第10章_植物种质资源的保存
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2020/7/18
泰坦魔芋
2020/7/18
三、低温保存的优点
2、植物种质资源低温保存时间长，保存的数量多
。如葡萄在植株在9℃条件下，通过每一年转换一 次新鲜培养基，可以保存15年之久，而在常温的条 件下需要1-3个月转接一次，通过这种方法，在2m2 实验室面积上保存了800个葡萄品种。而在田间需 要1hm2土地。
2020/7/18
珍 宝 岛 国 家 级 自 然 保 护 区
2020/7/18
内蒙古科尔沁国家级自然保护区
2020/7/18
龙门南昆山省级自然保护 区
2020/7/18
2、非原生态保存：是指种质保存于该植 物原生态生长地以外的地方。
➢ 包括：
异地保存（种质圃或植物园保存） 种质库（种子）保存 离体（试管）保存等。
2020/7/18
三、低温保存的优点
低温保存的技术操作简单，需要设备 少，投资小，技术成熟，存活率高，保 存时间长等特点为。可以作为植物种质 资源的中长期保存方法。
2020/7/18
三、低温保存的优点
1、低温保存的技术操作简单。 以魔芋为例，选取茎尖分生组织为外植体， 建立试管苗无性系；选取生长健壮的、芽大 小为1.5cm的材料移入保存培养基，于25℃ ，光照度1000lx，12h条件下培养一周；转 入4℃黑暗中保存。材料每6个月继代培养一 次，继代培养时，从形态、经济性状、生理 生化等方面进行遗传稳定性鉴定。
二、低温保存的原理
在植物生长条件中，温度是个重要的 因素。植物必须有适宜的温度，当温度 降低以后，植物的成长速度就会受到抑 制而减慢，老化程度延缓，因而延长了 继代的时间间隔达到保存种质的目的。
2020/7/18
植物对低温的 耐受力不仅取决于 基因型，也是与它 们起源和生长的生 态条件有关。
正确选择适宜低 温是保存后高存活 率的关键。
2020/7/18
华南植物园
2020/7/18
西双版纳植物园
2020/7/18
三、保存方式的利弊
1、 原生境保存和异Biblioteka Baidu保存
弊：需耗费巨大的人力、物力和土地，在实际中很难实施 ，而且易受自然灾害、虫害和病害的侵袭，造成植物资 源的丧失。
2、 种质库（种子）保存
弊：1）生活力随储存期的延长逐渐丧失；2）无性繁殖的 植物（如苹果、柑橘等）难于采用种子保存；3）采用 无性繁殖来保持其优良性状的植物（许多果树），用种 子繁殖后代会发生变异；4）顽拗型种子植物（芒果、 椰子、油棕等）因其种子不易干燥脱水和低温储藏，不 宜用种子保存或保存难度很大；5）有些植株不产生种 子，如脐橙、香蕉；6）易遭自然灾害袭击而使种质资 源丢失。
3、饥饿法 从培养基中减去1~2种营养元素，使植株缺乏相关营养而处于 最小生长量。
4、矿物油覆盖法 使培养材料与空气隔绝，延缓生长。
5、低光照培养 适当减弱光照强度，缩短光照时间，进而减缓试管苗生长。
6、低压保存 降低培养材料周围气压，达到抑制生长的目的分为低气压与 低氧压两种，保存原理相似。
7、干燥保存法 降低培养物水分，其生命活动就能延缓，这与传统的种子干
燥储存类似。脱水和限制糖的供应量常被看成是一个正常种子 成202熟0/7经/18 历的类似过程。
第二节 植物种质资源的低温保存
一、低温保存的概念
植物种质资源的低温保存是指用离体培 养的方式在非冻结程度的低温下（一般 为1~9℃）保存种质方法。
对于植物而言，低温常常是指那些比 常温稍低一些的温度。
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怀
塘 雅
来
葡
葡
萄
萄
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一、物种资源超低保存的发展概况
1.超低温保存发展 ① 20世纪70年代，Nag和Street证明胡萝卜悬浮培养细胞在 液氮中保存能恢复生长。
②1999年，Moukadiri等研究表明：超低温保存对水稻愈伤 组织再生后代的表性特征没有影响。 ③2001年.刘云国等发现苹果茎尖经保存后，谱带没有发生 变化。 2.结论 植物离体材料的超低温保存是长期保存种质资源的理想方 法。
会由于取样的随机性造成基因资源的丢失。因此，常 温限制生长保存方法是使培养物处于无生长 或缓慢生长状态下抑制植物的生长。
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二、常温保存的方法和原理
1、高渗保存法
是指通过提高培养基的渗透压，减少培养物吸收 养分和水分的量，减缓生理代谢过程，从而减缓生 长速度，达到抑制培养物生长的种质保存方法。 高渗物质：甘露醇（4~6%）、蔗糖+甘露醇 高渗配合低温保存效果更明显。如： 6~10℃低温下，培养基中加4%甘露醇，可保存马 铃薯1 ~ 2年，存活率最高可达90%以上。
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三、保存方式的利弊
3、离体保存 是将植物外植体在无菌环境下进行组织培养
，并贮存在各类生长抑制条件下，使其缓慢生 长或停止生长，以达到长期保存的目的，而在 需要利用时可迅速恢复正常生长。
种质资源的离体保存打破了植物生长季节 限制，具有节省贮存空间、便于运输和交流等 优点。对于利用营养器官繁殖的材料，可防止 多代繁殖造成种性退化及病毒感染，保证了种 质的优良性和遗传稳定性。
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二、物种资源超低温保存的原理
在细胞冷冻保存时，由于
（一）超低温保存的原理
细胞外的水首先形成冰态， 引起细胞外渗透压升高，
化在，超仅低剩温下保不存能过被程利中用，的植束物缚细水胞，内导 细 导酶致 胞 致自促细 内 蛋由反胞 环 白水应脱 境 质被停水发变固，生性止进改，定，一变酶化几步，系或乎使可统汽所
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二、常温保存的方法和原理
2、生长抑制剂保存法
在培养基中加入生长抑制剂以减缓培养材料的生长，达 到长期保存种质材料的保存方法。 生长调节剂：
脱落酸（ABA）、青鲜素、矮壮素（CCC）、多效唑等 使试管苗生长缓慢，生长健壮、叶色浓绿、移栽成活率高。
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二、常温保存的方法和原 理
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种质资源离体保存
方法包括： 常温限制生长保存 低温保存 超低温保存
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第一节 植物种质资源的常温限制生长保存
一.常温限制生长保存的概念
正常条件下离体培养不适合种质资源保存，因为在这种 条件下，材料生长很快，需要经常进行继代，工作量 及费用增加，在继代过程中易受微生物的污染，而且
泰坦魔芋
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三、低温保存的优点
2、植物种质资源低温保存时间长，保存的数量多
。如葡萄在植株在9℃条件下，通过每一年转换一 次新鲜培养基，可以保存15年之久，而在常温的条 件下需要1-3个月转接一次，通过这种方法，在2m2 实验室面积上保存了800个葡萄品种。而在田间需 要1hm2土地。
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2、非原生态保存：是指种质保存于该植 物原生态生长地以外的地方。
➢ 包括：
异地保存（种质圃或植物园保存） 种质库（种子）保存 离体（试管）保存等。
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三、低温保存的优点
低温保存的技术操作简单，需要设备 少，投资小，技术成熟，存活率高，保 存时间长等特点为。可以作为植物种质 资源的中长期保存方法。
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三、低温保存的优点
1、低温保存的技术操作简单。 以魔芋为例，选取茎尖分生组织为外植体， 建立试管苗无性系；选取生长健壮的、芽大 小为1.5cm的材料移入保存培养基，于25℃ ，光照度1000lx，12h条件下培养一周；转 入4℃黑暗中保存。材料每6个月继代培养一 次，继代培养时，从形态、经济性状、生理 生化等方面进行遗传稳定性鉴定。
二、低温保存的原理
在植物生长条件中，温度是个重要的 因素。植物必须有适宜的温度，当温度 降低以后，植物的成长速度就会受到抑 制而减慢，老化程度延缓，因而延长了 继代的时间间隔达到保存种质的目的。
2020/7/18
植物对低温的 耐受力不仅取决于 基因型，也是与它 们起源和生长的生 态条件有关。
正确选择适宜低 温是保存后高存活 率的关键。
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华南植物园
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西双版纳植物园
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三、保存方式的利弊
1、 原生境保存和异Biblioteka Baidu保存
弊：需耗费巨大的人力、物力和土地，在实际中很难实施 ，而且易受自然灾害、虫害和病害的侵袭，造成植物资 源的丧失。
2、 种质库（种子）保存
弊：1）生活力随储存期的延长逐渐丧失；2）无性繁殖的 植物（如苹果、柑橘等）难于采用种子保存；3）采用 无性繁殖来保持其优良性状的植物（许多果树），用种 子繁殖后代会发生变异；4）顽拗型种子植物（芒果、 椰子、油棕等）因其种子不易干燥脱水和低温储藏，不 宜用种子保存或保存难度很大；5）有些植株不产生种 子，如脐橙、香蕉；6）易遭自然灾害袭击而使种质资 源丢失。
3、饥饿法 从培养基中减去1~2种营养元素，使植株缺乏相关营养而处于 最小生长量。
4、矿物油覆盖法 使培养材料与空气隔绝，延缓生长。
5、低光照培养 适当减弱光照强度，缩短光照时间，进而减缓试管苗生长。
6、低压保存 降低培养材料周围气压，达到抑制生长的目的分为低气压与 低氧压两种，保存原理相似。
7、干燥保存法 降低培养物水分，其生命活动就能延缓，这与传统的种子干
燥储存类似。脱水和限制糖的供应量常被看成是一个正常种子 成202熟0/7经/18 历的类似过程。
第二节 植物种质资源的低温保存
一、低温保存的概念
植物种质资源的低温保存是指用离体培 养的方式在非冻结程度的低温下（一般 为1~9℃）保存种质方法。
对于植物而言，低温常常是指那些比 常温稍低一些的温度。
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怀
塘 雅
来
葡
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萄
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一、物种资源超低保存的发展概况
1.超低温保存发展 ① 20世纪70年代，Nag和Street证明胡萝卜悬浮培养细胞在 液氮中保存能恢复生长。
②1999年，Moukadiri等研究表明：超低温保存对水稻愈伤 组织再生后代的表性特征没有影响。 ③2001年.刘云国等发现苹果茎尖经保存后，谱带没有发生 变化。 2.结论 植物离体材料的超低温保存是长期保存种质资源的理想方 法。
会由于取样的随机性造成基因资源的丢失。因此，常 温限制生长保存方法是使培养物处于无生长 或缓慢生长状态下抑制植物的生长。
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二、常温保存的方法和原理
1、高渗保存法
是指通过提高培养基的渗透压，减少培养物吸收 养分和水分的量，减缓生理代谢过程，从而减缓生 长速度，达到抑制培养物生长的种质保存方法。 高渗物质：甘露醇（4~6%）、蔗糖+甘露醇 高渗配合低温保存效果更明显。如： 6~10℃低温下，培养基中加4%甘露醇，可保存马 铃薯1 ~ 2年，存活率最高可达90%以上。
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三、保存方式的利弊
3、离体保存 是将植物外植体在无菌环境下进行组织培养
，并贮存在各类生长抑制条件下，使其缓慢生 长或停止生长，以达到长期保存的目的，而在 需要利用时可迅速恢复正常生长。
种质资源的离体保存打破了植物生长季节 限制，具有节省贮存空间、便于运输和交流等 优点。对于利用营养器官繁殖的材料，可防止 多代繁殖造成种性退化及病毒感染，保证了种 质的优良性和遗传稳定性。
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二、物种资源超低温保存的原理
在细胞冷冻保存时，由于
（一）超低温保存的原理
细胞外的水首先形成冰态， 引起细胞外渗透压升高，
化在，超仅低剩温下保不存能过被程利中用，的植束物缚细水胞，内导 细 导酶致 胞 致自促细 内 蛋由反胞 环 白水应脱 境 质被停水发变固，生性止进改，定，一变酶化几步，系或乎使可统汽所
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二、常温保存的方法和原理
2、生长抑制剂保存法
在培养基中加入生长抑制剂以减缓培养材料的生长，达 到长期保存种质材料的保存方法。 生长调节剂：
脱落酸（ABA）、青鲜素、矮壮素（CCC）、多效唑等 使试管苗生长缓慢，生长健壮、叶色浓绿、移栽成活率高。
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二、常温保存的方法和原 理
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种质资源离体保存
方法包括： 常温限制生长保存 低温保存 超低温保存
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第一节 植物种质资源的常温限制生长保存
一.常温限制生长保存的概念
正常条件下离体培养不适合种质资源保存，因为在这种 条件下，材料生长很快，需要经常进行继代，工作量 及费用增加，在继代过程中易受微生物的污染，而且