常见微生物培养基
微生物培养基种类大全
摘要：1、营养琼脂（普通琼脂）成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤）100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定）制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。
用途：作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板（BA）制法：取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养1、营养琼脂（普通琼脂)成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤) 100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定)制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。
用途：作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板（BA)制法：取营养琼脂（PH7．6)，加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。
用途：1．一般棉拭子均接种此培养基。
2．尿液，脓液3．分离细菌标本用。
3、基础培养基（肉膏汤BB)成份：蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，过滤分瓶，121℃高压灭菌，20分钟备用。
用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管。
2 作普通琼脂斜面。
4、血液培养基（大管肉汤培养基)成份：1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升4 枸椽酸钠0．3g制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。
用途：作血，骨髓培养用。
5、肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂)成份：蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25（22)克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0．5%美兰溶液20毫升制法：将蛋白胨，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正PH7．4过滤，补足失水，加入2%伊红溶液20毫升，0．5%美兰溶液20毫升，（115℃高压20分钟)，冷却至50℃左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。
微生物-常用培养基介绍
• 供分离葡萄球菌或其他营养要求较高的细菌及进行培养、鉴定
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α溶血、β溶血、γ溶血
10
肺炎链球菌在血平板上的生长
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化脓性链球菌在血平板上的生长
12
金黄色葡萄球菌的β 溶血
13
化脓性链球菌的β 溶血
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溶血
1 PB0123A/F 2 PO0480B
哥伦比亚血平板 胰蛋白胨大豆琼脂平板（三层无菌包装、辐照）
3
4
PO0155A
PO8060A
营养琼脂平板
玫红酸中国蓝乳糖琼脂平板 万古霉素巧克力琼脂平板
5 PB8001A/F 6 PO0152A 7 8 PO0262D PO0479D
MH平板
胰蛋白胨大豆琼脂接触平板（三层无菌包装、辐照） 卵磷脂吐温胰蛋白胨大豆琼脂接触平板(三层无菌包装、辐照）
乳糖（－）：无色或浅褐色菌落
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SS琼脂平板
• PO5022A 90mmX10 PO5022F 70mmX10 • 分离沙门氏、志贺氏菌属细菌
• 强选择性培养基 • 沙门氏、志贺氏半透明菌落 • 大肠杆菌呈红色菌落
• 产硫化氢的菌属可形成黑色中心 • 避光保存
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中国蓝琼脂平板
• PO8060A 90mmX10 PO8060F 70mmX10 • 弱选择性培养基 ，抑制阳性球菌的生长
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血琼脂平板
• 均匀红色，无斑点，无裂纹，无血和纤维凝块 • 供分离葡萄球菌或其他营养要求较高的细菌及进行培养、鉴定 • 传代培养
• 观察溶血 α溶血、β溶血、γ溶血
• 卫星试验 • CAMP试验
常用微生物培养基
常用微生物培养基分离真菌：注：抗生素所有培养基灭菌放置不烫手背时（温度约为40°C左右），同时加入氯霉素和链霉至终浓度为0.5 mg/mL（提前配置好，用0.22 µm微孔滤膜过滤，-20℃存储），混匀后倒平板，用于抑制细菌生长。
1.GPY培养基：葡萄糖20 g，蛋白胨10 g，酵母提取物10 g，海盐15 g，琼脂20 g，蒸馏水1 L，pH 7.5，115℃，30 min灭菌2.PDA培养基：Potato Dextrose Agar干粉39 g/L，海盐15 g，蒸馏水1 L，pH 6.5-7.0，121℃，15 min灭菌3.马丁培养基：葡萄糖10 g，蛋白胨5 g，磷酸二氢钾1 g，七水合硫酸镁0.5 g，孟加拉红0.03 g，海盐15 g，琼脂20 g，蒸馏水1 L，115℃、30 min灭菌4.MEA培养基：麦芽浸粉17g，蛋白胨3g，海盐15g，蒸馏水1L，121℃，20 min 灭菌5.YPD培养基：酵母提取物10 g/L，蛋白胨20 g/L，葡萄糖20 g/L，琼脂20 g/L，115℃，30 min灭菌6.沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA，每升培养基）：蛋白胨（peptone）10.0 g，葡萄糖（glucose）40.0 g，琼脂（agar）15.0 g，pH 4.0 - 6.0；7.酵母汁麦芽提取物琼脂培养基（YM，每升培养基）：麦芽浸粉（malt extract）3.0 g，酪蛋白胨（casein peptone）5.0 g，酵母提取物（yeast extract）3.0 g，葡萄糖（glucose）10.0 g，琼脂（agar）15 g，pH 6.0 - 6.5；8.察氏培养基（CDA，每升培养基）：硝酸钠（NaNO3）3. 0 g，氯化钾（KCl）0.5 g，蔗糖（sucrose）30. 0 g，七水合硫酸镁（MgSO4·7H2O）0.5 g，七水合硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）0. 01 g，磷酸氢二钾（K2HPO4）1.0 g，琼脂（agar）15.0 g，pH 6.0 - 6.5；分离放线菌：注：抗生素所有培养基灭菌放置不烫手背时（温度约为40℃左右），同时加入制霉菌素（终浓度为100.0 μg/ml）和萘啶酮酸（终浓度为25.0 μg/ml）（提前配置好，用0.22µm 微孔滤膜过滤，于-20℃冻存），混匀后倒平板，分别用于抑制真菌和细菌生长。
微生物培养基名词解释
微生物培养基名词解释微生物培养基是用于培养和繁殖微生物的一种含有特定成分的培养介质。
微生物培养基主要由水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等组成，目的是为了提供微生物所需的营养物质和环境条件，促进微生物的生长和繁殖。
常见的微生物培养基可以根据其成分和用途进行分类：一、基本培养基基本培养基是最常用的一类培养基，主要用于固定常见微生物的培养。
基本培养基一般包括碳源、氮源、无机盐和水等组分，常见的有肉汤、肽胨培养基、葡萄糖盐基培养基等。
1. 肉汤：肉汤是一种含有大量氨基酸和肽的培养基，常用于微生物的预培养和子域检测。
2. 肽胨培养基：肽胨培养基是含有胨、胨水解蛋白质、葡萄糖、无机盐和水的培养基，可用于大多数细菌和真菌的培养。
3. 葡萄糖盐基培养基：葡萄糖盐基培养基是一种以葡萄糖为碳源，含有无机盐和水的培养基，适用于许多细菌和酵母菌的培养。
二、选择性培养基选择性培养基是一种通过添加特定成分，以抑制或促进某些细菌生长的培养基。
选择性培养基通常用于分离和检测特定微生物，常见的有MacConkey琼脂培养基、巴氏培养基等。
1. MacConkey琼脂培养基：MacConkey琼脂培养基是一种可以选择性培养肠杆菌科细菌的培养基，通过添加胆盐和非发酵碳源能够抑制大多数革兰阳性菌的生长。
2. 巴氏培养基：巴氏培养基是一种用于培养厌氧菌的选择性培养基，其中添加了巴氏指示剂，可以通过颜色变化来检测菌落中的气体产生情况。
三、富营养培养基富营养培养基是一种含有较高浓度营养成分的培养基，常用于需要高营养条件下的微生物培养，例如快速生长的菌株的培养或微生物代谢产物的生产。
常见的富营养培养基有液体LB培养基和固体富植物营养琼脂培养基。
1. LB培养基：LB培养基是一种常用的富营养液体培养基，主要由酵母提取物、牛肉精、纤维素和水组成。
2. 富植物营养琼脂培养基：富植物营养琼脂培养基是一种富营养的固体培养基，常用于细菌和真菌的快速生长。
146种常见微生物培养基配方(可打印版)
146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2～7.4配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红（rose bengal，玫瑰红水溶液）100mL琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）马铃薯200g蔗糖（或葡萄糖）20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
常见微生物培养基
常见微生物培养基Medium含有碳水化合物、含氮应用化学药品配成并标液体培养基不易长期保有不同。
一般培养基在对一些需严格灭菌的培2~6。
C的冰箱内。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 1.00.5 1.5水100毫升在烧杯内加水100火上加热。
待烧杯内各10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,30分钟。
配方二马铃薯培养基250500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好2pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升2、放线菌培养基配方一可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升595使它溶解。
在烧杯外做好pH值到7.27.4备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升50030分钟。
另取500pH值到7.43、真菌培养基配方一Sabouraud’s蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升40本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基2001000液中加入10煮沸溶解后加糖20用。
把这培养基的pH值调到7.27.4杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升301000把这培养基的pH值调到7.27.4配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取801小4、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克200100020分钟足水分到100020%pH配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%整pH值到6该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
常见微生物培养基
常见微生物培养基1. 肉汤培养基（Nutrient Broth）：这是一种常用的基础培养基，适用于多种微生物的生长。
它含有牛肉浸膏、酵母提取物和蛋白胨等成分，提供了丰富的氮源、维生素和生长因子。
2. 肉汤琼脂（Nutrient Agar）：在肉汤培养基的基础上添加琼脂，使其成为固体培养基。
这种培养基常用于分离和鉴定微生物，因为固体培养基可以形成单个菌落，便于观察和计数。
3. 血琼脂（Blood Agar）：在肉汤琼脂中加入5%的脱纤维羊血或马血。
这种培养基对于需要氧气和营养丰富的环境的微生物（如链球菌和肺炎球菌）特别有效。
4. 麦康凯琼脂（MacConkey Agar）：这是一种选择性培养基，用于分离和鉴定肠道杆菌。
它含有胆盐和结晶紫，可以抑制革兰氏阳性菌的生长，同时促进革兰氏阴性菌的生长。
5. 沙保罗琼脂（Sabouraud Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有葡萄糖、蛋白胨和琼脂。
它还含有抗生素氯霉素，可以抑制细菌的生长。
6. 鲁哥氏碘液（Lugol's Iodine）：这是一种用于检测细菌的染色剂，通常与革兰氏染色法一起使用。
它可以帮助区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
7. 马铃薯葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar）：这是一种用于培养真菌的培养基，含有马铃薯提取物和葡萄糖。
它为真菌提供了丰富的碳水化合物和氮源。
8. 三糖铁琼脂（Triple Sugar Iron Agar）：这是一种用于鉴定肠道杆菌的培养基，含有乳糖、蔗糖和葡萄糖。
通过观察细菌在培养基上的生长情况和产酸情况，可以区分不同的肠道杆菌。
9. 革兰氏染色法（Gram Stain）：这是一种用于区分细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的颜色，可以区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
10. 荧光染色法（Fluorescent Stain）：这是一种用于检测细菌的染色法，通过观察细菌在染色后的荧光颜色，可以区分不同的细菌种类。
微生物学实验常用培养基的
牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）121℃灭菌20min。
2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。
9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂）。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基培养基的配制：称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL，煮沸约30min，用纱布过滤。
用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。
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常见微生物培养基培养基Medium是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐包括微量元素以及维生素和水等。
有的培养基还含有抗菌素和色素。
按所用原料不同可分为两类应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的称为天然培养基应用化学药品配成并标明成分的称为合成培养基或综合培养基。
化学试剂中的培养基大多为合成培养基。
由于液体培养基不易长期保管现在均改制成粉末。
培养基由于配制的原料不同使用要求不同而贮存保管方面也稍有不同。
一般培养基在受热、吸潮后易被细菌污染或分解变质因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
对一些需严格灭菌的培养基如组织培养基较长时间的贮存必须放在2~6。
C的冰箱内。
常见培养基有1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克蛋白胨1.0克氯化钠0.5克琼脂 1.5克水100毫升在烧杯内加水100毫升放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠用蜡笔在烧杯外作上记号后放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后加入琼脂不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,分装在各个试管里加棉花塞用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心除去脂肪和血管250克用刀细细剁成肉末后加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好记号煮沸转用文火炖2小时。
过滤滤出的肉末干燥处理滤液pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心灭菌备用。
配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升先把琼脂加水煮沸溶解然后分别加入其他组分搅拌使溶解后分装灭菌备用。
2、放线菌培养基配方一淀粉琼脂培养基高氏培养基可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升先把淀粉放在烧杯里用5毫升水调成糊状后倒入95毫升水搅匀后加入其他药品使它溶解。
在烧杯外做好记号加热到煮沸时加入琼脂不停搅拌待琼脂完全溶解后补足失水。
调整pH值到7.27.4分装后灭菌备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升把面粉用水调成糊状加水到500毫升放在文火上煮30分钟。
另取500毫升水放入琼脂加热煮沸到溶解后把两液调匀补充水分调整pH值到7.4分装灭菌备用。
3、真菌培养基配方一萨市Sabouraud’s培养基蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后加热不断搅拌待琼脂溶解后加入40克麦芽糖或葡萄糖搅拌使它溶解然后分装灭菌备用。
本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基把马铃薯洗净去皮取200克切成小块加水1000毫升煮沸半小时后补足水分。
在滤液中加入10克琼脂煮沸溶解后加糖20克用于培养霉菌的加入蔗糖用于培养酵母菌的加入葡萄糖补足水分分装灭菌备用。
把这培养基的pH值调到7.27.4配方中的糖如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升洗净黄豆芽加水煮沸30分钟。
用纱布过滤滤液中加入琼脂加热溶解后放入糖搅拌使它溶解补足水分到1000毫升分装灭菌备用。
把这培养基的pH值调到7.27.4可用来培养细菌和放线菌。
配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取80粒干豌豆加水煮沸1小时用纱布过滤后在滤液中加入琼脂煮沸到溶解分装灭菌备用。
4、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克把马铃薯洗净去皮后切成小块。
称取马铃薯小块200克加水1000毫升煮沸20分钟后过滤。
在滤汁中补足水分到1000毫升即成20%马铃薯煮汁。
在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖煮沸使它溶解后补足水分分装灭菌备用。
使用该培养基对pH值要求不严格可以不测定。
配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%马铃薯煮汁方法同上。
在煮汁中加入上述各种组分加热溶解后补足水分调整pH值到6。
分装灭菌备用。
该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
5.烟草的培养基在植物组织培养时,通过调节IAA和CTK的比值能影响愈伤组织分化出根或芽.CTK/IAA高时,愈伤组织分化芽CTK/IAA低时,分化根;CTK/IAA比例适中维持愈伤组织不分化愈伤组织诱导培养基制备以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL ,维生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS 培养基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL.然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏水,加入40g蔗糖后搅拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl调整pH值至5.8-6.0.加入14g琼脂,将铝锅置于电炉上,搅拌加热使琼脂完全溶化,然后用蒸馏水定容至终体积2L,继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中.烟草叶片愈伤组织诱导取一无菌培养皿,用解剖刀切取1-2片无菌苗叶片置于无菌培养皿中,并用解剖刀将叶片切成2mm2左右的小片,然后将其接种于准备好的培养基上,每瓶接种5小片,一共接种6瓶.接种后的三角平置于24条件下黑暗培养1周,然后在同样温度下有光照和全黑暗下培养3周直至愈伤组织形成(两种情况各置3瓶).观察愈伤组织诱导结果,统计愈伤组织诱导率.器官分化及植株再生培养将诱导的愈伤组织按类型分别转入分化培养基上,置于连续光照,温度20-22 C条件下培养3周,统计愈伤组织再生植株情况.愈伤组织诱导的总体情况烟草愈伤组织诱导培养4周后,愈伤组织基本形成,即排除因生长时间不够而未形成愈伤的情况.具体情况见表一中所示,6瓶培养物均有愈伤形成,且都未发生污染,但诱导率几乎各不相同.其中, 在光照条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为60.0℅, 在黑暗条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为46.7%.由于实验过程中,外植体即烟草叶片取得偏小,接种时可能已有部分外植体的大部分细胞脱水死亡,使整个实验的愈伤组织诱导率偏低,愈伤块偏小.特殊培养基一选择性培养基1酵母菌富集培养基葡萄糖5% 尿素0.1% 硫化铵0.1% 磷酸二氢钾0.25% 磷酸氢二钠0.05% 七水合硫酸镁0.1% 七水合硫酸铁0.01% 酵母膏0.05%孟加拉红0.003% pH4.52 Ashby无氮培养基富集好养自生固氮菌甘露醇1% 磷酸二氢钾0.02% 七水合硫酸镁0.02% 氯化钠0.02%二水合硫酸钙0.01% 碳酸钙0.5%二鉴别培养基EMB培养基常用于鉴别E.coli蛋白胨10g 乳糖5g 蔗糖5g 磷酸氢二钾2g 伊红Y 0.4g 美蓝0.065g蒸馏水1000g pH7.2分离海洋微生物的培养基配方2216E培养基配方固体培养基蛋白胨5克酵母膏1克磷酸高铁0.01克琼脂15-----20克培养基Medium是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐包括微量元素以及维生素和水等。
有的培养基还含有抗菌素和色素。
按所用原料不同可分为两类应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的称为天然培养基应用化学药品配成并标明成分的称为合成培养基或综合培养基。
化学试剂中的培养基大多为合成培养基。
由于液体培养基不易长期保管现在均改制成粉末。
培养基由于配制的原料不同使用要求不同而贮存保管方面也稍有不同。
一般培养基在受热、吸潮后易被细菌污染或分解变质因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
对一些需严格灭菌的培养基如组织培养基较长时间的贮存必须放在2~6。
C的冰箱内。
常见培养基有1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克蛋白胨1.0克氯化钠0.5克琼脂 1.5克水100毫升在烧杯内加水100毫升放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠用蜡笔在烧杯外作上记号后放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后加入琼脂不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,分装在各个试管里加棉花塞用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心除去脂肪和血管250克用刀细细剁成肉末后加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好记号煮沸转用文火炖2小时。
过滤滤出的肉末干燥处理滤液pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心灭菌备用。
配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升先把琼脂加水煮沸溶解然后分别加入其他组分搅拌使溶解后分装灭菌备用。
2、放线菌培养基配方一淀粉琼脂培养基高氏培养基可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升先把淀粉放在烧杯里用5毫升水调成糊状后倒入95毫升水搅匀后加入其他药品使它溶解。
在烧杯外做好记号加热到煮沸时加入琼脂不停搅拌待琼脂完全溶解后补足失水。
调整pH值到7.27.4分装后灭菌备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升把面粉用水调成糊状加水到500毫升放在文火上煮30分钟。
另取500毫升水放入琼脂加热煮沸到溶解后把两液调匀补充水分调整pH值到7.4分装灭菌备用。
3、真菌培养基配方一萨市Sabouraud’s培养基蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后加热不断搅拌待琼脂溶解后加入40克麦芽糖或葡萄糖搅拌使它溶解然后分装灭菌备用。
本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基把马铃薯洗净去皮取200克切成小块加水1000毫升煮沸半小时后补足水分。
在滤液中加入10克琼脂煮沸溶解后加糖20克用于培养霉菌的加入蔗糖用于培养酵母菌的加入葡萄糖补足水分分装灭菌备用。
把这培养基的pH值调到7.27.4配方中的糖如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升洗净黄豆芽加水煮沸30分钟。
用纱布过滤滤液中加入琼脂加热溶解后放入糖搅拌使它溶解补足水分到1000毫升分装灭菌备用。
把这培养基的pH值调到7.27.4可用来培养细菌和放线菌。
配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取80粒干豌豆加水煮沸1小时用纱布过滤后在滤液中加入琼脂煮沸到溶解分装灭菌备用。