自来水水质的微生物学检测实验设计
(2023)微生物实验报告水中细菌总数和大肠菌群的检测(一)
(2023)微生物实验报告水中细菌总数和大肠菌群的检测(一)水中微生物实验报告实验概述•实验名称：水中微生物总数和大肠菌群的检测•实验时间：2023年•实验地点：实验室实验目的•检测水中微生物总数和大肠菌群的存在情况•评估水质卫生状况，指导水资源管理和人群健康实验方法1.采集不同来源的水样。
2.将水样制成不同浓度的稀释液。
3.取一定量的水样稀释液注入培养皿中。
4.加入适当培养基，进行菌落计数和形态特征观察。
5.通过酶促法检测大肠杆菌。
实验结果•来源于自来水厂的水样中，微生物总数为100CFU/mL，大肠菌群未检测到。
•来源于河流的水样中，微生物总数为1000CFU/mL，大肠菌群为20CFU/100mL。
•来源于地下水的水样中，微生物总数为10CFU/mL，大肠菌群未检测到。
结论•来源于自来水厂的水样水质较好，不存在大肠菌群的污染。
•来源于河流的水样水质较差，大肠菌群的检出说明存在污染，需进行水质治理。
•来源于地下水的水样水质较好，不存在大肠菌群的污染。
实验意义•检测水中微生物总数和大肠菌群的存在情况，有利于保障人类健康和水资源的可持续利用。
•提供科学依据和技术支持，指导水资源管理和水质卫生监测。
实验注意事项•实验过程需严格遵守无菌操作规范，防止样本污染。
•实验前需对实验设备、培养基等进行消毒处理，确保实验环境洁净。
•实验结束后，需妥善处理实验产生的废液、废料等。
实验展望•未来可进一步开展对水中其他微生物种类的检测，深入了解水生态系统的生物多样性。
•结合近年来人类活动和气候变化的影响，对水质卫生进行长期监测，及时掌握水质变化趋势。
•根据实验结果，制定针对性的水资源管理和水质卫生治理措施。
结语该实验通过检测水中微生物总数和大肠菌群，评估了水质的卫生状况。
实验结果表明，水质卫生状况与水源的来源密切相关。
希望通过类似的实验，加强对水质卫生状况的监测和管理，确保水资源的可持续利用，保障人们的用水安全和健康。
自来水中细菌总数的测定
自来水中细菌总数的测定自来水是我们生活中必需的一种水源，但由于其经过管道输送，可能会受到外界环境的影响，其中细菌是其中一种污染物。
因此，对自来水中的细菌总数进行测定，有助于判断自来水是否符合生活饮用水标准。
一、实验原理本实验采用了膜过滤法对自来水中的细菌总数进行测定。
其原理是通过将水样通过微孔膜滤器，将水中的微生物捕捉在滤膜的表面，再将滤膜培养在含有营养物质的琼脂培养基中，使细菌能够生长形成菌落，然后再通过计数器进行计数。
二、实验步骤1. 实验前处理：先将实验室的玻璃仪器清洗干净，用工业酒精将滤器放入灭菌杯中斜着着火杀菌，备用。
2. 取一个样品瓶，将自来水（1L）倒入瓶中。
将样品瓶放入一个不透明的塑料袋中，用胶带密封塑料袋，防止紫外线照射导致细菌死亡。
3. 首先将滤装置组装好，将滤膜放入滤装置的中间柄内，放入开口的滤膜夹中。
然后用无菌注射器将琼脂培养基吸入滤装置的压力室中，将压力室旋好。
4. 用烧杯等容器将自来水倒入滤装置中，通过压力室将水样通过滤膜，滤膜表面残留的微生物被滤装置中的滤膜抓住，滤液通过过滤口流出。
滤液需丢弃。
5. 将滤膜夹子取下，将滤膜放入用滤膜侧朝上的营养琼脂培养基培养皿中，培养皿需用无菌手套拆开。
将其覆盖好，标明标识，并用胶带作为封口。
6. 将培养皿竖起放入培养箱中，温度设定为37℃左右，需要放置24h以上，17~25℃下也可进行培养，培养天数也需要视不同微生物而定。
7. 取出培养皿，用目镜进行菌落计数。
计数时需要注意，培养皿中的菌落数量需要控制在20~200个之间。
计数完后将数据进行转换，得出升级菌落数，即水样中的细菌总数。
三、实验注意事项1. 玻璃仪器需要在实验前清洗干净，并且需要消毒处理，防止样品污染。
2. 在进行实验前，实验人员需要洗手，并穿戴洁净的实验服和手套，防止手部细菌对实验结果的影响。
3. 滤装置和培养皿需要在无菌条件下进行处理，避免细菌的交叉感染。
4. 培养皿中需要加盖，防止紫外线照射导致细菌死亡，同时也可以避免污染。
检测水中细菌实验报告
检测水中细菌实验报告实验目的本实验旨在探究不同水源中细菌的存在情况，以检测水质是否安全，并且比较不同水源中细菌的数量差异。
实验材料1. 不同水源的取样瓶- A组：自来水，B组：河水，C组：井水2. 细菌培养基3. 培养皿4. 恒温培养箱5. 显微镜6. 微生物鉴定手册实验步骤1. 将取样瓶置于实验台上，避免受到其他污染源的干扰。
2. 分别取代表性的自来水、河水和井水样品，并将每个样品分别装入对应组别的取样瓶中。
3. 将每个样品的取样瓶稍微晃动，以确保细菌均匀分布于水中。
4. 取样瓶的标签上注明所属组别。
5. 在实验室中，为每个组别准备三个培养皿，并在每个培养皿中倒入细菌培养基（约满一半）。
6. 分别将A组、B组和C组的水样倒入相应的培养皿当中。
7. 用试管夹将每个培养皿退出4毫升的液体（水样+培养基），并转移到三个不同的培养皿中，确保菌液均匀地分散。
8. 紧密盖上培养皿的盖子，将其放入恒温培养箱中，设置合适的培养温度（例如37）。
9. 培养72小时后，取出培养皿进行观察，并使用显微镜观察细菌的形态。
10. 根据细菌的形态和相应的实验结果，使用微生物鉴定手册进行细菌的鉴定与分类。
实验结果观察培养皿后，我们发现以下结果：- A组（自来水）：培养皿上观察到一些细菌的生长，但数量较少。
- B组（河水）：培养皿上观察到大量细菌的生长，并且形成了密集的细菌菌落。
- C组（井水）：培养皿上观察到适量细菌的生长，数量介于A组和B组之间。
实验分析根据细菌的生长情况，可以初步得出以下结论：1. 自来水中的细菌数量较少，说明自来水的水质较为安全。
2. 河水中的细菌数量较多，可能存在潜在的食品污染风险，需要处理后才能安全饮用。
3. 井水中的细菌数量处于中等水平，需要进一步检测和处理，以确保水质安全。
实验总结通过实验我们了解到不同水源中细菌的存在情况，同时比较了各个水源中细菌数量的差异。
实验结果显示，自来水的水质较为安全，而河水和井水中细菌的数量则需要进一步处理。
生活饮用水中微生物检测质量方案
生活饮用水中微生物检测质量方案摘要：在人们的日常生活中，水是重要的生存资源，优质的水资源直接影响着人们的身体健康。
在现代化社会的快速发展中，水环境会受到各种因素的影响，使水资源污染越来越严重，影响了人们的健康生活。
为确保水资源质量，相关部门应加大监管力度，结合各地区生活饮用水的实际情况，采用科学合理的检测技术手段，制订完善的检测方案，针对生活饮用水进行微生物质量检测，提升生活饮用水质量，同时为人们营造良好的生活环境。
本文针对生活饮用水中微生物检测质量控制方案设计进行详细分析，根据水质检测工作的需求，做好前期的准备工作，为水质检测工作的实施奠定良好基础；分析具体的影响因素，控制检测质量；并针对检测结果进行分析，不断完善检测方案，从而确保生活饮用水中微生物检测质量。
关键词：生活饮用水；微生物；检测质量；控制方案随着现代化城市的不断发展，使我国水资源的受污染程度、影响范围越来越大。
对此，还需进一步加大对生活饮用水微生物的检测力度，采用现代化检测技术，掌握各地区水资源的综合情况，制订完善的检测方案，详细分析影响微生物检测质量的影响因素，注重微生物采集、运输、保存、检测等各环节，提高检测过程的科学性与合理性，从而确保生活饮用水质量[1]。
1生活饮用水中微生物检测质量控制方案设计1.1正确选择实验药品。
在生活饮用水微生物检测质量控制方案设计中，对微生物检测工作的开展，最重要的工作环节就是前期的准备工作，根据各地区水资源的实际情况，制订完善的检测方案，根据检测工作的实施需求，正确选择实验相关用品。
其中包括对培养基的购买，以批次购买的方式，对其进行明确的标记，确保所购买的培养基符合水质检测工作的实施需求[2]。
根据我国相关规定与检测方法，先对购买的培养基灭菌、消毒处理，避免对水质检测过程与结果造成影响[3]。
然后把培养基制成平板，放置在37℃的培养箱内，要求时间为24h。
通过对培养箱内实际情况的观察，如果没有菌落的生长，说明培养基是无菌的，符合水质检测工作的相关要求[4]。
水处理微生物实验报告
水处理微生物实验报告实验目的：通过研究水处理微生物的作用，了解微生物在水处理中的应用和重要性。
实验材料和方法：材料：自来水、废水、细菌培养基、平板、试管、显微镜等。
方法：1. 取自来水和废水样品，分别装入试管中。
2. 对试管中的样品进行稀释，得到不同浓度的样品。
3. 用吸管吸取一定量的稀释后的样品，均匀涂抹在细菌培养基平板上。
4. 将涂抹后的平板放入培养箱中，25培养24小时。
5. 取出培养好的平板，观察菌落的形态和数量。
6. 用显微镜观察菌落中的微生物，记录种类和数量。
实验结果：经过观察，可以发现自来水样品在平板上的菌落数量相对较少，且菌落颜色较浅。
而废水样品在平板上的菌落数量较多，菌落颜色较深。
通过显微镜观察，可以看到菌落中存在大量不同形态的微生物。
实验讨论：1. 自来水中的微生物数量较少，这是因为自来水经过消毒处理，微生物已经被杀灭或大量减少。
2. 废水中的微生物数量较多，这是因为废水中存在大量有机物质，为微生物提供了生存和繁殖的条件。
3. 废水中的微生物种类较多，包括细菌、真菌、藻类等。
这些微生物具有不同的代谢特点，对水中有机物质进行分解和降解，从而净化水体。
4. 废水处理中常使用微生物处理技术，利用微生物的降解能力进行废水处理。
通过培养和筛选适宜的微生物，可以提高废水处理效果，达到净化水体的目的。
实验结论：水处理微生物在废水处理中发挥着重要的作用。
通过研究微生物的生长和降解特性，可以优化水处理工艺，提高废水的处理效果。
同时，对自来水中的微生物进行研究也有助于了解水质的健康和安全情况。
因此，对水处理微生物的研究具有重要的意义。
微生物综合实验报告
实验题目：检测水中大肠杆菌群数量组员姓名：郑伟周宇作者单位：南京工业大学生物与制药工程学院摘要：实验采用自来水作为样品，利用多管发酵法对样品进行培养,接种，分离，纯化，得到具有不同特征的肠杆菌。
通过对肠杆菌的数量和形态特征的分析，确定自来水是否被污染和污染程度。
关键词：水源；肠杆菌；多管发酵；数量；污染前言：水是制药和食品行业使用最为广泛的原料，也是我们日常生活离不开的、赖以生存的基础。
水与药品、食品中的其他原料一样，必须符合既定的质量标准，如果水被污染就会影响多批次产品。
另外，对微生物实验室来说，水是各种培养基、缓冲液、检测剂的主要组成部分。
必须严格控制水的微生物学质量，以保证医药食品产品、培养基、试剂等的质量的可靠性以及人类用水的安全。
制药用水微生物监测是为了监控控制性微生物从而将水中微生物含量维持在一定水平。
没有必要将水中存在的所有微生物都监测出来，只针对对产品对人具有潜在危害的致病性的微生物进行监控。
流行病学研究确认，水携带的病原菌的存在与肠道来源的细菌相关，肠道病原微生物进入水体，随水流传播可引起肠道病爆发流行，所以必须对水中病原微生物严格监控。
但要从水体中直接检出病原微生物比较困难，它们在水中的数量很少且培养条件苛刻，分离和鉴别都比较难，即使样品检测结果是阴性也不能保证没有病原微生物的存在。
因此，常用指示微生物作为水体中病原微生物的监测指标。
大肠菌群细菌在人的肠道和粪便中数量很多，受到粪便污染的水容易被检出，且检测方法比较简易。
所以，常以大肠菌群为微生物评价水的卫生质量。
大肠菌群是一群需氧或兼性厌氧的、在37℃培养24~48h 能发酵乳糖产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌，包括埃希菌属（Escherichia)、柠檬酸杆菌属（Citrobacter）、肠杆菌属（Enterobacter）、克雷伯菌属（Klebsiella）。
大肠菌群数是指每升水中含有的大肠菌群的近似值，根据水中大肠菌群的数目即可判断水源是否被粪便污染，并推断水源受肠道病原菌污染的可能性。
微生物论文---自来水中细菌总数的测定
微生物论文---自来水中细菌总数的测定标题：自来水中细菌总数的测定研究摘要：水是人类生活中不可或缺的重要资源，而自来水作为人们日常生活中常用的饮用水源之一，对其细菌总数的测定显得尤为重要。
本研究旨在通过实验方法对自来水中细菌总数进行测定，并分析其对水质的影响。
实验方法包括用环境培养基进行培养和计数、制备标准曲线以及利用显微镜观察菌群形态特征。
实验结果显示，自来水中细菌总数较高，其中以非致病性菌群为主。
此外，本研究还对细菌总数与水质的关系进行了探讨，并提出了改善自来水水质的建议。
这些研究成果对于保障人们日常饮用水的安全和提升自来水供应的质量具有重要的指导意义。
关键词：自来水，细菌总数，培养和计数，标准曲线，显微镜观察，水质改善引言：自来水作为广泛使用的饮用水源，其水质安全与人们的健康息息相关。
水中微生物是自来水水质评估的重要指示因子之一，尤其是水中细菌总数。
细菌总数可以反映自来水中的微生物多样性及其数量，从而评估水质的卫生状况。
因此，了解自来水中细菌总数的测定方法和水质影响因素，对保护人们的生命安全和提高自来水供应质量具有重要意义。
方法：1. 样品采集与处理：根据相关标准，从不同地点和时间段采集自来水样品，避免污染并尽快送至实验室进行处理。
2. 细菌总数的培养和计数：采用适当的营养培养基，在恰当的条件下培养细菌，并采用平板计数法确定细菌总数。
3. 制备标准曲线：选取具有代表性的细菌菌种，制备不同浓度（CFU/mL）的菌液，并根据菌液浓度和培养基培养的菌落计数结果绘制标准曲线。
4. 显微镜观察：从培养基上取出菌落，制备细菌涂片并利用显微镜观察细菌形态特征。
结果：经过实验测定，自来水中细菌总数平均为X CFU/mL。
观察到多种细菌菌落，其中非致病性菌群的数量较多，而致病性细菌数量较少。
讨论：本研究结果表明，在自来水中存在较高的细菌总数，其中以非致病性菌群为主。
细菌总数的测定可以为评估自来水的卫生状况提供依据，并帮助改善水质。
微生物学实验设计方案
食品生物危害性项目的分析检测--饮用水检测及鉴定一．实验目的1、学习从自来水中分离、纯化微生物的原理与方法。
2、学习、掌握自来水中细菌、大肠杆菌的检测与鉴定方法。
二. 实验原理1、采样：即采集含菌的样品采集含菌样品前应调查研究一下自己打算筛选的微生物在哪些地方分布最多，然后才可着手做各项具体工作。
2、增殖培养（又称丰富培养）增殖培养就是在所采集的豆腐干等含菌样品中加入某些物质，并创造一些有利于待分离微生物生长的其他条件，使能分解利用这类物质的微生物大量繁殖，从而便于我们从其中分离到这类微生物。
因此，增殖培养事实上是选择性培养基的一种实际应用。
3、纯种分离在生产实践中，一般都应用纯种微生物进行生产。
通过上述的增殖培养只能说我们要分离的微生物从数量上的劣势转变为优势，从而提高了筛选的效率，但是要得到纯种微生物就必须进行纯种分离。
纯种分离的方法很多，主要有：平板划线分离法、稀释分离法、单孢子或单细胞分离法、菌丝尖端切割法等。
4、微生物的形态特征：细菌是单细胞原核微生物，基本形态为球状、杆状和螺旋状。
有些细菌除具有共同结构外还具有鞭毛、荚毛、芽孢等特殊结构。
大肠菌群是一类革兰氏阴性无芽孢杆菌，24h内能发酵乳酸或半乳糖。
三．实验材料1、器材：小刀一把、培养皿20个、量筒、滴管5个、吸水纸、试管30支、烧杯5个、三角瓶（100ml）6个、玻璃棒、乳钵、接种环、镊子、恒温培养箱、高温灭菌锅、天平、显微镜、血球计数板、酒精灯、纱布、漏斗、乳糖蛋白胨发酵管、带塞玻璃瓶、、滤纸、pH试纸、刻度吸管（1mL和10mL各5个）等。
2、试剂：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、伊红美兰琼脂培养基、革兰氏染液、乳糖胆盐培养基、95％乙醇、无菌水等。
３、样品自来水（一）自来水中的细菌含量检测一、实验目的（1）学习水样的采取和水样中细菌总数测定的方法（2）了解和掌握平板菌落计数的原则二、实验验原理绝大多数腐生性和致病性的细菌，可在营养丰富的牛肉膏蛋白胨培养基上进行生长，出现肉眼可见的菌落，虽然这样设计出来的水中细菌的总数实际上是一种近似值，但它基本上能代表水样中细菌的数量。
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自来水水质的细菌学检查
一、文献综述
1.（1）水质细菌学检验的意义
生活自来水及其水源水等水体受到生活污水、工农业废水或人和动物粪便的污染后,水中的细菌数可大量增加,其中病原菌也随之增加引发传染危害人类健康因而水中细菌总数和大肠菌数量可反映水体受微生物污染的程度水中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关。
故水的细菌学检验对了解水体受污染程度在流行病学和提供水质标准中有重要意义和价值它是评价水质污染程度的重要指标之一。
（2）总大肠菌群的检测意义
大肠菌群系：指一群在37°C、24小时能发酵乳糖产酸产气，需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
测定的意义：大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。
调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。
粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。
大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除--般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在(如沙门氏菌、志贺氏菌等)，因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，具有广泛的卫生学意义。
它反映了水源是否被粪便污染，同时间接地指出水源是否有肠道致病菌污染的可能性。
大肠菌群数系以每1g (或mL)检样内大肠菌群近似可能数MPN (the most probable number-简称MPN)表示
（3）耐热大肠菌群的检测意义
作为一种卫生指标菌，耐热大肠菌群中很可能含有粪源微生物，因此耐热大肠菌群的存在表明可能受到了粪便污染，可能存在大肠杆菌。
但是，耐热大肠菌群的存在并不代表对人有什么直接的危害。
作为粪便污染指标菌，耐热大肠菌群与大肠菌群、大肠杆菌相似，主要以其检出情况来判断食品是否受到了粪便污染。
粪便是肠道排泄物，有健康者，也有肠道病患者或带菌者粪便，所以粪便中既有正常肠道菌，也可能有肠道致病菌(如沙门氏菌、志贺式菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌等)和食物中毒者。
因此，食品既然受到粪便污染就有可能对食用者造成潜在的危害。
通常情况下，耐热大肠菌与大肠菌群相比，在人和动物粪便中所占的比例较大，而且由于在自然界容易死亡等原因，耐热大肠菌群的存在可认为食品直接或间接的受到了比较近期的粪便污染。
因而，耐热大肠菌群在食品中的检出，与大肠菌群相比，说明食品受到了更为不清洁的加工，肠道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。
耐热大肠菌群比大肠菌群能更贴切地反应食品受人和动物粪便污染的程度，且检测方法比大肠杆菌简单地多，而受到重视。
2.(1)细菌总数测定的原理与方法
原理：水中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关。
由于重金属及其他有毒物质对细菌有杀灭或抑制作用，因此总细菌数少的水样，并不能排除已被这些物质所污染。
细菌总数主要作为判定被检水样污染程度的标志在水质卫生学检验中，细菌菌落总数(CFU)是
指lmL水样在营养琼脂培养基(LB培养基)中，于37C培养24h后所生长的腐生性细菌菌落总
数。
它是有机物污染程度的指标，也是卫生指标。
方法：本实验采用标准平皿法对水样中细菌做计数,这是一种测定水中好氧的和兼性厌氧的异养细菌密度。
由此法所得的菌落数实际上要低于水样中实际活菌的数目。
一般规定，1ml 饮用水中总菌数不得超过100个。
(2)大肠菌群数测定的原理与方法
原理：大肠菌群系指-群能发酵乳糖，产酸产气,氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽抱杆菌。
它反映了食品是否被粪便染，同时间接地指出食品是否有肠道致病菌污染的可能性。
即中大肠菌群数系每100g (或m)检样大肠菌群最近似数(the most probable number简称MPN)示。
方法：采用多管发酵法，以最近似数的方法来记载。
此一数字是根据概率公式来计算,有大于实际数字的倾向,在增加每种稀释度的试管重复数后，可减小偏差。
二、实验采用标准
随着经济的发展，人口的增加，不少地区水源短缺，有的城市饮用水水源污染严重，居民生活饮用水安全受到威胁。
1985年发布的《生活饮用水卫生标准》（GB5749－85）已不能满足保障人民群众健康的需要。
为此，卫生部和国家标准化管理委员会对原有标准进行了修订，联合发布新的强制性国家《生活饮用水卫生标准》（GB5750－2006）（下称“新标准”）。
GB5750--2006
（详见质量控制标准与检验方法标准）
质量控制标准与检验方法标准
（略，详见质量控制标准与检验方法标准.PDF）
生活饮用水卫生国标(GB5750- 2006)规定总大肠菌群(MPN/ 100ml或CFU/ 100mL)不得检出。
细菌总数的定义及国标限值细菌总数是指1升水样在营养琼脂培养基中,于培养基24小时培养后,所生长的细菌菌落的总数。
国标中规定1升水中细菌总数不得超过100个
采样方法
自来水:从学校各生活区（天健区楼栋）取样。
先将自来水龙头用火焰灭菌，再开放水龙头使水流1-2分钟后，用无菌空瓶接取水样。
三、主要仪器设备
培养基及器皿、牛肉膏蛋白胨培养基、乳糖蛋白胨发酵管(内倒置小管)、10ml吸管一支、100ml量筒一支、2瓶50ml三倍乳糖蛋白胨培养液(内倒置小管)、10支5ml三倍乳糖蛋白胨培养液(内倒置小管)、伊红美蓝琼脂培养基、无菌空瓶、EMB，革兰染液。
培养基:营养琼脂培养基
四、实验技术路线
初发酵——平板分离——复发酵证实实验
初步发酵试验:三倍浓缩乳糖蛋白胨液体培养基，接种水样总量为300ml ( 100ml 2份，10ml10 份，12支发酵管)。
37C培养24h ~ 48h。
平板分离: 将产酸产气及只产酸不产气(发酵乳糖)管接种EMB, 37C培养24h,取典型菌落作革兰氏染色镜检。
复发酵试验:革兰氏染色镜检为革兰阴性无芽胞杆菌，取该菌接种于普通浓度乳糖蛋白胨(每管接1~3个菌落), 37C培养24h,有产酸产气者即证明有大肠杆菌的存在。
实验流程图如下
五、实验步骤
1.实验前的准备：(1)培养基的配置。
(2)面所售营养琼脂培养基为瓶装黄白色干燥粉末易吸潮,加水煮沸溶解后为半透明液体,冷至38开始凝固,pH值7.2~7.4,日常工作中可用250ml锥形瓶洗净消后,取10.5克培养基粉末加250ml蒸馏水摇匀,煮至完全融化,放于高压蒸汽灭菌器内,121度高压灭菌15分钟,备用。
(3)器皿的消毒。
将平皿、试管、刻度吸管等清洗干后于干燥箱中160灭菌两小时,备用。
2.实验步骤:
细菌总数测定：
（1）以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1 mL充分混匀的水样.注人灭菌培养皿里中,倾注约15 ml.已融化井冷却到45C左右的营养琼脂培养基,井立即旋摇平皿,使水样与培养基充分混匀。
每次检验时应做一平行接种,同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。
（2）待冷却凝固后,翻转平盟.使底面向上,置于36C土IC培养箱内培养48 h.进行菌落计数，即为水样1ml的菌落总数。
大肠菌群测定：
(1) 初发酵试验:在2个装有50毫升三倍乳糖蛋白胨发酵管中，各加入100毫升水样，在10 支装有5毫升三倍乳糖蛋白胨发酵管中，各加入10毫升水样。
混匀后37°C培养24小时。
(2)平板分离:经24小时培养后，将产酸产气及只产酸的发酵管，分别划线接种于伊红美蓝平板上，于37°C培养18--24 小时，将符合下例特征的菌落的一部分，进行涂片、革兰氏染色、镜检。
a.深紫黑色，具有金属光泽的菌落;
b.紫黑色，不带或略带金属光泽的菌落;
c.淡紫红色，中心色较深的菌落。
(3) 复发酵试验:经涂片、染色、镜检为革兰氏阴性无芽抱杆菌时，则挑取该菌落的另一部分，再接种于普通浓度的乳糖蛋白胨发酵管中，每管可接种来自同一发酵管的同类型菌落1--3 个。
37°C培养24小时，结果若产酸产气，即证实有大肠菌群存在。
证实有大肠菌群存在后，再根据发酵试验的阳性管数查表二,即得大肠菌群数。