干细胞实验室管理使用规程
造血干细胞移植技术管理规范(限制临床医疗应用)
造血干细胞移植技术管理规范目录一、医疗机构基本要求 (2)二、人员基本要求 (3)（一）开展造血干细胞移植技术的医师。
(3)（二）其他相关卫生专业技术人员。
(4)三、技术管理基本要求 (4)四、培训管理要求 (6)（一）拟开展造血干细胞移植技术的医师培训要求。
(7)（二）培训基地要求。
(7)为规范造血干细胞移植技术的临床应用，保证医疗质量和医疗安全，制定本规范。
本规范是医疗机构及其医务人员开展造血干细胞移植技术的最低要求。
本规范适用于应用同种异基因造血干细胞移植技术治疗血液系统疾病，其造血干细胞来源包括血缘（HLA全相合或者单倍型相合）和非血缘供者的骨髓、外周血或脐带血。
一、医疗机构基本要求（一）医疗机构开展造血干细胞移植技术应当与其功能、任务和技术能力相适应，有合法的造血干细胞来源。
（二）有卫生健康行政部门核准登记的血液内科或儿科及相关专业诊疗科目。
（三）开展造血干细胞移植治疗技术的科室应当具备以下条件：1.有百级层流病房床位4张以上，配备患者呼叫系统、心电监护仪、外周血干细胞采集机、流式细胞仪、电动吸引器或中心负压吸引系统、供氧设施。
2.成人血液内科开展儿童造血干细胞移植技术的，还应当至少有1名具有副主任医师以上专业技术职务任职资格的本医疗机构儿科医师。
3.医疗机构应当在完成5例同胞全相合异基因造血干细胞移植术后，方可开展非血缘、脐带血或者配型不合造血干细胞移植。
（四）其他相关科室。
1.开展造血干细胞移植技术的，应当具有质量控制和质量评价措施的实验室或有固定协作关系的实验室，能够进行造血干细胞活性检测、有核细胞计数、CD34＋细胞计数和HLA组织配型，具备免疫抑制剂的血药浓度监测能力。
造血干细胞移植技术所需的相关检验项目参加省级及以上卫生健康委指定的室间质量评价机构的室间质量评价并合格。
2.有微生物检测及相关诊断检验、血液学和病理学常规检测、细胞遗传学分析条件和能力，或与具备上述条件和能力的实验室有固定协作关系。
干细胞实验室组织管理制度
干细胞实验室组织管理制度第一章总则第一条为规范干细胞实验室的管理，保障工作安全，促进科研工作的顺利进行，根据国家有关法律法规和相关文件要求，制定本管理制度。
第二条干细胞实验室是科研单位非常重要的实验室之一，具有较高的危险性和专业性，因此必须严格按照国家法律法规和科研单位管理制度进行管理。
第三条干细胞实验室实验人员必须具有较高的科研素质、较强的动手能力和较高的安全意识，同时要受过专业训练。
第四条干细胞实验室应遵循科学、规范、安全、高效的原则，严格按照相关管理制度对干细胞实验室进行管理。
第五条干细胞实验室应具有相应的仪器设备和管理人员，且设备设施的运行与维护应符合国家标准。
第二章干细胞实验室基本管理规范第六条干细胞实验室应严格按照《危险化学品管理条例》等法律法规要求，建立危险化学品使用档案，做好危险化学品进出库登记和台账管理，确保危险化学品使用的安全性。
第七条干细胞实验室应按照有关规定，做好实验室物品的进出库管理，任何实验室物品离开实验室必须填写物品领用单，并经过主管领导审批。
第八条干细胞实验室应根据实验室的具体情况，制定由实验室负责人和实验人员共同遵守的实验室规章制度，对实验室人员的行为进行规范。
第九条干细胞实验室应配备经验丰富的实验室管理人员进行全面管理，以保证实验室的质量和效率。
第十条干细胞实验室应有专门的安全防护人员负责实验室的安全防护工作，确保实验室人员的生命安全和身体健康。
第三章干细胞实验室人员管理规范第十一条干细胞实验室具体工作人员的岗位应根据实验室的需要进行设置，对实验人员进行岗位培训，保证实验室工作的质量和效率。
第十二条干细胞实验室应建立人员考核制度，对实验室工作人员的绩效进行评定，并根据评定结果做出相应的奖惩措施。
第十三条干细胞实验室应建立健全的人事档案管理制度，对实验室人员的人事档案进行全面管理，确保人事档案的真实性和完整性。
第十四条干细胞实验室应加强对实验室工作人员的安全培训，提高实验室工作人员的安全意识和自我保护能力。
干细胞制剂机构相关设施、环境和安全管理规范
干细胞制剂机构相关设施、环境和安全管理规范干细胞制剂机构相关设施、环境和安全管理规范：1、机构内应设立限制区，制备、贮存、检测、包装等可能影响细胞质量与安全的工作应在限制区域内进行。
限制区域应设立人员准入授权制度和登记制度，进入人员和进入时间应有记录。
加装门禁：卡、指纹识别，自动记录2、机构内应设置功能区。
功能区可包括细胞制备区、质量检测区、细胞贮存区、物料库区、医疗废物存放区、行政区、辅助区等。
各功能区总体布局应合理且不得互相妨碍。
其他：工作人员洗浴，重复应用的器皿洗刷消毒。
3、机构应建立在远离严重空气污染、水质污染、病原微生物（含未知或无检测手段的病原微生物）丰富的场所，应远离辐射、振动或噪声干扰的区域。
4、机构应采用高可靠性供电方式供电。
双路供电5、机构的内环境应清洁，地面、路面及运输等不应对细胞的制备和贮存造成污染。
不要养花6、细胞制备区、细胞贮存区、质量检测区应为相互独立或相互物理隔离的区域。
7、进入洁净区（室）的空气必须经过净化，并根据制备工艺要求划分空气洁净度级别，应符合协会质量管自律理规范要求。
8、与细胞制备和细胞贮存的质量要求相关的、在非完全密封状态下的细胞操作应在B级背景下的A级洁净等级进行。
9、洁净区内人员净化用室和制备用室的建筑面积应与工艺要求、空气洁净度等级和工作人员数量相适应。
10、细胞制备区中的有菌操作区和无菌操作区应有各自独立的空气净化系统，应配置状态标识（如工作中、消毒中等）。
11、洁净区的出风口和回风口设置应合理，不应产生空气流通的死角。
可能涉及高危致病因子的操作，其空气系统等设施应符合特殊要求。
正压全排、负压。
12、洁净区应配备良好的加湿、除湿、排风、除尘、降温、升温、消毒等设施。
臭氧、UV13、机构应建立洁净区环境监测的标准操作规程，应定期监测洁净区动态条件下的环境温度、湿度、尘埃粒子数和微生物数，监测结果应符合设计要求并记录存档。
14、洁净区与非洁净区之间应设置缓冲间。
干细胞微生物学检测标准操作规程SOP-ZK-002
质量管理精心整理干细胞微生物学检测标准操作规程精心整理一、总则精心整理1.目的：建立针对实验室干细胞微生物学标准操作程序，用以规范员工的检测操作。
2.范围：适用于公司内部生产干细胞的微生物学检测工作3.责任：生产部、生产车间、质量管理部、QC检验室主任、检验员对本规程的执行负责。
4.检测依据： YY/T0188.6－1995药品检验操作规程，第6部分，微生物测定法。
二、细菌检测1.所用检测试剂耗材及仪器①取培养皿待恢复室温②将待检样本过火后拧开盖子③利用一次接种环将样本接种于培养液皿中④坐上标记方便记录与查看结果⑤将培养皿倒扣置培养箱中⑥ 37℃培养3-5天查看结果精心整理⑦结果鉴定：培养皿上有否出现可疑菌落，如有则为细菌污染，若培养至第5天未见可疑菌落，则未污染⑧做好结果记录并填写质量报告三、真菌检测1.所用检测试剂耗材及仪器②将待检样本过火后拧开盖子③利用一次接种环将样本接种于培养液皿中④坐上标记方便记录与查看结果⑤将培养皿倒扣置培养箱中⑥ 26℃培养3-5天查看结果精心整理⑦结果鉴定：培养皿上有否出现可疑菌落，如有则为细菌污染，若培养至第5天未见可疑菌落，则未污染⑧做好结果记录并填写质量报告四、支原体检测支原体快速法：③温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟④配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用⑤洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干⑥加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外精心整理⑦温育：操作同 3⑧洗涤：操作同 5⑨显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟⑩终止：每孔加终止液50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）精心整理。
干细胞检测操作规程
干细胞检测操作规程干细胞检测操作规程一、实验前准备1. 检测设备：确保干细胞检测所需的设备完好，并进行必要的校准和质控。
2. 试剂准备：根据实验所需，准备好所需的试剂，并按照说明书进行储存和稀释。
3. 材料准备：清洗和消毒实验所需的材料和试剂瓶，确保材料的无菌和干净。
二、样品处理1. 样品采集：根据实验设计，采集所需的样品，确保样品的来源正确，防止交叉污染。
2. 样品储存：及时将采集到的样品储存在适当的条件下，防止变质和污染。
3. 样品处理：根据实验要求，对样品进行预处理，如离心、稀释等。
三、实验操作过程1. 培养基准备：根据实验需要，准备所需的培养基，并进行必要的消毒处理。
2. 细胞培养：将样品加入培养基中，按照实验要求进行细胞培养，包括培养时间、温度、CO2浓度等。
3. 干细胞检测：根据实验要求，使用特定的试剂和设备进行干细胞检测，包括细胞分离、标记、荧光检测等步骤。
4. 数据分析：对检测结果进行计算和分析，确保准确性和可重复性。
四、实验后处理1. 剩余样品处理：对实验中剩余的样品进行妥善处理，避免交叉污染和环境污染。
2. 设备清洗：对使用过的设备进行清洗和消毒，确保下次实验的准确性。
3. 数据记录与存储：将实验结果进行记录，并进行适当的存储，方便后续数据分析和查看。
4. 实验报告撰写：根据实验结果，撰写实验报告，包括实验目的、方法、结果和结论等。
五、实验安全措施1. 佩戴实验手套：进行实验时，必须戴上实验手套，避免污染和伤害。
2. 注意个人卫生：做好个人的卫生保护工作，包括勤洗手、不随地吐痰、不食用实验物品等。
3. 安全操作：严格按照实验操作规程进行操作，禁止随意更改实验步骤，保证实验安全。
总结：干细胞检测是一项复杂的实验操作，对实验者的操作技巧和实验设备的正常运行要求较高。
在进行干细胞检测前，必须做好实验前的准备工作，包括设备和试剂的准备、样品的处理等。
在实验操作过程中，需要严格按照实验步骤进行操作，并注意实验安全措施，保证实验结果的准确性和可靠性。
干细胞临床研究相关管理规范与文件
干细胞临床研究相关管理规范与文件干细胞临床研究相关管理规范与文件一、引言本文档旨在规范干细胞临床研究，确保研究工作的安全性、科学性和伦理性。
本文档适用于所有干细胞临床研究项目及相关工作人员。
二、术语定义2.1 干细胞：具有自我更新能力和分化能力的细胞。
2.2 临床研究：在人体中对干细胞进行研究的活动。
2.3 伦理委员会：负责审查干细胞临床研究计划，保护受试者权益和确保研究合规性的机构。
三、研究流程管理3.1 研究计划编制：详细描述研究目的、方法、受试者招募和随访等内容。
3.2 受试者招募和知情同意：招募符合研究条件的受试者，并确保其明确知晓研究目的和风险。
3.3 受试者随访：对参与研究的受试者进行定期随访，记录研究过程中的相关数据。
3.4 研究数据管理：确保研究数据的完整性、准确性和保密性，建立相应的数据管理系统。
四、实验室管理4.1 干细胞采集与保存：制定标准规范，确保干细胞的采集和保存过程符合相关要求。
4.2 干细胞培养与扩增：制定培养操作规范，确保干细胞培养的质量和稳定性。
4.3 干细胞分化与应用：制定分化操作规范，确保干细胞分化的准确性和安全性。
五、质量管理5.1 设备和试剂管理：确保实验室设备和试剂的选择、购买、验收等质量管理过程符合标准要求。
5.2 培训与人员管理：对参与干细胞临床研究的工作人员进行必要的培训，确保其具备相应的知识和技能。
5.3 样品管理：建立样品管理制度，确保样品的标识、存储和运输过程符合相关要求。
六、伦理管理6.1 伦理审查：将研究计划提交给伦理委员会进行审查和审核，确保研究符合伦理要求。
6.2 受试者权益保护：确保受试者的知情同意、隐私保护和研究过程中的权益得到充分保护。
6.3 病例报告与数据公开：制定数据公开原则，对研究结果进行及时和适当的公开。
附件：1、干细胞临床研究流程图2、伦理审查申请表格3、数据管理系统使用手册法律名词及注释：1、《干细胞临床研究管理办法》：指明了干细胞临床研究的管理要求和程序。
干细胞流程及注意事项说明
干细胞流程及注意事项说明干细胞是一种具有自我更新和分化能力的细胞，具有广泛的应用前景。
在干细胞研究中，正确的操作流程和注意事项非常重要，下面将为您详细介绍干细胞流程及注意事项说明。
一、实验前准备1.1 实验室环境干细胞实验需要在严格的无菌条件下进行，因此实验室环境应该保持清洁、整洁、无尘，并且要定期消毒。
1.2 实验仪器干细胞实验所需的仪器设备包括显微镜、离心机、培养箱等。
这些设备应该经过严格的检测和保养，确保其正常运行。
1.3 培养基和试剂干细胞培养需要使用特殊的培养基和试剂，这些物品应该购买正规厂家生产的产品，并且要注意保存条件。
二、获取干细胞2.1 干细胞来源目前可以用于获取干细胞的方法有多种，包括体内分离、体外培养等。
其中较为常见的方法是从人类或动物组织中分离出干细胞。
2.2 干细胞分离干细胞分离需要使用特殊的试剂和设备，具体操作步骤如下：（1）准备组织样本，并进行消化处理。
（2）将消化后的组织样本过筛，去除不需要的组织碎片和异物。
（3）使用特定的抗体或其他方法对干细胞进行分离。
2.3 干细胞培养将分离出的干细胞放入培养基中进行培养。
在培养过程中应该注意以下事项：（1）保持无菌状态，避免污染。
（2）定期更换培养基，以保证营养物质的供应和废物的排出。
（3）控制培养温度、湿度和二氧化碳浓度等环境条件，以促进干细胞生长和分化。
三、干细胞鉴定为了确保分离出来的是真正的干细胞，需要进行鉴定。
常用的鉴定方法包括：3.1 免疫荧光染色法使用特异性抗体标记干细胞表面标志物，然后观察染色结果。
如果干细胞表面标志物呈阳性，说明分离出的是真正的干细胞。
3.2 流式细胞术利用流式细胞仪对干细胞进行鉴定。
流式细胞仪可以对单个细胞进行检测，并且可以同时检测多种标志物。
四、干细胞分化4.1 干细胞分化方法干细胞可以通过不同的方法进行分化，包括：（1）生长因子诱导法：通过添加特定的生长因子来促进干细胞向特定方向分化。
（2）遗传修饰法：通过基因工程技术改变干细胞内部基因表达，从而实现特定的分化方向。
大鼠表皮干细胞安全操作及保养规程
大鼠表皮干细胞安全操作及保养规程前言表皮干细胞（Epidermal Stem Cells，简称ESCs），是一种自我更新、能够分化成多个皮肤细胞类型的干细胞。
ESCs 可以促进疤痕组织的形成和愈合、促进血管生成、加速脂肪细胞调节、协调免疫反应、预防老化等，正在被广泛应用于医疗美容、医学研究等领域。
本文将介绍大鼠表皮干细胞的安全操作及保养规程。
一、实验室环境要求1.1 实验设备1.带有灭菌器的无菌实验室。
2.制备培养基的实验室。
3.能够进行无菌操作的工作台。
4.带有紫外线照射器的生物安全柜。
5.单光子发光显微镜。
6.低温离心机。
7.培养箱。
1.2 清洁卫生要求实验室的每件设备、每种培养基和培养用品等都必须是无菌的。
从实验室进入的所有人员都应该穿戴好防护用品，在实验室内吸烟和进食是禁止的。
实验室的墙壁、地板以及设备都应该保持清洁，并且定期进行消毒处理。
二、大鼠表皮干细胞操作规程2.1 提取和培养1.使用无菌手套打开大鼠。
2.取下其皮肤，并在 70% 的酒精中浸泡和清洗至少 3 次。
3.分离表皮和真皮，并将表皮切成 1mm x 1mm 的小块。
4.置于一个含有 1% 的胰酶、0.05% 的牛胆酸和 0.01% 的DNA 酶的消化液中。
温度应该保持在37°C，至少持续 6 小时，直到组织被胰酶完全消化。
5.将消化后的细胞在无菌状况下振荡 10 次，将其孵育于1640 培养基和 10% 的胎牛血清里，并使其粘附在无菌器皿上，温度为37°C，CO2 浓度为5%。
6.每 3 天更换培养基一次，将缓慢生长的细胞 Passage1。
2.2 用于外用试验将 ESCs 移植到从同一种大鼠分离出的皮肤小块上，在取得小鼠皮肤小块的授权后，将 ESCs 移植到小鼠身上。
2.3 移植用于人体试验移植 ESCs 前，必须获取受试者同意，并采用所有必要的伦理和知情程序，进行伦理验证和道德审查，移植后进行严格的监测和跟踪。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
干细胞实验室管理使用规程
1 目的建立实验室管理使用规程，保证操作者正确使用。
2 范围适用于实验室操作。
3 责任者操作人员、实验室管理人员。
4 内容
4．1实验室应严禁放置杂物，无关人员严禁入内。
4．2 实验室应严格保持整洁，防止污染，定期消毒。
实验室应每次使用前后用%新洁尔灭溶液擦拭工作台面及可能污染的死角，湿拖地面，每周湿擦墙面
及天花板。
定期清洁空气净化器，做好消毒记录。
无菌衣每周送供应室消
毒。
4．3实验人员用肥皂洗手后进入缓冲间换拖鞋，用75％乙醇棉球擦手，穿戴工作衣帽、口罩。
进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁。
帽子要将全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。
4．4将所需物品剥去牛皮纸及外包装，从传递窗移入操作间。
所有进出实验室的物品需通过专用传递窗通道，并且需经过紫外线消毒或75%酒精消毒。
4．5超净工作台使用前开启紫外灯照射30分钟，使用时打开吹风净化工作台，操作完毕及时清理消毒。
4．6取无菌物品时，必须用无菌钳（镊），镊子剪刀等在每次使用前后，必须通过火焰灭菌冷却后方可使用。
未经消毒的物品不可触及无菌物或跨越无菌区。
注射器如需回抽时，应对着火焰吸入无菌空气。
4．7实验过程严格按照无菌操作规程操作，进行无菌操作时如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用，应更换或重新灭菌。
所有消毒灭菌物品必须及时标明打开时间，并在规定时限内使用。
实验完毕，整理检品及各种用具并
清洁工作台面。
4．8细胞培养箱、离心机等实验仪器根据各自要求定期消毒。
新配培养液等试剂送检无菌后使用。
4．9各种消毒灭菌剂根据其性能及产品说明与要求配置，并按要求定时测试浓度，保证消毒灭菌效果。
实验室定期进行洁净度测试检查沉降菌（在室内打开血琼脂平板30分钟，经37℃培养48h），100级平均菌落数不得过1个/皿，如超过应进行清洁消毒。
4．10 实验室进出程序如下：
实验室进出程序
虚线为出室程序。