凝聚胺法交叉配血标准操作规程
交叉配血步骤
盐水介质配血法：
1、取洁净小试管两支，分别注明主侧、次侧。
2、主侧管分别加受血者血清2滴和供血者红细胞悬液1滴。
次侧管加供血者血清2滴和受血者红细胞悬液1滴。
混匀，3400转/min离心15秒。
轻轻摇动试管，观察结果。
凝聚胺配血法
1、取洁净小试管两支，分别注明主侧、次侧。
主侧管：病人血清2滴+献血者3%~5%红细胞悬液1滴
次侧管：病人3%~5%红细胞悬液1滴+献血者血清2滴
2、各加入LIM0.65ml，混匀后再加入Polybrene溶液2滴，并混合均匀，3400转/min离心15秒，弃上清，轻轻摇动试管观察是否凝集，如无凝集必须重做，最后加入Resuspending2滴，轻轻摇动试管混合并观察结果。
3、如果凝集散开，配血结果相合；如果凝集不散开，配血结果不相合。
凝聚铵介质交叉配血
凝聚胺介质交叉配血
【注意事项】 1、临床输血进行交叉配血试验时，应当首先 进行盐水介质的交叉配血试验，排除完全性 （IgM型）红细胞抗体的存在后，再进行凝聚 胺介质交叉配血试验； 2、溶血标本不能用于交叉配血试验； 3、当重悬液加入后，应尽快观察结果（不超 过3min），以免反应减弱或消失； 4、凝聚胺是一种抗肝素试剂，所以如果使用 含肝素的标本，要加较多的凝聚胺中和肝素。
【操作步骤】 1、取4支洁净小试管，表明主、次侧管； 2、在主侧管中加入受血者血清2滴和献血 者红细胞悬液1滴；在次侧管中加入献血者血 清2滴和受血者红细胞悬液1滴； 3、每管各加入LIM溶液0.6ml，并加入2 滴凝聚胺溶液，混匀； 4、1300×g离心15s，倒去上清液；
凝聚胺介质交叉配血
【操作步骤】 5、轻轻摇动试管，肉眼观察有无凝集， 若无凝集，必须重做； 6、加入2滴重悬液，并轻轻混合，肉眼 观察结果； 7、取载玻片一张，用滴管分别从主次侧 内各吸1滴细胞悬液均匀涂于玻片上，显微镜 观察，最后得出试验结果。
谢谢！
凝聚胺介质交叉配血
【结果判断】 先用肉眼观察有无凝集，再进一步用显 微镜观察有无凝集。如主侧管和次侧管内红细 胞凝集散开，则为凝聚胺引起的非特异性凝集， 表示受血者和献血者两血在凝聚胺介质配血相 容，献血者血液可以输注。
【结果判断】 如果主侧管和次侧管或单一侧试管内 红细胞凝集不散开，则表示为抗原抗体 结合的特异性反应，两血不相容，献血 者血液不可输注。
凝聚胺介质交叉配血
凝聚胺介质交叉配血
【标本、试剂与器材】 1、标本 ABO全血标本（2ml）患者1人 份，供者2人份（红细胞制备成2%~5%红细 胞悬液）； 2、试剂 凝聚胺试剂盒（包括低离子介质、 凝聚胺试剂和重悬液）； 3、器材 记号笔、试管、试管架、滴管、载 玻片、离心机、显微镜。
血库凝聚按法交叉配血操作规程及血库收发标本制度
交叉配血操作规程交叉配血试验（凝聚胺法）[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。
距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。
而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。
如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。
交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。
[试剂组成]1，洁净试管，离心机，显微镜。
2，0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至1000 ml。
试剂启用后，有效期为：二周。
3，凝聚胺试剂*1 低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2钠及稳定剂。
*2 凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。
*3 复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。
*4 阳性对照血清：含抗D血清，氯化钠及稳定剂。
4，抗人IgG 血清。
[试剂保存和稳定性]1．凝聚胺试剂须保存在2-25℃。
2．有效期内可使用。
3．抗人IgG血清低温冰箱保存。
复溶后放2—4℃冰箱保存。
[标本收集和准备]1．抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。
以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。
2．2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3次。
根据下表进行红细胞悬液的配制。
悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1．取出3支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴，次测管：加入供血者血清（浆）2滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1滴，对照管：加入2滴*4阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴。
凝聚胺法交叉配血标准操作规程
凝聚胺法交叉配血标准操作规程1.原理凝聚胺（polymatching）法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红细胞。
加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。
2.标本采集：2.1标本种类：抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清，将细胞配成5％盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。
2.2标本要求：抗凝和干燥管均可，如用抗凝血主张用EDTAK2（mg/dz）抗凝标本应无溶血，切标签齐全。
3.标本储存：急诊标本30分钟内完成操作，标本应至4℃冰箱保存7天。
4.标本运输：室温运输。
5.标本拒收标准：细菌污染。
溶血标本，标签不齐全不能作测定。
6.试剂：6.1试剂名称：凝聚胺试剂(polymatching)6.2试剂生产厂家：(台资)xxxx生物技术有限公司。
6.3试剂组成：试剂1.低离子介质(LowLonicMedium，LIM).试剂打开使用后，可置室温贮存，未开封者2-10度贮存，有效期为2年。
试剂2.凝聚胺溶液(PolybreneSolution).贮存及有效期同上。
试剂3.重悬液(ResuspendingSolution).贮存及有效期同上。
试剂4.8.5％生理盐水。
7.仪器：7.1血型血清xx离心机：XTL-4.7xx离心机械研究所7.2离心机：xx手术器械厂7.3电热恒温水箱：xx长源实验设备厂7.4xx：OLYMPUS(xx)8.操作步骤及结果判断：8.1供受者红细胞用生理盐水配成3-5％的细胞悬液。
加样量均为：血清2滴，红细胞悬液1滴。
主管：受血者血清+供者红细胞悬液;次管：受者红细胞悬液+供者血清;(阴阳对照管另设)。
交叉配血试验(凝聚胺方法)
交叉配血试验（凝聚胺方法）一、试剂储存条件及有效期未开封试剂应贮存于2～25℃、相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。
二、样本要求1、新鲜血清、含EDTA抗凝血浆、3%-5%的红细胞悬液。
2、不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。
三、检验方法1、取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者 3-5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1 滴，次侧管反之。
2、各加 LIM0.7ml,混合均匀后，再各加 Polybrene2 滴，并混合均匀。
3、用血库离心机 3400 转/分离心 10 秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml 液体。
4、轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。
5、最后加入 Resuspending2 滴，轻轻转动试管混合并涂片，显微镜下观察结果：在 30 秒-1 分钟内凝集散开，代表是由 Polybrene 引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。
如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。
四、注意事项1、可以用含EDTA之血浆代替血清使用。
2、若病人血清（血浆）含肝素，如洗肾患者，须多加4-6滴Polybrene溶液以中和肝素。
3、本试剂盒的操作方法也适用于抗体鉴定。
4、若试剂使用前为低温贮存，请恢复室温再行操作。
5、加做辅助性抗球蛋白试验，目的是增加检测抗-K的敏感性，对检测其他红细胞抗体无帮助。
6、在冬天室温极低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清中可能含有寒冷凝集素等因素，面导致假阳性的结果出现。
若有此怀疑，建议在最后滴入Resuspending时，将试管立即置入37摄氏度水浴中，轻轻转动试管混合，并在60秒内观察结果。
交叉配血操作规程凝聚胺法
交叉配血操作规程凝聚胺法交叉配血是指将一定数量的输血者的红细胞与另一组供血者的血清进行混合，通过观察混合血后是否发生凝集反应来确定血型。
交叉配血操作主要采用凝聚胺法进行，以下是交叉配血操作规程的详细步骤。
1.准备工作a.配置所需试剂，包括输入血浆、配血瓶、试剂盘、标本管、溶血酶溶液、配血盘等。
b.通过测定输血者和供血者的血型，确认双方的血型信息，并记录在相关记录表中。
2.标本采集a.采集输血者和供血者的静脉血标本，放入标本管中，避免血样凝固。
b.标本采集的相关操作要符合严格的无菌原则，确保血样的无菌及安全性。
3.标本处理a.将标本管中的静脉血标本置于冰上，在4℃下保存。
b.用溶血酶溶液处理输血者的红细胞，将3滴红细胞加入到每一个配血瓶中，轻轻摇动混合均匀。
4.试剂配置a.将配血盘中的试剂盘取出，配置新鲜的抗血型血清和已知血型标准红细胞。
5.凝胶装配a.打开凝胶洞口，将配血盘的试剂盘放入凝胶洞中。
b.确保试剂盘的位置正确，使试剂液体触及到凝胶洞的底部。
6.样本混合a.取出保存在冰上的输血者和供血者的静脉血标本，放置于试剂盘的对应位置。
b.轻轻旋转试剂盘，使血样和试剂充分混合起来，注意避免搅拌过于激烈。
7.观察凝聚反应a.在一定的时间内，观察配血盘中是否发生凝聚反应。
b.根据凝聚反应的情况，判断输血者和供血者的血型是否兼容。
8.结果判读a.若输血者的红细胞与供血者的血清发生凝聚反应，表示两者的血型不兼容，不适合进行输血。
b.若输血者的红细胞与供血者的血清没有发生凝聚反应，表示两者的血型兼容，可以进行输血。
9.记录和报告a.记录每次交叉配血的操作过程和结果，包括输血者和供血者的血型信息、配血的凝聚反应情况等。
b.报告输血者的血型结果和是否适合进行输血。
交叉配血操作规程凝聚胺法主要是通过观察凝聚反应来判定血型的兼容性，该方法操作简单、结果可靠。
但需要注意的是，交叉配血结果只能作为指导输血的参考依据，还需要综合考虑患者的临床情况和输血指征等因素，确保安全有效地进行输血操作。
输血科交叉配血操作规程
类另小操作规程部n ：输血科名称：输血科交叉配血试验标准作规程 新 增：交叉配血标准操作规程【目的】检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配 血，确保受血者输血安全。
【范围】所有输血前需要进行交叉配血的血制品。
【职责】配血岗位负责交叉配血试验。
【原理】交叉配血试验是指受血者血清与供血者红细胞及受血者红细胞 与供血者血清之间的混合凝集试验，分为主管（或称主侧）及次管（或称次侧）。
主管是受血者血清与供血者红细胞，次管是受血者红细胞 与供血者血清。
凝聚胺法利用多聚季胺盐类一一凝聚胺携带很多正电荷，中和 红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆 性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝 集消散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判 断供、受者间血液的相容性。
生效日期：2014. 10 修改日期：2014. 09【标本采集和处理】1、标本采集：EDTA抗凝静脉血2ml。
2、标本保存：室温放置不超过6小时，4℃保存不超过72小时，无溶血及明显乳糜。
【设备与试剂】1、凝胶胺介质试剂盒①包装规格：150Tests∕盒。
②试剂组成：低离子溶液，凝聚胺溶液，悬浮液。
③储存条件及有效期：未开封试剂应贮存于2℃-25℃、相对湿度不大于80%；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后6个月内使用完。
2、红细胞悬液：取标本离心后压积红细胞与生理盐水配制3%-5%红细胞悬液。
3、BaSo2005-2> BaSo2002-2型医用低速离心机：珠海贝索生物技术有限公司。
【方法】1、盐水介质法a）取小试管（内径10 mm×60 mπι）2支，分别标明“Ps+Dc”和“Pc+Ds”，前者为主管，后者为次管。
其中Ps=受血者血清，Pc=受血者红细胞，Ds=供血者血清，De二供血者红细胞。
凝聚胺法交叉配血操作规程
凝聚胺法交叉配血操作规程一．【预期用途】本产品作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体的临床筛选检测及辅助用于临床交叉配血实验。
二．【检验原理】红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta 电位决定红细胞之间的排斥作用。
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。
其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。
最后，加入悬浮液（Resuspending），Resuspending 具有中和凝聚胺（Polybrene）阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。
三．【主要组成成分】试剂由低离子溶液（Low Ionic Medium）、凝聚胺溶液（Polybrene Reagent）、悬浮液（Resuspending）组成。
注：一般情况在有效期内不同批号试剂盒中的各组份可以互换使用，但不推荐此做法。
四．【储存条件及有效期】2℃～25℃保存，有效期2年。
未开封试剂应贮存于相对湿度不大于80％，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80％，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为2年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。
生产日期及有效期信息见标签。
五．【样本要求】1、新鲜血清、含EDTA抗凝血浆、3％～5％的红细胞悬液。
（如取分离血清后底层红细胞50ul与生理盐水1mL配成5％红细胞悬液）2、不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
凝聚胺法交叉配血标准操作规程
1.目的
规范凝聚胺法交叉配血标准操作程序。
2.原理
红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕,而形成Zeta电位， Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。
其后，加入凝聚胺(Polybrene)溶液，它是一种高阶阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。
最后加入悬浮液（Resuspending）， Resuspending具有中和凝聚胺(Polybrene)的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。
3.试剂
由珠海贝索生物技术有限公司生产的凝聚胺法试剂盒，其组成：
3.1低离子介质(LIM) 2×130ml。
3.2凝聚胺(Polybrene)溶液2×20ml。
3.3 Resuspending溶液2×20 ml
4.仪器
4.1 80-2离心机：上海医疗器械有限公司
4.2电热恒温水浴箱：上海精宏实验设备有限公司
4.3 OLYMPUS显微镜：日本
5.操作步骤及结果判断
按照试管法血型鉴定检验标准操作程序进行受血者血型鉴定, 并将鉴定结果写于申请单，并签名。
以“同型输注”为原则，取相对应的成分血源进行交叉配血。
5.1取洁净小试管2支,分别标明主、次侧管。
5.2于主侧管中加入受血者血浆2滴和供血者3-5%红细胞悬液1滴,次侧管中加
入供血者血浆2滴和受血者3-5%红细胞悬液1滴, 轻轻混匀离心1000r/分钟, 仔细观察有无凝集,无凝集则可进行下一步骤,若有凝集则查找原因。
（盐水法）
编制人王渊审核人钟剑
版本号第二版颁布日期2018年1月1日
5.3将LIM液分别加入上述主侧管、次侧管各0.65毫升，然后分别加入
Polybrene溶液2滴，充分混匀。
在室温中静止15秒钟。
5.4 3400转/分钟离心10秒钟，则将上清液倒掉，保留管底约0.1毫升的液体，
轻轻摇动试管，观察有无凝集。
若没有凝集，须重做。
5.5最后加入Resuspending溶液2滴，轻轻混匀，1分钟内看凝集是否散开。
若散开，则可以涂成薄片镜检，确定镜下也没有凝集,则判定配血结果相合；
若不散开，将试管立即置入37℃水浴，若凝集散开则为冷凝集，在交叉配血报告单上备注出，提醒临床输注时注意，强冷凝集时建议不输注；若37℃水浴凝集不散则为血交叉不合，通知临床建议不输注，并记录在申请单和异常结果登记本上，如病情需要必须输血，立即送往血液中心做进一步鉴定和血交叉，找到合适的血源。
6.结果报告
6.1 依据交叉结果，认真填写交叉配血报告单。
应逐项填写，不得遗漏。
结
果经专业人员审核后，确认准确无误后发出报告。
若交叉不合，应向上级部门和临床及时联系，并作好记录。
必要时送省血液中心。
6.2将交叉结果登记在交叉登记本上，记帐。
电告临床由医务人员到血库提取
血制品,在提取血制品时必须由血库工作人员与提血者一起核对后双方在
登记本上签名。
7.附注
7.1第一次输血（浆）病人，必须要求在该病人输注前留血做传染病九项，并
签订输血治疗同意书。
7.2符合交纳互助金者必需交纳, 符合免交纳互助金者必需有相关证件复印,
并在血库备案。
7.3一次输血大于2000毫升者需有输血会诊单。
8.注意事项
8.1观察结果时必在显微镜下观察。
8.2每次离心后观察试管底部是否有红细胞,如果没有,表明有溶血现象,必须
重做。
8.3加再悬液后，应轻轻转动试管，不可过猛，并应立即读取结果（包括镜下
观察），以防弱凝集迅速消散，导致假阴性结果。
8.4聚凝胺是抗肝素药物，如受血者（供血者）血液中含有肝素，试验时应多
加数滴聚凝胺试剂。
编制人王渊审核人钟剑
版本号第二版颁布日期2018年1月1日
8.5在室温较低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清中可能含有寒冷
凝集素等因素，而导致假阳性的结果出现。
若有此怀疑，建议将试管立即置入37摄氏度水浴中，轻轻转动试管混合，并在30秒内再观察结果。
8.6 供血出现溶血或上清液有混浊现象,严禁使用。
8.7 BASO凝聚胺法试剂使用前请回复室温再行操作。
9.参考文献
9.1陆永绥，张伟民主编.临床检验管理与技术规程.杭州：浙江大学出版社，
2004.
9.2试剂说明书。
编制人王渊审核人钟剑
版本号第二版颁布日期2018年1月1日。