验方法1、溶剂检查将溶剂置1cm石英吸收池中，以空气为空白，测定其吸光度。
溶剂和吸收池的吸光度，在220-240nm范围内不得超过0.40。
在241-250nm范围内不得超过0.20，在251-300nm范围内不得超过0.10，在300nm以上时不得超过0.05。
2、杂散光检查按表1-2所列试剂和浓度配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在规定的波长处测定透光率，应符合表1-2中规定。
3、吸收度准确度检测取在120℃干燥至恒重的重铬酸钾（基准）约60mg，精密称重，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000mL，在规定的波长处测定并计算其吸收系数应符合表1-3中规定。
五、数据记录表1-1：溶剂检查结果记录220-240 241-250 251-300 >300波长/nm220 230 235 241 245 250 260 275 300 350 500 800 吸光度标准<0.40 <0.20 <0.10 <0.05吸光度测量表1-2：杂散光检查结果记录试剂浓度/%(g/mL) 测定的波长/nm 透光率（T）/%NaI 1.00 220 <0.8实际测量值NaNO2 5.00 340 <0.8实际测量值表1-3：吸收度准确度检测结果波长/nm 235 257 313 350吸收系数（E1%1cm）的规定值124.5 144.0 48.6 106.6吸收系数（E1%1cm）的许可范围123.0-126.0 142.8-146.2 47.0-50.3 105.5-108.5 吸光度（A）吸收系数（E1%1cm）的测量值六、实验结果与分析1、本次实验所用仪器各项检查结果是否符合要求？如不符合要求，请分析有哪些可能原因。
紫外可见光分光光度计实验报告
紫外可见光分光光度计实验报告实验目的：本实验旨在了解如何使用紫外可见光分光光度计（UV-Vis Spectrophotometer）来测量溶液的浓度，该技术主要依据吸收波长（Absorption wavelength）和吸收率（Absorption rate）来确定溶液的浓度。
实验原理：紫外可见光分光光度计（UV-Vis Spectrophotometer）是一种测量光谱散射或吸收特征的仪器。
该仪器由光源、分光镜、滤光片和检测器等部件组成。
光源由一个或多个发光管发射出的指定波长的光束来照射试样，经过滤光片后将指定波长的光束照在检测器上，检测器检测试样的吸收率，并将结果显示到测量仪器上。
实验方法：在本次实验中，选择6个不同浓度的NaCl（纯度≥99.5％）溶液: 0.000、0.002、0.004、0.006、0.008、0.010mol/L，每一种浓度调制三份，每份用量各4mL。
将研究所需试管清洗干净后存放备用；将标样液（0mol/L NaCl）放入研究所需试管中，然后在末端实验室中开启紫外可见光分光光度计；打开设置后，设置分析项，模式为读取浓度，选择绝对值模式，测量范围为400nm-800nm；点击启动测量，根据读取的浓度值确定每种溶液的浓度。
实验结果：经实验所得数据如下表所示：实验研究：根据实验结果的对照，可以得出紫外可见光分光光度计能够准确测定溶液的浓度。
安全操作：（1）实验前必须充分掌握实验要求和安全注意事项，并遵守实验室各项安全规定；（2）实验结束后，要记得及时关闭实验仪器，维持实验室干净整洁；（3）加总液体时必须要戴安全眼镜保护眼部安全，避免易燃，毒性，有害气体及粉尘的污染；（4）严禁把酸，碱溶液和其它有害液体排放到下水道中。
总结：本次实验成功地使用紫外可见光分光光度计来测量NaCl等溶液的浓度。
经过测试，发现紫外可见光分光光度计测定溶液浓度准确可靠，易于控制，可以满足实验需求。
在本次实验过程中，我们还学习到了如何操作紫外可见光分光光度计，以及如何科学安全的配制实验液体等重要知识。
紫外可见分光光度计验证方案及报告
紫外可见分光光度计验证方案及报告一、验证方案：1.准备样品：选择已知浓度的溶液作为样品，建议选择具有不同吸光度的溶液，以检验分光光度计在不同浓度下的测量性能。
2.校准光程：根据分光光度计的使用说明书，调整光程，使其与样品中光程相同。
通常使用玻璃比色皿来校准光程。
3.校准零点：在光程调整好之后，使用去离子水或纯溶剂填充比色皿，并将读数设置为零，以校准分光光度计的零点。
4.测量样品：使用准备好的样品，按照样品的吸光度范围，依次将样品放入比色皿中并插入分光光度计测量室进行测量。
5.记录和比对数据：记录测量数据，并与已知的溶液浓度进行比对。
可以使用线性回归或标准曲线的方法来验证光度计的准确性。
二、验证报告：标题：紫外可见分光光度计验证报告摘要：本报告旨在验证紫外可见分光光度计的准确性和可靠性。
通过测量已知浓度的溶液，并与理论值进行比对，以验证光度计的测量性能。
引言：紫外可见分光光度计是一种常用的测量物质浓度的仪器。
本次实验目的是通过测量具有不同吸光度的溶液样品来验证紫外可见分光光度计的测量准确性。
实验方法：根据验证方案中的步骤，选择不同浓度的溶液样品作为实验样品，并根据样品的吸光度范围进行测量，记录测量数据。
结果与讨论：将测量数据与已知的溶液浓度进行比对，可以计算出光度计的测量准确性。
通过线性回归或标准曲线的方法，我们可以看到光度计的准确性和可靠性。
结论：本实验结果表明，分光光度计在测量不同浓度的溶液样品时具有较高的准确性和可靠性。
可以根据测量数据得出物质浓度与吸光度之间的线性关系，从而准确测量物质浓度。
建议：在使用分光光度计进行测量时，应注意校准光程和零点，以确保准确测量。
此外，进行质量控制测试并建立标准曲线是保证测量准确性的重要步骤。
以上是一个紫外可见分光光度计验证方案及报告的示范，可以根据具体实验需求和仪器使用说明书进行相应的调整和修改。
实验一分光光度计的性能检验
仪器和试剂
• （1）722型分光光度计 波长设定需从短波向长波方向调整。
1．同种比色皿透光度的差异对测定有何影响？ Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱
• （2）容量瓶：25ml 1支；100ml 1 支 开机后需预热20分钟。
仪器在同一工作条件下(440)，用同种溶液连续测定7次，其透光率最大读数与最小读数之差(极差)应小于0. 同种厚度的比色皿之间，透光率误差应小于0.
开实机验后 一需分预光热光度20计分的钟定性。能结检验果的准确性，因此新购仪器及使用一定时 间后，均需进行检验调整。 2．检查分光光度计的波长精度及重现性对测定有什么实际意义？
（2）利用KMnO4溶液的最大吸收值来检验波长的精度。 （2）掌握分光光度计的性能检验方法。 1．比色皿透光率的检查
• （2）利用KMnO 溶液的最大吸收值来检验波 4 以空气的透光率为100%，则比色皿的透光率应不低于84%，同时在450nm、650nm处测其透光率，各透光率差值应小于5%。 长的精度。 检查方法：将0.
722型分光光度计使用方法
• 1.开机后需预热20分钟。 • 2.波长设定需从短波向长波方向调整。 • 3.调零需在透射比模式下将比色皿架置于调零
档。 • 4.调满度时将空白样品置于光路，按100%T（
OA）键。 • 5.按方式键可实现透射比，吸光度方式转换。 • 6.波长改变后千万不能忘了再调到零和调满度
• （3）吸量管：1ml 1支，10ml 1 支 实验过程中，注意不要将溶液撒入机器内部，如果发生上述情况，请及时清理干净。
1．比色皿透光率的检查 2．检查分光光度计的波长精度及重现性对测定有什么实际意义？ 4个比色皿在450nm、650nm的透光率
• （4）0.2mol/L KMnO 溶液 1．比色皿透光率的检查
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实验一 紫外－可见分光光度计的性能检验 一、实验目的1.掌握紫外－可见分光光度计性能的检验方法2.学会UV-1100型紫外－可见分光光度计的使用方法 二、实验原理分光光度计的性能的好坏，直接影响到测定结果的准确程度。
因此，要对仪器进行性能检查，以保证测定结果的准确性。
三、仪器和试剂UV －1100型紫外－可见分光光度仪 石英比色皿（一对） 擦镜纸K 2Cr 2O 7溶液 KMnO 4溶液 蒸馏水四、实验内容及操作步骤1. 比色皿的配对性 将蒸馏水注入到比色皿中，以其中一个比色皿作空白，在 440 nm 波长处分别测定其他各比色皿中的透光率。
2.波长精度的检查 用KMnO 4溶液的最大吸收波长525nm 为标准，在待测仪器上测绘KMnO 4溶液的吸收曲线，若测得的最大吸收波长在525±1nm 以内，则仪器的波长精度符合使用要求。
3. 重复性 以0.02mol/L 的H 2SO 4溶液的透光率为100%，用同一K 2Cr 2O 7溶液连续测定7次，求出极差，如小于0.5%，则重复性符合要求。
4.吸收值的准确度考察 取K 2Cr 2O 7溶液，在以下波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，如下表所示，其相对偏差在±1%以内，则吸收值的准确度符合要求。
波长/cm 235（最小）257（最大）313（最小） 350（最大） 吸收系数1%1E cm123.0～126.0 142.8~146.247.0~50.3105.5~108.5五、思考题1. 同种比色皿透光度的差异对测定有何影响？2. 检查分光光度计的重复性对测定有什么实际意义？实验二、吸收曲线的测绘及吸收系数的测定 一、实验目的1. 掌握测绘吸收曲线的方法2. 学会测定吸收系数 二、实验原理实验三、分光光度法测定槐花中总黄酮的含量一、实验目的1.掌握用标准曲线法测定槐花中总黄酮含量的方法2.巩固紫外－可见分光光度计的操作方法二、实验原理黄酮类化合物分子结构中多含有羰基和羟基等结构，这些结构可与金属盐类试剂如铝盐、铅盐等生成有色配合物。
铝盐比色法是指用三氯化铝或硝酸铝、亚硝酸钠同黄酮类化合物生成稳定的有色配合物，可用于定量分析。
三、仪器和试剂UV－1100型紫外－可见分光光度仪石英比色皿（一对）5% NaNO2溶液10% Al(NO3)3溶液NaOH试液芦丁对照品槐花药材其余试剂均为分析纯四、实验内容及操作步骤1. 对照品溶液的制备精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品50mg，置25ml量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀。
精密吸取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
（每1ml中含无水芦丁0.2mg）。
2. 标准曲线的制备精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分别置25ml量瓶中，各加水至5ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，在500nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
3. 样品测定取本品粗粉约1g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚适量，加热回流至提取液无色，放冷，弃去乙醚液。
再加甲醇90ml，加热回流至提取液无色，移至100ml量瓶中，用甲醇少量洗涤容器，洗液并入量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。
精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。
精密量取3ml，至25ml 量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至5ml”起依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量（μg），计算，即得。
槐花中含总黄酮以无水芦丁（C27H30O16）计，不得少于8.0%。
五、注意事项1、对照品和样品应同时显色2、显色剂加入的顺序、加入量和显色时间要正确六、思考题1.分光光度法有哪些影响因素？2.试述标准曲线法的优点。
实验四、薄层板的制备一、实验目的掌握薄层板的制板方法二、仪器和试剂天平（0.1mg）研钵玻璃板 10 cm×20cmCMC-Na水溶液蒸馏水95％乙醇（A.R）薄层层析用硅胶G（青岛海洋化工厂）三、实验内容及操作步骤1. 洗板选取板面平整的玻璃板，洗净后放置在薄层板放置架上阴干备用。
（要求：薄板应光滑、平整、不符水珠。
）2．匀浆将吸附剂1份（3.0g）和水3份在研钵中向同一方向研磨混合均匀。
3．铺制将已调制好的吸附剂匀浆倒至玻璃板板的一端，用研棒将匀浆引到玻板的各个边缘，轻轻震动，使吸附剂均匀铺开成一薄层。
置水平台上阴干。
4．活化将阴干的薄层板至于110℃烘箱中活化30分钟，置于有干燥器中备用。
要求：制备好的薄层板应检查其均匀度,即在反射光及透射光的检视下其表面应均匀、光滑、平整、无麻点、无气泡、无破损及无污染。
四、注意事项1.玻璃板的规格有多种10*20cm、20*20cm等，可根据实验需要选择不同规格的玻璃板。
2. CMC-Na水溶液做为薄层板制备的粘合剂，《中国药典》2005年版规定其浓度在2‰～5 ‰，其浓度大小决定了所制备薄层板的硬度，本次实验粘合剂浓度为3 ‰。
3.除硅胶GF254外，薄层用硅胶还有硅胶G、硅胶H、硅胶GF365、硅胶GH254、硅胶GH365等，不同种类的硅胶所制备出的薄层板性能不同。
本次试验所用的硅胶GF254是指一种含有煅石膏的硅胶并在其硅胶中加入了一种在254nm下显强荧光背景的荧光剂，主要用于分离、检视在紫外和可见光下物无吸收的成分。
五、思考题1．薄层板的铺制过程中应注意哪些问题？实验五薄层色谱定性分析（五味子的定性鉴别）一、实验目的1. 掌握薄层色谱的定性分析方法2. 熟悉薄层板的点样方法二、实验原理中药五味子中，五味子甲素为其主要有效成分之一，为了更好的进行定性鉴别，选用五味子甲素对照品和五味子对照药材进行对照，根据相同的组分在相同的条件下，应该有相同的颜色和比移值来作为定性鉴别的依据。
三、仪器与试剂毛细管薄层板 10 cm×20cm所用试剂均为分析纯五味子粉末四、实验内容及操作步骤取五味子粉末1g，加三氯甲烷20ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品液。
另取五味子对照药材1g，同法制成对照药材溶液。
再取五味子甲素对照品，加三氯甲烷制成每ml 含1mg的对照品溶液。
吸取上述三种溶液各2μl，点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15∶5∶1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
五、注意要点1.五味子有南、北之分。
《中国药典》2005年版（一部）所收载的五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis(TurcZ) Bail的干燥成熟种子。
习称“北五味子”。
2.本次实验操作分为点样、展开、检视与记录数据四个过程。
具体操作要点如下：2.1点样：在干燥、清洁的环境中用毛细管分别吸取对照品溶液、对照药材溶液和样品溶液于同一硅胶GF254薄层板上，点样基线距离底边10~15mm，点样圆点不大于3mm，接触点样时勿损伤薄层板表面。
点间距离不少于8mm。
2.2展开：浸入展开剂的深度为距底边5mm为宜。
上行展开10cm左右，达到展距后取出薄层板、晾干、待检测。
（展开之前应注意预平衡：在双槽展开箱的一侧槽内加入适量的展开剂，密闭，一般保持15～30 min，待容积蒸汽平衡后，应迅速将薄层板放入展开箱中，立即密闭，展开。
）2.3检视与记录数据：将展开、晾干的薄层板置于254mm紫外灯下检视，观察供试品溶液所显示的主斑点的颜色和位置（Rf值）与对照品溶液、对照药材溶液是否一致。
当供试品溶液主斑点与对照品、对照药材能对应时，即可认为该药材为药典收载五味子。
六、思考题1．如何克服薄层展开过程中的边缘效应？引起边缘效应的因素有哪些？实验六、高效液相色谱仪的使用一、实验目的1. 掌握高效液相色谱仪的使用方法2.了解高效液相色谱仪的结构二、仪器和试剂L-2000液相色谱仪（紫外检测器）；C18反相键合色谱柱（250 mm×4.6 mm）；微量进样器（25μl）；过滤器（0.45μm）及脱气装置；苯、甲苯、萘；甲醇（色谱纯）；重蒸馏水（新制）；三、实验内容与步骤（一）．流动相的预处理：1．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。
2．对过滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
（二）．安装色谱柱（三）．液相色谱仪的使用方法1.启动液相色谱仪：(1)检查仪器的电源线是否已连接。
(2)打开仪器的电源开关。
(3)打开输液泵电源。
(4)打开检测器电源。
（在平衡和冲洗色谱柱时请将检测器关闭）2..排除管道内空气：(1)将吸滤头放入经过处理后的溶剂内。
(2)将输液泵阀打开（逆时针旋转180º）。
(3)按下pump on/off键，开启输液泵。
(4)按下purge键，开始排管道内气泡。
(5)仔细观察管路，至无气泡流出时，再次按下purge键，暂停排液。
(6)按下pump on/off键，关闭输液泵。
(7)顺时针旋紧输液泵阀。
3.泵流速的设定：(1)按下manual键。
(2)按下1键，按ent键确认。
(3)输入需要的流速，按ent键确认。
4.检测器波长的设定：按下wl键，输入需要的波长，按ent键确认。
5.打开T2000P色谱工作站：(1)选择实时进样通道1，进入样品信号采集界面。
(2)鼠标左键点击“方法”，修改或者新建分析方法。
(3)鼠标左键点击“谱图”，设置谱图显示。
(4)在“停止时间”项下输入采集停止时间。
(5)在“路径及文件名规则”项下输入文件保存路径。
(6)鼠标右键点击“使用方法”项下分析方法，选择分析方法。
6.色谱柱预平衡：按下pump on/off键，开启输液泵。
至基线平稳时可开始进样。
7．进样：(1)进样前按A/Z键将基线调零。
(2)将进样阀逆时针旋至于load位，插入进样针，进样。
(3)进样后立即将进样阀顺时针旋至injecti位。
工作站开始采集信息。
8.数据采集完毕后，点击停止进样。
9.点击“再处理”和“报告”图标对图谱进行再处理，出报告图。
10.实验完毕后冲洗色谱柱。
11.关闭工作站，关闭输液泵电源，关闭检测器电源、关闭仪器电源。
附: 练习液相色谱仪使用的色谱条件、样品溶液和进样量色谱条件流动相为甲醇∶水（80∶20）；固定相为C18反相键合色谱柱；检测波长为254nm；流速：1ml/min。
样品溶液含苯、甲苯、萘浓度分别为1μg/ml的甲醇溶液。
进样量：10μl。
四、问题讨论流动相在使用前为何要过滤和脱气？实验七高效液相色谱定性及定量分析——中药赤芍中芍药苷的定性鉴别和含量测定（色谱分析设计实验）一、实验目的1.掌握利用高效液相色谱法进行定性及定量分析2.巩固高效液相色谱仪的使用方法二、实验内容中药赤芍中芍药苷的高效液相色谱分析三、实验提示赤芍为常用中药，主要含芍药苷，并含氧化芍药苷、芍药内酯苷、牡丹酚、挥发油等，赤芍中的芍药苷是其主要活性成分，为了控制其含量，对赤芍中的芍药苷进行含量测定。