紫外可见分光光度计及其应用
紫外可见分光光度计的在临床检验中发展和应用

紫外可见分光光度计及其在临床检验中的发展和应用摘要:紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理部门,紫外可见分光光度计都有广泛而重要的应用。
紫外可见分光光度计有着较长的历史,其主要理论框架早已建立,制作技术相对成熟。
在临床检验中的应用更是广泛,现在国内几乎每个乡镇医院的检验科都有紫外可见分光光度计,构成紫外可见分光光度计的光、机、电、算等任何一方面的新技术都可能再推动紫外可见分光光度计整体性能的进步。
在追求准确、快速、可靠的同时,小型化、智能化、在线化、网络化成为了现代紫外可见分光光度计新的增长点。
关键词:紫外可见分光光度计,检验医学l9世纪50年代,首先出现了用千目观比色法的纳氏(Nessler)比色管,不久有杜氏(Duboscq)比色计,后者一直沿用到本世的40年代。
1911年,使用硒光电池的Berg比色计制成。
而这种光电比色计是分光光度计的雏形和基础。
本世纪3O年代看,由于秉灯、氢灯和各种棱镜,光学器材和电学器材的发展,美国Beckman公司的第~台分光光度计终于在1941年问世。
至60年代,紫外可见光分光光度计(UV—V 计)基本上取代了光电比色计 1957年,美国Technicon 公司按照Skeggs医生的方案,推出了世界上第一台自动化的临床生化分析仪。
60年代以后.各种自动化分析仪层出不穷。
特别是70年代起,各种分光光度计与计算机联姻,明显地扩大了仪器功能现在,分光光度计作为综台光学、电学(尤其是计算机技术)和精密机械学的发展和应用,已广泛应用于医学、食品、工业和农业等许多领域。
其中以uV—V计系列彰响最广、应用最普遍,并且还是其他分光光度计(如原子吸收分光光度计)的基础。
紫外可见分光光度法具有仪器价格低廉适用性广泛,尤其是采用微机控制以来,该技术得到了突飞猛进的发展,成为检验医学中必备的一个常规仪器,本文将重点介绍uv—v 计的原理,结构,特点及其在临床检验医学中的发展和应用。
(完整版)紫外可见分光光度计--原理及使用

应用分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。
常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。
基本原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息,可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。
朗伯-比尔定律:当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比,即A= kcl式中比例常数k与吸光物质的本性,入射光波长及温度等因素有关。
c为吸光物质浓度,l为透光液层厚度。
组成各种型号的紫外-可见分光光度计,就其基本结构来说,都是由五个基本部分组成,即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。
1.光源在紫外可见分光光度计中,常用的光源有两类:热辐射光源和气体放电光源。
热辐射光源用于可见光区,如钨灯和卤钨灯;气体放电光源用于紫外光区,如氢灯和氘灯。
2.单色器单色器的主要组成:入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。
单色器质量的优劣,主要决定于色散元件的质量。
色散元件常用棱镜和光栅。
3.吸收池吸收池又称比色皿或比色杯,按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池,前者不能用于紫外区。
吸收池的种类很多,其光径可在0.1~10cm之间,其中以1cm光径吸收池最为常用。
4、检测器检测器的作用是检测光信号,并将光信号转变为电信号。
现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。
5、信号显示系统常用的信号显示装置有直读检流计,电位调节指零装置,以及自动记录和数字显示装置等。
操作步骤操作之前1.1开启电源进行初始化开启主机电源,分光光度计将按屏幕所显示的项目进行自检和初始化,如下图所示。
所有项目检测完毕,初始化结束,整个过程大约需要4min(若使用多池检测需5min)。
每个项目进行初始化操作时将被加亮显示,当初始化完成后,该项右边的星标也将加亮显示。
紫外可见分光光度计的主要部件及应用

紫外可见分光光度计的主要部件及应用下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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紫外可见分光光度计 普析

紫外可见分光光度计普析紫外可见分光光度计(UV-Vis spectrophotometer)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物、环境等领域的研究和实验中。
本文将从紫外可见分光光度计的原理、应用以及操作步骤等方面进行介绍。
一、紫外可见分光光度计的原理紫外可见分光光度计是利用物质对紫外可见光的吸收特性进行定量分析的仪器。
根据光的波长范围,可分为紫外光区和可见光区两部分。
紫外光区的波长范围为200-400 nm,可见光区的波长范围为400-800 nm。
紫外可见分光光度计的工作原理是通过光源产生的光经过样品后,被光电二极管或光电倍增管接收,形成光谱图,再通过计算机进行数据处理和分析。
在分析过程中,样品溶液的吸收特性会使光强发生变化,根据吸光度与物质浓度之间的线性关系,可以通过测量吸光度来确定物质的浓度。
二、紫外可见分光光度计的应用紫外可见分光光度计在科研和实验中有着广泛的应用。
以下是其中几个常见的应用领域:1. 生物化学分析:紫外可见分光光度计可用于蛋白质、核酸、酶等生物大分子的浓度测定和纯度分析,如蛋白质含量的测定、核酸的纯度检测等。
2. 药物分析:紫外可见分光光度计可用于药物的含量测定、质量控制和稳定性研究,如药物溶液的吸光度测定、药物的光解动力学研究等。
3. 环境监测:紫外可见分光光度计可用于水质、大气和土壤等环境样品的污染物分析和监测,如水中重金属离子的测定、大气中挥发性有机物的测定等。
4. 食品安全检测:紫外可见分光光度计可用于食品中添加剂、农药残留、重金属等有害物质的检测,如食品中硝酸盐含量的测定、食品中防腐剂的测定等。
三、紫外可见分光光度计的操作步骤使用紫外可见分光光度计进行实验时,需要按照以下步骤进行操作:1. 打开仪器电源,并预热一段时间,使光源和光电二极管稳定工作。
2. 根据实验需要选择合适的光源和检测器,设置光的波长范围。
3. 取一定量的样品溶液,注入样品池中,并调节样品池的位置,使光线通过样品溶液。
紫外可见分光光度计范围

紫外可见分光光度计范围紫外可见分光光度计是一种常用的光谱分析仪器,用于测量物质在紫外可见光波段的吸收和透过性质。
它能够提供物质吸收光谱的信息,帮助我们了解物质的组成和结构。
本文将介绍紫外可见分光光度计的基本原理、应用范围以及其在科学研究和工业生产中的重要意义。
一、紫外可见分光光度计的基本原理紫外可见分光光度计的基本原理是利用物质对特定波长光的吸收和透过性质来测量其浓度或含量。
它通过光源产生的连续光束,经过样品后,被光电传感器接收并转换为电信号。
根据样品的吸收特性,我们可以得到样品的吸光度,从而推算出其浓度或含量。
二、紫外可见分光光度计的应用范围紫外可见分光光度计广泛应用于医药、化学、生物、环境科学等领域。
它可以用于测定药品的纯度和含量,监测水质和空气质量,分析生物样品中的成分等。
以下是几个具体的应用范例:1.药物分析:紫外可见分光光度计可用于测定药物的纯度、含量和稳定性。
通过测量药物在特定波长下的吸收光谱,我们可以判断药物的质量,并及时调整生产工艺,确保药品的安全性和有效性。
2.环境监测:紫外可见分光光度计可用于监测水体和大气中的污染物含量。
例如,我们可以通过测量水体中溶解有机物的吸光度来评估水质状况,或者通过测量大气中气体的吸光度来监测空气污染物的浓度。
3.生物分析:紫外可见分光光度计可用于测定生物样品中的蛋白质、核酸和其他生物分子的浓度。
通过测量这些分子在紫外可见光波段的吸收光谱,我们可以了解其结构和功能,并进一步研究生物过程和疾病机制。
4.食品安全:紫外可见分光光度计可用于检测食品中的添加剂、污染物和有害物质。
例如,我们可以通过测量食品中色素的吸光度来判断其是否合格,或者通过测量食品中残留农药的吸光度来评估其安全性。
三、紫外可见分光光度计的重要意义紫外可见分光光度计在科学研究和工业生产中具有重要的意义。
它不仅为我们提供了分析物质的工具,还为我们研究物质的性质和反应机制提供了重要的信息。
以下是紫外可见分光光度计的几个重要意义:1.质量控制:紫外可见分光光度计可以用于药品、食品、化妆品等产品的质量控制。
紫外可见光分光光度计在环保检测领域的应用探讨

紫外可见光分光光度计在环保检测领域的应用探讨一、紫外可见光分光光度计的基本原理和特点紫外可见光分光光度计是一种用于测量样品溶液浓度以及化学反应速率等的光学仪器。
其工作原理是通过光的吸收特性来研究物质的性质和结构。
紫外可见光分光光度计主要利用紫外可见光谱的原理,测量样品溶液对光的吸收程度,从而得出目标物质的浓度。
其主要特点是快速、高灵敏度和广泛的应用范围。
二、紫外可见光分光光度计在环保检测中的应用1. 水质监测水是人类生活中不可或缺的资源,而水质的好坏直接关系到人们的健康和生活质量。
紫外可见光分光光度计可以用于监测水中重金属、溶解有机物和水中污染物的含量。
通过测量水中有害物质的浓度,可以及时发现水质的改变,并采取相应的措施进行处理,保护饮用水的安全。
2. 大气污染监测随着工业化进程的加快,大气中的污染物也越来越多。
紫外可见光分光光度计可以用于监测大气中各种污染物的浓度,如二氧化硫、氮氧化物和臭氧等。
通过监测大气污染物的含量,可以及时采取措施减少污染,保护大气环境的质量。
3. 土壤污染监测在农业和工业生产中,土壤污染也是一个严重的问题。
紫外可见光分光光度计可以用于监测土壤中重金属、有机物和其他污染物的含量,通过测量土壤样品对光的吸收程度来判断土壤的污染程度,从而制定相应的治理措斀,保护土壤资源和农产品的品质。
三、紫外可见光分光光度计在环保检测中的重要性紫外可见光分光光度计在环保检测中起到了至关重要的作用。
它能快速、准确地测量样品中目标物质的含量,为环保工作提供了重要的数据支持。
紫外可见光分光光度计的高灵敏度,使其能够检测到微量的污染物,保障了环境监测的全面性和准确性。
紫外可见光分光光度计的广泛应用范围,可以满足不同环境的检测需求,为环保监测工作提供了多样化的技术支持。
四、紫外可见光分光光度计在环保检测中的未来发展方向随着科技的不断发展,紫外可见光分光光度计在环保检测领域也将不断向前发展。
未来,紫外可见光分光光度计的灵敏度和分辨率将进一步提高,可以检测到更低浓度的目标物质。
紫外可见分光光度计范围

紫外可见分光光度计范围紫外可见分光光度计是一种常用的实验室仪器,用于测量物质在紫外和可见光区域的吸收和透射能力。
它可以帮助科学家和研究人员分析和确定物质的结构、浓度和反应性质。
本文将介绍紫外可见分光光度计的原理、应用范围和使用注意事项。
一、原理紫外可见分光光度计基于物质对不同波长光的吸收能力不同的原理。
当物质受到光的照射时,会吸收特定波长的光,使其能级发生跃迁。
通过测量物质对光的吸收程度,可以得到物质的吸收光谱。
紫外可见分光光度计利用光源发出连续的光,经过样品后,光会被检测器检测到,产生一个光谱图。
根据光谱图上的吸收峰值的强度和波长,可以推断出物质的浓度和化学结构。
二、应用范围紫外可见分光光度计广泛应用于各个领域的科研和实验室工作中。
以下是一些常见的应用范围:1. 化学分析:紫外可见分光光度计可以用于测定溶液中金属离子、有机物和其他化合物的浓度。
通过测量吸收峰值的强度,可以快速准确地确定样品中物质的含量。
2. 生物医学研究:紫外可见分光光度计可以用于测量DNA、蛋白质和其他生物大分子的浓度和纯度。
这对于研究细胞生物学、遗传学和药物研发等领域非常重要。
3. 环境监测:紫外可见分光光度计可以用于监测水和大气中的污染物。
通过测量样品中污染物的吸收能力,可以评估环境质量并制定相应的污染治理措施。
4. 食品安全:紫外可见分光光度计可以用于检测食品中的添加剂、农药残留和重金属等有害物质。
这对于保障食品安全和消费者健康非常重要。
三、使用注意事项在使用紫外可见分光光度计时,需要注意以下事项:1. 样品处理:样品应根据实验要求进行适当的处理,如稀释、过滤和提取等。
这样可以确保测量结果的准确性和可靠性。
2. 光程选择:光程是光通过样品的距离,通常使用1 cm的光程。
如果样品浓度较低,可以选择更长的光程以增加吸光度。
3. 波长选择:根据实验需求选择合适的波长范围进行测量。
紫外光谱通常在200-400 nm范围内进行,可见光谱通常在400-800 nm范围内进行。
(整理)紫外可见分光光度计及其应用

科技论文写作期末作业西北民族大学生命科学与工程学院11级生物技术(1)班符朝方学号:P112114841紫外可见分光光度计及其应用李诗哲西北民族大学生命科学与工程学院兰州730100摘要:紫外可见分光光度计对于分析人员来说是最有用的分析工具之一,几乎每一个分析实验室都离不开紫外可见分光光度计。
下面介绍了紫外分光光度计的原理、结构及其特点,并介绍了它在生物领域的应用及其他方面的应用1引言:紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理行业,紫外可见分光光度计都获得了日益广泛的应用。
2原理:紫外可见分光光度法紫外可见分光光度法【1】是根据物质分子对波长为200~760nm 的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。
操作简单、准确度高、重现性好。
波长长的光线能量小,波长短的光线能量大。
分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了人射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
2.1有机化合物的紫外可见吸收光谱【2】有机化合物的电子跃迁与紫外可见吸收光谱有关的电子有三种[[4],即形成单键的σ电子、形成双键的π电子以及未参与成键的n电子。
跃迁类型有:σ→σ*、n→σ*,π→π*、n→π四种。
饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*,n→σ*跃迁,吸收峰一般出现在真空紫外区,吸收峰低于200nm,实际应用价值不大。
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紫外可见分光光度计及其应用科技论文写作期末作业西北民族大学生命科学与工程学院11级生物技术(1)班符朝方学号:P112114841紫外可见分光光度计及其应用李诗哲西北民族大学生命科学与工程学院兰州 730100摘要:紫外可见分光光度计对于分析人员来说是最有用的分析工具之一,几乎每一个分析实验室都离不开紫外可见分光光度计。
下面介绍了紫外分光光度计的原理、结构及其特点,并介绍了它在生物领域的应用及其他方面的应用1引言:紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理行业,紫外可见分光光度计都获得了日益广泛的应用。
2原理:紫外可见分光光度法【1】紫外可见分光光度法是根据物质分子对波长为200~760nm的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。
操作简单、准确度高、重现性好。
波长长的光线能量小,波长短的光线能量大。
分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了人射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
【2】2.1有机化合物的紫外可见吸收光谱有机化合物的电子跃迁与紫外可见吸收光谱有关的电子有三种[[4],即形成单键的σ电子、形成双键的π电子以及未参与成键的n电子。
跃迁类型有:σ?σ*、n?σ*,π?π*、n?π四种。
饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ?σ*,n?σ*跃迁,吸收峰一般出现在真空紫外区,吸收峰低于200nm,实际应用价值不大。
不饱合机化合物的电子跃迁类型为n?π*,π?π*跃迁,吸收峰一般大于200nm.2.2有机化合物的吸收带吸收带(absorption band):在紫外光谱中,吸收峰在光谱中的波带位置。
根据电子及分子轨道的种类,可将吸收带分为四种类型。
(1)R吸收带(2)K吸收带(3)B吸收带(4)E吸收带2.3无机化合物的紫外可见吸收光谱无机化合物的UV-Vis光谱吸收光谱主要有:电荷迁移跃迁及配位场跃迁。
(1)电荷迁移光谱某些分子既是电子给体,又是电子受体,当电子受辐射能激发从给体外层轨道向受体跃迁时,就会产生较强的吸收,这种光谱称为电荷迁移光谱。
如苯酚基取代物在光作用下的异构反应。
(2)配位跃迁光谱在配体存在下过渡金属元素5个能量相等的d轨道和斓系、婀系7个能量相等的f轨道裂分,吸收辐射后,低能态的d电子或f电子可以跃迁到高能态的d或f 轨道上去。
绝大多数过渡金属离子都具有未充满的d轨道,按照晶体场理论,当它们在溶液中与水或其他配体生成配合物时,受配体配位场的影响,原来能量相同的d轨道发生能级分裂,产生d-d电子跃迁。
必须在配体的配位场作用下才可能产生,所以称为配位场跃迁;配体配位场越强,d轨道分裂能越大,吸收波长越短。
吸收系数。
max较小(102),很少用于定量分析;多用于研究配合物结构及其键合理论。
3紫外分光光度计的结构、特点、用途、应用范围【3】3.1紫外可见分光光度计的结构紫外可见分光光度计主要由辐射源、单色器、试样容器、检测器和显示装置等部分组成。
辐射源:必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱,如钨灯、卤钨灯(波长范围350~2500纳米),氖灯或氢灯(180~460纳米),或可调谐染料激光光源等。
单色器:它由人射、出射狭缝、透镜系统和色散元件(棱镜或光栅)组成,是用以产生高纯度单色光束的装置。
其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。
试样容器:又称吸收池。
供盛放试液进行吸光度测量之用,分为石英池和玻璃池两种,前者适用于紫外到可见区,后者只适用于可见区。
容器的光程一般为0.5一10厘米。
检测器:又称光电转换器。
常用的有光电管或光电倍增管,后者较前者更灵敏,特别适用于检测较弱的辐射。
近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器,具有快速扫描的特点。
显示装置:这部分装置发展较快。
较高级的光度计,常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等,可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
3.2主要特点:3.2.1应用广泛在国际上发表的有关分析的论文中,光度法约占28% 。
由于各种各样的无机物和有机物在紫外一可见区域都有吸收,因此均可借此方法加以测定。
在食品行业,紫外可见分光光度计被广泛应用于食品检测之中,得到越来越多的重视。
3.2.2仪器价格相对低廉且分析成本低紫外可见分光光度计价格相对低廉,分析成本低,在使用过程中仪器几乎没有什么耗损。
食品企业大多属于中小企业,规模不大且利润薄,降低食品检测费用尤为重要,用紫外可见分光光度计作为主要检测仪器可以大大减轻企业检测成本紫外可见分光光度计具有灵敏度高、选择性好、准确度高、使用浓度范围广、分析成本低、操作简便、快速、应用广泛等特点。
3.23仪器类型:紫外可见分光光度计主要分为单波长单光束直读式分光光度计、单波长双光束自动记录式分光光度计和双波长双光束分光光度计三种类型。
3.2.4应用范围:紫外可见分光光度计主要应用范围有:定量分析、定性和结构分析、反应动力学研究、研究溶液平衡等。
定量分析:广泛用于各种物料中微量、超微量和常量的无机和有机物质的测定。
定性和结构分析:紫外吸收光谱还可用于推断空间阻碍效应、氢键的强度、互变异构、几何异构现象等。
反应动力学研究:研究反应物浓度随时间而变化的函数关系,测定反应速度和反应级数,探讨反应机理。
研究溶液平衡:如测定络合物的组成、稳定常【4】3.2.5操作简便、快速对一些保质期较短的食品检测要求操作简便、快速,比如鲜牛奶的保质期短(仅1天时间),对它的检测必须要求简便、快速,用紫外可见分光光度计就可以很好满足此要求。
3.2.6准确度高对于一般的分光光度法来说,浓度测量的相对误差在1 %-3%范围内,如采用示差分光光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
4紫外分光光度计在生物领域的应用【5】4.1光度测量在食品生产中为了保证有颜色的饮料(如可乐、果汁及茶饮料)产品的颜色一致,可以在可见光区用紫外可见分光光度计来测定其吸光度值,使色差符合产品要求。
在发酵业中也可通过测定吸光度值来确定产品的发酵完成程度。
对于一些成分比较单一的产品也可通过测定吸光度值来确定产品合格与否。
比如,判定营养增强剂维生素B1的质量就可以在400 nm下测定其吸光度值,当其值不超过0.020时,即可确定为合格品。
.2成分的定性分析物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了人射光中的某些特定波长的光能量,相应发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子?原子和不同的分子空间结构,其吸收光熊量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特性波长处的最大吸收峰(峰值)和波形图来判断某种物质是否存在。
在食品生产中会使用一些食品添加剂,为了确定食品添加剂的质量,可以用紫外可见分光光度计对其进行光谱扫描。
例如,对食品中涉及的一些复合甜味剂、复合防腐剂和复合鲜味剂等就可以用紫外可见分光光度计进行一个全面扫描以排除违禁添加剂的使用。
另外,此方法还可以在物质结构分析方面作为红外光谱(IR)、核磁共振((NMR)、质谱(MS)等方法的辅助手段。
【6】4.2成分的定量分析对于食品卫生安全检测中一些含量需要严格控制的成分项目可以用紫外可见分光光度计来准确检测。
食品中常用紫外可见分光光度计测定。
4.3 DNA/蛋白分析DNA/蛋白质为生物大分子,所产生的紫外光吸收往往是其分子内的小基团所引起的,例如嘌呤碱、嘧啶碱、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和肽键等。
嘌呤碱、嘧啶碱以及由它们参与组成的核昔、核苷酸及核酸对紫外光有强烈的吸收,在吸收波长260 nm处有最大吸收值。
在蛋白质分子中,酪氨酸(TYR)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸((Trp)残基的苯环含有共扼双键,该共扼双键对紫外光有吸收(其中最大吸收Tyr在吸收波长274 nm; Phe在吸收波长257 nm; Trp在吸收波长280 nm),从而导致蛋白质对紫外光有吸收。
肽键对紫外光的最大吸收在吸收波长238 nm。
利用这个特性可以准确、可靠地测定乳制品中蛋白质含量。
【7】二、紫外可见分光光度法在共辘亚油酸定量分析中的应用采用UV- 9100型紫外可见分光光度计,测定了由植物油脂制得的共扼亚油酸共扼亚油酸甲酯、共扼亚油酸三甘酯在不同浓度时在200nm- 300nm的吸光度,绘制出样品在不同浓度时的吸光度曲线,找出适宜的浓度范围,用Microcal Software Origin Version 4. 0做回归分析,由线性回归给出样品浓度和吸光度的线性关系,为对实验结果进行检验和校正,采用惠普8452A二极管阵列分光光度计测定了同一批样品在不同浓度范围内的吸光度,利用PEAutosystem XL- Turl>oMass测得样品中共扼亚油酸准确浓度,结合回归系数给出了用紫外可见分光光度计快速测定样品中共扼亚油酸含量的经验公式。
【8】4.4核酸分析工作中的应用紫外可见分光光度计在氨基酸分析中的应用, 主要是用来对氨基酸的定量检测。
因为氨基酸对紫外光的主要吸收波长为230nm, 所以, 我们只要采用光度测量模式, 将紫外可见分光光度计仪器的波长GOTO 到氨基酸的最大吸收峰230nm 上, 就可测试其吸光度大小, 从而计算出氨基酸的含量。
但是, 因为氨基酸分析时, 一般是将它溶解在水中, 而水在230 nm 附近有很多干扰吸收线, 所以, 在用紫外可见分光光度计对氨基酸分析检测时, 要注意防止干扰的问题。
此外, 还需注意: 只有少数氨基酸有紫外吸收, 多数氨基酸无紫外吸收或很弱, 测定时要衍生化后再测。
4.5糖类分析测试工作中的应用紫外可见分光光度计在糖的分析中, 主要是作定量检测。
因为糖对紫外光的主要吸收波长为218nm, 所以, 对糖类进行分析时, 只要采用光度测量模式, 将紫外可见分光光度计仪器的波长GOTO 到氨基酸的最大吸收峰218 nm上, 就可测试其吸光度大小, 从而计算出糖的含量。
5紫外可见分光光度计在其他领域的应用5.1药品分析中的应用我国和世界上许多国家的药典都明确规定, 许多药品都要求用紫外可见分光光度计作质量控制。