微生物培养基配制
微生物培养基配制手册大全
临床微生物培养基手册大全1、营养琼脂（普通琼脂）成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤）100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定）制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。
用途：作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板（BA）制法：取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。
用途：1．一般棉拭子均接种此培养基。
2．尿液，脓液3．分离细菌标本用。
3、基础培养基（肉膏汤BB）成份：蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，过滤分瓶，121℃高压灭菌，20分钟备用。
用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管。
2 作普通琼脂斜面。
4、血液培养基（大管肉汤培养基）成份：1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕）1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升4 枸椽酸钠0．3g制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。
用途：作血，骨髓培养用。
5、肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂）成份：蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25（22）克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0．5%美兰溶液20毫升制法：将蛋白胨，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正PH7．4过滤，补足失水，加入2%伊红溶液20毫升，0．5%美兰溶液20毫升，（115℃高压20分钟），冷却至50℃左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。
（高压以后方可再加乳糖）用途：用作分离沙门氏，志贺氏菌属，也作菌群调查。
16、罗文斯坦培养基成份：磷酸二氢钾2．4克硫酸镁0．24克枸椽酸钠0．6克天门冬素3．6克纯甘油（丙三醇）12毫升水600毫升马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升（约3公斤）2%孔雀绿水溶液20毫升制法：1 除鸡蛋外（还有孔雀绿）。
微生物常用培养基配制方法
微生物常用培养基配制方法常用培养基的配制方法可以根据其成分的类型来进行分类。
以下是一些常见的微生物常用培养基的配制方法。
1.琼脂培养基琼脂培养基是一种含有琼脂作为凝胶剂的液体培养基。
其配制方法如下：1）称取所需的琼脂粉量，加入适量的蒸馏水并充分搅拌溶解。
2）将溶解好的琼脂液装入培养瓶中，用胶栓封口，与蒸馏水瓶一同放入高压蒸汽灭菌器中进行高压蒸汽灭菌，通常是121℃，压力为1.05kg/cm²，蒸汽灭菌时间不低于20分钟。
3）取出蒸汽灭菌后的琼脂液，冷却至温度不会杀死微生物，快速倒入培养皿中。
4）待琼脂凝固成凝胶后，可以用于菌株接种。
2.液体培养基液体培养基是由各种有机和无机物质组成的溶液，可以用于微生物的培养和增殖。
液体培养基的配制方法如下：1）称取所需的各种营养成分如氨基酸、矿质盐等，分别加入适量的蒸馏水中。
2）将搅拌棒或磁力搅拌器放入培养瓶中，加热至微生物能够生长的温度。
3）将配制好的营养液煮沸2-3分钟，以杀死其中的微生物，同时带入一些空气中的微生物。
4）冷却至微生物能够生长的温度，迅速校准pH值。
5）将培养液分装入无菌试管或瓶中，用胶帽封口。
6）将分装好的培养液放入高压蒸汽灭菌器中进行高压蒸汽灭菌，通常是121℃，压力为1.05kg/cm²，蒸汽灭菌时间不低于20分钟。
7）取出蒸汽灭菌后的液体培养基，可以用于菌株接种。
3.固体培养基固体培养基是通过在液体培养基中添加琼脂来使其凝固。
配制方法如下：1）首先按照液体培养基的配制方法制备好液体培养基。
2）在液体培养基凝固之前，将琼脂粉加入培养基中并均匀搅拌溶解。
3）将溶解好的琼脂培养基充分混合，并倒入无菌培养皿中。
4）待琼脂凝固成凝胶后，可以用于菌株接种。
这里只列举了常见的琼脂、液体和固体培养基的配制方法，实际上在微生物研究中还有许多其他类型的培养基，如选择性培养基、富集培养基和不同用途的专用培养基等。
每种培养基的配制方法都有所不同，需要根据具体的要求和目的进行调整和改进。
微生物培养基配制
培养基配制配制培养基有两种方法可以选择，一是购买培养基中所有化学药品，按照需要自己配制；二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂，如MS、B5等。
自己配制可以节约费用，但浪费时间、人力、且有时由于药品的质量问题，给实验带来麻烦。
就目前国内的情况看，大部分还是自己配制。
为了方便起见，现以MS培养基为例介绍配置培养基的主要过程。
1、配制几种母液（1）配制MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。
分别称取NH4NO3 165g KH2PO4 17gKNO3 190g CaCl2·2H2O 44gMgSO4·7H2O 37g各自配成1L的母液。
倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
（2）配制MS微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。
依次称取KI 0.083g Na2MoO4·2H2O 0.025gH3BO3 0.62g CuSO4·5H2O 0.0025gMnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O 0.0025gZnSO4·7H2O 0.86g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O 由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。
分别称取CuSO4·5H2O 0.05g CoCl2·6H2O 0.05g各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。
（3）配制MS有机母液一般配制成100倍MS有机母液。
依次称取肌醇10g 盐酸硫胺素（VB1）0.01g烟酸0.05g 甘氨酸0.2g盐酸吡哆醇（VB6）0.05g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
（4）配制MS铁盐母液一般配制成100倍MS铁盐母液。
依次称取EDTA二钠 3.73g FeSO4·7H2O 2.78g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
微生物实验培养基配方
微生物实验培养基配方基础培养基配方：1.水：用去离子水或蒸馏水配制培养基。
2.碳源：葡萄糖是最常用的碳源，可提供微生物的能量和碳原子。
浓度通常为0.2-1%。
3.氮源：氨基酸、氨基酸类衍生物、蛋白胨、氨基酸盐等都可以作为氮源。
蛋白胨的浓度通常为0.5-1%。
4.无机盐：常用的无机盐包括NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等。
它们提供微量元素和维持渗透平衡。
浓度根据不同微生物的要求而变化。
5.辅助物质：维生素、生长因子、酶、抗生素等物质有时会被添加到培养基中以满足微生物特殊的生长需求。
基础培养基通常是通用的，适用于多种微生物的培养和繁殖。
然而，根据不同的微生物，配方中可能会有一些调整和特殊需求。
以下是一些常见微生物群体的基础培养基配方：1.嗜热菌培养基配方：-水：去离子水。
-碳源：葡萄糖（1-2%）。
-氮源：氨基酸、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐：NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质：维生素、酶等。
2.嗜酸菌培养基配方：-水：蒸馏水。
-碳源：果糖（2-4%）。
-氮源：天门冬氨酸盐、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐：NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质：维生素、酶等。
3.嗜碱菌培养基配方：-水：去离子水。
-碳源：葡萄糖（1-2%）。
-氮源：氨基酸、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐：NaCl、KCl、Na2CO3、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质：维生素、酶等。
4.厌氧菌培养基配方：-水：蒸馏水。
-碳源：葡萄糖（1-2%）。
-氮源：氨基酸、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐：NaCl、KCl、Na2CO3、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质：维生素、酶等。
除了上述配方外，还可以根据实验需求添加抗生素、指示剂等。
抗生素可以抑制细菌、真菌和其他微生物的生长；指示剂则可以用来检测微生物的生长或一些特殊代谢产物的形成。
总之，微生物实验培养基的配方需要根据微生物的类型和特殊需求进行调整，以提供适宜的营养和环境条件，促进微生物的生长和繁殖。
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分：牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2％滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5％加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶1000 mL，121℃高压灭菌15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。
将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内，以无菌操作分装小试管。
蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。
从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。
迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管成分：蛋白胨 20g猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法：将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10 mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。
双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。
三、5％乳糖发酵管成分：蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法：除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸馏水内，校正pH。
将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，分别灭菌121 ℃ 15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。
在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用）成分：磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL ，121℃高压灭菌15min。
甲基红（MR）试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。
36种常用微生物培养基配制汇总
36种微生物常用培养基配制1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～7.6。
2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H2O0.01g，水1000mL，pH7.4～7.6。
配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO41g，MgSO4•7H2O0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。
待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下：将马铃署去皮，切成约2cm2的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O0.5g，KCl 0.5g，FeSO4•7H2O0.1g，水1000mL，pH7.0～7.2。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15g，pH7.8～8.0，分装每瓶70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液2.5mL，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL，以上混合后倾注平板。
*注意：醋酸铊是极毒的药品，需特别注意安全操作。
微生物培养基的配制和原理
微生物培养基的配制和原理
微生物培养基的配制
微生物培养基大致可分为无机盐基础培养基、有机物基础培养基和选择性培养基三类。
无机盐基础培养基的主要成分是无机盐，有机物基础培养基的主要成分是有机物，而选择性培养基根据所需培养的微生物的特征添加不同的生化物质和化学物质。
无机盐基础培养基的配制：
1. 首先准备好所需的无机盐。
无机盐的主要成分包括NaCl、KCl、MgSO4、FeSO4等。
2. 将所需的无机盐按照一定的比例溶解在蒸馏水或双蒸水中，制成基础盐溶液。
3. 将基础盐溶液加入其他成分中，如葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物、磷酸盐等，制成微生物培养基。
有机物基础培养基和选择性培养基的配制方法与无机盐基础培养基类似，只是需要添加不同的有机物和生化物质。
微生物培养基的原理
微生物培养基可以提供微生物生长所需的营养物质和环境条件。
微生物需要不同的营养物质和环境条件才能生长，如碳源、氮源、无机盐、酸碱度、温度和氧气分压等。
培养基的种类和配方根据需要培养的微生物的特征来选择，以满足微生物生长的要求。
无机盐基础培养基主要提供微生物所需的无机盐，有机物基础培养基主要提供微生物所需的有机物，而选择性培养基则通过添加不同的生化物质和化学物质，使得只有对应的特定微生物能够在其上生长。
几种微生物培养基配方
几种微生物培养基配方微生物培养基是用来培养和繁殖各类微生物的营养基质，其配方可以根据不同微生物种类和研究需求进行调整。
下面将介绍几种常见的微生物培养基配方。
1.普通营养琼脂培养基普通营养琼脂培养基是最常见的一种培养基，适用于大多数微生物的培养。
其主要成分包括肉汤，琼脂，氨基酸和糖类等。
普通营养琼脂培养基的配方如下：-肉汤：10克-酵母浸泡液（菌种培养基，可选）：5克-琼脂：15克-蒸馏水：1000毫升将肉汤和酵母浸泡液加入蒸馏水中，搅拌均匀后加热至溶解，再加入琼脂，继续加热至完全溶解。
搅拌均匀后，将溶液倒入培养皿中，冷却凝固后即可使用。
2.高营养琼脂培养基高营养琼脂培养基适用于对营养需求较高的微生物，如快速生长的细菌或真菌。
其配方相对于普通营养琼脂培养基略有不同，具体配方如下：-肉汤：10克-蛋黄粉：10克-葡萄糖：5克-琼脂：15克-蒸馏水：1000毫升将肉汤和蛋黄粉加入蒸馏水中，搅拌均匀后加热至溶解，再加入葡萄糖和琼脂，继续加热至完全溶解。
搅拌均匀后，将溶液倒入培养皿中，冷却凝固后即可使用。
3.铁琼脂培养基铁琼脂培养基用于培养铁菌等对铁元素营养要求较高的微生物。
其配方如下：-琼脂：15克-蔗糖：10克-磷酸二氢钾：0.2克-氯化铵：2克-硫酸亚铁：0.1克-蒸馏水：1000毫升将以上成分加入蒸馏水中，搅拌均匀后加热至溶解，然后继续加热至沸腾。
搅拌均匀后，将溶液倒入培养皿中，冷却凝固后即可使用。
4.特殊需求培养基除了普通营养基外，一些微生物需要特定的培养基才能生长。
例如，大肠杆菌需要含有葡萄糖和氧气的LB培养基；霉菌需要含有麦芽提取物和琼脂的SDA培养基。
这些特殊需求培养基的配方可以根据具体要求进行调整，以适应不同微生物的生长。
总结：微生物培养基有许多种，以上仅介绍了几种常见的配方。
实际应用中，根据不同微生物种类和研究需求，配方可以根据需要进行调整。
制备培养基时，需要严格按照操作规程操作，避免外界污染，以保证培养基的质量和可靠性。
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微生物培养基配制
培养基是指人工配制的、适合于微生物生长繁殖或累积代谢产物所需的各种营养物的混合基质。
配制培养基是进行微生物检验工作的基础,甚至是任何与微生物有关工作的基础。
注意事項–灭菌锅的使用
①加水盖过底部铁板—②放入东西—③关门—④調整溫度時間—⑤关紧泄压阀
灭菌結束後，等压力降回零時才可打開門
進入灭菌锅之物品，蓋子不可關太緊或太鬆
拿滅菌後物品請記得帶耐熱手套
培养基中的主要成分及其作用：
营养物质：N源、C源、无机盐、生长因子、水
常用的N源：蛋白胨、牛肉膏、肉浸汁、酵母膏
常用的C源：糖、醇类物质（单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖
双糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖；多糖：淀粉、纤维素、菊糖；
醇类：甘露醇、卫茅醇、甘油）
水：用蒸馏水，不能用自来水凝固剂：琼脂、明胶、血清等
抑制剂：
1、作用：鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖，增加待检菌的检出率
2、种类：
盐类：氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾（钠）、亚硒酸钠等
染色剂类：煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加拉红、玫瑰红
胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐
抗菌素：青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素
指示剂
1、作用：用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物质和含氮化合物，产酸产碱的能力。
2、常用的指示剂：酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、复红、伊红、美蓝、孔雀绿等。
培养基的类型：
●根据培养基的物理状态来区分：
1、液体培养基：主要用于增菌培养、鉴别性培养
2、固体培养基：用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定
3、半固体培养基：观察微生物的动力，有时用来保藏菌种
4、脱水(商品)培荞基：脱水培养基也称为商品培养基、预制干燥培养基。
●将各种营养成分按比例配制完全,制成脱水的干粉状,装
瓶出售;使用时只需按比例加人定量的水溶化、灭菌便可。
●根据培养基的用途来区分：
增殖培养基选择培养基鉴别培养基
1、增殖培养基：在普通培养基中加入
一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物
的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。
能够给微生物提供较适当的生长环境从而使微生物大量繁殖的培养基称为增菌培养基。
增菌、运送用培养基
2、选择培养基：在培养基中加入抑制剂以杀死或抑制不需要的菌种,分离对象因对该抑制剂有抗性而正常生长繁殖的培养基,称之为选择培养基。
分离培养用的培养基
3、鉴别培养基：在培养基中加入指示剂或化学药品,目的菌经培养后其代谢产物与化学试剂发生显色反应,因而用肉眼可快速鉴别出目的菌,这样的培养基称之为鉴别培养基。
例如:伊红美蓝培养基(EMB)就是一种常用的鉴别性培养基。
伊红美蓝培养基用于食品、乳制品、水源和病源标本中革兰氏阴性肠道菌的分离和鉴别
鉴别用培养基
4、活体培养基：病毒、立克次氏体等专性寄生微生物不能在一般培养基上生长,常用鸡胚、活细胞和动物进行培养。
采用鸡胚培养时,将微生物接到绒毛尿囊膜、尿囊、羊膜囊和卵黄囊中进行培养,即可得培养物。
细胞培养指将病毒接种到体外培养的活细胞上使其增殖。
（三）培养基制备的基本方法和注意事项
•培养基的制备记录培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化
•培养基pH的初步调正培养基的过滤澄清培养基的分装
•培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的保存1、培养基的制备记录
•每次制备培养基均应有记录，包括培养基名称，配方及其来源，和各种成份的牌号，最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等。
•记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。
2、培养基成分的称取
•培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱，最
好一次完成，不要中断。
可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上面做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。
完全称取完毕后，还应进行一次检查。
3、培养基各成份的混合和溶化
•指示剂应在调节好pH值后再加入；煮溶后要补加足水份；
•不能把培养基煮焦，焦化的不能使用。
4、培养基pH的校正
灭菌后pH值会下降0.1～0.2，在做培养基校正pH值时，应比实际值高0.1～0.2；
pH调整后，还应将培养基煮沸。
5、培养基的过滤澄清
•液体培养基可用滤纸过滤法
•琼脂培养基,可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤６、培养基的分装
•斜面：1/５管半固体培养基：1/3管。