人C-jun酶联免疫分析试剂盒使用方法
人 c-jun 酶联免疫分析试剂盒 说明书

人c-jun酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人c-jun,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中c-jun含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗c-jun抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗c-jun抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的c-jun呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
人C反应蛋白CRP酶联免疫分析试剂盒使用方法

人C-反应蛋白(CRP)酶联免疫分析试剂盒使用方法检测范围:96T30μg/L -800μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中C-反应蛋白(CRP)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C-反应蛋白(CRP)水平。
用纯化的人C-反应蛋白(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入C-反应蛋白(CRP),再与HRP标记的C-反应蛋白(CRP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中C-反应蛋白(CRP)浓度。
试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人C肽定量检测试剂盒(酶联免疫法)说明书V7.0

人C肽定量检测试剂盒(酶联免疫法)说明书V7.0 即用10-1136-0196人份试剂由瑞典Mercodia AB制造用于标签上的标识的说明预期用途C肽定量检测试剂盒(酶联免疫法)提供了一种人血清、血浆、尿液样本中C肽的定量检测方法。
本试验综述和说明胰岛β细胞功能的定性与定量评估不仅用于糖尿病自然历史的诊前和诊后研究,也在临床上作为选择正确疗法的导向。
外周胰岛素不能用于评估β细胞功能,鉴于门静脉循环使得肝脏吸收的大量化和复杂化,并且胰岛素试验不能区分内源性胰岛素和外源性胰岛素。
胰岛β细胞内的胰岛素原可裂解为1分子的C肽和1分子的胰岛素,C肽以和胰岛素等摩尔浓度量释放到循环中,相比胰岛素而C肽最低限度被肝脏吸收,因此,外周C肽浓度更能反映β细胞的分泌量,比胰岛素更准确。
尿液中C肽含量与血浆中C肽含量相关,但个体内和人体间存在很高的差异性,所以测定β细胞功能不够精确。
检测程序的原理C肽检测试剂盒(酶联免疫法)是一种固相双表位酶联免疫试剂。
它基于双夹心技术,两单克隆抗体分别结合在C肽分子的抗原决定簇上。
在孵育过程中,样本中的C肽与结合在微孔(板)中的C肽抗体和酶标C肽抗体反应。
洗涤移去非结合的酶标抗体。
结合的偶联物(标记物)通过与3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)反应而被检测到。
加入酸后反应终止,然后通过分光光度计(酶标仪)读取反应的终点。
警告与注意事项●用于体外诊断。
●不能让反刍动物或猪接触到本试剂盒的内容物及其残余物。
●本试剂盒的终止溶液含有0.5M的硫酸。
按常规预防措施处理危险化学品。
●所有的患者样本都应按潜在传染物处理。
要求但未提供的材料●配备相应的移液管(重复移取加入酶结合物溶液、试验缓冲液、TMB底物和终止溶液)●用于试剂制备的试管、烧杯和量筒●重蒸水●磁力搅拌器●涡轮混合器●酶标仪(含450nm滤光片)●平板振荡器(建议速率700-900循环/分钟,轨道运动)●微孔板(酶标板)洗涤设备试剂各Mercodia胰岛素ELISA检测试剂盒(10-1128-01)都包含96孔的试剂,足够用于双份测试的42个样本、1个校准曲线。
酶联免疫试剂盒实验操作规程及注意事项

操作规程:溶液配制1、针对呋喃唑酮、呋喃它酮、氯霉素等试剂盒,他们的1X洗液、1X样品稀释液、终止液是通用的。
检测数量大的情况下可以大量配制洗液、样品稀释液等,一般建议一个礼拜重配一次。
2、可以或需要前处理前配制的溶液:呋喃类:缓冲溶液、样品稀释液、1M HCL、1M NaOH、10mM邻硝基苯甲醛、洗涤工作液氯霉素:样品稀释液、洗涤工作液3、检测时配制的溶液:呋喃类:A、B液需在洗板前配制好,并混合均匀。
氯霉素:酶结合物工作液、A B液样本处理呋喃类:1、1g组织样本+4ml水+0.5ml 1M HCL+400ul 10nM邻硝基苯甲醛,剧烈涡动1min;2、60℃温箱孵育1h,然后拿出来涡动30s,继续孵育0.5h;3、依次加入5ml缓冲溶液、400ul 1M NaOH、6ml乙酸乙酯;4、剧烈涡动1min后4000g离心10min;5、取3ml上清液50-60℃氮气吹干,加入2ml正己烷,再加入1ml样品稀释液,高速涡动30s;6、4000g以上,离心5min,去上层及中间层杂质,取下层液体待测。
氯霉素:1、3g样品+ 6 mL 乙酸乙酯,充分涡动1 min后4000 g 离心 10 min;2、取 4 mL 上层乙酸乙酯50-60℃氮气吹干,加入2 mL正己烷,充分涡动10 s,再加入 1 mL 样品稀释液,低速涡动 1 min;3、4000 g 以上,离心 5 min,完全弃去上层正己烷及中间层杂质,取50 µL 进行检测。
检测过程呋喃唑酮:1、加50ul标准品/样品+50ul酶标二抗+50ul抗体工作液后室温(23-27℃)反应30min;2、每孔加260ul洗涤工作液洗板,共洗4次,拍干,加入混合好的100ul AB液,室温下避光反应15-20min(看颜色深浅),加入50ul终止液后读板。
呋喃它酮:1、加50ul标准品/样品+50ul酶结合物后室温(23-27℃)反应30min;2、每孔加260ul洗涤工作液洗板,共洗4次,拍干,加入混合好的100ul AB液,室温下避光反应15-20min(看颜色深浅),加入50ul终止液后读板。
人磷酯酶 C(PLC)酶联免疫分析试剂盒 使用说明书.

人磷酯酶C(PLC)酶联免疫分析试剂盒使用说明书产品编号:E1596h注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过3个月,-80℃不应超过6个月;标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测;高血脂的标本不需进行特殊处理,可直接检测。
操作步骤实验开始前,请提前配制好所有试剂;试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。
每次检测都应该做标准曲线。
如样品浓度过高时,均应用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
建议各实验室在操作前先进行预实验以建立最佳稀释倍数。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液100ul,余孔分别加标准品或待测样品100ul,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。
每孔加检测溶液A工作液100ul(在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液)100ul,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50ul,终止反应,此时蓝色立转黄色。
终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
在加终止液后立即进行检测。
注:1.每次实验留一孔作为空白调零孔(不同于空白孔),该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。
人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书

人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中转化生长因子(CRP)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C反应蛋白(CRP)水平。
用纯化的转化生长因子(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子(CRP),再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的转化生长因子(CRP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人C反应蛋白(CRP)浓度。
试剂盒内容及其配制:试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)塑料膜板盖1块半块标准品:100ng/ml 1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)标准品稀释缓冲液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素标记的抗OT抗体1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)亲和链酶素-HRP 1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)试剂盒组成:3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
人C反应蛋白ELISA检测试剂盒操作步骤:1. 使用前,将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul 于反应孔、加入待测样品50 ul 于反应孔内。
酶联免疫试剂盒实验操作注意事项

酶联免疫试剂盒实验操作注意事项
1. 检测试剂盒在使用前,需在室温下进行复温。
本试剂盒加样后室温反应时间为10分钟,环境温度对检测结果会有很大的影响,所以控制好环境温度(国际标准室温是20-25℃)是试剂盒检测性能发挥所必须的条件。
另外,所有反应过程需保持在水平位置,禁止倾斜放置。
2.样品提取尽量采用离心取上清的方法,对样品的稀释可以有效降低基质干扰,但稀释一定是要保证整个反应在同一体系下反应,对AFB1样品来说,甲醇的含量须始终保持与标准品一致(35%)。
3. 加样过程做重复孔是使检测结果更真实的接近于实际值,在确保加样精度的前提下,避免孔与孔之见的污染,每孔必须更换枪头,酶标板微孔中避免出现气泡,如不慎有气泡用干净枪头戳破,加样时确保用枪方法的一致性,减少非系统误差。
4. 洗板过程很重要,有条件建议使用洗板机,如人工洗板,则在加入洗液过程中,每孔中的液体尽量不要溢出到邻近板孔,如果洗板效果不好很容易造成本底偏高。
5. 加样过程一定要迅速准确,尽量保持每孔反应时间的均一性和加样顺序的前后一致性,如果样本超过20个,请用排枪做,避免造成前后反应时间不一致而导致的结果偏差。
6. 数据分析和处理,建议使用专门软件,根据具体情况选择合适的拟合方式,对AFB1试剂盒来说,建议使用CS曲线进行分析。
7.AFB1具有见光分解的特性,样品提取加样等过程请注意避光。
人C反应蛋白CRPELISA试剂盒使用说明书

人C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒使用说明书南京森贝伽现货供应,质量保证,价格优惠,试剂盒首选森贝伽。
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人C-反应蛋白(CRP)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C-反应蛋白(CRP)水平。
用纯化的人C-反应蛋白(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入C-反应蛋白(CRP),再与HRP标记的C-反应蛋白(CRP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人C-反应蛋白(CRP)的含量。
样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
人C-jun酶联免疫分析试剂盒使用方法
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T
3U/L – 80U/L
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中C-jun含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C-jun水平。
用纯化的人C-jun抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入C-jun,再与HRP标记的C-jun抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的C-jun呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人C-jun浓度。
试剂盒组成
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。