花色苷纯化分离及鉴定研究进展.
植物花色苷的研究进展
植物花色苷的研究进展植物花色苷是一类广泛建立在花瓣、果实及叶子的黄酮类化合物，广泛分布在植物界中，具有丰富的生物活性和药理学价值。
研究表明，花色苷具有抗氧化、抗炎、抗突变、抗癌、降血压、抗心脑血管疾病等生理活性，对于人类健康具有重要意义。
1. 花色苷的化学结构及提取方法研究花色苷的化学结构研究对于了解其药理活性及药效成分具有重要意义。
目前，已经发现了许多种植物中含有花色苷，对其化学结构进行了分析和鉴定。
研究人员还针对不同植物样品进行提取花色苷的方法进行了优化，以提高提取效率和纯度。
2. 花色苷的抗氧化活性研究花色苷具有较强的抗氧化活性，能够清除自由基，减少细胞损伤。
多项研究表明，花色苷的抗氧化活性主要通过清除超氧阴离子、羟自由基和过氧化氢等方式发挥作用。
花色苷还能够激活抗氧化酶的活性，进一步增强细胞的抗氧化能力。
花色苷具有明显的抗炎作用，能够抑制多种炎症介质的释放，减轻炎症反应。
实验研究发现，花色苷可以通过抑制促炎因子的合成、减少炎性细胞浸润等方式抑制炎症反应。
花色苷还能够调节免疫系统功能，增强机体的抵抗力。
花色苷对于多种肿瘤细胞具有抑制作用，能够减少癌细胞的增殖和扩散。
研究表明，花色苷可以通过抑制肿瘤细胞的DNA合成、诱导肿瘤细胞凋亡、降低细胞迁移和侵袭等方式发挥抗肿瘤活性。
花色苷还能够增强抗肿瘤药物的疗效，降低药物的毒副作用。
5. 花色苷的生物利用度和副作用研究花色苷的生物利用度及药理学特点是研究人员关注的重点。
研究表明，花色苷在人体内代谢较快，主要通过肠道和肝脏的代谢酶进行代谢。
花色苷在血液中的浓度也受多种因素的影响。
一些研究还发现，花色苷具有一定的副作用，如过敏反应、胃肠道不适等。
花色苷是一种具有重要生物活性的化合物，具有广泛的应用前景。
其研究进展主要集中在其化学结构及提取方法、抗氧化、抗炎、抗肿瘤等活性研究方面。
尚需进一步深入研究其药理学机制、生物利用度以及副作用等方面，为其进一步开发和应用提供科学依据。
玫瑰茄花色苷的提取纯化及活性研究
玫瑰茄花色苷的提取纯化及活性研究摘要：玫瑰茄（Solanum lycopersicum L.）是一种重要的蔬菜作物，其果实富含丰富的营养成分，其中茄花色苷是其重要的生物活性成分。
本研究通过初步提取、溶剂分配和硅胶柱层析等方法，成功地从玫瑰茄果实中提取到茄花色苷，并通过纯化层析方法得到高纯度的茄花色苷。
利用UV-Vis分光光度计和高效液相色谱分析（HPLC）对提取物和纯化物进行了分析和鉴定。
同时，使用抗氧化活性分析、抗肿瘤活性分析等试验方法对茄花色苷的生物活性进行了研究。
结果表明，提取物和纯化物对自由基具有很好的清除作用，体现了茄花色苷极强的抗氧化活性；并且发现茄花色苷对人体癌细胞具有一定的抑制和杀伤作用。
研究表明，玫瑰茄是一种富含茄花色苷的蔬菜，茄花色苷具有极强的生物活性，可以用作天然药物和保健食品原料。
关键词：玫瑰茄，茄花色苷，提取，纯化，抗氧化活性，抗肿瘤活性一、引言近年来，自然药物和保健食品在人们生活中的应用越来越广泛。
茄科植物Solanum lycopersicum L.，即番茄，在全球范围内被广泛种植和消费。
番茄中含有大量的营养成分，例如维生素C、维生素E、胡萝卜素、纤维素、钾、钙等，同时也含有一些特殊的生物活性成分。
其中茄花色苷是一种类黄酮化合物，化学结构为C27H31O16，具有强烈的抗氧化作用和抗癌作用（Cadena et al., 2013）。
茄花色苷能够在体内清除自由基，减轻氧化应激，进而发挥保护机体损伤的作用；同时，茄花色苷还能够诱导癌细胞凋亡，具有广泛的抗癌作用（van Breemen et al., 2006）。
茄花色苷的应用价值和开发前景备受关注。
玫瑰茄作为番茄的一个亚种，在我国南方地区种植较多。
研究表明，相较于其他番茄亚种，玫瑰茄中茄花色苷的含量更高，具有更好的保健和药用价值。
因此，在本研究中选取玫瑰茄果实为材料，研究茄花色苷的提取纯化及其活性研究，为深入挖掘玫瑰茄的生物活性成分提供理论参考二、材料与方法2.1 材料玫瑰茄（Solanum lycopersicum var. cerasiforme），甲醇、乙醇、氯仿、正丁醇、二甲基亚硫酸钠、双氧水、硫酸铵、十二酸钠。
蓝莓花色苷提取纯化及生理功能研究
蓝莓花色苷提取纯化及生理功能研究一、本文概述《蓝莓花色苷提取纯化及生理功能研究》这篇文章主要围绕蓝莓花色苷的提取纯化过程及其生理功能展开深入的研究和探讨。
蓝莓作为一种营养丰富的水果，其含有的花色苷成分具有显著的抗氧化、抗炎、抗疲劳等多种生物活性，因此备受研究者的关注。
本文首先概述了蓝莓花色苷的提取纯化方法，包括溶剂提取、超声波辅助提取、微波辅助提取等，并对各种方法的优缺点进行了比较分析。
接着，文章重点探讨了蓝莓花色苷的生理功能，如抗氧化作用、对心血管疾病的预防作用、对神经系统的保护作用等，并通过实验数据验证了其生理功能的科学性和有效性。
本文还展望了蓝莓花色苷在食品、保健品、化妆品等领域的潜在应用前景，为蓝莓花色苷的进一步研究和开发利用提供了理论支持和实践指导。
通过本文的研究，我们期望能够为蓝莓花色苷的深入研究和应用推广提供有益的参考和借鉴。
二、蓝莓花色苷的提取方法蓝莓花色苷作为一种天然色素和生物活性成分，具有广阔的应用前景和重要的研究价值。
为了有效地提取蓝莓中的花色苷，研究者们已经开发出了多种提取方法。
溶剂提取法是最常用的提取蓝莓花色苷的方法之一。
这种方法利用有机溶剂如甲醇、乙醇、丙酮等对花色苷的溶解性，将蓝莓中的花色苷溶解在溶剂中，然后通过蒸发溶剂得到花色苷提取物。
这种方法操作简便，提取效率高，但可能涉及到有机溶剂的残留问题。
超声波辅助提取法是一种新型的提取技术，它通过超声波产生的空化效应和机械效应，加速溶剂对蓝莓中花色苷的渗透和溶解，从而提高提取效率。
这种方法具有提取时间短、提取温度低、提取效率高等优点，但设备成本较高。
微波辅助提取法利用微波产生的热效应和非热效应，使蓝莓中的花色苷快速溶解在溶剂中。
这种方法提取时间短，提取效率高，且能够较好地保持花色苷的生物活性。
但微波辐射可能对花色苷的结构产生一定影响。
超临界流体萃取法是一种利用超临界流体（如二氧化碳）作为萃取剂，从蓝莓中提取花色苷的方法。
大孔树脂分离纯化蓝莓花色苷研究
－
中图分 类号 ： Ｓ ０ ． Ｔ ２２３
文献标 识码 ： Ａ
文章编 号 ： ０ ８ ９ ７ ２ １ ） ８ ０４ — ０ １０ — ５８（ ０ １ ０ — ０ ３ ４
ａ ｉ ｔ ｒｂ ｕ ｂ ｒｙ ａ ｔ ｏ ｙ ｎ ｎ ｓ ａ ｈ ｅ ｅ ｂ ｌ ｙ ｆ ｌ ｅ ｅ ｒ ｎ ｈ ｃ ａ ｉ ｓ ｗａ ｃ ｉ ｙ ｄ．ａ ｄ ７ ％ ｅｈ ｎ ｌｓ ｌ ｔ ｎ ｗａ ｓ ｄ ｔ ｅ ｏ ｔｔ ｅ ｉ ｏ ｎ ０ ｔ ａ ｏ ｏ ｕ ｉ ｓｕ ｅ ｏ ｄ ｓ ｒ ｏ ｐ ｈ ａ ｔ ｏ ｙ ｎ ｎ ｌ ｅ ｅｒ ｒ ｍ ｎ ｈ ｃ ａ ｉ ｓｂ ｕ ｂ ｒｙ ｆｏ ＮＫＡ－ ａ ｒ ｐ ｒ ｕ ｅ ｉ ｓ Ｔ ｅ ｂ ｓ ｃ ｎ ｉ ｏ ｓ ｏ ｙ ａ ｉ ｄ ｏ ｔ ｎ： ２ ｍ ｃ ｏ ｏ ｏ ｓｒ ｓｎ ． ｈ ｅ ｔ ｏ ｄ ｔ ｎ ｆｄ ｎ ｍ ｃ ａ ｓ ｒ ｉ ｉ ｐ ｏ ｆ ｅ ｔ ｍ ｌｍｉ ７ ％ ｅ ｈ ｎ ｌ ｅ ｏ ｐ ｉ ｎ ｒ ｔ ｍｌｍ ｉ ． ｅ ｄｒ ｅ２ ／ ｎ， ０ ａ ｔ ａ ｏ ｓ ｒ ｔ ａｅ ２ ／ ｎ ｄ ｏ
Ａｍｏｎ ｆｔ ｅ ．ＮＫＡ一２ ｍａｃ ｏ ｒ ｕｓ ｒ ｓｎｓ ｅ ｈｉ ｔ ｄ ｔ ｘｃ ｌｅ ｔｃ ａ ａ ｔ ｒｓｉ ｓ ｆ ｒ ｂｌ ｅ ｒ ｙ ｇ ｏ ｈ ｍ ｒ ｐｏ ｏ ｅ ｉ ｘ ｂｉｅ ｈｅ ｅ ｅ ｌ ｎ ｈ ｒ ｃ ｅ ｉｔｃ ｏ ｕ ｂｅ ｒ
ｄｅ ｏ ｔｏ ｑ ｌ ｉｕ ｗａ ｎ ｓ ｒ ｉ ｎ ｅ ｕｉｉ ｐ ｂｒ ｍ ｓ ａ ￣３。ｔ ｅ ｈｉ ｈ ｓ ｄ ｏ ｔｏ ｈｅ ｃ ｎ ｔｏ ３． ｎｄ ４０（ ｈ ｇ ｅ ｔａ ｓ ｒ ｉ ｎ ｐ
天然植物花色苷研究进展
天然植物花色苷研究进展作者：刘漾伦徐文泱李政来源：《食品安全导刊·下》2024年第02期摘要：花色苷是花青素的显色成分，存在于很多植物体内，具有抗氧化活性、抗癌、抗肥胖等作用。
本研究概述了花色苷的分布、提取方式、鉴别及定量分析、生物学特性研究进展，并展望了花色苷在食品中的应用。
关键词：花色苷；研究进展；应用Abstract： Anthocyanins are the chromogenic components of anthocyanins， which exist in many plants and have antioxidant activity， anti-cancer， anti-obesity and other effects. In this study， the distribution， extraction， identification， quantitative analysis and biological characteristics of anthocyanins were summarized， and the application of anthocyanins in food was prospected.Keywords： anthocyanin; progress; application1 花色苷简介花青素具有典型的类黄酮结构，主要以植物色素的形式存在，可显现出红色、蓝色和紫色，以糖苷形式广泛分布于有色水果中，特别是浆果，其显色成分为花色苷。
研究发现花色苷的抗氧化能力较强，具有抗癌、抗肥胖、抗糖尿病以及预防DNA损伤等效用。
因此，富含花青素的食物具有良好保健功效，经常食用能有效降低患慢性疾病的风险。
目前，已有500余种天然花色苷被发现，涉及27个科，72个属。
已知的花青素包括天竺葵色素、飞燕草色素、芍药素、牵牛花素以及锦葵素等。
花青素与糖以糖苷键的形式结合生成花色苷，存在植物的不同部位。
桑葚花色苷的提取、纯化研究
液 将 其 稀 释 到 100 mL 。 第 一 种 为 pH=1.0 的 盐 酸 - 氯 化 钾
/ 试验研究
溶液中，分别在超声波功率为 100 W、120 W、140 W、160 W、 180 W 、 200 W 的条件下提取 30 min ，离心、过滤之后测定花 色苷提取率，通过比较提取率大小来确定较优水平。 4） 不同料液比对提取效果的影响。准确称取 5 份质量为
示差法进行测定：吸取 1 mL 提取液，分别用 2 种不同的缓冲 （0.025 mol/L） 缓 冲 液 ， 第 二 种 为 pH=4.5 的 醋 酸 - 醋 酸 钠 34
| 四川农业与农机/2017 年 2 期 |
功率为 160 W 的条件下提取 30 min ，离心、过滤之后测定花 量为 5.00 g 的桑葚粉，按料液比 1 ʒ 15 ，加入到 75% 酸化乙醇
（0.4 mol/L） 缓冲液。摇匀后静置 15 min 使其平衡后，分别测 定其在 520 nm 和 700 nm 下的吸光度，以蒸馏水为空白。根据 Wrolstad 等人推导的公式计算花色苷提取率。 γ （mg/g） = （AˑMWˑDF） / （εˑLˑSL） 式中： γ- 花色苷提取率； A- 吸光度差值； DF- 稀释倍数； A= （A520-A700） pH1.0- （A520-A700） pH4.5
说明当超生波提取时间过长时会对花色苷提取造成损失。因 此，选择超声波的提取时间为 40 min 。 2.1.2 乙醇浓度对提取率的影响 度酸化乙醇的条件下提取 30 min 后花色苷提取率结果如图 2 所示。随着酸化乙醇浓度的升高花色苷提取率逐渐增大，并 在 75% 时达到最大，但此后随着酸化乙醇浓度的升高花色苷 苷的结构。因此，选择酸化乙醇的浓度为 75% 。 2.1.3 超声波功率对提取率的影响 率超声波的条件下提取 30 min 后花色苷提取率结果如图 3 所 160 W 时达到最大，此后随着超声波功率的增大花色苷提取 在固定料液比 1 ʒ 15 ，酸化乙醇浓度 75% ，分别在不同功 在固定料液比 1 ʒ 15 ，超声波功率 160 W ，分别在不同浓
紫甘蓝花色苷分离、鉴定及性质研究
紫甘蓝花色苷分离、鉴定及性质研究紫甘蓝花色苷分离、鉴定及性质研究植物中存在着各种具有天然活性的化合物，包括表皮色素、花青素和花色素等。
花青素是一类具有广泛生物活性的天然色素，广泛存在于植物中，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤和降低心血管疾病风险等多种生理作用。
紫甘蓝（Brassica oleracea var.purpurea）是一种地中海产的野生植物，其花朵中含有丰富的花青素。
本研究旨在分离、鉴定和研究紫甘蓝花色苷的性质。
首先，我们以新鲜紫甘蓝花朵为材料，采用乙酸乙酯为提取溶剂，经过超声波提取，得到花色苷的提取物。
然后，利用聚苯乙烯D101树脂进行吸附分离，再通过醇洗和醋酸乙酯洗脱，得到主要的花色苷分离物。
经过硅胶层析、高效液相色谱等多种方法对分离物进行进一步纯化、分离和鉴定。
经过鉴定，我们成功分离并鉴定了紫甘蓝花朵中的花色苷。
通过高效液相色谱仪测定，分离物的保留时间和紫外-可见吸收光谱与标准品进行对比，得到了紫甘蓝花朵中最主要的花色苷成分。
同时，通过质谱仪测定，确定了分离物的分子质量和分子式。
根据质谱数据和核磁共振波谱等技术，还鉴定了分离物的结构和化学式。
在性质方面，我们对分离物进行了初步的理化性质研究。
首先，测定了分离物的溶解度，发现其可溶于乙酸乙酯、乙醇和水等多种溶剂中。
接着，我们研究了分离物的熔点和沸点。
结果显示，分离物具有高熔点和沸点，说明其在高温环境下相对稳定。
此外，我们还测定了分离物在不同pH值下的稳定性。
结果发现，在中性和弱酸性条件下，分离物相对稳定，但在碱性条件下容易降解。
最后，我们对紫甘蓝花色苷的生物活性进行了初步的研究。
通过体外抗氧化实验，发现紫甘蓝花色苷具有较强的抗氧化活性，可以对清除自由基起到一定的保护作用。
此外，我们还进行了细胞毒性实验，发现花色苷对某些肿瘤细胞具有一定的抑制作用。
综上所述，本研究成功分离、鉴定了紫甘蓝花朵中的花色苷，并初步研究了其性质和生物活性。
这些研究结果对于深入理解紫甘蓝花色苷的生物活性和应用潜力具有重要的意义。
食品中花色苷物质的提取与评价分析方法研究
食品中花色苷物质的提取与评价分析方法研究食品是人类生活中不可或缺的重要组成部分，而食品的质量与营养价值与我们的健康息息相关。
其中，花色苷作为一类重要的生物活性物质，在食品中的含量和质量评价上具有重要意义。
本文将探讨食品中花色苷物质的提取与评价分析方法的研究进展。
首先，花色苷是一类在植物中广泛存在的化合物，其具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性。
因此，研究食品中花色苷的含量和活性对于评估食品的营养价值和功能性具有重要意义。
目前，常用的花色苷提取方法主要包括传统浸提法、超声波浸提法、微波辅助浸提法等。
这些方法均能有效提取食品中的花色苷物质，但其提取效率和稳定性仍然是需要改进的方面。
其次，针对花色苷物质的评价分析方法也日益多样化。
最常见的评价方法是高效液相色谱法（HPLC），该方法通过对待测样品进行分离和检测，能够准确测定花色苷的含量，并且具有灵敏度高、分辨率好等优点。
此外，近年来还涌现出一些新的评价方法，如基于荧光、红外光谱等技术的分析方法。
这些新方法能够提高测定效率，减少样品前处理步骤，并且能够对多个成分进行同时测定，从而更好地满足食品分析的需求。
另外，花色苷的评价分析方法也面临一些挑战和问题。
首先，不同食品样品中花色苷的组成和含量可能存在较大差异，因此，开发适用于不同食品的标准分析方法是亟待解决的问题。
其次，一些食品中的花色苷物质含量较低，对于灵敏度要求较高的分析方法仍然有待改进。
此外，花色苷物质的结构多样化，导致不同花色苷物质之间的相互转化和互相影响，使得分析方法的选择和分析结果的解释变得更加复杂。
综上所述，食品中花色苷物质的提取与评价分析方法的研究是一个具有挑战性和重要意义的课题。
当前，虽然已经有许多方法被提出和应用于花色苷的提取和评价，但仍然需要进一步完善和改进。
相信随着科学技术的不断发展和进步，我们能够找到更加高效、灵敏和准确的方法，为评估食品的营养价值和功能性提供更有力的支持。
食品科学领域的专家和研究者们将继续努力，推动食品分析方法的创新和改进，为人类提供更加健康和有益的食品。
花色苷的研究进展
2013 年，Buran[2] 等 人 采 用 大 孔 吸附树脂对蓝莓花色苷进行了分离纯 化，并对大孔吸附树脂进行了筛选。 结果表明：FPX66 型树脂的吸附能力
和 解 析 能 力 最 高，XAD761 型 树 脂 和 XAD1180 型树脂的解析能力最低 [3]。 1.2 高效逆流色谱法
高效逆流色谱法是一种没有载体 的液 - 液分配色谱，在分离株体内不加 入任何的固态载体或支持体，因而完 全排除了载体对分离过程的影响，是 目前应用最为广泛的一种方法。
[4] 陆英 , 李佳银 , 罗晋 , 李觅路 , 刘仲华 . 高效逆流色制备分离紫甘薯 花色苷 [J]. 分析化学研究报告 , 2011, 39(6): 851-856.
[5] 易建华 , 潘毛头 , 朱振宝 . 高速 逆流色谱分离纯化紫甘蓝花色苷 [J]. 食 品与机械 , 2012, 28(6): 129-131.
关键词：花色苷；提取；纯化；鉴定
1 花色苷的纯化
一 般 情 况 下， 提 取 出 来 的 花 色 苷 往往有很多的杂质，比如有机酸、糖， 等等。为了提高花色苷的色价和稳定 性，就要求进一步对其进行纯化。目前， 关于花色苷应用最多的纯化方法主要 可以分为以下几大类。 1.1 柱层析法
目前，柱层析法是用来纯化花色苷 的最广泛的一种方法，而其又因固定相 的不同，又分为凝胶柱层析、硅胶层析、 离子交换树脂层析、聚酰胺层析以及大 孔树脂层析方法。其中，大孔吸附树脂 方法是近年来发展起来的一种方法，它 是一类有机高聚物吸附剂，它的基本原 理是利用大孔吸附树脂从极稀水溶液中 吸附微量的亲水性酚类衍生物，再经洗 脱回收，除掉杂质，从而达到纯化的目 的。不同种类的大孔吸附树脂的吸附能 力也各不相同。
植物花色苷的研究进展
植物花色苷的研究进展植物花色苷是一类存在于植物细胞中的生物活性化合物，具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性。
近年来，关于植物花色苷的研究进展迅速，不仅在生物医药领域取得了突破性进展，也为植物保健食品、化妆品等领域的开发提供了新的可能性。
本文就植物花色苷的研究进展进行综述，以期对该领域的研究做出一定的贡献。
一、植物花色苷的来源和分类植物花色苷是植物中广泛存在的一类生物活性化合物，不同种类的植物花色苷在化学结构上存在差异，主要可分为黄酮类、花青素类、花色苷类等。
黄酮类植物花色苷以大豆异黄酮、木酮、槲皮苷等为代表；花青素类植物花色苷则包括花青素、花颜素、花青素苷等；而花色苷类植物花色苷主要为葡萄糖苷、果糖苷等。
这些植物花色苷主要存在于植物的花、叶、茎、果实等部位，在植物生长发育过程中扮演着重要的角色。
由于其在植物中的广泛存在和多样性，植物花色苷的研究一直备受关注，并在多个领域取得了重要进展。
二、植物花色苷的生物活性1.抗氧化活性植物花色苷在抗氧化活性方面表现出明显的优势，其分子结构中的酚羟基和双键结构使其具有很强的自由基清除能力，能有效抑制自由基的生成和活性，具有很好的抗氧化作用，对预防和延缓氧化性疾病，如肿瘤、心脑血管疾病等具有重要的保护作用。
2.抗炎活性植物花色苷能够通过调节炎症反应、抑制炎症介质和细胞因子的表达，发挥抗炎作用。
研究发现，某些植物花色苷可以有效抑制白细胞生成的过氧化物酶和一氧化氮合成酶的活性，减少炎症相关介质的释放，具有显著的抗炎效果。
3.抗癌活性植物花色苷对癌细胞的增殖、转移和侵袭具有一定的抑制作用，能够阻断多种肿瘤细胞的生长和增殖，对多种实体瘤和血液瘤具有一定的抗癌作用。
植物花色苷还可通过诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤的血管生成等机制，发挥抗癌活性。
1.生物合成途径的研究近年来，越来越多的科学家开展了对植物花色苷合成途径的研究，揭示了植物花色苷的生物合成途径及其调控机制。
这些研究不仅为解析植物花色苷的生物合成过程提供了理论基础，还为植物工程育种和研发新型植物保健品奠定了基础。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
收稿日期 :2013－11－20; 修稿日期 :2013－12－04基金项目 :国家自然科学基金 (31271836 ; 湖南省研究生创新课题(CX2012B290 作者简介 :魏一枝 (1990－ , 女 , 硕士 , 研究方向为农产品加工及贮藏工程。
通信作者 :邓洁红 (1967－ , 女 , 教授 , 博士生导师 , 研究方向为园艺产品深加工理论与技术 , 通信地址 :410128湖南长沙市芙蓉区湖南农业大学食品科技学院, E-mail :hongjiedeng@163．com 。
花色苷纯化分离及鉴定研究进展魏一枝 1, 邓洁红 1, 2, 王维茜 1, 刘永红3(1．湖南农业大学食品科技学院 , 长沙 410128; 2．食品科学与生物技术湖南省重点实验室 ,长沙 410128; 3．湖南生物机电职业技术学院 , 长沙 410127摘要 :花色苷是高等植物中最重要的水溶性色素。
因其种类繁多、来源广泛、安全无毒并有一定的营养和保健功效而引起国内外的广泛关注 , 具有十分重要的开发价值和广阔的应用前景。
文中介绍了国内外花色苷分离纯化 (层析法、高速逆流色谱、膜分离法、固相萃取、以及花色苷鉴定 (高效液相色谱 -串联质谱法 , 核磁共振法的研究方法 , 并对各种方法进行了分析评价。
对全面认识和开发利用花色苷具有一定的参考价值。
关键词 :花色苷 ; 纯化 ; 分离 ; 鉴定中图分类号 :TS264．4文献标志码 :A 文章编号 :1005－1295(2014 01－0050－05doi :10．3969/j．issn．1005－1295．2014．01．013Ｒesearchon Isolation and Identification of AnthocyaninsWEI Yi-zhi 1, DENG Jie-hong 1, 2, WANG Wei-qian 1, LIU Yong-hong 3(1．College of Food Science and Technology , Hunan Agricultural University , Changsha 410128, China ; 2．KeyLaboratory of Food Science and Biological Technology of Hunan Province , Changsha 410128, China ;3．Hunan Biological and Electromechanical Polytechnic , Changsha 410127, China Abstract :Anthocyanins are the most important water-soluble pigment in plants．It caused widespread concern at home and abroad because of its variety and wide range of sources , safety and rich in nutrition and health effects , it has a very important development value and broad application prospects．The present paper mentioned some methods for anthocyanin separation and purification (chromatography , high-speed countercur-rent chromatography , membrane separation , solid phase extraction , and identification (high performance liq-uid chromatography-tandem mass spectrometry , nuclear magnetic resonance spectroscopy ．Key words :anthocyanin ; purification ; separation ; identification0引言随着人们对食品安全意识的提高 , 开发和应用天然色素已成为食品色素行业的发展趋势。
花色苷是一种重要的水溶性色素 , 花色苷的定性与定量、生理活性与功能、高效提取与绿色分离技术以及结构稳定性一直是研究的重点。
花色苷的提取技术已经发展得比较成熟 , 国外多采用盐酸化甲醇、丙酮、硫酸、乙酸或盐酸水溶液提取 [1－3], 国内多采用柠檬酸、盐酸水溶液和酸化乙醇作为提取剂 , 如今超声波和微波技术也用来辅助溶剂提取。
随着技术的发展 , 超临界、高压脉冲电场、酶法提取 , 及亚临界萃取技术也被应用于花色苷提5包装与食品机械 2014年第 32卷第 1期取。
但如何更好地纯化、分离 , 以获得价格低廉、高纯度而且性质稳定的花色苷是研究的目标。
由于花色苷应用、产品研发工业化需求的增加 , 过去的纯化分离方法已经不能满足市场的需求。
因此本文将对纯化分离及鉴定的技术研究进行综述。
1花色苷纯化分离一般来说 , 经过提取后的花色苷粗品中往往含有很多有机酸、糖等杂质 , 产品质量稳定性差、纯度不高。
为了提高产品的色价和稳定性 , 需要对提取物进一步纯化。
纸色谱、薄板色谱和柱色谱是较传统的分离方法。
近年学者们利用高效液相色谱法 , 以及高速逆流色谱、膜分离法、反相高效液相色谱对花色苷成功地进行了纯化。
1．1层析法层析法是应用最广泛的一类纯化技术。
根据固定相的不同 , 柱层析分离的原理有所不同。
目前大多采用凝胶、聚酰胺、硅胶、离子交换树脂、大孔树脂等。
但聚酰胺层析在花色苷中应用不多 , 主要用于黄酮类化合物的分离纯化。
1．1．1大孔树脂层析在国内外分离纯化物质的若干方法中 , 利用大孔吸附树脂纯化天然植物色素是一种适合工业化生产的方法 , 该方法工艺简单 , 可不用或少用除乙醇之外的有机溶剂 , 安全性强 , 树脂再生容易 , 重复利用率高。
国内外研究者应用大孔吸附树脂对多种植物色素进行了纯化。
目前天然产物化学成分分离中最常用的树脂有三菱公司的 HP 系列、以及美国Ｒohn＆hass 公司生产的 Amberlite XAD 系列。
邓洁红在刺葡萄皮花色苷的研究中用了 8种大孔吸附树脂发现 HP-20树脂在纯化刺葡萄皮色素中 , 表现出良好的吸附性及洗脱性 , 优于其他几种树脂 [4]。
HP-20树脂静态吸附最优条件 pH 值为 3、温度40? 、其静态饱和吸附量达到 32．0796mg /g湿树脂 (色素原液浓度 1．2357mg / mL 。
其解吸率可达到 92%以上 , 树脂动态饱和吸附量达到 39．00mg /mL湿树脂 , 色素液纯化后色价为原来的 5．93倍。
J．Chandrasekhar 等在分离紫甘蓝中的花色苷时 , 基于洗脱剂液体的体积 , 解吸液体积及其中溶质的浓度做出了 XAD-7的动态的吸附曲线和解吸曲线 [5], 吸附的最佳工艺参数如下 :在样品溶液中的花色素苷的浓度为 0．21mg /mL, 加工量为 5．3BV , 流速为 2mL /min, 温度为 25?2? 。
解吸工艺的最佳参数 :洗脱液的体积和流速为3BV (100%, v /v 乙醇和 2mL / min 。
为了检查最终产品 (花色素苷的稳定性 , 观察到纯化后糖的浓度 , 从初始 224．7g /mL降低至 0．07g /mL。
色度值从 34．05增加至 46．67。
表明花青素纯化后的稳定性增加。
XAD-7HP 显示最高吸附容量达 0．84mg /mL, 回收率 92．85%。
李杨等人以烟 73酿酒葡萄为花色苷提取材料 , 采用 HPLC 分析方法 , 对 10种树脂的吸附 /解析效果进行了比较 [6]。
选定结果较优的 XAD-7HP 树脂进行纯化试验。
花色苷的干物质中含量由处理前的 48．16%提高到处理后的 94．93%, 色价由处理前的 47．7提高到处理后的 291．6, 回收率为 85．7%。
在避光、 pH 值为3, 4? 的条件下存放 7天 , 花色苷的保留率在 95%以上 , 适宜于花色苷的短期保存。
1．1．2聚酰胺层析法刘敬华等在蓝靛果花色苷分离纯化研究中以 X-5纯化后的蓝靛果花色苷为原料 [7], 以聚酰胺作为层析介质 , 以纯度和回收率为指标进行单因素试验 , 在此基础上应用响应面分析法 , 获得层析的最佳条件为 :上样浓度为 3．0mg /mL, 上样体积为 25mL , 径长比为 1? 15, 洗脱剂乙醇的浓度为 60%, 洗脱剂的流速为 2mL /min, 在此条件下纯化的花色苷的纯度达到 34．85%, 常规法用大孔树脂纯化的蓝靛果花色苷纯度大概在 14% 18%, 这样纯化的蓝靛果花色苷较大孔树脂纯化的花色苷纯度提高 1倍左右 , 是未纯化的蓝靛果花色苷粗提物的 14倍左右。
1．1．3凝胶柱层析法凝胶层析也称排阻层析 , 工作原理是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用 , 根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。
朱振宝等人初步研究了紫甘蓝花色苷在 Sephadex LH-20凝胶层析柱上最佳的分离条件 [8], 当以 30%乙醇为洗脱液 , 流速为 1mL /min时 , 紫甘蓝花色苷的分离效果最好。
凝胶柱层析的优点是操作条件比较温和 , 可在相当广的温度范围内进行 , 不需要有机溶剂 , 并且对分离成分理化性质的保持有独到之处 , 但吸附力弱。
刘亮等人采用柱层析法对荔枝果皮中主要的花色苷及低聚黄烷醇分离纯化时 [9], 分别采用 Amberlite XAD-16、 ADS-17大孔树脂和 Toyopearl TSKHW-40S 柱层析相结合的方法纯化荔枝花色苷及低聚黄烷醇类化合物 , 分离纯化得 15到 1种花色苷和 4种低聚黄烷醇化舍物单体 , 利用 HPLC-MS 、 GC 、 NMＲ及 CD 等分析手段进行结构分析表明 , 纯化得到的花色苷为荔枝中主要的花色苷矢车菊素 -3-芸香糖苷 , 以及 4种低聚黄烷醇化合物。
试验证实大孔树脂与Toyopearl TSKHW-40S 凝胶柱层析相结合 , 可有效分离纯化荔枝中花色苷及低聚黄烷醇类化合物。
同样 , 在其他天然产物的纯化分离中 , 研究者们也可利用结合层析的方法以得到更好的效果。
1．1．4离子交换树脂层析目前在国内 , 离子交换树脂主要用于脂溶性化合物的纯化 , 管娜娜等在γ-氨基丁酸 (GABA 的富集中采用 0．02mol /L, pH5．6的 Na 2HPO 4-柠檬酸缓冲液进行富集后 , 采用 D001大孔强酸性阳离子交换树脂对该富集液进行纯化试验 [10], 调节富集液 pH2．0, 以 2mg /mL的浓度上样吸附 , 2mol /L的氨水浓度进行洗脱 , 最终得到纯度为 61．25%γ-氨基丁酸。