利用原生质体育种技术获得优良酵母菌设计实验路线
酵母菌的分离纯化酵母菌的分离纯化实验方案
酵母菌的分离纯化酵母菌的分离纯化实验方案导读:就爱阅读网友为您分享以下“酵母菌的分离纯化实验方案”资讯，希望对您有所帮助，感谢您对的支持!酵母菌的分离纯化实验目的1. 了解培养基的配置与灭菌技术;2. 无菌操作技术;3. 工业微生物的分离与纯化技术;4. 工业微生物的检测及保藏。
基本原理1、培养基是人工配置的用于培养、分离、鉴定和保存各种微生物的营养基质。
也适合微生物在生命活动中积累各种代谢产物。
由于微生物种类不同，营养类型各异以及实验目的不同，因此培养基的种类也很多。
不同微生物对营养的要求不同，在配置时根据微生物对PH的要求选择合适的PH。
1由于本次实验主要是分离纯化酵母菌，所以配置的培养基是适合酵母菌生长麦芽汁平板培养基，同时添加抗生素抑制霉菌及其它菌的生长。
2、接种和培养过程中必须保证不被其它微生物所污染，关键在于严格进行正确的无菌操作，但是绝对无菌是不可能的，只能人工创造相对无菌的环境。
所以本次实验无菌操作是在超净工作台的酒精灯火焰旁进行。
3、把特定微生物从混杂的微生物群体中分离出来而获得某一种或某一株微生物的过程叫微生物的分离与纯化。
首先根据其生长特性设计只利于此菌生长的条件，再根据各种稀释法使他们在固体培养基上单独长成菌落。
分离纯化的方法通常有:稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法和平板划线。
此次实验采用梯度稀释涂布平板法。
4、微生物检测项目最常用的是细胞数的检测，方法比较多，主要有显微镜直接计数法、平板菌落计数法(CFU)、光电比浊计数法等。
本次实验设计酵母菌的数量检测，选用显微镜直接计数法和平板菌落计数法。
实验器材仪器设备恒温水浴锅、电热干燥箱、蒸汽灭菌锅、超净工作台、恒温培养箱、恒温摇床、水浴锅、电炉、铜锅、酒精灯、接种环、电子天平、研钵、光学显微镜、血细胞计数器玻璃器2皿烧杯、锥形瓶、大小试管、培养皿、漏斗、三角涂棒、吸管、试管架、玻璃涂棒、盖玻片试剂与材料苹果、大麦芽、琼脂、蒸馏水、碘液、抗生素、染色液其它纱布、滤纸实验内容及操作步骤(一)、样品的选择酵母菌一般在果园的土壤中或者水果的表面含量较多，因此选择苹果为样品。
酵母菌的纯培养实验原理
酵母菌的纯培养实验原理酵母菌是一种单细胞真核生物，广泛存在于自然界中，常见于土壤、果皮和发酵食品等环境中。
酵母菌的纯培养实验是一种常用的实验手段，通过这种实验可以得到纯净的酵母菌培养物，为后续的研究提供了可靠的基础。
酵母菌的纯培养实验主要包括以下几个步骤：酵母菌的分离、酵母菌的培养和酵母菌的纯化。
酵母菌的分离是实验的第一步。
我们可以从自然界中采集到含有酵母菌的样品，比如果皮、土壤等。
将样品放入培养基中，利用其富含的养分和适宜的温度等条件，促使酵母菌开始生长。
然后，通过显微镜观察，可以看到培养基中存在着许多酵母菌细胞。
选取单个酵母菌细胞，将其转移到另一个培养基中，再次进行培养。
经过多次的分离，我们可以得到纯净的酵母菌培养物。
酵母菌的培养是纯培养实验的关键步骤。
酵母菌的培养基一般由碳源、氮源、矿物质和维生素等组成，提供了酵母菌生长所需的养分。
培养基的配制需要根据酵母菌的需求来确定，以确保酵母菌能够正常生长和繁殖。
在培养过程中，温度和氧气供应也是需要注意的因素。
一般情况下，酵母菌的最适生长温度为28-30摄氏度，过高或过低的温度都会对其生长产生不利影响。
此外，酵母菌对氧气的需求较高，需要提供充足的氧气供应。
酵母菌的纯化是实验的最后一步。
在酵母菌培养物中，可能会存在其他微生物的杂菌。
为了获得纯净的酵母菌培养物，我们可以采用多种方法，如温度选择法、抗生素选择法和营养选择法等。
这些方法可以通过调节培养基中的温度、添加抗生素或改变培养基中的营养成分，来选择性地培养酵母菌，排除其他微生物的干扰。
通过以上的步骤，我们可以得到纯净的酵母菌培养物。
这些纯净的酵母菌培养物可以用于研究酵母菌的生理特性、代谢途径、基因表达和蛋白质功能等方面的问题。
同时，纯培养的酵母菌也为酵母菌在工业生产中的应用提供了基础。
总结起来，酵母菌的纯培养实验是一种重要的实验手段，通过分离、培养和纯化等步骤，可以得到纯净的酵母菌培养物。
这些纯净的酵母菌培养物可以为酵母菌的研究提供可靠的基础，也为酵母菌在工业生产中的应用提供了有力支持。
高中生物学新课程选择性必修3实验教学设计2：酵母菌的纯化培养
杂菌不混入发酵物 毒。
验 中呢？
教
环节二 实验探究
学 活 动 设 计
1. 视频展示酵母 菌培养基的成分、 配置方法，倒平板 和平板划线操作的 基本流程。 2.巡回检查学生进 行实验的过程，提 醒学生安全操作。 3.针对学生的疑问 进行点拨解答。
1.观看视频，明确实验的流 程和操作步骤，归纳培养基 的组成成分，分析平板倒置 的原因和平板划线法纯化分 离微生物的原理。 2.小组分工合作完成培养基 的配置。 3.完成倒平板和平板划线操 作。
让学生在感性 认识的基础上理性 分析归纳培养基的 配置、平板倒置的 原因、平板划线法 的原理，加深对基 础知识的理解。 通过观看视频，规 范实验操作。
环节三 思维提升
1.平板倒置原因？ 2.设置未接种平板 组的意义是什么？ 3.为什么每一次划 线前，要用酒精灯 灼烧接种环，并且 要从上一次划线的 末端开始划线？ 4.为什么最后一次 划线和第一次的划 线不能相连？ 5.划线完毕后灼烧 接种环的原因？
学生活动 环节一 情景导入
设计意图
设问：自制酸奶容
思考并回答问题
实
易引发肠胃不适， 主要是由于在制作 过程中有杂菌混 入。那么，怎样才 能保证无处不在的
首先要尽量做到密封条 件下的发酵；其次，所用器 具材料使用之前要做好消毒 工作；最后，制作环境要清 洁卫生，并经常用紫外灯消
让学生初步认 识防止杂菌污染， 获得纯净的微生物 培养物的重要性。
环节四 分享交流
引导、评价
与教师一起梳理和总结，结 合已有知识储备，发表观点， 并为自己的观点寻求证据。
培养学生的批判性 思维。
环节五 课堂小结
展示 PPT 概念图 体会、必记。
增强模型建构意 识。
原生质体融合育种
原生质体融合育种摘要原生质体融合育种克服了远缘杂交不亲和的障碍，可以提高重组频率，使得遗传物质的交换、传递更完整，成为微生物育种的一种重要方式。
其过程包括原生质体制备和再生、原生质体融合以及融合体检出等步骤。
在每个步骤中均要考虑到其应注意的因素，从而提高原生质体育种的效率，达到快速育种的目的。
因原生质体融合育种的优势，其在多功能菌种选育、工程菌选育和工业生产育种等方面应用广泛。
关键词原生质体制备融合育种原生质体再生融合体检出引言传统的杂交育种具有一定的局限性，需要受到亲和力的影响，并且要求亲本有性的分化，而原生质体育种则克服了这些缺点。
当细菌细胞壁被剥离，剩下由原生质膜包围的原生质部分称为原生质体。
原生质体融合是指通过人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程。
[1]原生质体融合不受种属限制，能够完整的传递遗传物质，使得重组几率提高进而提高育种速度。
[1-2]育种步骤可分为五大步骤：直接亲本及其遗传标记的选择、双亲本原生质体制备和再生、亲本原生质体诱导融合、融合重组体分离、遗传标记分析和测定。
1.亲本遗传标记的选择进行原生质体融合的双亲本一般要携带遗传标记，以顺利地筛选到融合子。
常用营养缺陷型、抗性、荧光染色、温度敏感性、孢子颜色、菌落形态等作为标记。
其中营养缺陷型是常用而有效的选择手段。
[3]2.原生质体制备制备原生质体是融合育种的前提，为了制备原生质体，需要将包围细胞的细胞壁去除掉。
去壁的方法很多，主要有机械法、酶法和非酶法，现在使用较多的是酶法。
[4]2.1酶法制备原生质体的条件（1）菌体年龄微生物的生理状态决定了原生质体的形成，而菌龄明显影响了原生质体的形成率，菌龄过长不利于释放原生质体，过短则菌丝体容易破裂。
丝状真菌一般选择年轻的尖端生长点的菌丝；细菌与霉菌一般采用对数生长期，而放线菌以对数期到静止期的转换期为好。
[5]（2）稳定剂原生质体由于失去了细胞壁因此对环境十分敏感，渗透压尤为重要。
酵母实验教案设计方案模板
一、实验名称酵母发酵实验二、实验目的1. 了解酵母在发酵过程中的作用。
2. 掌握酵母发酵的基本原理和实验操作方法。
3. 培养学生的实验操作技能和观察能力。
三、实验原理酵母是一种单细胞真菌，在适宜的条件下，酵母能够将糖类物质转化为酒精和二氧化碳。
本实验通过观察酵母发酵过程中酒精和二氧化碳的产生，验证酵母的发酵作用。
四、实验材料与试剂1. 实验材料：酵母粉、葡萄糖、琼脂、蒸馏水、烧杯、试管、酒精灯、酒精、滴管、pH试纸、碘液、锥形瓶、玻璃棒等。
2. 实验试剂：酵母粉、葡萄糖、琼脂、蒸馏水、碘液、酒精等。
五、实验步骤1. 准备实验材料：将琼脂加入蒸馏水中，加热溶解后，冷却至室温备用。
2. 配制培养基：将葡萄糖加入琼脂溶液中，搅拌均匀，倒入锥形瓶中，待凝固后，制成固体培养基。
3. 接种酵母：用无菌滴管将酵母粉接种于固体培养基上，用玻璃棒轻轻搅拌，使酵母均匀分布。
4. 观察酵母发酵：将接种后的培养基置于37℃恒温培养箱中培养，每隔一定时间观察酵母菌的生长情况和酒精、二氧化碳的产生。
5. 测定pH值：用pH试纸测定发酵过程中培养基的pH值变化。
6. 验证二氧化碳产生：将装有发酵培养基的锥形瓶倒置，观察瓶底是否有气泡产生。
7. 验证酒精产生：用碘液检测发酵过程中酒精的产生。
六、实验注意事项1. 实验过程中要保持无菌操作，避免污染。
2. 实验过程中要严格遵守实验操作规程，确保实验结果准确。
3. 注意观察实验现象，做好实验记录。
七、实验报告要求1. 实验报告应包括实验目的、原理、材料与试剂、实验步骤、实验结果、实验讨论等内容。
2. 实验结果应包括酵母菌的生长情况、pH值变化、二氧化碳和酒精的产生情况等。
3. 实验讨论应结合实验结果，分析酵母发酵过程中的变化和原因。
八、实验拓展1. 探究不同温度、不同浓度的葡萄糖对酵母发酵的影响。
2. 研究其他微生物的发酵作用，如乳酸菌、醋酸菌等。
3. 了解发酵技术在食品、医药、化工等领域的应用。
原生质体融合育种
（二）原生质体融合的影响因素 １、融合剂 电场融合的优点： 适于动植物、微生物细胞；融合频率高 可在显微镜下观察
（二）原生质体融合的影响因素
１、融合剂
２、温度 20~30℃
３、亲株的亲和力和原生质体的活性
４、无机离子
PEG介导融合 钙离子、镁离子
电场融合
糖或糖醇
四、融合体再生 复原： 再生培养基 细胞壁重建 形成菌落 P239 图9.8
第五节 酵母菌原生质体融合育种 一、酵母细胞壁结构和遗传标记 菌龄对原生质体形成影响大 亲本灭火的方法：紫外线
热 药物
第五节 酵母菌原生质体融合育种 一、酵母原生质体制备 p259 预处理：EDTA；巯基乙醇
蜗牛酶
第六节 霉菌原生质体融合育种 二、培养基及相关溶液 p262 （1）查氏培养基的作用：菌丝生长 （3）酶液的制备：
（2）菌体培养方式：
1.平板玻璃纸法：
丝状菌
2.振荡沉没培养法
细菌和酵母菌
酶法分离原生质体的影响因素？
（3）菌体年龄
丝状真菌
菌丝体尖端细胞
放线菌
对数期到静止期
细菌
对数期
酵母菌
菌体同步化
酶法分离原生质体的影响因素？
（4）稳定剂
高渗溶液
无机盐：NaCl、KCl、MgSO4、CaCl 微生物原生质体育种 三、原生质体转化育种 何种形式DNA转化率高？ 质粒
第一节 微生物原生质体育种
五、其他微生物原生质体育种 脂质体转移 原生质体转染等
第二节 微生物原生质体融合育种
微生物原生质体融合育种：
通过人为方法，使遗传性状不同的两细胞的原 生质体发生融合，并产生重组子的过程。
生物实验教案：中学生物实验《酵母发酵条件探究》设计
生物实验教案：中学生物实验《酵母发酵条件探究》设计一、引言中学生物实验在培养学生科学实验能力的同时，也有助于提高他们的科学思维和研究兴趣。
本教案旨在设计一项生物实验，名为《酵母发酵条件探究》，通过改变不同条件下的酵母发酵情况，让学生了解酵母发酵的基本原理和影响因素，并培养学生的实验设计和数据分析能力。
本教案将对实验的目的、所需材料、实验步骤、数据记录和实验结果分析进行详细描述。
二、实验目的本实验的目的是让学生了解酵母发酵的条件以及不同条件对酵母发酵效果的影响。
通过实验，学生将学会如何设计并进行实际操作，以便最大限度地掌握实验技能，培养他们的科学思维和创新能力。
三、实验材料1. 酵母粉2. 砂糖3. 盐4. 温水5. 温度计6. 量杯7. 实验管8. 密封瓶9. 实验记录表格四、实验步骤1. 准备工作：a) 将酵母粉、砂糖和盐分别称量好b) 准备一定量的温水c) 温水的温度应在实验开始前测量并记录2. 实验设计：a) 将4个实验管标记为A、B、C、Db) 在A实验管中加入10ml温水和5g酵母粉，搅拌均匀c) 在B实验管中加入10ml温水、5g酵母粉和5g砂糖，搅拌均匀d) 在C实验管中加入10ml温水、5g酵母粉和5g盐，搅拌均匀e) 在D实验管中加入10ml温水、5g酵母粉、5g砂糖和5g盐，搅拌均匀3. 实验操作：a) 将实验管A、B、C、D放置在温度恒定的环境中，定时观察酵母发酵的情况b) 在实验过程中，要记录温度的变化以及酵母的发酵状态5. 数据记录：a) 记录每个实验管中酵母的发酵时间和产生的气体量b) 使用实验记录表格记录数据，确保准确性和规范性6. 实验结果分析：a) 比较不同条件下酵母发酵的时间和产生的气体量b) 分析酵母发酵所需的最佳温度、理想的盐浓度以及糖对发酵的影响七、实验结果与讨论通过对实验结果的观察和数据分析，我们可以得出一些结论：1. 酵母发酵的最佳温度为X摄氏度，超过或低于该温度将会影响酵母发酵效果。
从环境中分离酵母菌 实验设计方案
实验设计方案从环境中分离酵母菌班级：10级生科（2）班组员:刘楠楠: 201008010222潘婷: 201008010225李炜昊：201008010221马森:201008010224实验：从环境中分离出酵母菌实验设计方案一、采样采样的理由：1、酵母菌与人类的关系密切酵母菌是一类单细胞真菌的俗称，分类学上分属于子囊菌纲半知菌类特征:1. 个体一般以单细胞状态存在；2. 多数营出芽生殖，有的裂殖；3. 能发酵糖类产能；4. 细胞壁常含有甘露聚糖；5. 喜在含糖量较高、酸度较大的水生环境中生长。
酵母菌分布：主要生长在偏酸的含糖环境中，在水果、蜜饯的表面和果园土壤中最为常见。
种类：据1982年的资料，已知的酵母有56属，500多种。
酵母菌与人类的关系极其密切。
千百年来，人类几乎天天离不开酵母菌，例如酒类的生产，面包的制作，乙醇和甘油发酵，石油及油品的脱蜡，饲用、药用等的生产。
2、酵母菌细胞的形态和构造电子显微镜下的酿酒酵母细胞结构示意图细胞直径比细菌粗10倍左右，如Saccharomyces cerevisiae细胞的宽度为2.5~10μm，长度为4.5~21μm。
因此在光学显微镜下可以模糊地看到它们细胞内的各种结构分化。
酵母菌细胞的形态通常有球状、卵圆状、椭圆状、柱状或香肠状等多种。
细胞壁：酵母细胞壁呈“三明治”结构外层：甘露聚糖（约占30%，以α-糖苷键联结（并非所有酵母菌都有）内层：葡聚糖（约占30-40%，由D-葡萄糖以β-糖苷键联结）中间层：蛋白质（含6-8%，多为酶类）细胞膜：酵母菌的细胞膜与原核生物的基本相同。
但有的酵母菌如酿酒酵母中含有固醇类（甾醇）、VitD的前体----麦角固醇，这在原核生物是罕见的。
细胞核:核膜：核孔40～70nm ，透性比任何生物膜都大。
•染色体:由DNA和组蛋白牢固结合而成，呈线状, 数目因种而异。
•核仁：核内有一或几个区域rRNA含量很高，这一区域为核仁，是合成核糖体的场所。
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利用原生质体育种技术获得优良酵母菌设计实验路线
摘要：
一、引言
1.1 背景介绍：原生质体育种技术在酵母菌育种中的应用
1.2 实验目的：获得优良酵母菌
二、实验材料与方法
2.1 实验材料：酵母菌菌株、培养基等
2.2 实验方法：原生质体育种技术
三、实验步骤
3.1 酵母菌菌株的筛选与分离
3.2 原生质体的制备与融合
3.3 融合子的筛选与鉴定
3.4 优良酵母菌的设计与应用
四、实验结果与分析
4.1 筛选出优良酵母菌
4.2 优良酵母菌的性能分析
4.3 结果讨论
五、结论
5.1 实验总结
5.2 对实际应用的意义
正文：
一、引言
1.1 背景介绍：原生质体育种技术在酵母菌育种中的应用
随着科学技术的进步，生物技术在各个领域得到了广泛的应用。
在酵母菌育种领域，原生质体育种技术因其独特的优势而备受瞩目。
原生质体育种技术是指通过原生质体融合，将不同酵母菌的优良性状进行组合，从而获得更优良的酵母菌菌株。
这种方法能有效提高酵母菌的性能，为酿酒、面包制作等食品工业提供更优质的酵母菌。
1.2 实验目的：获得优良酵母菌
为了提高酵母菌的性能，本实验将利用原生质体育种技术，筛选出优良酵母菌，并研究其性能，为实际应用提供参考。
二、实验材料与方法
2.1 实验材料：酵母菌菌株、培养基等
本实验所需的材料主要有酵母菌菌株、培养基、融合剂等。
其中，酵母菌菌株为实验的基础，培养基用于酵母菌的培养和筛选，融合剂则用于原生质体的制备与融合。
2.2 实验方法：原生质体育种技术
本实验采用原生质体育种技术，主要包括以下步骤：酵母菌菌株的筛选与分离、原生质体的制备与融合、融合子的筛选与鉴定、优良酵母菌的设计与应用。
三、实验步骤
3.1 酵母菌菌株的筛选与分离
首先，从多种酵母菌菌株中筛选出具有优良性状的菌株，并进行分离，为
后续实验做好准备。
3.2 原生质体的制备与融合
将筛选出的酵母菌菌株进行培养，利用融合剂制备原生质体，并进行原生质体融合。
通过融合，将不同酵母菌的优良性状进行组合。
3.3 融合子的筛选与鉴定
融合完成后，对融合子进行筛选与鉴定，挑选出具有优良性状的融合子。
3.4 优良酵母菌的设计与应用
将筛选出的优良酵母菌进行性能测试，分析其性能，为实际应用提供依据。
四、实验结果与分析
4.1 筛选出优良酵母菌
经过实验筛选，成功获得了具有优良性状的酵母菌。
4.2 优良酵母菌的性能分析
对筛选出的优良酵母菌进行性能分析，发现其在发酵速率、酒精产量等方面具有显著优势。
4.3 结果讨论
通过原生质体育种技术，成功筛选出优良酵母菌，为实际应用提供了优质的菌株。
五、结论
5.1 实验总结
本实验利用原生质体育种技术，成功筛选出优良酵母菌，具有重要的实际意义。