094渗透压摩尔浓度检查中的一个特殊现象及原因分析
渗透现象及体液渗透压的测定
渗透Hale Waihona Puke 度渗透压2.红细胞现象
注意事项
渗透压计使用前需要预热，冷冻液达到-9度
之后才能进行测量。 在定标和测量中应做到每次换样品必须用蒸 馏水冲洗探头并用卫生纸擦拭干净，保证下 一个样品的测量不受前一个样品在探头上残 留的污染。
思考题
哪些原因会产生早冻现象？
哪些原因会产生不冻现象？ 渗透压在医学上有那些应用？
三、内容
1.溶液的配制
分别按要求配制低渗、等渗、高渗溶液备用
2.溶液和尿液的渗透压测定
用渗透压计测定所配制的低渗、等渗、高渗溶液、尿液、饮料、 市售PBS缓冲液等。
3.观察渗透现象
在显微镜下观察红细胞在低渗、等渗、高渗溶液中的形态变化
四、实验结果
1.测定结果
室温t= ℃
样品 低渗 等渗 高渗 尿样
渗透现象及体液渗透压的测定
一、目的
1.了解渗透压计的测定原理和方法 2.用渗透压计测定低渗、等渗、高渗和尿液 等溶液的渗透浓度 3.用显微镜观察红细胞在低渗、等渗和高渗 溶液中的不同形态
二、原理
间接测量渗透压的方法有：蒸汽压下降法、沸点上升 法和凝固点降低法等，最常见的是凝固点降低法。该法操 作方便，精度高，测定迅速，样品用量少且对生物样品无 变性作用。 欲知某一溶液的质量渗透浓度Cos ，只要测其冰点下 降值即可。规定溶液的渗透浓度在280～320mmol/L范围内 为等渗溶液，低于或高于此范围的为低渗或高渗溶液。 由于渗透压值与冰点降低值呈线性关系，FM-9X型冰 点渗透压计已将冰点降低值转换成渗透压单位（重量渗透 压摩尔浓度，简称重摩渗透压mOsm/kg）显示读数。
渗透压实验报告
1. 理解渗透压的概念及其影响因素；2. 掌握渗透压实验的基本操作方法；3. 分析渗透压对细胞形态的影响。
二、实验原理渗透压是指溶液中溶质分子通过半透膜向浓度较低溶液一侧移动的压力。
半透膜只允许溶剂（通常是水）或部分溶质（一般为小分子物质）透过，而不允许其他溶质（一般为大分子物质）透过。
渗透压的大小与溶液中溶质的浓度成正比。
本实验通过观察不同浓度溶液对红细胞形态的影响，验证渗透压的存在及其对细胞形态的影响。
三、实验材料与仪器1. 材料：新鲜红细胞、生理盐水、高渗盐水、低渗盐水；2. 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、吸管、试管等。
四、实验步骤1. 将新鲜红细胞用生理盐水洗涤3次，以去除红细胞表面的血浆蛋白；2. 将洗涤后的红细胞分为三组，分别加入生理盐水、高渗盐水、低渗盐水；3. 每组红细胞用显微镜观察其形态变化，记录结果；4. 对比不同浓度溶液下红细胞形态的变化，分析渗透压对细胞形态的影响。
五、实验结果与分析1. 生理盐水组：红细胞形态正常，呈双凹圆碟形；2. 高渗盐水组：红细胞体积缩小，边缘开始皱缩，细胞膜出现皱褶；3. 低渗盐水组：红细胞体积膨胀，细胞膜破裂，血红蛋白逸出。
实验结果表明，渗透压对红细胞形态有显著影响。
高渗盐水溶液中，红细胞因失水而皱缩；低渗盐水溶液中，红细胞因吸水而膨胀直至破裂。
这说明渗透压的存在，以及渗透压对细胞形态的影响。
1. 渗透压是溶液中溶质分子通过半透膜向浓度较低溶液一侧移动的压力；2. 渗透压对细胞形态有显著影响，高渗溶液使细胞皱缩，低渗溶液使细胞膨胀直至破裂；3. 本实验成功验证了渗透压的存在及其对细胞形态的影响。
七、实验讨论1. 实验过程中，操作要轻柔，以免破坏红细胞；2. 实验结果可能与实验条件、试剂质量等因素有关；3. 在实际应用中，渗透压对生物体的影响具有重要意义，如维持细胞内环境稳定、调节血液流动等。
八、实验总结本次实验通过观察不同浓度溶液对红细胞形态的影响，成功验证了渗透压的存在及其对细胞形态的影响。
渗透压摩尔浓度测定法
冰点下降法原理：
• 在理想的稀溶液中，冰点下降符合 △ Tf ＝ Kf×m 的关系，式中 △Tf 为冰点下降，Kf为冰点下降常 数 ( 实验表明１ mol 的任何非电解质溶液（等于 6.023E23个分子颗粒数）溶解于１kg水中，则使 水的冰点温度由０℃下降至 -1.860℃) ， m 为重量 摩尔浓度。 • 而渗透压符合△Po＝Ko×m的关系，式中Po 为渗 透压，Ko 为渗透压常数，m为溶液的重量摩尔浓 度。 • 由于两式中的浓度等同，故可以用冰点下降原理 测定溶液的渗透压摩尔浓度。
渗透压在生物体中起到重要作用：
• 每一个活细胞的表面膜具有半透膜特性， 即水可以透过，而溶解于水中的其它无机 物和有机物不能随意透过。水透入细胞中， 可产生一定的压力，从而保持细胞有一定 的形状和弹性。
• 机体的体液中主要成分是水，其中溶有许 多有机物和无机物。在正常状态下，体液 中的物质成分相当稳定，它们在细胞内外 的分布和交换亦处于动态平衡中。体液中 物质成分的稳定保证了体液作为一种溶液 所具有的一系列理化性质，如密度、酸碱 度、渗透压、离子强度、电导率、表面张 力、介电常数等的相对稳定。体液维持一 定的渗透压，是构成机体内环境相对稳定 的最重要条件之一。
不使用半透膜的间接方法：
• 冰点下降：药典采用，操作简便，精确度 高，测量迅速，对生物样品无不良影响。 • 蒸气压下降：简单快速，样品用量极微小。 • 沸点上升：因在高温下进行，对生物样品 有影响，会引起蛋白质等胶体物质变性或 分解。与冰点下降法比较，灵敏度较低。
依数Байду номын сангаас：
• 由物理化学的论述得知，稀溶液中溶剂的 蒸汽压降低、冰点下降、沸点升高（溶质 不挥发）和产生渗透压（有半透膜条件下） 的数值，仅与一定量溶液中溶质的质点 （分子、离子）数有关，而与溶质的本性 无关，这些性质称其为稀溶液的“依数 性”。
2024年高级卫生专业技术资格考试微生物检验技术(094)(正高级)试卷及答案指导
2024年高级卫生专业技术资格考试微生物检验技术(094)(正高级)模拟试卷(答案在后面)一、多项选择题（本大题有30小题，每小题1分，共30分）1、以下哪些属于微生物检验技术的基本步骤？（）A. 样品采集与处理B. 微生物分离纯化C. 微生物鉴定D. 药物敏感试验E. 报告撰写2、在微生物分离纯化的过程中，以下哪种方法常用于分离革兰氏阳性菌？（）A. 霍夫曼平板法B. 沙氏平板法C. 肉汤培养法D. 培养基稀释法E. 稀释涂布平板法3、下列关于细菌培养基的选择与配制的说法正确的是：A. 所有细菌的培养都使用相同的培养基B. 选择培养基时需要考虑目标菌株的营养需求和生长条件C. 培养基配制完成后无需灭菌即可使用D. 鉴定肠道致病菌常用SS琼脂作为选择性培养基E. 血平板常用于初次分离培养细菌4、关于抗生素敏感性试验，以下叙述正确的是：A. 抗生素敏感性试验仅对革兰氏阳性菌有意义B. MIC（最小抑菌浓度）法可以定量测定细菌对抗生素的敏感度C. 纸片扩散法适用于所有临床分离菌株的药敏测试D. 抗生素敏感性试验的结果可以直接指导临床用药E. 在进行药敏试验前，必须确保菌悬液浓度符合标准5、下列关于细菌形态学的描述中，正确的是（）A. 革兰氏染色法可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌B. 细菌的形态学观察主要用于细菌的鉴定C. 细菌的形态学观察包括细菌的大小、形状、排列等D. 细菌的形态学观察可以用于判断细菌的致病性6、以下关于细菌生理学的描述中，错误的是（）A. 细菌的生长繁殖需要营养物质、水分、适宜的温度和pH值B. 细菌的新陈代谢包括同化作用和异化作用C. 细菌的同化作用包括自养和异养D. 细菌的异化作用包括光合作用和化能作用7、关于细菌L型的描述，下列哪些是正确的？A. 细菌L型是指在某些条件下细菌细胞壁缺陷而形成的形态B. L型细菌可以通过常规培养基生长C. 它们通常在高渗透压培养基上生长D. L型细菌对青霉素类抗生素敏感E. 由于细胞壁的缺失，L型细菌可以在不利环境下存活8、关于真菌的基本特征，以下哪几项说法是准确的？A. 真菌属于原核生物界B. 大多数真菌通过产生孢子的方式繁殖C. 酵母菌是一种单细胞形式的真菌D. 所有真菌都是多细胞有机体E. 真菌能够进行光合作用9、以下哪些微生物属于革兰氏阴性菌？A. 肠杆菌属（如大肠杆菌）B. 铜绿假单胞菌C. 链球菌属（如肺炎链球菌）D. 霍乱弧菌 10、以下哪些指标可以用来判断细菌的耐药性？A. 最小抑菌浓度（MIC）B. 敏感性试验结果C. 药物敏感度指数D. 耐药基因检测11、下列关于细菌的细胞壁成分及其功能的说法，哪几项是正确的？A. 肽聚糖是所有细菌细胞壁的主要成分。
渗透压摩尔浓度测定法
渗透压的临床应用：
• 渗透压测定是诊断水、电解质和酸碱平衡 紊乱，制定输液具体方案和确定输液具体 步骤的实验室检查项目之一。
• 血液渗透压紊乱综合征 • 脱水和水肿与体液渗透压紊乱 • 评价肾脏的尿浓缩和稀释功能 • 监护人工透析 • 鉴定神经内分泌障碍和失调
渗透压摩尔浓度测定法
• 当供试品溶液的毫渗透压摩尔浓度大于仪器的测 定范围时，用适宜的溶剂稀释至可测定的毫渗透 压摩尔浓度范围内。
• 当供试品为固体，先溶于适宜的溶剂中，再进行 测定。
渗透压摩尔浓度测定法
毫渗透压摩尔浓度比的测定：
• 定义：供试品与0.9％（g/ml）氯化钠溶液的毫渗 透压摩尔浓度比率称为毫渗透压摩尔浓度比。
• 使用半透膜的直接方法（半透膜式渗透压 计）。
• 不使用半透膜的间接方法（晶体渗透压 计）。
渗透压摩尔浓度测定法
使用半透膜的直接方法：
• 可分为袋状半透膜式和平板状半透膜式等几大类。 • 高分子溶液：溶剂和溶质分子量差别较大，选择
和制作半透膜还是比较容易的。此方法适用与高 分子溶液渗透压测定，即胶体渗透压测定。 • 低分子溶液：尤其溶质分子量小于10000以下， 由于分子量差别不是很悬殊或比较小，选择和制 作半透膜较困难。此方法原理上可行，但在技术 上有很大困难和不便。
渗透压摩尔浓度测定法
• 机体的体液中主要成分是水，其中溶有许 多有机物和无机物。在正常状态下，体液 中的物质成分相当稳定，它们在细胞内外 的分布和交换亦处于动态平衡中。体液中 物质成分的稳定保证了体液作为一种溶液 所具有的一系列理化性质，如密度、酸碱 度、渗透压、离子强度、电导率、表面张 力、介电常数等的相对稳定。体液维持一 定的渗透压，是构成机体内环境相对稳定 的最重要条件之一。
渗透压测定法ppt
渗透压测定法
• 1、什么是渗透压？ • 2、渗透压测定仪的原理？ • 3、渗透压测定仪的构造？ • 4、渗透压的操作方法？
什么是渗透压 •
渗透压是指当溶液被多孔性 的薄膜阻挡时，溶液对薄膜 的压力。是由于溶质的分子 在溶液中发生扩散作用而产 生的，能使薄膜向外扩张。
渗透压测定的原理
• 渗透压测定仪通常采用测量溶液的冰点下降 来间接测定其渗透压摩尔浓度，溶液中溶质微 粒对水的吸引力，溶液的渗透压依赖于溶液中 溶质粒子的数量，是溶液的依数性之一，通常 以渗透压摩尔浓度来表示。他反应得是溶液中 各种溶质对溶液的总和。
4 待仪器校正完后，选择“摩 尔浓度测定”将准备好的滴眼 液吸入干净的PU管中测定，点 击“确定”测量三次取平均值， 记录摩尔浓度和渗透压比。
零点校正
量程校正
测定滴眼液
注意事项
•
大家了解了吗。 是不是很简单
你们也动手 试试吧
渗透压测定的原理渗透压测定仪通常采用测量溶液的冰点下降来间接测定其渗透压摩尔浓度溶液中溶质微粒对水的吸引力溶液的渗透压依赖于溶液中溶质粒子的数量是溶液的依数性之一通常以渗透压摩尔浓度来表示
Osmotic pressure
定仪
——渗透压摩尔浓度测
项目团队：七组 编辑人：吴巧玉 编辑时间：2017年3月8号
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那么下面我们 来具体操作一下 摩尔浓度渗透压 测定仪吧
选用药品： 马来酸马洛
尔滴眼液
冰点渗透压测定仪的操作方法
马来酸噻马洛尔滴眼液渗透压的测定
• 实验准备：纯化水、滤纸、烧杯、滴眼液、 标准校准液、PU管
• 实验目的：滴眼液的渗透压应与人的泪液 等渗，若滴用高渗滴眼液可使患者内角膜 失去水分，而低渗滴眼液可使患者眼角膜 胀大而产生刺激。
渗透压摩尔浓度测定法
渗透压摩尔浓度测定法-----------2017 1 简述生物膜，例如人体的细胞膜或毛细血管壁，一般具有半透膜的性质，溶剂通过半透膜由低浓度溶液向高浓度溶液扩散的现象称为渗透，阻止渗透所需施加的压力，即为渗透压。
在涉及溶质的扩散或通过生物膜的液体转运各种生物过程中，渗透压都起着及其重要的作用。
因此，在制备注射剂、液体型眼用制剂等药物制剂时，必须关注其渗透压。
凡处方中添加了渗透压调节剂的制剂，均应控制其渗透压摩尔浓度。
静脉输液、营养液、电解质或渗透利尿药（如甘露醇注射液）等制剂，应在药品说明书上标明其渗透压摩尔浓度，以便临床医生根据实际需要对所用制剂进行适当的处置。
正常人体血液的渗透压摩尔浓度范围为285～310mOsmol/kg，0.9%氯化钠溶液或5%葡糖糖溶液的渗透压摩尔浓度与人体血液相当口虽然人体本身具有一定的渗透压调节能力，但静脉输液、眼用溶液应尽可能与血液等渗。
除另有规定外，等渗的范围一般为260～320mOsmol/kg；冰点下降0.48～0.59℃或渗透压比0.9～1.1。
甘露醇注射液、氨基酸注射液等高渗注射剂及注射用无菌粉末渗透压摩尔浓度的限值，可根据生产工艺及临床使用情况做出相应的规定。
2 渗透压与渗透压摩尔浓度溶液的渗透压，依赖于溶液中粒子的数量，是溶液的依数性之一，通常以渗透压摩尔浓度（Osmolality)来表示，它反映的是溶液中各种溶质对溶液渗透压贡献的总和。
渗透压摩尔浓度的单位，通常以每千克溶剂中溶质的毫渗透压摩尔来表示，可按下列公式计算毫渗透压摩尔浓度(mQsmol/kg)：毫渗透压摩尔浓度(mOsmol/kg) = (每千克溶剂中溶解的溶质克数/分子量)×π×1000式中，n为一个溶质分子溶解并解离时形成的粒子数。
在理想溶液中，例如葡萄糖n=1，氯化钠或硫酸镁n=2，氯化钙n=3，枸橼酸钠n=4。
在生理范围及稀溶液中，其渗透压摩尔浓度与理想状态下的计算值偏差较小;随着溶液浓度的增加，与计算值比较，实际渗透压摩尔浓度下降。
渗透压摩尔浓度测定方法
渗透压摩尔浓度测定方法生物膜，例如人体的细胞膜或毛细血管壁，一般具有半透膜的性质，溶剂通过半透膜由低浓度溶液向高浓度溶液扩散的现象称为渗透，阻止渗透所需施加的压力，即为渗透压。
在涉及溶质的扩散或通过生物膜的液体转运各种生物过程中，渗透压都起着极其重要的作用。
因此，在制备注射剂、眼用液体制剂等药物制剂时，必须关注其渗透压。
处方中添加了渗透压调节剂的制剂，均应控制其渗透压摩尔浓度。
静脉输液、营养液、电解质或渗透利尿药（如甘露醇注射液）等制剂，应在药品说明书上标明其渗透压摩尔浓度，以便临床医生根据实际需要对所用制剂进行适当的处置（如稀释）。
正常人体血液的渗透压摩尔浓度范围为285～310mOsmol/kg ，0.9％氯化钠溶液或5％葡萄糖溶液的渗透压摩尔浓度与人体血液相当。
溶液的渗透压，依赖于溶液中溶质粒子的数量，是溶液的依数性之一，通常以渗透压摩尔浓度（Osmolality ）来表示，它反映的是溶液中各种溶质对溶液渗透压贡献的总和。
渗透压摩尔浓度的单位，通常以每千克溶剂中溶质的毫渗透压摩尔来表示，可按下列公式计算毫渗透压摩尔浓度（mOsmol/kg ）：1000n m Osm ol/kg ⨯⨯=分子量的克数每千克溶剂中溶解溶质）毫渗透压摩尔浓度（式中，n 为一个溶质分子溶解或解离时形成的粒子数。
在理想溶液中，例如葡萄糖n=1，氯化钠或硫酸镁n=2，氯化钙n=3，枸橼酸钠n=4。
在生理范围及稀溶液中，其渗透压摩尔浓度与理想状态下的计算值偏差较小；随着溶液浓度的增加，与计算值比较，实际渗透压摩尔浓度下降。
例如0.9％氯化钠注射液，按上式计算，毫渗透压摩尔浓度是2×1000×9/58.4=308mOsmol/kg ，而实际上在此浓度时氯化钠溶液的n 稍小于2，其实际测得值是286mOsmol/kg ；复杂混合物，如水解蛋白注射液的理论渗透压摩尔浓度不容易计算，因此通常采用实际测定值表示。
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发布日期20060414
栏目化药药物评价>>化药质量控制
标题渗透压摩尔浓度检查中的一个特殊现象及原因分析
作者张震陈海峰
部门
正文内容
审评四部审评八室张震陈海峰
关键词：渗透压，渗透压摩尔浓度检查。
摘要：本文就静脉输液渗透压摩尔浓度检查中出现的一个特殊现象进行了说明，并
对该现象产生的原因进行了分析。
渗透现象和渗透压是人体血浆和各种液体制剂的特性。
静脉输液和滴眼液的渗透压
必须与人体血浆渗透压保持基本一致，制剂渗透压过高和过低都会对人体产生损害。
在该类制剂的处方工艺研究中，必须考虑其渗透压。
人体血浆渗透压可分为两类：晶体渗透压和胶体渗透压。
晶体渗透压由无机盐（如：氯化钠、氯化钾等）和有机小分子（如：葡萄糖、尿素等）产生，占总渗透压的99％以上，是构成血浆渗透压的主要成分；胶体渗透压又称膨胀压，由血浆蛋白等高分子
物质产生，仅占总渗透压的不到1％。
液体制剂由于一般皆为小分子药物的溶液，因而这类药物仅能产生晶体渗透压，制
剂研究中所测定的渗透压一般测定的也是晶体渗透压。
一些高分子化合物（如右旋糖苷、羟乙基淀粉、明胶衍生物等）的溶液也能产生一定的胶体渗透压，但由于胶体渗
透压往往很小，常可忽略不计，因而高分子药物在制成大输液时一般需要加入小分子
物质来调节渗透压，使制剂的总渗透压与人体渗透压基本一致。
如右旋糖苷常制成5％的葡萄糖注射液或0.9％的氯化钠注射液，羟乙基淀粉一般制成0.9％的氯化钠注射液。
在审评中我们发现，某些静脉输液中高分子物质的存在对溶液渗透压摩尔浓度的测
定有干扰。
如某明胶代血浆产品，处方由水解明胶和一定量的钠、钾、钙等离子组成。
研究表明该产品的毫渗透压摩尔浓度很低，一般只有230～260mOsmol/kg，甚至只有200mOsmol/kg左右，该产品的国家标准中未对渗透压摩尔浓度进行控制。
但是，当
仔细分析该产品的处方并经计算，却发现：本品处方中的钠、钾、钙离子所产生的晶
体渗透压已经能够达到280mOsmol/kg以上，已基本可以达到与血浆的等渗；而处方
中的水解明胶也能产生一定量的胶体渗透压，应该可以使渗透压有一定提高，但实测
的结果反而使样品的渗透压降低了。
同时有关研究表明，产品的毫渗透压摩尔浓度与
产品的浓度没有相关性，即样品浓度的提高不能相应地提高样品的渗透压摩尔浓度，
与理论存在相悖之处。
多家申报单位的测定值皆比理论值偏小很多，提示测定可能存
在系统误差。
经进一步分析认为，测定的方法的不当可能是该类产品渗透压偏低的主要原因。
从测定方法来看，渗透压的测定可采用渗透膜法来直接测定，其单位可用mmHg或Kpa 来表示；也可以用测定溶液的渗透压摩尔浓度来间接反映溶液的渗透压，其单位用mOsmol/kg或mOsmol/L表示。
由于渗透膜法直接测定较为繁琐，而渗透压摩尔浓度可采用仪器方便地测定，因而现多采用渗透压摩尔浓度来表示输液制剂的渗透压。
中国药典中液体制剂渗透压的测定即采用渗透压摩尔浓度测定法。
查阅中国药典2005年版附录IX G“渗透压摩尔浓度测定法”，该方法对渗透压的测定主要依据稀溶液的依数性这一稀溶液的特性，采用冰点下降法测定溶液的渗透压摩尔浓度。
该方法的原理为：稀溶液中离子浓度的增加会使溶液的冰点（凝固点）下降，根据冰点下降的数值大小可以推算溶液中离子的浓度和溶液的渗透压摩尔浓度。
该方法在测定小分子物质溶液的渗透压（如小分子药物、氯化钠、葡萄糖、甘露醇等）时较为准确，但在测定水解明胶等高分子胶体类产品时却会产生系统误差，原因可能是：水解明胶在溶液的温度降到冰点附近时产生胶凝现象，因而溶液在冰点附近成为胶冻状，溶液的表观冰点升高，从而导致仪器的渗透压摩尔浓度测定值偏小。
因而中国药典中的方法不适用于该类制剂渗透压摩尔浓度的测定。
该类制剂的渗透压测定可采用渗透膜法来直接测定。
同样，其他高分子化合物的溶液可能也存在类似的问题，可能无法用中国药典中的方法进行测定。
因此，在进行含有胶体类化合物的渗透压测定时，需注意中国药典中的渗透压测定法方法的适用性，否则，会得出错误的结论。
备注。