运载体与基因表达载体的区别
高中生物选修三专题一 1.2 基因工程的基本操作程序
已知基因的核苷酸序列 ； ③前提条件：_______________________ 模板DNA 、___________ DNA引物 、 原料：___________ 热稳定DNA聚合酶 、 ________________ 四种脱氧核苷酸 。 __________________ 指数 方式扩增，即____ 2n （n为扩增 ④方式：以_____ 循环的次数） ⑤结果： 使目的基因的片段在短关信息。
如：根据基因的核苷酸序列
基因的功能
基因在染色体上的位置
基因的转录产物mRNA
基因翻译产物蛋白知道序列，NA B、线粒体DNA C、总mRNA D、tRNA
3、化学方法人工合成目的基因
（1）范围
在基因较小，核苷酸序列已知的 情况下，可以利用DNA合成仪人工合 成。
（2）方法 化学合成法 、 反转录法
（在DNA合成仪中合成）
人工合成 (基因比较小)
DNA合成仪
48
①反转录法：
以目的基因转录成的信使 RNA为模板，反转录成互补的 单链DNA，然后在酶的作用下 合成双链DNA，从而获得所需 的基因。
（二）、目的基因
主要指的是编码蛋白质的结构基因
也可以是一些具有调控作用的因子。
例如：与生物抗逆性相关的基因，与生物优良品质 相关的基因，药物和保健品相关的基因，与毒物降 解相关的基因，以及与工业所需要酶相关的基因。
目前被广泛提取使用的目的基因有： 苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因 （抗病毒、抗细菌)、人胰，导入的 一段碱基序列互补配对。
温度控制和缓冲液（Mg2+）
（5）、仪器： PCR扩增仪（自动调控温度的仪 器） （6）、方式： 以_____ 指数 方式扩增，即 ____ 2n （n为扩增循环的次数）
基因工程知识点总结
基因工程总结一．概念(1)原理：。
(2)优点：与杂交育种相比，；与诱变育种相比，。
（3）基因工程成功的原因：①成功拼接的原因：②成功表达的原因：二．基本工具1、两种酶：(1) ：作用特点：。
(2) ：E·coli DNA连接酶与T4 DNA连接酶的区别：2、一种运载体（1）条件：①；②；③具有特殊的标记基因（作用：）（2）种类：最常用；其他动植物病毒、三、操作程序(1) ：方法：①：不知道脱氧核苷酸序列②：已知目的基因两端一小段序列，便于③利用化学方法人工合成：知道全部序列，且基因比较小。
这种方法不需要模板。
(2) ——基因工程的核心基因表达载体的组成：(3)(4)①目的基因是否插入到转基因生物的染色体DNA上：②是否转录：③是否翻译：④个体水平鉴定：抗虫、抗病接种实验易错点说明：1、切割目的基因和运载体的要求：用限制酶。
目的是：。
同种的含义是：同一种或相同两种，即单酶切或双酶切。
选择双酶切的原因是。
2、工具≠工具酶；运载体≠质粒。
3、启动子≠起始密码子，终止子≠终止密码子起始密码子和终止密码子位于mRNA上，分别控制翻译过程的启动和终止。
启动子：。
终止子：一段有特殊结构的DNA短片段，位于基因的尾端，作用是使转录过程停止。
4、基因探针的要求：①单链②有③5、农杆菌转化法中的“2”次导入：第一次：将含有目的基因的T—DNA的质粒导入农杆菌；第二次（非人工操作）：将含有目的基因的T—DNA导入受体细胞并整合到植物细胞的染色体DNA上。
6、转化：。
7、（1）乳腺生物反应器与化学反应器比较,优点是：质量稳定，成本低廉，无污染，经济效益显著。
（2）乳腺生物反应器与膀胱生物反应器比较，或者优点是：①收集产物更容易，不必对动物造成伤害；②从动物一出生就可以收集；③与性别无关。
8、将目的基因导入植物细胞采用最多的方法;导入单子叶植物最常用且成本较高的方法；我国科学家独创且简便经济的方法。
巩固练习1、下图中的图1是Eco RⅠ限制酶的作用示意图。
基因工程的操作程序
内含子
外显子
能够编码蛋白质的序列叫做外显子
不能够编码蛋白质的序列叫做内含子
启动子
终止子
编码区上游
编码区下游
内含子：
外显子：
真核细胞的 基因结构
编码区
非编码区
外显子：能编码蛋白质的序列 内含子：不能编码蛋白质的序列
：有调控作用的核苷酸序列， 包括位于编码区上游的RNA 聚合酶结合位点（启动子）。
启动子、终止子对于目的基因表达必不可少
目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表达载体的方式携带进去。
注意
三将目的基因导入受体细胞
（一）转化：
（二）方法
将目的基因导入 植物细胞
将目的基因导入 动物细胞
将目的基因导入 微生物细胞
农杆菌转化法
基因枪法
花粉管通道法
——显微注射法
——感受态细胞
目的基因进入_________内，并且在 受体细胞内维持_____和_____的过程（1）.基因（2）.基因的构建方法
通过对受体菌的培养而储存基因 基因组的构建cDNA的构建-----反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。
目的基因的mRNA
单链DNA
1
2
3
6
5
4
双链DNA (目的基因)
① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术
③条件：_______________________、 _______________、___________ 、 ___________.前提条件：
基因的表达载体名词解释
基因的表达载体名词解释基因是生物体内负责遗传信息传递的基本单位，它们通过表达转录为蛋白质，从而决定了细胞和生物体的结构和功能。
在这个过程中，基因的表达载体发挥着重要的角色。
本文旨在对基因的表达载体进行解释和阐述。
概述基因的表达载体是指能够载入并传递基因表达所需信息的分子。
在细胞中，基因的表达过程包括转录和翻译两个阶段，而表达载体在这些阶段起着至关重要的作用。
RNARNA（核糖核酸）是一种核酸分子，它们能够将DNA中的遗传信息转录为可移动的遗传物质。
在基因表达中，RNA起到了传递DNA信息到蛋白质合成机器的关键作用。
具体而言，RNA分为不同类型，包括信使RNA（mRNA）、转运RNA （tRNA）和核糖体RNA（rRNA），它们分别参与转录和翻译过程。
转录转录是基因表达的第一步，它将DNA中的一段编码信息转换为相应的mRNA。
在这个过程中，基因的表达载体是RNA聚合酶（RNA polymerase），它能够识别和结合特定的DNA序列，将其转录为RNA。
而RNA聚合酶本身依赖于其他蛋白质因子的辅助，这些因子共同组成了转录复合物，确保基因转录的进行。
调控序列在基因的表达过程中，基因的调控序列也被视为一种表达载体。
调控序列是DNA序列中具有调控功能的片段，它们能够在调控转录和翻译过程中发挥作用。
例如，启动子是一种调控序列，它位于基因的上游区域，并能够与转录因子结合，促进基因的转录。
另外，增强子和沉默子也是调控序列的重要类型。
翻译转录产生的mRNA将作为翻译的载体，进一步转化为氨基酸序列的蛋白质。
这个过程依赖于细胞质中的核糖体以及特定的tRNA分子。
mRNA与核糖体结合后，tRNA分子将携带特定的氨基酸配对到相应的mRNA密码子上。
这样，翻译机器系统可以按照基因的信息进行逐个读取和合成氨基酸序列，最终形成蛋白质分子。
酶和蛋白质在基因表达中，各种酶和蛋白质也可以被视为基因的表达载体。
例如，在转录过程中，RNA聚合酶和辅助因子构成了转录复合物，完善基因的转录。
基因工程的基本工具_基因工程的原理及技术_基因工程和蛋白质工程的应用-高中生物知识点
基因工程的基本工具_基因工程的原理及技术_基因工程和蛋白质工程的应用-高中生物知识点·基因工程基因工程三种工具原理及基因工程的四个步骤一、基因工程需要三个工具：1、剪刀：限制酶。
2、针线：DNA连接酶。
3、运输：运载体。
二、基因工程四个步骤：1、目的基因的获取。
2、基因表达载体的构建目的基因与运载体结合。
3、将目的基因导入受体细胞。
4、目的基因的检测与表达。
基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术。
是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。
基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。
基因工程，又称基因操作，DNA重组技术，基因克隆，分子克隆等。
克隆就是来自同一祖先的相同副本或拷贝的集合，而获得同一拷贝的过程则称为克隆化，也就是无性繁殖。
蛋白质工程是研究蛋白质的结构及结构与功能的关系，然后人为地设计一个新蛋白质，并按这个设计的蛋白质结构去改变其基因结构，从而产生新的蛋白质。
1983年，美国生物学家厄尔默首先提出了“蛋白质工程”的概念，随即被广泛接受和采用。
蛋白质工程是以蛋白质结构与功能关系的知识为基础，通过周密的分子设计，把蛋白质改造为合乎人类需要的新的蛋白质。
人们利用分子遗传学的知识和对蛋白质结构的了解，在实验室条件下，设计出全新的优良蛋白质。
利用基因工程生产的胰岛素就是蛋白质工程的第一个成功范例。
由于蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，在技术方面有许多同基因工程技术相似的地方，因此人们也把蛋白质工程称为第二代基因工程。
蛋白质工程与基因工程的区别蛋白质工程就是根据蛋白质的精细结构与功能之间的关系，利用基因工程的手段，按照人类自身的需要，定向地改造天然的蛋白质，甚至创造新的、自然界本不存在的、具有优良特性的蛋白质分子。
蛋白质工程自诞生之日起，就与基因工程密不可分。
基因表达载体和重组质粒的区别
载体，质粒，基因表达载体3者有何不同？载体是一种运输工具，细胞膜上的蛋白质也是一种载体，其识别很单一，也因此有了选择透过性。
质粒是一种小型环状DNA，广泛存在于微生物中，一般的基因工程中，质粒被用来当做目的基因的运载体，也是一种运输工具。
基因表达载体是目的基因和运载体连接后的产物。
基因表达载体和重组质粒的区别基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。
如果以质粒作为运载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。
然后用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端（部分限制性内切酶可切割出平末端，拥有相同效果）。
将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之间形成氢键，再加入适量DNA连接酶，催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组DNA分子。
这个重组的DNA分子也叫重组质粒。
就是这样。
简单的说，重组质粒是基因表达载体的一种。
生物学上marker是什么意思从文字上说，标记（Marker），染色体上一个可以被识别的区域（比如限制性内切酶的酶切点，基因的位置等）。
标记的遗传能够被检测出来。
标记可以是染色体上有表达功能的部分（比如基因），也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够被检测出来的部分从实验上说，marker有两种，一种是基因marker，一种是蛋白质marker。
两种marker分别是进行琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE（蛋白质电泳）所用的标准参照物，用以指示目的基因或者蛋白的大小。
一般常称呼的marker都是指基因marker，即DNA markerDNA Marker作为一种分子标记(Marker)，构建分子图谱。
分子标记克隆在质粒上，可以繁殖及保存。
DNA Marker 是分子量不同的DNA片段，主要用途就是DNA 分子凝胶电泳时，加样用做对比来检测琼脂糖凝胶是否有问题。
基因表达载体和重组质粒的区别
载体，质粒，基因表达载体3者有何不同？载体是一种运输工具，细胞膜上的蛋白质也是一种载体，其识别很单一，也因此有了选择透过性。
质粒是一种小型环状DNA，广泛存在于微生物中，一般的基因工程中，质粒被用来当做目的基因的运载体，也是一种运输工具。
基因表达载体是目的基因和运载体连接后的产物。
基因表达载体和重组质粒的区别基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。
如果以质粒作为运载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。
然后用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端（部分限制性内切酶可切割出平末端，拥有相同效果）。
将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之间形成氢键，再加入适量DNA连接酶，催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组DNA分子。
这个重组的DNA分子也叫重组质粒。
就是这样。
简单的说，重组质粒是基因表达载体的一种。
生物学上marker是什么意思从文字上说，标记（Marker），染色体上一个可以被识别的区域（比如限制性内切酶的酶切点，基因的位置等）。
标记的遗传能够被检测出来。
标记可以是染色体上有表达功能的部分（比如基因），也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够被检测出来的部分从实验上说，marker有两种，一种是基因marker，一种是蛋白质marker。
两种marker分别是进行琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE（蛋白质电泳）所用的标准参照物，用以指示目的基因或者蛋白的大小。
一般常称呼的marker都是指基因marker，即DNA markerDNA Marker作为一种分子标记(Marker)，构建分子图谱。
分子标记克隆在质粒上，可以繁殖及保存。
DNA Marker 是分子量不同的DNA片段，主要用途就是DNA 分子凝胶电泳时，加样用做对比来检测琼脂糖凝胶是否有问题。
高考生物之易混名词区分（上）
高考生物之易混名词区分（上）1. 原生质层与原生质、细胞质的区别原生质是指细胞内的所有生活物质，包括细胞膜、细胞质和细胞核等。
细胞质是指细胞中细胞膜以内、细胞核以外的全部原生质。
原生质层是指成熟的植物细胞中，细胞膜、液泡膜及它们之间的细胞质合在一起的一层半透膜。
质壁分离指的是原生质层与细胞壁分离，而不是细胞质与细胞壁分离或原生质与细胞壁分离。
原生质：是生命的物质基础，是由蛋白质、核酸、脂类等生物大分子相互作用而形成。
从结构上说，原生质是细胞内的全部生命物质，它又分化为细胞膜、细胞质和细胞核等部分，但不包括细胞壁，因为细胞壁不具有生物活性。
可以说：一个动物细胞就是一小团原生质。
原生质层：是原生质的一部分，主要包括细胞膜、液泡膜和这两层膜之间的细胞质。
原生质层相当于一层半透膜，把液泡里面的细胞液与外界溶液隔离开来。
在两侧的溶液具有浓度差时，成熟的植物细胞的细胞液就会通过原生质层与外界溶液发生渗透作用。
原生质体：指除去了细胞壁的植物细胞或菌体，一般可通过专一性的酶（纤维素酶、溶菌酶）破坏细胞壁或通过青霉素阻止细胞壁的正常合成而获得。
在生物化学、代谢功能等方面，原生质体与完整的细胞相似，而且具有完整细胞的许多酶系统，因此常用来进行生理生化方面的某些研究。
同时，通过原生质体的融合而进行的体细胞杂交，为杂交育种提供了新的线索。
植物体细胞杂交的过程，实际上是不同植物体细胞的原生质体融合的过程，它有助于克服远源杂交不亲的障碍、有助于培育作物新品种，如科学家将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄马铃薯”杂种植物体。
2. 吸胀吸水与渗透吸水的区别吸胀吸水是未成熟植物细胞的吸水方式，是靠细胞内的亲水物质如纤维素、淀粉、蛋白质等吸收的，分生区、形成层和干种子细胞主要靠吸胀吸水。
而成熟的植物细胞可吸胀吸水，但主要靠渗透吸水。
3. 呼吸作用与呼吸的区别呼吸作用是发生在每一个活细胞中的有机物氧化分解、释放能量并生成高能化合物ATP的过程。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
运载体与基因表达载体的区别
1、不同点：
⑴“运载体”泛指基因工程操作中能将目的基因送达受体细胞的工具。
如细菌质粒等。
相对“基因表达载体”而言，“运载体”主要是强调它能运输目的基因这一功能，只要能运输目的基因就算是运载体，并不计较是不是真正运输了目的基因。
⑵“基因表达载体”，是实施了运输目的基因、并且要保证目的基因到达受体细胞后能够表达的运载体。
这样看来，运载体、基因表达载体二者之间就不能完全等同。
2、联系：
“基因表达载体”是在”运载体”的基础上构建成的。
基因表达载体的构成：目的基因+ 启动子+ 终止子+ 标记基因。
3、表达载体上的启动子和终止子是本身具有还是后加上去的呢？
这个问题，教科书中并没有明确说明，但我个人的观点是：这要看获取目的基因的方法，而问题的根源在于基因的结构。
关于基因的结构，在新课程标准中也不再做为教学的要求了。
（人类）结构基因的基本结构：上游非编码区+ 启动子+ 编码区+ 终止子+ 下游非编码区
人类结构基因4个区域：
①前导区，位于编码区上游，相当于RNA5’末端非编码区（非翻译区）；
②编码区，包括外显子与内含子；
③尾部区，位于RNA3’编码区下游，相当于末端非编码区（非翻译区）；
④调控区，包括启动子和增强子等。
基因编码区的两侧也称为侧翼顺序（图1－１）。
⑴启动子：启动子（promoter）能促进转录过程。
也有人将启动子称为“RNA聚合酶识别位点”。
包括下列几种不同顺序：
①TATA框（TATA box）：其一致顺序为TATAATAAT。
它约在基因转录起始点上游约-30-50bp 处，基本上由A-T碱基对组成，是决定基因转录始的选择，为RNA聚合酶的结合处之一，RNA聚合酶与TATA框牢固结合之后才能开始转录。
②CAAT框（CAAT box）：其一致顺序为GGGTCAATCT，是真核生物基因常有的调节区，位于转录起始点上游约-80-100bp处，可能也是RNA聚合酶的一个结合处，控制着转录起始的频率。
③GC框（GC box）：有两个拷贝，位于CAAT框的两侧，由GGCGGG组成，是一个转录调节区，有激活转录的功能。
此外，RNA聚合酶Ⅲ负责转录tRNA的DNA和5SrDNA，其启动子位于转录的DNA 顺序中，称为下游启动子。
⑵终止子：在一个基因的末端往往有一段特定顺序，它具有转录终止的功能，这段终止信号的顺序称为终止子（terminator）。
终止子的共同顺序特征是在转录终止点之前有一段回文顺序，约7-20核苷酸对。
回文顺序的两个重复部分由几个不重复碱基对的不重复节段隔开，回文顺序的对称轴一般距转录终止点16-24bp。
在回文顺序的下游有6-8个A-T对，因此，这段终止子转录后形成的RNA具有发夹结构，并具有与A互补的一串U，因为A-U之间氢健结合较弱，因而RNA/DNA杂交部分易于拆开，这样对转录物从DNA模板上释放出来是有利的，也可使RNA聚合酶从DNA上解离下来，实现转录的终止。
由此可见：启动子、终止子对于基因的表达来说，是非常重要的。
⑶获取目的基因的方法：
①散弹枪法——用限制酶直接从DNA上切取。
显然，这种方法获得的目的基因是结构完整的，即含有启动子和终止子的。
在DNA连接酶的催化下可直接与运载体构成重组DNA——基因表达载体。
②反转录法——以mRNA为模板，以游离脱氧核苷酸为原料，在逆转录酶催化下形成DNA。
显然这种方法所得到的只是结构基因的编码区，并不是完整的基因，也就是说缺乏启动子和终止子，就需要后加上二者。
③人工化学合成法——在已知目的基因脱氧核苷酸序列的情况下，在DNA合成仪中人工合成。
显然，这种方法所获得的目的基因结构也应该是完整的。