科研论文格式与范文
科技论文格式范文(通用28篇)

科技论文格式范文(通用28篇)1.水利科技推广工作存在的主要问题政府重视不够政府在新技术、新工艺和新材料的推广应用中具有举足轻重的作用。
目前,各级政府部门对水利科技的推广应用普遍不够重视,很多地方没有成立推广机构,缺乏较为系统的水利科技推广政策法规,缺少针对水利科技推广应用的扶持政策。
标准化环节薄弱相应的技术标准和规程规范是新技术、新工艺和新材料等应用于工程建设的依据,而技术标准和规程规范的形成往往需要较大量的工程实践和较长的时间周期,因此新技术在初期很难有相应的标准化依据,受此限制,设计、施工和项目法人往往不愿意采用新技术、新工艺和新材料,造成水利科技推广工作面临重重困难。
专项推广经费不足水利科技研发和推广离不开资金支持,按照发达国家科技投入的经验,科研、开发、推广的资金比例一般为1:10:100。
在我国,经费不足是制约水利科技推广的瓶颈,具体体现在推广机构运行经费不足,新技术、新工艺和新材料的应用缺乏财政扶持等。
水利科研和推广应用脱节水利科研和推广应用存在脱节现象,一是水利科技创新项目立项和验收对推广要求不明确,很多科研团队将工作重心放在项目的申报、完成和验收上,验收完成后就束之高阁,没有开展项目后继推广工作;二是科研院校的科研方向与水利发展要求不相适应,没有将科研与市场需求结合起来,存在“纸上谈兵、闭门造车”的现象。
专业推广人才匮乏水利科技推广具有较强的专业性,从事推广工作的人员不仅要善于营销,还要具备一定的水利专业知识。
目前,省、市、县推广机构的工作人员大多兼职技术推广工作,知识结构、工作时间都难以满足水利科技推广工作的需要;技术持有单位一般会组建营销团队,但其优势在市场营销,而水利工程一般为公益性项目,以财政投资为主,在水利科技推广过程中既要具备一定水利专业技术功底,又要善于与水利主管部门、设计和施工单位进行沟通,目前相当部分企业营销团队欠缺这样的经验和能力。
2.促进水利技术推广应用的对策针对目前存在的主要问题,为促进水利科技的推广应用,需做好以下工作:提高政府重视程度水利科技的推广应用离不开政府的推动,政府的重视程度、推广的力度,在一定程度决定着水利科技的应用程度。
论文研究报告格式范文模板(精选23篇)

论文研究报告格式范文模板(精选23篇)一、标题可使用比正文大1—2号的字型与变化了的字体(黑体)来排列,上空2—3行,下空1—2行。
二、署名接标题下一行,一般写上“××单位课题组”,在右上角打上一个“x”,然后在首页文末划一横线下面加注,也注上“x”号相呼应。
加注时要标明课题的级别、性质、归属、立题年份、负责人姓名、成员(顾问)姓名、研究报告的撰写者以及一些谢辞。
也可单独列一页,或放置正文末尾括号中,将具体的工作与成员予以说明。
三、内容摘要和关键词内容摘要是对研究报告中所描述的背景、采用的主要方法、形成的结论与提出的新见解的简要说明,以100—300字为宜,接着“××单位课题组”空1—2行,其中“内容摘要”用中括号,变体字。
关键词除了帮助检索之外,还在于可提醒本研究报告的阅读者着意理解所列词语,以2—5个为宜,紧接着“内容摘要”,其中“关键词”也用中括号,变体字。
四、正文正文是教育科研报告的主体部分,包括以下几个方面:1、问题的提出⑴是揭示问题或困难;⑵是研究的目的和意义⑶是研究现状的综述⑷是本课题关键概念的界定。
3、课题研究的思路与框架这一部分需说明自己对本课题研究思路的角度和特色,还要将研究对象的选择、研究工具、研究步骤等方面的问题交代清楚。
4、课题已经的内容与方法这是研究成果的主体,是课题研究内容的全面展开。
5、研究结果的分析与讨论结果是根据研究过程中搜集到的资料、数据进行整理后展示的客观事实,它告诉我们最终得到什么,这些东西是什么。
结果可用图直观表达,也可用文字简要说明。
五、结论这是整个研究过程的结晶。
它是在研究结果分析的基础上经过推理、判断、归纳而概括出更高一个层次的成果或观点。
结论指出研究结果说明了什么,今后应怎样办等。
六、存在的问题与后续的研究七、报告落笔的时间:一般放在正文右下方。
参考资料的基本格式引用对象基本格式目录第1章项目总论第3章市场预测与分析第4章项目地点的选址第5章项目总体方案设计第6章设备与物质采购第7章环境保护与安全生产第8章项目的组织与管理第9章项目总投资估算与资金筹措第10章项目经济评价第11章社会效益和生态效益分析第12章可行性研究结论与建议第13章结论与建议第14章附件第1章总论总论部分是对其中一具体项目可行性研究报告内容的总体性和粗线条式概括,并说明可行性研究报告编制的依据。
中文论文标准格式

中文论文标准格式导语:中文论文标准格式是怎样的?下面是由本文库整理的关于中文论文标准格式及范文。
欢迎阅读!中文论文标准格式及范文1、题目:题目应简洁、明确、有概括性,字数不宜超过20个字(不同院校可能要求不同)。
本专科毕业论文一般无需单独的题目页,硕博士毕业论文一般需要单独的题目页,展示院校、指导教师、答辩时间等信息。
英文部分一般需要使用times newroman字体。
2、版权声明:一般而言,硕士与博士研究生毕业论文内均需在正文前附版权声明,独立成页。
个别本科毕业论文也有此项。
3、摘要:要有高度的概括力,语言精练、明确,中文摘要约100—200字(不同院校可能要求不同)。
4、关键词:从论文标题或正文中挑选3~5个(不同院校可能要求不同)最能表达主要内容的词作为关键词。
关键词之间需要用分号或逗号分开。
5、目录:写出目录,标明页码。
正文各一级二级标题(根据实际情况,也可以标注更低级标题)、参考文献、附录、致谢等。
6、正文:专科毕业论文正文字数一般应在3000字以上,本科文学学士毕业论文通常要求8000字以上,硕士论文可能要求在3万字以上(不同院校可能要求不同)。
毕业论文正文:包括前言、本论、结论三个部分。
前言(引言)是论文的开头部分,主要说明论文写作的目的、现实意义、对所研究问题的认识,并提出论文的中心论点等。
前言要写得简明扼要,篇幅不要太长。
本论是毕业论文的主体,包括研究内容与方法、实验材料、实验结果与分析(讨论)等。
在本部分要运用各方面的研究方法和实验结果,分析问题,论证观点,尽量反映出自己的科研能力和学术水平。
结论是毕业论文的收尾部分,是围绕本论所作的结束语。
其基本的要点就是总结全文,加深题意。
7、致谢:简述自己通过做毕业论文的体会,并应对指导教师和协助完成论文的有关人员表示谢意。
8、参考文献:在毕业论文末尾要列出在论文中参考过的所有专著、论文及其他资料,所列参考文献可以按文中参考或引证的先后顺序排列,也可以按照音序排列(正文中则采用相应的哈佛式参考文献标注而不出现序号)。
优秀护理科研范文

优秀护理科研范文护理科研论文的格式篇一备注:保险,中介勿扰!护理科研小组工作总结篇二护理科研论文的格式一、文题文题是概括文章性质和内容的重要标志,是最先提供给读者的直接信息。
文题与内容要相符,应能概括论文的主要内容,读者常是以文题为主要依据来判断论文的阅读价值,故文题要概括、简练、准确、新颖:1、概括:即用简短的文字囊括全文内容,体现全文精髓,使人一看就能对全文的含义有一个明确的概念,引人入胜,便于记忆。
2、简练:就是要简短、精练,一般以不超过20个字宜,切忌冗长繁杂,用词要字斟句酌,可用可不用的字应尽量免用。
如“妥拉苏林局部皮下浸润注射消除输液引起的局部肿胀的观察”,共26个字,改为“妥拉苏林局部注射消除输液外渗肿胀的观察”,19个字已可表达文章主题。
题目的文字一般不用简称或外文缩写,必须用时也只能选用公认和常用名称。
文题尽量不用标点符号,如有必要设副标题,可用破折号与正题分开,如“急性心肌梗死患者的。
护理-----附150例病例分析”。
3、准确:就是要4、新颖:题目要有特色和新意,不落俗套,避免与已有文献的题目雷同。
用词准确,正确反映论文的主题与内容,避免出现文题不符的情况。
如“临床输注过程中的空气污染及其对策”,作为文题不准确。
因为1)“空气污染”并非输注过程中的“;2)”对策“应该是防止或减少污染的对策,其中”及其“欠妥。
如改为”静脉输注环境的空气污染即及其预防“则能正确反映论文的主题。
1)课题的提出者及设计者;2)课题研究的主要执行者;3)进行资料收集及统计处理的人员;4)论文的主要撰写和修改者;5)对论文主要内容能承担全部责任,并能给予全面解释和答辩的人员。
2、署名注意事项:3)署名必须用真名,不得用化名、笔名和假名。
4)论文发三、摘要表前,若参加研究者已调往其他单位,可在署名末尾右上角加注符号,在页脚注中说明。
即文章的内容提要,是用最扼要的文字概括说明本研究的目的、步骤与方法、主要发现及结论,着重说明研究工作的创新和发现,使读者概略了解全文内容,以决定是否有阅读全文的必要。
标准论文格式+要求+范文超全)

标准论文格式一:1、题目。
应能概括整个论文最重要的内容,言简意赅,引人注目,一般不宜超过20个字。
论文摘要和关键词。
2、论文摘要应阐述学位论文的主要观点。
说明本论文的目的、研究方法、成果和结论。
尽可能保留原论文的基本信息,突出论文的创造性成果和新见解。
而不应是各章节标题的简单罗列。
摘要以500字左右为宜。
关键词是能反映论文主旨最关键的词句,一般3-5个。
3、目录。
既是论文的提纲,也是论文组成部分的小标题,应标注相应页码。
4、引言(或序言)。
内容应包括本研究领域的国内外现状,本论文所要解决的问题及这项研究工作在经济建设、科技进步和社会发展等方面的理论意义与实用价值。
5、正文。
是毕业论文的主体。
6、结论。
论文结论要求明确、精炼、完整,应阐明自己的创造性成果或新见解,以及在本领域的意义。
7、参考文献和注释。
按论文中所引用文献或注释编号的顺序列在论文正文之后,参考文献之前。
图表或数据必须注明来源和出处。
(参考文献是期刊时,书写格式为:[编号]、作者、文章题目、期刊名(外文可缩写)、年份、卷号、期数、页码。
参考文献是图书时,书写格式为:[编号]、作者、书名、出版单位、年份、版次、页码。
)8、附录。
包括放在正文内过份冗长的公式推导,以备他人阅读方便所需的辅助性数学工具、重复性数据图表、论文使用的符号意义、单位缩写、程序全文及有关说明等。
二:本科毕业论文格式要求:1、装订顺序:目录--内容提要--正文--参考文献--写作过程情况表--指导教师评议表参考文献应另起一页。
纸张型号:A4纸。
A4 210×297毫米论文份数:一式三份。
其他(调查报告、学习心得):一律要求打印。
2、论文的封面由学校统一提供。
(或听老师的安排)3、论文格式的字体:各类标题(包括“参考文献”标题)用粗宋体;作者姓名、指导教师姓名、摘要、关键词、图表名、参考文献内容用楷体;正文、图表、页眉、页脚中的文字用宋体;英文用Times New Roman字体。
怎么写论文模板范文

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2.结果解释:对结果进行解释和分析,指出结果的重要性和影响。
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4.结果展望:对结果的未来研究方向和发展趋势进行展望。
地理科技论文格式范文

地理科技论文格式范文:论文常用来指进行各个学术领域的研究和描述学术研究成果的文章,简称之为论文。
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中国是世界上地学发展最早的国家之一,中国地理学有悠久的发展历史,是现代地理学发展的深厚根基和源泉。
在当代科学体系中,通常将数学、物理学、化学、天文学、地学和生物学并列,作为自然科学研究的六大领域。
地学(Geoscience),也称地球科学(Earth Science),是人类认识行星地球的最重要的一门基础科学,包括地质学、地球物理学、地理学、大气科学和海洋科学等研究地球的全部学科。
中国是世界上地学发展最早的国家之一,中国地理学有悠久的发展历史,是现代地理学发展的深厚根基和源泉。
中国古代地理学在中国古代常将“天文”和“地理”并称,认为天文和地理是有关自然界的全部知识。
中国古代地学知识萌芽于远古时代,至上古时期的春秋战国时代,汉字已基本成熟,对地形、地物的文字记载和图形表达,使地理学知识得到快速增长和积累。
战国时代就出现了《山海经》、《禹贡》和《管子》等一批有关地理的著述;相关的地理学思想,如有关区域差异的论述,人与自然关系的理念,以及护育人类生存环境等思想均已初显端倪。
论述中国古代地理学,一般是以《山海经》和《禹贡》为起点。
《山海经》和《禹贡》最早对当时人们所认识的世界进行了较为系统的描述,涉及自然、经济、人文等多方面的地学内容。
无论是所涉及的区域,还是所讨论的内容,这些相关著作都具有代表性。
描述大范围区域的地理情况,首先遇到的问题是如何将所掌握的内容恰当地组织起来,并给予清晰、有条理的表述。
《山海经》将大地进行划分,然后分区予以描述,开创了地理学区域描述的先河。
《山海经》中的《山经》将全国划分为5个区域,分别记述山川、植物、动物、水系、矿产等。
《山经》是最古老的全国性、综合性的地理著作,是我们祖先自古以来在生产生活中所获得的全部地理知识的一个总结。
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正规论文格式与范文标准论文格式范文一、论文的基本格式1、题目。
应能概括整个论文最重要的内容,言简意赅,引人注目,一般不宜超过20个字。
论文摘要和关键词。
2、论文摘要应阐述学位论文的主要观点。
说明本论文的目的、研究方法、成果和结论。
尽可能保留原论文的基本信息,突出论文的创造性成果和新见解。
而不应是各章节标题的简单罗列。
摘要以500字左右为宜。
关键词是能反映论文主旨最关键的词句,一般3-5个。
3、目录。
既是论文的提纲,也是论文组成部分的小标题,应标注相应页码。
4、引言(或序言)。
内容应包括本研究领域的国内外现状,本论文所要解决的问题及这项研究工作在经济建设、科技进步和社会发展等方面的理论意义与实用价值。
5、正文。
是毕业论文的主体。
6、结论。
论文结论要求明确、精炼、完整,应阐明自己的创造性成果或新见解,以及在本领域的意义。
7、参考文献和注释。
按论文中所引用文献或注释编号的顺序列在论文正文之后,参考文献之前。
图表或数据必须注明来源和出处。
(参考文献是期刊时,书写格式为:[编号]、作者、文章题目、期刊名(外文可缩写)、年份、卷号、期数、页码。
参考文献是图书时,书写格式为:[编号]、作者、书名、出版单位、年份、版次、页码。
)8、附录。
包括放在正文内过份冗长的公式推导,以备他人阅读方便所需的辅助性数学工具、重复性数据图表、论文使用的符号意义、单位缩写、程序全文及有关说明等。
二、本科毕业论文格式要求:1、装订顺序:目录--内容提要--正文--参考文献--写作过程情况表--指导教师评议表参考文献应另起一页。
纸张型号:A4纸。
A4210×297毫米论文份数:一式三份。
其他(调查报告、学习心得):一律要求打印。
2、论文的封面由学校统一提供。
(或听老师的安排)3、论文格式的字体:各类标题(包括“参考文献”标题)用粗宋体;作者姓名、指导教师姓名、摘要、关键词、图表名、参考文献内容用楷体;正文、图表、页眉、页脚中的文字用宋体;英文用TimesNewRoman字体。
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科研论文格式写作2008-05-06 10:17:52 阅读168 评论0字号:大中小一、开题报告:1.选题意义2.国内外文献综述3.写作框架:{三段论:①问题;②原因;③对策、建议、措施}4.正文:①标题:{不能超过20个汉字,超过后要用副标题}——副标题:{(以……为例)或(据***统计…而得)}②作者:{1~3个作者为宜}③作者单位:{单位全称,所在省城市邮政编码}④摘要:{用第三人称写法(不以“本文”、“作者”等为主语,可用“文章”),200字之内}⑤关键词:{3-5个,中间用分号相隔}⑥英语翻译:{翻译①②③④⑤部分}⑦正文:{结构要严谨,表达要简明,语义要确切,论点要鲜明,论据要充分,引用要规范,数据要准确,层次不宜过多,层次序号为:一、(一)、1、(1)、1)}⑧参考文献:{文献类型标识,如专著:[M];论文集:[C];报纸文章:[N];期刊文章:[J];学位论文: [D];报告:[R];标准:[S];专刊:[P];统计年笺:[Z]}a论文集格式:作者.题名[文献类型标识].编者.文集名.出版地:出版者,出版年.b期刊文章格式:主要责任者.题名[文献类型标识].刊名,年,卷(期).c报纸文章格式:主要责任者.题名[文献类型标识].报纸名,出版日期(版次).d网站格式:URL网址名称◆同一专著、论文集、期刊、报纸文章,都一律只用一个序号,而且要把页码统一标注在文章中相应序号之后。
⑨作者简介:{作者姓名(出生年—)、性别、民族(汉族可省略),籍贯(省、市或县)、现供职单位全称及职称、学位、研究方向、联系方式}二、论文级别:1.一般刊物:{省级、国家级}2.核心刊物:{省级、国家级}SCI{[Science Citation Index](科学引文索引)}SSCI{[Social Sciences Citation Index](社会科学引文索引)}CSSCI{[Chinese Social Science Citation Infoemation](中文社会科学引文索引)}EI{[The Engineering Index](工程索引)[English Index](英文索引)或(英文简缩)}三、注释:{用于对文内某一特定内容的解释或说明,其序号为:①②③……,注释置于页脚}标题作者(单位全称,所在省城市邮政编码)【摘要】:……【关科研论文格式写作2008-05-06 10:17:52 阅读168 评论0字号:大中小一、开题报告:1.选题意义2.国内外文献综述3.写作框架:{三段论:①问题;②原因;③对策、建议、措施}4.正文:①标题:{不能超过20个汉字,超过后要用副标题}——副标题:{(以……为例)或(据***统计…而得)}②作者:{1~3个作者为宜}③作者单位:{单位全称,所在省城市邮政编码}④摘要:{用第三人称写法(不以“本文”、“作者”等为主语,可用“文章”),200字之内}⑤关键词:{3-5个,中间用分号相隔}⑥英语翻译:{翻译①②③④⑤部分}⑦正文:{结构要严谨,表达要简明,语义要确切,论点要鲜明,论据要充分,引用要规范,数据要准确,层次不宜过多,层次序号为:一、(一)、1、(1)、1)}⑧参考文献:{文献类型标识,如专著:[M];论文集:[C];报纸文章:[N];期刊文章:[J];学位论文: [D];报告:[R];标准:[S];专刊:[P];统计年笺:[Z]}a论文集格式:作者.题名[文献类型标识].编者.文集名.出版地:出版者,出版年.b期刊文章格式:主要责任者.题名[文献类型标识].刊名,年,卷(期).c报纸文章格式:主要责任者.题名[文献类型标识].报纸名,出版日期(版次).d网站格式:URL网址名称◆同一专著、论文集、期刊、报纸文章,都一律只用一个序号,而且要把页码统一标注在文章中相应序号之后。
⑨作者简介:{作者姓名(出生年—)、性别、民族(汉族可省略),籍贯(省、市或县)、现供职单位全称及职称、学位、研究方向、联系方式}二、论文级别:1.一般刊物:{省级、国家级}2.核心刊物:{省级、国家级}SCI{[Science Citation Index](科学引文索引)}SSCI{[Social Sciences Citation Index](社会科学引文索引)}CSSCI{[Chinese Social Science Citation Infoemation](中文社会科学引文索引)}EI{[The Engineering Index](工程索引)[English Index](英文索引)或(英文简缩)}三、注释:{用于对文内某一特定内容的解释或说明,其序号为:①②③……,注释置于页脚}标题作者(单位全称,所在省城市邮政编码)【摘要】:……【关键词】:……【英语翻译】:……正文:……【参考文献】……【作者简介】……自身免疫性感音神经性聋基因治疗的实验研究发表时间:2009-6-5 14:45:50 浏览次数:174 来源:中国创新医学网推荐蔡文君,谭长强,李玉瑾,黄和,李霜南京医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科暨耳鼻咽喉科学研究室,江苏南京 210029;南京工业大学生物化学中心,江苏南京 210009【摘要】目的:研究以重组复制缺陷型腺病毒为载体的Fas配体(Fas Ligand,即FasL)基因和白细胞介素10(即IL10)基因治疗实验性自身免疫性感音神经性聋。
方法:采用同种内耳组织抗原加弗氏佐剂免疫豚鼠,造成自身免疫性感音神经性聋的动物模型28只,按配对设计将其分为4组,通过鼓阶微量注射的方式,A组注入携带FasL基因的腺病毒(Ad FasL),B组注入携带IL10基因的腺病毒(Ad IL10),C组单纯注入腺病毒(携带绿色荧光蛋白,即Ad GFP),D组注入等量的磷酸盐缓冲液。
基因导入7 d后行听觉脑干诱发电位(ABR)测试,后取颞骨制作石蜡切片并行HE染色和光镜观察,每组各取两耳行螺旋韧带和基底膜透射电镜观察。
每组各取3只(6耳)行免疫荧光和酶免疫组织化学试验,以检测基因产物表达和腺病毒转染情况。
结果:免疫组织化学显示携带目的基因的腺病毒可以转染血管纹、螺旋韧带、Corti器、螺旋神经节、蜗轴小血管周围及其耳蜗的骨壁等部位的细胞,并产生相应的蛋白产物(IL10和FasL)。
ABRⅢ波阈值的均值对比结果显示,A组和B组明显低于C组和D组。
内耳组织的免疫炎性反应亦明显较C组减轻。
结论:重组复制缺陷型腺病毒可以携带目的基因转导入内耳,并在内耳表达基因产物,其抑制炎症反应的作用可有效地减轻自身免疫性感音神经性聋的内耳组织免疫炎性损伤和听觉功能障碍,有望成为治疗自身免疫性感音神经性聋新的方法和途径。
【关键词】基因治疗;自身免疫性感音神经性聋;豚鼠1979年McCabe依据其临床发现,即18例听力障碍患者经过免疫抑制治疗后听力有明显改善,提出了自身免疫性感音神经性聋(autoimmune sensorineural hearing loss,ASNHL)的概念。
之后的进一步研究发现,自身免疫性损害不仅可累及耳蜗,还可波及前庭,故又提出了自身免疫性内耳病(autoimmune inner ear disease,AIED)[12]概念。
目前ASNHL的病因和发病机制尚不十分清楚,临床缺乏特异性诊断方法,对于ASNHL患者的治疗亦存在着一些问题,主要是采用皮质激素或免疫抑制剂治疗,虽然疗效较快、较好,但该类药物毒副作用多,而且还存在停药后复发率较高等问题。
近年来随着分子生物学研究的深入和基因工程技术的进展,基因治疗已成为许多相关疾病治疗研究方面的热点和新希望。
基因治疗是根据特定的治疗目的基因将DNA导入到宿主细胞中并在其中表达。
1996年Lalwani等[34]报道了将基因导入动物内耳,以后关于内耳的基因治疗成为一个热点,并在载体选择、导入方法和安全性评估等方面取得了很大的进步。
基因工程技术已能构建特异性载体,可携带治疗基因导入动物耳内,在动物内耳获得高效表达[4],产生具有高度生物活性的稳定的基因产物,并且不产生病毒相关的耳毒性反应,这为基因治疗感音神经性聋提供了生物学证据。
目前因为复制缺陷性腺病毒载体具有病毒滴度高、转染效率高(100%)、宿主细胞范围广、外源基因容量大、稳定和无插入突变危险等特点,已经成为基因转导研究中应用最多的载体之一。
Yagi等[5]将腺病毒携带的GDNF基因从圆窗膜注射入鼓阶,GDNF基因在蜗内得到表达并发挥作用。
基于上述研究状况和现有研究工作基础,本项目组拟将利用基因治疗的独特性和内耳可行局部治疗的独特解剖特点,对自身免疫性感音神经性聋模型动物进行内耳免疫抑制或调节基因的试验性治疗研究,以探讨其治疗效果和可能发生的副反应情况。
1 材料和方法1.1 实验动物健康成熟豚鼠,白色红目,体重300 g左右,耳廓反应正常,耳镜检查排除中耳疾患,所有动物均由南京青龙山养殖场提供。
1.2 内耳组织粗制抗原(crude inner ear antigens,CIEAgs)制备豚鼠CIEAgs制取方法参考文献[4],主要步骤:将豚鼠清醒断头,取出颞骨,快速打开听泡,在解剖显微镜下分离全膜迷路,包括基底膜、螺旋韧带、膜半规管、椭圆囊和球囊(祛除耳石器),放入0.01 mol·L-1 pH 7.4 PBS中,经研磨、冻溶、超声粉碎、匀浆、离心(1 000 r·min-1,5 min)后取上清液,采用紫外分光光度计测定蛋白含量,分装后低温干燥制成CIEAgs干粉备用,保存于-80 ℃冰箱。
1.3 ASNHL动物模型制备首次免疫每只动物采用CIEAgs 400 mg·(0.4 ml)-1,加等量完全弗氏佐剂,注射于右后足垫;2周后以CIEAgs 200 mg·(0.4 ml)-1加等量不完全弗氏佐剂,注射于背部多点皮下;间隔2周后,再同样强化免疫1次。
依据听觉诱发电位Ⅲ波的阈值升高(超过免疫前全部动物均值加2倍标准差)和出现针对CIEAgs特异性抗体(ELISA法,波长490 nm时A值超过免疫前全部动物均值加2倍标准差),判断为ASNHL模型动物制备成功[6]。
1.4 实验设计ASNHL模型动物共28只,按配对设计分为4组,每组7只:A、B和C组分别向鼓阶内注入携带FasL基因的重组腺病毒(Ad FasL)、携带IL10基因的重组腺病毒(Ad IL10)和携带绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad GFP);D组(即对照组)用同样方法仅向鼓阶内注射磷酸盐缓冲液。
1.5 重组基因载体鼓阶内注射末次免疫后2周进行。
豚鼠用1%的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(30 mg·kg-1)后,在耳廓后方作一长3~4 cm弧形切口,显露听泡,用微型电钻打开听泡,暴露耳蜗底转,用针尖轻轻磨薄耳蜗鼓阶侧壁的骨壁,钻一针尖大小的孔,用微推进器将小儿头皮针的针尖(针尖斜面已打磨变小)插入鼓阶,深度不超过1 mm,先抽取少量(约10 μl)的外淋巴液,再用微量注射机将重组腺病毒或腺病毒液缓慢(1 μl·min-1)注入鼓阶,A组给予Ad FASL(病毒滴度为2.5×10 10 pfu·ml-1)20 μl,B组给予Ad IL10(病毒滴度为1.0×108 pfu·ml-1)20 μl,C组给予AD GFP(病毒滴度为1.0×109 pfu·ml-1)20 μl,D组给予等量的磷酸盐缓冲液,骨蜡封闭耳蜗底转,抗生素冲洗中耳腔3次,部分局部放置氧氟沙星明胶海绵预防感染。