生物 化学 实验室 常用试剂 大全
高中生物所有试剂总结

高中生物所有试剂总结
在高中生物实验中,试剂是非常重要的工具,用于促进各种化学反应或者检测
生物分子。
以下是一些常用的高中生物实验中所使用的试剂。
1. 盐溶液:用来制备缓冲液、模拟细胞内液体环境,以及调节pH值。
2. 硫酸:常用于蛋白质分解、消化和去除蛋白质的活性。
3. 双氧水:用于检测酶的活性,其中酶可以催化双氧水的分解并产生气泡。
4. 醋酸:常用于制备醋酸盐缓冲液,用于调节DNA或蛋白质的电荷性质。
5. 酒精:常用于DNA或蛋白质的沉淀和提取。
6. 苯酚:常用于碘液的制备,用于检测淀粉的存在和浓度。
7. 碳酸氢钠:用于调节实验液体的pH,使其呈现碱性条件。
8. 硫酸铜:用于碘液的制备,用于检测淀粉的存在和浓度。
9. 氧气剥夺剂:如氧化铜,用于观察光合作用过程中光合放氧作用的效果。
10. 表面活性剂:如洗碗液、肥皂水,用于制备表面张力实验和溶解脂质实验。
11. 茴香醛溶液:用于检测脂质的存在,常用于苏丹红染色实验。
12. 过氧化氢溶液:用于检测和测定酶的活性。
请注意,使用试剂时应遵守实验室安全规定,确保正确使用和储存试剂。
确保
实验环境安全和人身安全是至关重要的。
这些试剂是在高中生物实验中常用的一部分,能够帮助学生更好地理解和学习
生物学的相关实验知识。
通过实验操作,学生可以加深对生物学概念的理解,并提高实验技能。
生物高一所有试剂知识点

生物高一所有试剂知识点生物是一门基础科学,其中试剂是进行实验研究的重要工具。
在高一生物学习中,了解并熟悉各种试剂的性质、用途以及实验操作是非常重要的。
本文将为你介绍生物高一所有试剂的知识点。
一、常用试剂1. 水:用于配制溶液、洗涤试剂瓶、清洗仪器等。
2. 盐酸(HCl):用于调节pH值、去除金属氧化物、消化组织等。
3. 硫酸(H2SO4):用于消化组织、脱水、酸碱滴定等。
4. 高锰酸钾(KMnO4):常用于氧化反应,如检测有机物的存在与否。
5. 碘液(KI/I2):常用于检测淀粉的存在与否,也可用于消毒。
6. 苏木精:用于染色组织切片,以便观察细胞和组织的形态结构。
7. 快速脱水液:用于组织固定和脱水,使组织保持完整性。
8. 甲醛:用于固定组织样本,以便后续的染色和显微观察。
9. 乙醇:用于固定和脱水组织,也可用于制备染色剂。
10. 苯酚:常用于提取核酸和蛋白质,也可用于制备染色剂。
二、分子生物学试剂1. 缓冲液:用于调节实验溶液的pH值,保持反应体系的稳定。
2. DNA提取试剂盒:用于从细胞中提取DNA,进一步进行分析和研究。
3. RNA提取试剂盒:用于从细胞中提取RNA,进行基因表达研究。
4. 聚合酶(DNA聚合酶、逆转录酶等):用于DNA扩增和RNA逆转录反应。
5. 凝胶:如琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶,用于电泳分离DNA、RNA和蛋白质。
6. 荧光染料:如SYBR Green、荧光素等,用于检测DNA扩增反应的产物。
7. 蛋白质标记试剂:如辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)等,用于蛋白质的检测与标记。
三、细胞生物学试剂1. 细胞培养基:提供细胞生长所需的营养物质和环境,如DMEM、RPMI-1640等。
2. 胰蛋白酶:用于细胞消化,从培养基中解离细胞。
3. 乳化液:用于制备细胞内器官的离心悬液,进一步进行细胞分析。
4. 细胞凋亡检测试剂盒:用于检测细胞凋亡(程序性细胞死亡)。
5. 细胞增殖试剂盒:用于检测细胞增殖情况,如MTT法、CCK-8法等。
常用生化试剂品名

常用生化试剂品名Tris:Tris(Hydroxymethyl)aminomethane 三羟甲基氨基甲烷分子式: NH2C(CH2OH)3 分子量: 121.14 TRIS 是一种最常用的生物缓冲液,常配成PH 值为 6.8,7.4,8.0,8.8。
其PH 值随温度变化很大。
一般来说,温度每升高一度,PH 值下降0.03。
EDTA:Ethylene Diamine Tetraacetic Acid 乙二胺四乙酸分子式: C10H16N2O8 分子量: 292.248 EDTA 是化学中一种良好的配合剂,它有六个配位原子,形成的配合物叫做鳌合物,EDTA 在配位滴定中经常用到,一般是测定金属离子的含量。
尿素:(脲碳酰胺; 碳酰二胺脲)尿素:脲; 碳酰胺碳酰二胺脲)Urea (分子式: CH4N2O 分子量: 60.05 尿素易溶于水,在20℃时100 毫升水中可溶解105 克。
SDS:dodecyl sulfate, sodium salt 十二烷基硫酸钠:分子式: C12H25SO4Na 分子量: 288.38 溶解性:溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿、醚。
健康危害:对粘膜和上呼吸道有刺激作用,对眼和皮肤有刺激作用。
可引起呼吸系统过敏性反应。
SDS 是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂。
它用于确定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝胶电泳。
它也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸:蛋白复合物。
在乳液聚合反应中,可充当两相溶液的乳化剂。
DTT:DL-Dithiothreitol二硫苏糖醇分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25 常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。
DTT 和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT 的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。
DTT 的用途之一是作为巯基化DNA 的还原剂和去保护剂。
巯基化DNA 末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。
这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA 在生物感应器中的固定)的效率;而在DNA 溶液中加入DTT,反应一段时间后除去,就可以降低DNA 的二聚化。
高中生物所有试剂总结归纳

高中生物所有试剂总结归纳
生物学是一门实验性很强的学科,试剂是生物实验中必不可少的工具。
下面是高中生物所有试剂的总结归纳。
1. 水:生物实验中最基本的试剂,用于制备其他试剂和溶解其他物质。
2. 盐酸:用于调节pH值,溶解金属和非金属氧化物,以及蛋白质的沉淀。
3. 硝酸:用于氧化有机物和还原金属,以及制备其他试剂。
4. 碘液:用于检测淀粉质和脂肪,以及制备其他试剂。
5. 酒精:用于提取DNA和RNA,以及制备其他试剂。
6. 氯仿:用于提取脂质和蛋白质,以及制备其他试剂。
7. 氨水:用于调节pH值,溶解金属和非金属氧化物,以及制备其他试剂。
8. 碳酸氢钠:用于调节pH值,以及制备其他试剂。
9. 碳酸钠:用于调节pH值,以及制备其他试剂。
10. 硫酸:用于调节pH值,溶解金属和非金属氧化物,以及制备其
他试剂。
11. 碘酸钾:用于氧化有机物和还原金属,以及制备其他试剂。
12. 氢氧化钠:用于调节pH值,以及制备其他试剂。
13. 氢氧化铜:用于检测蛋白质和糖类,以及制备其他试剂。
14. 氢氧化钙:用于调节pH值,以及制备其他试剂。
15. 氢氧化铁:用于检测蛋白质和糖类,以及制备其他试剂。
以上是高中生物所有试剂的总结归纳,这些试剂在生物实验中都有着重要的作用。
在使用这些试剂时,需要注意安全,遵守实验室规定,以免发生意外。
生物化学实验常用试剂介绍

生物化学实验常用试剂介绍生物化学实验是研究生物体分子结构、组成、功能及其变化规律的关键实验之一。
而在生物化学实验中,常常需要使用各种试剂来实现实验目的。
本文将介绍一些生物化学实验常用的试剂及其主要用途。
一、缓冲液缓冲液是生物化学实验中常用的试剂之一,用于控制实验体系的pH值。
常见的缓冲液有磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液和三氨基乙醇缓冲液等。
磷酸盐缓冲液常用于DNA电泳实验、酶的活性测定等实验中;醋酸盐缓冲液常用于蛋白质电泳实验、酶的催化反应等实验中;三氨基乙醇缓冲液常用于酶的稳定性和结构研究实验中。
二、蛋白质试剂1. SDS-PAGE凝胶SDS-PAGE凝胶是一种用于蛋白质电泳分离和分析的基质。
SDS(十二烷基硫酸钠)可以使蛋白质带负电荷,并破坏蛋白质的二级结构,使其线性展开。
在SDS-PAGE凝胶中,蛋白质按照大小被迁移,从而实现对蛋白质的分离和定量。
2. Bradford试剂Bradford试剂是一种常用的蛋白质定量试剂,基于染料与蛋白质之间的相互作用原理。
通过与蛋白质中的氨基酸残基发生复杂的相互作用,使试剂变色,进而可以测定蛋白质的浓度。
Bradford试剂广泛应用于酶活性测定、蛋白质纯化等实验中。
三、核酸试剂1. Trizol试剂Trizol试剂是一种用于提取细胞或组织中总RNA的试剂,具有较高的纯度和稳定性。
通过加入Trizol试剂并结合乙腈和以色列氰化钠,可以将细胞或组织破坏,并使RNA与DNA、蛋白质分离。
Trizol试剂广泛应用于核酸提取、基因表达分析等实验中。
2. RNase ARNase A是一种常用的核酸酶,能够降解RNA分子。
在实验中,RNase A常常用于消除DNA污染物,使RNA分子纯净。
此外,RNase A还广泛应用于RNA酶抵抗性测定、RNA溶解等实验研究中。
四、酶类试剂1. 葡萄糖氧化酶(GOD)葡萄糖氧化酶是一种常用的酶类试剂,主要用于测定血液、尿液中的葡萄糖浓度。
生物实验中常用的化学试剂

中学生物实验中常用的化学试剂临洮玉井职专黎伟730502一、常用的染色剂1.苏丹III染色剂:它是一种弱酸性染料,红色粉末,易溶于脂肪和酒精(溶解度0.15%),使用时取0.01克苏丹III、加90%的酒精5毫升溶解,并加甘油5毫升,即成为苏丹III。
该试剂遇到脂肪反映产生橘黄色,木栓层、角质层也能染色。
2.苏丹IV染色剂:该物质和苏丹III相似,使用时取该物质0.1克溶解于100毫升的氯仿中,即成为苏丹III染色剂,该试剂遇到脂肪产生红色。
3、龙胆紫染色液;它是由结晶紫和甲基紫混合而成的碱性染料,它能使细胞核中的染色体(染色质)染成紫色。
4.醋酸洋红液:取45毫升的冰醋酸,加蒸馏水55毫升,再加入洋红1克,搅拌均匀,加入一颗生绣的铁钉,煮沸10分钟,冷却过滤,成为常用的醋酸洋红液,储存在棕色瓶中。
5.二苯胺试剂:主要用于DNA鉴定,使用时取二苯胺0.8克,溶解于180毫升的冰醋酸中,再加入8毫升的过氯酸,使用前加入1.6%的乙醛0.8毫升,溶液为无色,该试剂遇DNA产生紫色反应。
6.番红:是从藏红花中提取出来的一种天然染料,染色时先将木质化的组织切成片,浸于50%的酒精中,再用1%的番红染色,70%的酒精脱色木质化的细胞壁染成红色。
7.间苯二酚:在酸性环境中间苯二酚可使木质化的细胞壁染成红色,配制液为5%的水溶液,染色后易退色,适合做临时装片的染色剂。
8.苯胺蓝:使用时配制成9%的酒精溶液,苯胺蓝把纤维细胞壁染成蓝色(未着色的部分为淡蓝色)。
9.固绿:主要用于纤维素细胞壁的染色,固绿呈现绿色,使用时与番红配合使用。
染色的方法是先用番红染色30分钟,75% 酒精脱色,纤维素细胞染成红色,再用固绿染色,最后使细胞壁呈绿色,其他部分呈红色。
10.碘——氯化锌:该染色剂能把细胞壁染成蓝紫色;配制方法:20克氯化锌、6.5克黄化钾、1.3克、碘1.5克水混合而成,该试剂储存在避光处。
11.碘——碘化钾:配制方法是取3克KI溶于5毫升蒸馏水中,再加入1克碘,置于棕色瓶中保存;染色时将配制的原液稀释,碘——碘化钾能将细胞质染成黄色,使淀粉染成蓝色。
生理生化实验常用试剂【自己整理】

生理生化实验常用试剂【自己整理】培养基LB液体培养基:胰化蛋白胨:1%,酵母抽提物:0.5%,NaCl:1%,pH 7.5LB固体培养基:在LB液体培养基中加入1.5%的琼脂粉YPD液体培养基:酵母抽提物:1%,蛋白胨:2%,葡萄糖:2%,pH自然YPD固体培养基:在YPD液体培养基中加入1.5%的琼脂粉完全极限省却成分培养基(CM):YNB:0.67%,葡萄糖:2%,其中含(mg/L):苏氨酸150 酪氨酸30 缬氨酸150赖氨酸30 谷氨酸100 丝氨酸150天冬氨酸100 甲硫氨酸20 苯丙氨酸50异亮氨酸30 精氨酸20其它营养成分(mg/L):腺嘌呤50 尿嘧啶50 组氨酸100亮氨酸100 色氨酸100省却特定的氨基酸成分,液体培养基pH 5.6,固体培养基加1.5%的琼脂粉,pH 6.510×YNB(13.4%酵母氮源,含硫酸铵不含氨基酸):溶解13.4gYNB于100mL水中,过滤除菌,加热至YNB完全溶解,存于4℃。
500×B(0.02%生物素):溶解20mg生物素于100mL 水中,过滤除菌,放于4℃。
100×AA(0.5%各种氨基酸):溶解各50mg L-谷氨酸,L-蛋氨酸,L-赖氨酸,L-亮氨酸,L-异亮氨酸于100mL 水中,过滤除菌,存于4℃。
10×D(20%葡萄糖):溶解200g D-葡萄糖于1 000mL水中,高压灭菌15min。
500×生物素(0.02%):溶解20mg生物素于100mL水中,过滤除菌,放于4℃,可放1年。
100×H(0.4%组氨酸):溶解400mg L-组氨酸于100mL水中,低于50 度加热以促溶解,过滤除菌,可放1年。
10×D(20%葡萄糖):溶解200g D-葡萄糖于1 000mL水中,高压灭菌15min或过滤除菌,可放1年。
10×M(5%甲醇):混合5mL甲醇与95mL水,过滤除菌存于4℃,可放2个月。
高中生物各种试剂及其应用总结

高中生物各种试剂及其应用总结高中生物是一门重要的学科,其中试剂是不可或缺的一部分。
试剂是指在生物实验中用于检测、分离、纯化、定量、定性等目的的化学物质。
本文将对高中生物中常用的试剂及其应用进行总结。
1. 氢氧化钠(NaOH)氢氧化钠是一种强碱性试剂,常用于调节溶液的酸碱度。
在DNA 提取、蛋白质电泳等实验中,需要使用氢氧化钠来调节溶液的pH 值。
此外,氢氧化钠还可以用于清洗实验器皿。
2. 氯化铁(FeCl3)氯化铁是一种常用的试剂,可以用于检测苯酚、酚类化合物等。
在生物实验中,氯化铁可以用于检测蛋白质的存在。
当蛋白质与氯化铁反应时,会产生紫色的化合物,可以通过比色法进行定量分析。
3. 碘酸钾(KIO3)碘酸钾是一种氧化剂,可以用于检测淀粉质。
在淀粉质检测实验中,需要将样品加入碘酸钾溶液中,如果样品中含有淀粉质,则会产生蓝黑色的化合物。
4. 氯仿(CHCl3)氯仿是一种有机溶剂,可以用于提取脂质。
在脂质提取实验中,需要将样品加入氯仿中,通过离心等方法将脂质分离出来。
5. 氯化钠(NaCl)氯化钠是一种常用的盐类试剂,可以用于制备缓冲液、生理盐水等。
在细胞培养实验中,需要使用生理盐水来维持细胞的生长环境。
6. 碳酸氢钠(NaHCO3)碳酸氢钠是一种碱性试剂,可以用于制备缓冲液。
在细胞培养实验中,需要使用缓冲液来维持细胞的生长环境。
7. 氢氧化钾(KOH)氢氧化钾是一种强碱性试剂,可以用于调节溶液的酸碱度。
在DNA 提取、蛋白质电泳等实验中,需要使用氢氧化钾来调节溶液的pH 值。
8. 硫酸(H2SO4)硫酸是一种强酸性试剂,可以用于制备缓冲液、清洗实验器皿等。
在DNA提取实验中,需要使用硫酸来分离DNA。
9. 氢氧化铜(Cu(OH)2)氢氧化铜是一种碱性试剂,可以用于检测蛋白质的存在。
当蛋白质与氢氧化铜反应时,会产生蓝色的化合物,可以通过比色法进行定量分析。
10. 碘化钾(KI)碘化钾是一种常用的试剂,可以用于检测淀粉质。
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试剂配制方法一、实验室常用储备液(1)0.5mol/L EDTA(乙二胺四乙酸)在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O,在磁力搅拌器上剧烈搅拌。
用10mol/L NaOH调至PH8.0(约用10mol/L NaOH 50ml),补加超纯水至1L。
分装后高压蒸汽灭菌。
室温贮存。
注意:EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0,才会溶解。
(2)1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中,用浓盐酸将PH值调至设定值。
PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后,方可最后调定PH值。
加超纯水定容至1L,分装后高压蒸汽灭菌。
如果配制的溶液呈现黄色,应予丢弃。
并使用质量更好的Tris。
Tris溶液的PH值因温度而异,温度每升高1℃,PH值大约降低0.03个单位。
(3)10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中,磁力搅拌至完全溶解,用蒸馏水定容至1L,过滤除菌,室温贮存。
乙酸铵在热水中分解,含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。
(4)甘油(10%,V/V)用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。
用0.22μm过滤器过滤除菌。
分装成1ml每份,-20℃贮存。
(5) 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶,磁力搅拌数小时,以确保其完全溶解。
然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中,于4℃避光保存。
注意:溴化乙啶是一种诱变剂,必须小心操作。
(6) 70%乙醇(C2H5OH)100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。
(7) 50×葡萄糖Glucose(150ml储备液)将54g D-葡萄糖溶于超纯水,磁力搅拌至完全溶解,并将体积调至150ml,过滤除菌,室温贮存。
(8) 10mol/L氢氧化钠(NaOH)将400g NaOH颗粒,加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中,磁力搅拌至完全溶解。
不要向NaOH颗粒中加水。
烧杯可置于冰浴中,当颗粒完全溶解后,加蒸馏水至1L。
注意:NaOH溶液的制备属于放热反应,液体制备要极为谨慎,预防玻璃器皿破碎和化学灼伤。
如有条件,可使用厚的塑料烧杯。
(9) 3mol/L乙酸钠(PH5.2和PH7.0)将408.1g乙酸钠·3H2O(M=136g/mol)溶于800ml蒸馏水中,加冰醋酸将PH值调至5.2,或用稀乙酸将PH值调至7.0,加蒸馏水定容至1L,等份分装,高压除菌,室温贮存。
(10)5mol/L NaCl将292.2g NaCl溶于约800ml蒸馏水中,磁力搅拌至完全溶解,定容至1L。
等份分装,高压除菌,室温贮存。
(11)1mol/L CaCl2147g CaCl2·2H2O溶于约800ml蒸馏水中,磁力搅拌至完全溶解,加蒸馏水至1L。
4℃贮存。
(12)1mol/L KCl74.6g KCl溶于约800ml蒸馏水中,磁力搅拌至完全溶解,加蒸馏水定容至1L。
高压蒸汽灭菌20min,室温贮存。
理想的做法是将配好的溶液分装在灭菌管内,每小份约100μl,每份只使用一次。
(13)1mol/L MgCl220.3g MgCl2·6H2O,加水定容至100ml。
室温贮存。
(14)1mol/L HCl按以下顺序混合:913.8ml H2O,86.2浓盐酸。
室温保存。
(15)1mol/L MgSO424.6g MgSO4·7H2O,加水定容至100ml。
室温保存。
(16)1mol/L MnCl2MnCl2的分子量为197.0。
将197g MnCl2溶于约800ml蒸馏水中,磁力搅拌至完全溶解,蒸馏水定容至1L,室温贮存。
(17)1mol/L碳酸氢钠将12.6g碳酸氢钠(M=84)溶于100ml蒸馏水中,体积调至150ml,即可获得1mol/L溶液,过滤除菌,室温贮存。
(18)1mol/L乙酸钾(KOAc,PH7.5)将9.82gKOAc(M=98.14g/mol)溶于90ml超纯水中,用2mol/L乙酸将PH 调至7.5,加纯水至100ml,将溶液等份分装,-20℃贮存。
(19)8mol/L乙酸钾将78.5g乙酸钾溶于80ml超纯水中,再将溶液体积调至100ml,经0.22μm过滤器除菌,室温贮存(时间不限)。
(20)10mol/L氯化锂(LiCl)无水氯化锂分子量为42.4,取424g无水氯化锂溶于1L蒸馏水中配成10mol/L的溶液,高压除菌,室温贮存。
氯化锂的一水合物易潮解,一般不用。
(21)1mol/L乙酸镁将214.46g乙酸镁·4H2O溶于800ml蒸馏水中,加蒸馏水将体积调至1L,高压除菌,室温贮存。
二、实验室常用缓冲液(1)50×TAE电泳缓冲液(1L)试剂用量Tris碱242g冰醋酸57.1mlNa2EDT A·2H2O 37.2g加蒸馏水定容至1L(2)10×TBE电泳缓冲液(1L)试剂用量Tris碱108g硼酸55g0.5mol/L EDTA(PH8.0) 40ml加超纯水定容至1L(3)10×TPE缓冲液试剂用量Tris碱108g85%磷酸(1.679g/ml) 15.5ml0.5mol/L EDTA(PH8.0) 40ml加超纯水定容至1L(4)1mol/L磷酸钠缓冲液(PH6.0-7.2)(1L)将1mol/L NaH2PO4(单盐)和1mol/L Na2HPO4(二盐)储备液按下表说明混合,可得到所需的不同PH值的1mol/L磷酸钠缓冲液1L。
配制1mol/L储备液:将138g NaH2PO4·H2O(M=138g/mol)溶于足量蒸馏水制成1L溶液;将142g Na2HPO4(无水,M=142g/mol)溶于足量蒸馏水配成1L溶液。
1mol/L NaH2PO4的体积(ml)1mol/L Na2HPO4的体积(ml)最终PH值877 123 6.0850 150 6.1815 185 6.2775 225 6.3735 265 6.4685 315 6.5625 375 6.6565 435 6.7510 490 6.8450 550 6.9390 610 7.0330 670 7.1280 720 7.2 (5)0.1mol/L磷酸钠缓冲液(由1mol/L储备液制得)(25℃)(100ml)1mol/L Na2HPO4的体积(ml)1mol/L NaH2PO4的体积(ml)最终PH值7.9 92.1 5.812.0 88.0 6.017.8 82.2 6.225.5 74.5 6.435.2 64.8 6.646.3 53.7 6.857.7 42.3 7.068.4 31.6 7.277.4 22.6 7.484.5 15.5 7.689.6 10.4 7.893.2 6.8 8.0 (6)10×TE(1L)试剂用量1mol/L Tri s·Cl(PH8.0)100ml0.5mol/L EDTA 20ml加蒸馏水至1L(7)1×TE(100ml)试剂用量1mol/L Tri s·Cl(PH8.0)1ml0.5mol/L EDTA 200μl加蒸馏水至100ml三、核酸提取及纯化试剂(1) 2%CTAB(100ml)试剂终浓度用量1M Tris-HCL(PH8.0)100mM 10ml0.5M EDTA(PH8.0)20mM 4mlCTAB 3%(g/100ml) 2gPVP 2%(g/100ml) 2g5M NaCl 1.4M 28ml蒸馏水定容至100ml(2) 3%CTAB(100ml)试剂终浓度用量1M Tris-HCL(PH8.0)100mM 10ml0.5M EDTA(PH8.0)20mM 4mlCTAB 3%(g/100ml) 3gPVP 2%(g/100ml) 2g5M NaCl 1.4M 28ml蒸馏水定容至100ml(3) 10%CTAB(50ml)试剂终浓度用量5M NaCl 0.7M 7mlCTAB 10%(g/100ml) 5g蒸馏水定容至50ml(4)总RNA提取的变性裂解液(250ml)试剂用量0.78M柠檬酸钠8.25ml10%肌氨酸钠12.375ml异硫氰酸胍118.05gDEPC水定容至250ml(5)0.1%DEPC水在1L超纯水中加入1ml DEPC,制成最终浓度为0.1%(v/v)的溶液,摇晃至DEPC充分扩散,于37℃孵育12h,高压除菌20min,使多余的DEPC失活。
(6) 8%SDS(十二烷基硫酸钠)20g SDS溶解于90ml蒸馏水,用浓盐酸调节PH值至7.2,蒸馏水定容至250ml,室温保存。
每次只加入几克SDS,可使溶液制备更容易。
(7)氯仿:异戊醇(24:1)按照24:1的比例配制混合溶液,4℃避光保存。
其中氯仿可使蛋白质变性并有助于水相和有机相的分离,异戊醇则有助于减少抽提过程中泡沫的形成。
无论是氯仿还是异戊醇,使用前均无须处理。
(8)叶绿体、线粒体匀浆缓冲液(1L)试剂用量终浓度蔗糖 102.687g 0.3mol/L1M Tris-HCl 50ml 50mmol/L 0.5M EDTA 10ml 5mmol/L BSA 1g 0.1% PVP10g1% 1mol/L MgCl 2 10ml 10mmol/L Vc1g0.1% β-巯基乙醇 1ml 0.1%蒸馏水定容至1L(9) 叶绿体、线粒体保存缓冲液(1L )试剂 用量终浓度蔗糖 102.687g 0.3mol/L 1M Tris-HCl50ml50mmol/L 10mmol/L MgCl 2 10ml 10mmol/L蒸馏水定容至1L(10) 叶绿体、线粒体裂解缓冲液(100ml )(11) 叶绿体高盐缓冲液(500ml )试剂用量 终浓度1M Tris-HCl 25ml 50mmol/L试剂用量终浓度1M Tris-HCl 5ml 50mmol/L 0.5M EDTA5ml 25 mmol/L蒸馏水定容至100ml0.5M EDTA 25ml 25 mmo1/L5M NaCl 125ml 1.25 mol/LBSA 0.5g 0.1%β-巯基乙醇0.5ml 0.1%蒸馏水定容至500ml(12)线粒体冲洗缓冲液(1L)试剂用量终浓度NaCl 8.775g 0.15mmol/L1M Tris-HCl 50ml 50mmol/L(PH8.0)0.5M EDTA 50ml 25 mmo1/L蒸馏水定容至1L四、DNA、RNA和蛋白质电泳试剂(1)40%丙烯酰胺(500ml)4℃避光保存试剂用量丙烯酰胺(Acry) 190g甲叉双丙烯酰胺(bis) 10g超纯水定容至500ml(2)6%丙烯酰胺(1L)4℃避光保存试剂用量尿素450g40%丙烯酰胺胶150ml10×TBE 100ml超纯水定容至1L附:聚丙烯酰胺分离DNA的有效范围丙烯酰胺%(w/v)有效分离范围bp 二甲苯氰* 溴酚蓝*3.5 1000~2000 460 100 5.0 80~500 260 65 8.0 60~400 160 45 12.0 40~200 70 20 15.0 25~150 60 15 20.06~1004512*所给数据是有染料迁移的双链DNA 片段的近似大小(3) 变性上样缓冲液(20ml )4℃保存试剂用量 终浓度 98%去离子甲酰胺 19.6ml 10mM EDTA 0.4ml溴酚蓝 0.05g 0.25% 二甲苯氰 0.05g0.25%(4) 亲和硅烷(100ml )4℃保存(5) 10%过硫酸氨(APS )1g 过硫酸氨加超纯水至10ml ,该溶液可在4℃条件下贮存数周。