36种常用微生物培养基配制汇总

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36种常用微生物培养基配制汇总

36种常用微生物培养基配制汇总

36种常用微生物培养基配制汇总36种微生物常用培养基配制1、牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7、4~7、6.2、高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g,KNO31g,NaCl0、5g,K2HPO4?3H2O 0、5g,MgSO4?7H2O0、5g,FeSO 4?7H2O0、01g,水1000mL,pH7、4~7、6。

配制时注意:可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中.3、马丁氏(Martin)培养基(用于从土壤中分离真菌)K2HPO41g,MgSO4?7H2O0、5g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL,自然pH,121℃湿热灭菌30min.待培养基融化后冷却55~60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL).4、马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,水1000mL,配制方法如下:将马铃署去皮,切成约2cm2得小块,放入1500mL得烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,取其滤液加糖,再补足至1000mL,自然pH,霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖.5、察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g,NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO4?7H2O0、5g,KCl 0、5g,FeSO4?7H2O0、1g,水1000mL,pH7、0~7、2。

6、Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g,NaCl5g,琼脂15g,pH7、8~8、0,分装每瓶70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15醋酸铊水溶液2、5mL,青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0、5mL,以上混合后倾注平板。

微生物培养基配制手册大全

微生物培养基配制手册大全

临床微生物培养基手册大全1、营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。

用途:作普通琼脂平皿。

2、血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。

用途:1.一般棉拭子均接种此培养基。

2.尿液,脓液3.分离细菌标本用。

3、基础培养基(肉膏汤BB)成份:蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。

用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。

2 作普通琼脂斜面。

4、血液培养基(大管肉汤培养基)成份:1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕)1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0.493/100毫升] 49.3% 1毫升4 枸椽酸钠0.3g制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。

2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。

用途:作血,骨髓培养用。

5、肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)成份:蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25(22)克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0.5%美兰溶液20毫升制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。

(高压以后方可再加乳糖)用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。

16、罗文斯坦培养基成份:磷酸二氢钾2.4克硫酸镁0.24克枸椽酸钠0.6克天门冬素3.6克纯甘油(丙三醇)12毫升水600毫升马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升(约3公斤)2%孔雀绿水溶液20毫升制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。

146种培养基配方

146种培养基配方

146种培养基配方培养基是微生物学实验中用来培养和繁殖微生物的营养物质组合的混合物。

不同种类的微生物对培养基的要求不同,因此有很多种不同的培养基配方。

以下是一些常见的微生物培养基配方及其用途。

1. LB培养基:由Tryptone、Yeast Extract和NaCl组成,用于培养大肠杆菌等细菌。

2.洋葱培养基:将洋葱切碎,加入生理盐水悬浮液中,并加热煮沸,用于培养霉菌等真菌。

3.玉米浆培养基:将玉米浆过滤后,与其他添加剂混合,用于培养放线菌等产生抗生素的微生物。

4.BHIA培养基:由牛肉提取物、酵母粉、大豆蛋白酸水解物和葡萄糖组成,用于分离和培养霍乱弧菌等革兰氏阴性菌。

5.PDA培养基:由马铃薯、葡萄糖和琼脂组成,用于培养真菌和酵母。

6.铜绿假单胞菌选择性培养基:由铜绿假单胞菌选择性抱合物和琼脂组成,用于分离和培养铜绿假单胞菌。

7.南非忍冬培养基:由南非忍冬浆液、葡萄糖和琼脂组成,用于培养放线菌等微生物。

8.霍乱选择性富集培养基:由牛肉脯、胆盐、次氯酸钠等组成,用于富集和分离霍乱弧菌。

9. Sabouraud培养基:由葡萄糖、琼脂和酵母培养物组成,用于培养皮肤真菌。

10.洋葱素培养基:由洋葱素提取物、蔗糖和琼脂组成,用于培养嗜热菌。

11.耐热菌培养基:由牛肉提取物、蛋白胨和琼脂组成,用于培养耐高温微生物。

12. Salmonella选择性富集培养基:含有肉精提取物、胆盐和硫代硫酸钠,用于富集和分离沙门氏菌。

13.溶藻菌富集培养基:由海藻提取物、胆盐和地衣酸组成,用于富集和分离溶藻菌。

14.MRSA选择性富集培养基:含有盐酸、洗涤剂和染料,用于富集和分离甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌。

15. Trichophyton培养基:由马铃薯提取物、琼脂和迷迭香酸组成,用于培养皮肤真菌。

16.高盐富集培养基:含有高浓度的NaCl,适用于培养嗜盐菌。

17.TBX富集培养基:含有大肠杆菌选择性抱合物和苦味素,适用于富集志贺氏菌。

146种培养基配方

146种培养基配方

146种培养基配方在微生物学研究中,培养基是非常重要的工具,用于维持和培养各类微生物的生长。

不同的微生物对培养基成分有着不同的需求,因此,有很多种不同的培养基配方被设计出来以满足微生物的需求。

下面是一些常用的微生物培养基配方。

1. 素琼脂葡萄糖培养基(Tryptone glucose yeast extract agar):- 牛肉提取物(Tryptone) 10g- 酵母提取物(Yeast extract) 5g- 葡萄糖(Glucose) 10g- Agar 15g-pH7.22. 红色半固体培养基(Red semi-solid medium):- 蛋白胨(Peptone) 10g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- Agar 7.5g- 酚红(Phenol red) 0.02g-pH7.23. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potato glucose agar):- 马铃薯提取物(Potato extract) 4g- 葡萄糖(Glucose) 20g- Agar 20g-pH7.04. 大肠杆菌营养琼脂培养基(Escherichia coli nutrient agar): - 羊肉肉脏提取物(Peptone from meat infusion) 5g- 水解酵母(Yeast extract) 3g-NaCl5g- Agar 15g-pH7.05. 硫磺琼脂培养基(Sulfur agar):- 素蛋白(Casein peptone) 10g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 硫磺粉末(Sulfur powder) 0.1g- Agar 15g-pH7.56. 罗氏琼脂培养基(Rogosa agar):- 葡萄糖(Dextrose) 20g- 麦粉汁(Malt extract) 10g- 柠檬酸(Citric acid) 5g- Agar 15g-pH5.27. 环境样品微生物菌落计数菌落计数琼脂培养基(Microbial Colony Count Agar):- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 蛋白胨(Peptone) 5g-NaCl9g- Agar 15g-pH7.28. 活性炭琼脂培养基(Activated charcoal agar):- 木质纤维素(Cellulose) 5g- 活性炭(Activated charcoal) 1g- Agar 10g-pH7.29. 高盐基琼脂培养基(High salt base agar):- 兰氏海盐(Sea salt) 20g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 蛋白胨(Peptone) 5g- Agar 15g-pH7.510. 大豆酪蛋白琼脂培养基(Soy peptone agar):- 大豆酪蛋白(Soy peptone) 5g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- Agar 15g-pH7.0这只是一小部分微生物培养基的配方,实际上有很多种不同的培养基适用于不同类型的微生物。

常用培养基配方汇总

常用培养基配方汇总

常用培养基配方汇总培养基是微生物学研究和实验室工作中常用的一种培养微生物的基础环境,其主要组成包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。

下面是一些常用的培养基配方汇总。

1.琼脂培养基琼脂培养基是最常用的固体培养基之一,其主要成分为琼脂、蔗糖、牛肉膏粉和无机盐。

其配方如下:-琼脂:15g-蔗糖:10g-牛肉膏粉:3g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化镁:0.5g-氯化钾:0.2g-高锰酸钾:0.0001g-蛋白胨:3g-酵母提取物:3g- 菜子油:0.5ml- 蒸馏水:1000ml2.肉汤培养基肉汤培养基是一种常用的液体培养基,其主要成分为牛肉膏粉和蛋白胨。

其配方如下:-牛肉膏粉:3g-蛋白胨:5g-葡萄糖:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:2g-氯化镁:0.5g- 蒸馏水:1000ml3.紫砂培养基紫砂培养基是一种用于真菌培养的培养基,其主要成分为紫砂和蔗糖。

其配方如下:-紫砂:15g-蔗糖:30g-蛋白胨:2g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g4.麦芽培养基麦芽培养基是一种用于酵母和酵母菌类培养的培养基,其主要成分为麦芽粉和蔗糖。

其配方如下:-麦芽粉:10g-蔗糖:30g-蛋白胨:5g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g- 蒸馏水:1000ml5.铁蛋白培养基铁蛋白培养基是一种用于菌类和细菌培养的培养基,其主要成分为铁蛋白和蔗糖。

其配方如下:-铁蛋白:10g-蔗糖:10g-蛋白胨:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:1g-氯化钙:0.1g这些常用的培养基配方可根据实验需要进行适当调整和改良,以提高微生物的生长和培养效果。

同时,在制备培养基的过程中要注意消毒和无菌操作,以避免试验的污染和杂质的干扰。

常用培养基配方汇总

常用培养基配方汇总

常用培养基配方汇总培养基是微生物学和生物技术中常用的一种实验工具,用于培养和繁殖微生物。

不同的微生物需要不同的培养基来满足其生长和繁殖的需求。

以下是一些常用的培养基配方汇总。

1. LB培养基(Luria-Bertani培养基)LB培养基是最常用的培养基之一,适用于大多数细菌的培养。

其成分包括植物蛋白胨、酵母提取物、氯化钠和琼脂。

它提供了细菌所需的氨基酸、碳源和能量源。

配方:-植物蛋白胨:10g-酵母提取物:5g-氯化钠:10g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至7.02. 紫砂培养基(Sabouraud培养基)紫砂培养基是一种适用于真菌培养的培养基。

其成分包括葡萄糖、酵母提取物和琼脂。

它提供了真菌所需的碳源和能量源。

配方:-葡萄糖:40g-酵母提取物:10g-加水至1L,调节pH至5.63. TSB培养基(Tryptic Soy Broth培养基)TSB培养基是一种适用于多种微生物的通用培养基。

其成分包括植物蛋白胨、胨肽、大豆胨和琼脂。

它提供了微生物所需的氨基酸、碳源和能量源。

配方:-植物蛋白胨:17g-胨肽:3g-大豆胨:5g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至7.34. MRS培养基(De Man, Rogosa and Sharpe培养基)MRS培养基是一种适用于乳酸菌培养的培养基。

其成分包括蔗糖、氯化镁、氯化钠、蛋白胨、酵母提取物和琼脂。

它提供了乳酸菌所需的碳源、氮源和能量源。

配方:-蔗糖:50g-氯化镁:0.2g-氯化钠:5g-酵母提取物:10g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至6.25.R2A培养基R2A培养基是一种适用于水样中微生物培养的培养基。

其成分包括胨肽、葡萄糖、酵母提取物、琼脂和微量元素。

它提供了水样中微生物所需的氮源、碳源和能量源。

配方:-胨肽:0.5g-葡萄糖:0.5g-酵母提取物:0.5g-琼脂:15g-微量元素:1mL-加水至1L,调节pH至7.2以上是一些常用的培养基配方汇总,适用于不同类型的微生物培养。

常用微生物培养基配方大全

常用微生物培养基配方大全

常用微生物培养基配方大全(总4页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面,使用请直接删除(1)分离细菌时,在培养基中加入浓度为50U/ml制霉菌素,可以抑制霉菌和酵母菌的生长。

(2)(2)分离放线菌时,在样品中加入0.05%十二烷基磺酸钠(SDS)不仅可以抑制细菌的生长,还能激活放线菌孢子的萌发。

加入氟哌酸(5mg/L)+制霉菌素(50mg/L)+青霉素(0.8mg/L)也可以有效地抑制细菌和真菌,而不影响放线菌的生长。

(3)(3)分离霉菌和酵母菌时,在培养基中加入青霉素、链霉素和四环素各30U/ml,可以抑制细菌和放线菌生长。

(4)分离根霉和毛霉时,由于这些微生物的菌丝易蔓延成片,难以得到纯化的菌落,通常在培养基中添加0.1%去氧胆酸钠或山梨醇防止菌丝蔓延,使菌落长得小而紧密。

一般用于分离单一目的微生物的培养基中均含有抑制其他微生物的抑制剂,这些专用的抑制剂在小型实验室配制较麻烦,现已有成品供应,只要直接加入基础培养基即可。

如氨苄西林,主要用于分离亲水气单孢菌。

1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克,蛋白胨1.0克,氯化钠 0.5克,琼脂 1.5克,水 1000毫升在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。

待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。

等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。

配方二马铃薯培养基取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。

在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。

过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到7.5左右。

每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。

配方四根瘤菌培养基葡萄糖 10克磷酸氢二钾 0.5克碳酸钙 3克硫酸镁 0.2克酵母粉 0.4克琼脂 20克水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。

微生物学实验常用培养基的配制

微生物学实验常用培养基的配制

牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化10g钠琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL 121℃灭菌20min。

2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀20g粉硝酸钾1g氯化0.5g钠磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼20g脂水1000mLpH7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL(rose bengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

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36种微生物常用培养基配制1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~7.6。

2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7H2O0.01g,水1000mL,pH7.4~7.6。

配制时注意:可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。

3.马丁氏(Martin)培养基(用于从土壤中分离真菌)K2HPO41g,MgSO4•7H2O0.5g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL,自然pH,121℃湿热灭菌30min。

待培养基融化后冷却55~60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。

4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,水1000mL,配制方法如下:将马铃署去皮,切成约2cm2的小块,放入1500mL的烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,取其滤液加糖,再补足至1000mL,自然pH,霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。

5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g,NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO4•7H2O0.5g,KCl 0.5g,FeSO4•7H2O0.1g,水1000mL,pH7.0~7.2。

6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g,NaCl 5g,琼脂15g,pH7.8~8.0,分装每瓶70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL,以上混合后倾注平板。

*注意:醋酸铊是极毒的药品,需特别注意安全操作。

7.麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基)葡萄糖0.1g, KCl 0.18g,酵母膏0.25g,醋酸钠0.82g,琼脂l.5g,蒸馏水l00mL。

溶解后分装试管,1l5℃湿热灭菌15min。

8.葡萄糖蛋白胨水培养基(用于V.P.反应和甲基红试验)蛋白胨0.5g,葡萄糖0.5g,K2HPO4 0.2g,水100mL,pH7.2,1l5℃湿热灭菌20min。

9.蛋白胨水培养基(用于吲哚试验)蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.2~7.4,121℃湿热灭菌20min。

10.糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验)蛋白胨0.2g,NaCl 0.5g,K2HPO4 0.02g,水100mL,溴麝香草酚蓝(1%水溶液)0.3mL,糖类lg。

分别称取蛋白胨和NaCl溶于热水中,调pH至7.4,再加入溴麝香草酚蓝(先用少量95%乙醇溶解后,再加水配成1%水溶液),加入糖类,分装试管,装量4~5cm高,并倒放入一杜氏小管(管口向下,管内充满培养液)。

115℃湿热灭菌20min。

灭菌时注意适当延长煮沸时间,尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。

常用的糖类,如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等(后两种糖的用量常加大为1.5%)。

11.RCM培养基(强化梭菌培养基)、(用于厌氧菌培养)酵母膏3g,牛肉膏l0g,蛋白胨10g,可溶性淀粉lg,葡萄糖5g, 半胱氨酸盐酸盐0.5g,NaCl 3g,NaAc 3g,水l000mL,pH8.5,刃天青3mg/L,l2l℃湿热灭菌30min。

12.TYA培养基(用于厌氧菌培养)葡萄糖40g,牛肉膏2g,酵母膏2g,胰蛋白胨(bacto-typetone)6g,醋酸铵3g,KH2PO4 0.5g,MgSO4•7H2O0.2g,FeSO4•7H2O0.01g,水1000mL,pH6.5,121℃湿热灭菌30min。

13.玉米醪培养基(用于厌氧菌培养)玉米粉65g,自来水1000mL,混匀,煮10min成糊状,自然pH,121℃湿热灭菌30min。

14.中性红培养基(用于厌氧菌培养)葡萄糖40g,胰蛋白胨6g,酵母膏2g,牛肉膏2g,醋酸铵3g,KH2PO4 5g,中性红0.2g,MgSO4•7H2O0.2g,FeSO4•7H2O0.01g, 水1000mL,pH6.2,121℃湿热灭菌30min。

15.CaCO3明胶麦芽汁培养基(用于厌氧菌培养)麦芽汁(6波美)1000mL,水1000mL,CaCO310g,明胶10g,pH6.8,121℃湿热灭菌30min。

16.BCG牛乳培养基(用于乳酸发酵)(A)溶液:脱脂乳粉100g,水500mL,加入1.6%溴甲酚绿(B.C.G)乙醇溶液1mL,80℃灭菌20min。

(B)溶液:酵母膏10g,水500mL,琼脂20g, pH6.8,121℃湿热灭菌20min。

以无菌操作趁热将(A)、(B)溶液混合均匀后倒平板。

17.乳酸菌培养基(用于乳酸发酵)牛肉膏5g,酵母膏5g,蛋白胨10g,葡萄糖10g,乳糖5g,NaCl 5g,水1000mL,pH6.8,121℃湿热灭菌20min。

18.酒精发酵培养基(用于酒精发酵)蔗糖10g,MgSO4•7H2O 0.5g,NH4NO30.5g,20%豆芽汁2mL,KH2PO4 0.5g,水100mL,自然pH。

19.柯索夫培养基(用于钩端螺旋体培养)优质蛋白胨0.4g, NaCl 0.7g,KCl 0.02g, NaHCO3 0.01g,CaCl 0.02g,KH2PO40.09g,NaH2PO40.48g,蒸馏水500mL,无菌兔血清40mL。

制法:除兔血清外的其余各成分混合,加热溶解,调pH至7.2,121℃湿热灭菌20min,待冷却后,加入无菌兔血清,制成8%血清溶液,然后分装试管(5~10mL/管),56℃水浴灭活lh后备用。

20.豆芽汁培养基黄豆芽500g,加水1000mL,煮沸lh,过滤后补足水分,121℃湿热灭菌后存放备用,此即为50%的豆芽汁;用于细菌培养:10%豆芽汁200mL,葡萄糖(或蔗糖)50g,水800mL,pH7.2~7.4。

用于霉菌或酵母菌培养:10%豆芽汁200mL,糖50g,水800mL,自然pH。

霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。

21.LB(Luria—Bertani)培养基(细菌培养,常在分子生物学中应用)双蒸馏水950mL,胰蛋白胨l0g,NaCl l0g,酵母提取物(bacto- yeast extract)5g,用lmol/L NaOH (约l mL) 调节pH值至7.0,加双蒸馏水至总体积为1L,121℃湿热灭菌30min。

含氨苄青霉素LB培养基:待LB培养基灭菌后冷至50℃左右加入抗生素,至终浓度为80~100mg/L。

22.复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)、(用于水体中大肠菌群测定)蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母浸膏5g,琼脂20g,乳糖10g,K2HPO40.5g,无水亚硫酸钠5g,5%碱性复红乙醇溶液20mL,蒸馏水1000mL。

制作过程:先将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加入到900mL水中,加热溶解,再加入K2PO4,溶解后补充水至l000mL,调pH至7.2~7.4。

随后加入乳糖,混匀溶解后,于115℃湿热灭菌20min。

再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中,用少许无菌水使其溶解,在水浴中煮沸10min 后,立即滴加于20mL 5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色转变为淡粉红色为止。

将此混合液全部加入到上述已灭菌的并仍保持融化状态的培养基中,混匀后立即倒平板,待凝固后存放冰箱备用,若颜色由淡红变为深红,则不能再用。

23.乳糖蛋白胨半固体培养基(用于水体中大肠菌群测定)蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母膏5g,乳糖10g,琼脂5g,蒸馏水1000mL,pH7.2~7.4,分装试管(l0mL/管),115℃湿热灭菌20min。

24.乳糖蛋白胨培养液(用于多管发酵法检测水体中大肠菌群)蛋白胨10g,牛肉膏3g,乳糖5g,NaCl 5g,蒸馏水l000mL,1.6%溴甲酚紫乙醇溶液lmL。

调pH至7.2,分装试管(l0mL/管),并放入倒置杜氏小管,l15℃湿热灭菌20min。

25.三倍浓乳糖蛋白胨培养液(用于水体中大肠菌群测定)将乳糖蛋白胨培养液中各营养成分以扩大3倍加入到l000mL水中,制法同上,分装于放有倒置杜氏小管的试管中,每管5mL,1l5℃湿热灭菌20min。

26.伊红美蓝培养基(EMB培养基)(用于水体中大肠菌群测定和细菌转导)蛋白胨l0g,乳糖10g,K2HPO4 2g,琼脂25g,2%/伊红Y(曙红)水溶液20mL,0.5%美蓝(亚甲蓝)水溶液l3mL,pH7.4。

制作过程:先将蛋白胨、乳糖、K2HPO4和琼脂混匀,加热溶解后,调pH至7.4,1l5℃湿热灭菌20min,然后加入已分别灭菌的伊红液和美蓝液,充分混匀,防止产生气泡。

待培养基冷却到50℃左右倒平皿。

如培养基太热会产生过多的凝集水,可在平板凝固后倒置存于冰箱备用。

在细菌转导实验中用半乳糖代替乳糖,其余成分不变。

27.加倍肉汤培养基(用于细菌转导)牛肉膏6g,蛋白胨20g,NaCl 10g,水1000mL,pH7.4~7.6。

28.半固体素琼脂(用于细菌转导)琼脂1g,水100mL,121℃湿热灭菌30min。

29.豆饼斜面培养基(用于产蛋白酶霉菌菌株筛选)豆饼100g加水5~6倍,煮出滤汁100mL,汁内加入KH2PO4 0.1%,MgSO4 0.05%,(NH4)2SO4 0.05%,可溶性淀粉2%,pH6,琼脂2%~2.5%。

30.酪素培养基(用于蛋白酶菌株筛选)分别配制A液和B液。

A液:称取Na2HPO4•7H2O 1.07g。

干酪素4g,加适量蒸馏水,并加热溶解。

B液:称取KH2PO4 0.36g,加水溶解。

A、B液混合后,加入酪素水解液0.3 mL,加琼脂20g,最后用蒸馏水定容至1000mL。

酪素水解液的配制:1g酪蛋白溶于碱性缓冲液中,加入1%的枯草芽孢杆菌蛋白酶25mL加水至100mL,30℃水解l h。

用于配制培养基时,其用量为1000mL,培养基中加入100mL以上水解液。

31.细菌基本培养基(用于筛选营养缺陷型)Na2HPO4•7H2O 1g,MgSO4•7H2O0.2g,葡萄糖5g,NaCl 5g,K2HPO4lg,水l000mL,pH7.0,1l5℃湿热灭菌30min。

32.YEPD培养基(用于酵母原生质体融合)酵母粉10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,蒸馏水1000mL,pH6.0,115℃湿热灭菌20min。

33.YEPD高渗培养基(用于酵母原生质体融合)在YEPD培养基中加入0.6mol/L的NaCL,3%琼脂。

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