蛙类的反射及心脏的神经支配
蛙类的反射及心脏的神经支配
【摘要】在中枢神经系统参与下，机体对刺激所引起的适应性反应称为反射，而实现该反射的通路则称作反射弧。
动物的心脏受交感神经和迷走神经双重作用，在不同的刺激强度下，心脏会表现出不同的搏动特征。
本实验利用脊蛙分析反射弧的组成，探讨反射弧的完整性与反射活动的关系，通过对脊蛙的反射时进行测定，进一步探究反射弧的组成及其影响因素。
通过对迷走交感神经干进行不同强度的刺激和处理，进而探究心脏搏动同迷走交感神经干之间的联系。
实验结果表明，反射活动的结构基础是反射弧，包括感受器、传入神经、中枢、传出神经和效应器五部分。
反射弧的任何一部分受到破坏或发生障碍时，都不能实现完整的反射活动；迷走神经兴奋性较高，低频率低强度的电刺激迷走交感神经干时多产生迷走效应，心脏搏动缓慢，高频度高强度刺激时多产生交感效应，而两者之间则产生先迷走后交感的双重效应。
以蟾蜍作为实验动物,研究蛙类的反射及心脏的神经支配,对于了解反射弧的组成及反射传导的机理以及探究心脏的神经支配因素具有重要意义。
【关键词】蟾蜍；坐骨神经；反射弧；心脏；迷走交感神经干
【引言】反射是机体应对外界刺激的特有功能之一，而心脏的神经支配是机体调节自身的有效途径。
反射和心脏搏动是动物生存的基础,以蟾蜍为实验对象, 研究蛙类的反射及心脏的神经支配, 可以了解生理学对于研究动物的反射和心脏的神经支配的常用方法和基本思路。
本实验通过对蟾蜍进行不同的刺激和处理，进而探究反射及反射弧存在的生理基础以及神经对于心脏搏动的意义。
材料与方法：
1、实验动物
蟾蜍
２、实验器材
支架、坩埚钳、蛙板、滤纸、棉花、秒表、纱布、烧杯、常用手术器械、张力换能器、BL420F、刺激电极、棉线、滴管
３、实验药品
任氏液、１％阿托品、０.５％和１％的硫酸溶液、２％普鲁卡因
４、实验操作
4.1 取一只蟾蜍，只毁脑。
将其挂在支架上，观察到蟾蜍没有蹬腿现象说明毁脑成功。
4.2 将蟾蜍腹位固定于蛙板上，剪开右侧股部背外侧皮肤，分离出坐骨神经，穿线备用。
此时创口应尽量小，以避免太大的痛觉对实验结果的影响。
4.3 坩埚钳夹住蟾蜍下颌，悬挂于支架上。
4.4 将蟾蜍右后肢最长趾浸入0.5%硫酸溶液中2-3mm，立即开始计时，当出现屈反应时停止计时，并用清水清洗该趾后用棉花擦干。
4.5 以蟾蜍左后肢最长趾重复4.4实验。
4.6 用手术剪自右后肢最长趾基部环切皮肤，然后用手术镊剥净该趾的皮肤，用硫酸刺激最长趾，记录时间。
4.7 改换右后肢有皮肤的趾，重复刺激。
4.8 取1%硫酸溶液的滤纸片，贴于蟾蜍右侧背部或者腹部，记录反射时间。
4.9 用细棉条包住分离出的坐骨神经，并在棉条上滴加几滴普鲁卡因溶液后，每隔2min重复步骤4.7，记录加药时间以及每次反射时间，直至反射消失。
4.10 当屈反射不再出现时，每隔2min重复步骤4.8，记录加药时间以及每次反射时间，直至反射消失。
4.11 将左侧后肢最长趾再次浸入0.5%硫酸溶液中，记录反射时间。
4.12 将蟾蜍继续进行毁髓后重复试验。
4.13 将蟾蜍从支架取下，背位放置于蛙板上，在一侧颔角与前肢间剪开皮肤，分离结缔组织，剪断提肩胛肌，寻找一条血管神经束（其中含有皮动脉、颈静脉和迷走交感神经干），用玻璃解剖针分离出迷走交感神经束，穿线备用。
4.14自剑突剪开胸骨柄，暴露心脏，剪开心包膜，用蛙心夹夹住心尖，连接张力传感器和BL420F。
将保护电极勾住迷走交感神经干，并将保护电极的两级同刺激电极两级相接。
4.15打开BL420F，进入生物信号采集处理系统，描记一段正常的心搏曲线后调节刺激频率和强度，用低频度低强度的电刺激（连续单刺激，波宽1-10ms）迷走交感神经干，观察和记录心搏曲线的变化。
再调节为高频率高强度以及中等频率和强度的电刺激迷走交感神经干观察和记录心搏曲线的变化。
4.16 在静脉窦于心房之间滴加阿托品溶液2-3滴，5min后重复步骤4.15。
5、实验结果
5.1 反射时的测定及反射弧的分析
表一若干因素对反射的影响
毁坏脊髓后再重复实验，蟾蜍不再发生反射。
5.2 心脏的神经支配
图1 正常心搏曲线
图2 低频低强度电刺激对（频率10HZ；强度3V；波宽10ms）
图3 寻找中、高频率和强度的电刺激（1）——频率13HZ；强度3.5V；波宽10ms
图4 寻找中、高频率和强度的电刺激（2）——频率40HZ；强度5V；波宽10ms
图5 寻找中、高频率和强度的电刺激（3）——频率50HZ；强度6V；波宽10ms
图6 寻找中、高频率和强度的电刺激（4）——频率200HZ；强度20V；波宽10ms
图7 加阿托品后不同连续单刺激对心脏的作用（1）——频率10HZ；强度3V；波宽10ms
图8加阿托品后不同连续单刺激对心脏的作用（2）——频率50HZ；强度5V；波宽10ms
图9 加阿托品后不同连续单刺激对心脏的作用（2）——频率100HZ；强度10V；波宽10ms 讨论与结论：
1、反射时的测定及反射弧的分析
1.1若干因素对反射的影响
1.1.1由表一可知:完整的反射弧是反射成功产生的生理基础，在本次实验中，屈反射的反射弧为：（1）皮肤—（2）坐骨神经—（3）脊髓—（4）坐骨神经—（5）肌肉，以上5部分分别为：感受器—传入神经—中枢—传出神经—效应器。
缺少其中任意一个结构，反射都不能发生。
1.1.2 皮肤是反射弧的效应器，剥去皮肤后，反射不能产生。
且背部皮肤较趾部皮肤更为敏感，在背部贴滤纸使蟾蜍产生反射的时间小于趾部刺激，且其敏感程度大于趾部刺激。
1.2普鲁卡因对反射的影响
普鲁卡因是一种局部麻醉剂，有表二可知：当右侧坐骨神经被麻醉后，右侧肢体反射弧被破坏。
随着麻醉时间的递增，反射逐渐消失。
当药效消失后，反射将会恢复。
结果表明，背部贴滤纸对蟾蜍的刺激更为强烈，普鲁卡因的麻痹作用
出现时间较长。
同时，蟾蜍左侧的反射弧依然完整，故破坏右侧反射弧不会影响
左侧肢体的反射活动。
1.3 毁坏脊髓对反射的影响
毁坏脊髓后再重复实验，由于脊髓是蟾蜍反射弧的中枢，反射弧被破坏，所以蟾蜍不再发生反射。
1.4 其他因素
1.4.1 本次实验中，为了节省时间，只测定了一组反射时间，对实验的准确性有一定的影响。
1.4.2 若蟾蜍趾部皮肤未剪除干净，对实验结果将带来较大影响。
1.4.3 一次刺激完成后，需要用清水洗净皮肤，再用纱布擦干净后继续实验，否则残留的硫酸溶液会对实验结果有影响。
1.4.4 普鲁卡因的滴加量会对反射时间带来影响。
1.4.5 分离坐骨神经时，若创口太大，太大的痛觉会对实验结果带来误差。
2、心脏的神经支配
2.1低频低强度电刺激对心脏的影响
心脏受交感神经和副交感神经支配。
心交感神经兴奋使心跳加快加强，传导加速，从而使心输出量增加。
支配心脏的副交感神经为迷走神经，兴奋时心率减慢，心脏收缩力减弱，传导速度减慢，从而使心输出量减少。
由于迷走神经的兴奋性较高，低频率低强度的电刺激时主要产生迷走效应（如图2所示）。
2.2 中、高频率、强度电刺激对心脏的影响
逐渐增大刺激频率和强度，迷走效应仍占主导（如图3-图6），交感效应不明显，预期要得到的双重效应和交感效应并未出现。
一般地说，心迷走神经与心交感神经对心脏的作用是相互对抗的。
但两者同时作用心脏时，其最终结果不等于两者分别作用时效果的代数和。
在多数情况下，心迷走神经的作用比交感神经占有更大的优势。
预期现象未出现，可能的原因如下：
a、刺激过于频繁使神经过于疲惫，交感神经的作用变得更弱，被迷走效应所掩盖。
b、副交感神经末梢与交感神经末梢相互作用的结果。
C、温度、食物等环境因素的影响，使交感效应被抑制。
d、因为实验动物长期的精神紧张，可能导致蟾蜍植物性神经紊乱。
2.3 阿托品与不同连续单刺激对心脏的作用
如图7-图9所示，在心脏处滴加阿托品后，出现了先迷走后交感的双重效应，说明阿托品对于封闭迷走神经对于心脏的影响有作用。
增大刺激频率和强度，发现交感效应更加明显，证明高频率高强度的电刺激易产生交感效应。
但是单纯的交感效应并未出现，究其原因，可能是由于：
a、阿托品加入量太少。
b、实验过程中，交感迷走神经干被损伤。
c、刺激过于频繁使神经过于疲惫，交感神经的作用变得更弱，迷走效应增
强。
d、因为实验动物长期的精神紧张，或者实验环境和食物等因素的影响，可能导致蟾蜍植物性神经紊乱。
参考文献
[1]/cv-physiology/ktxx/4/4-1.htm
[2] 互动百科
/wiki/%E6%A4%8D%E7%89%A9%E7%A5%9E%E7%BB %8F%E5%A4%B1%E8%B0%83
[3] 李仁德，董守良，陈强，人体及动物生理学实验指导.兰州大学出版社。
小结影响蛙心波动的内环境因素及其作用。
小结影响蛙心波动的内环境因素及其作用。
蛙心波动是指蛙心脏的收缩和舒张过程中出现的周期性变化。
内环境因素是指影响蛙心波动的身体内部环境因素。
以下是一些常见的内环境因素及其作用：
1. 自主神经系统：自主神经系统分为交感神经系统和副交感神经系统。
交感神经系统通过释放肾上腺素和去甲肾上腺素等神经递质，可以增加心率和收缩力，促使心脏更快地收缩和舒张。
相反，副交感神经系统通过释放乙酰胆碱等神经递质，可以减慢心率和收缩力，使心脏节奏更为缓慢。
2. 血液中的物质浓度：血液中的氧气、二氧化碳和酸碱平衡等物质的浓度对蛙心波动起着重要作用。
例如，当血液中氧气浓度降低或二氧化碳浓度升高时，会刺激化学感受器，引起心率加快和心肌收缩力增强。
此外，酸碱平衡的改变也会直接影响心脏的兴奋性和收缩力。
3. 温度：温度是另一个影响蛙心波动的内环境因素。
当体温升高时，心率会增加，心肌收缩力增强，心脏波动更为活跃。
相反，当体温降低时，心率减慢，心肌收缩力减弱，心脏波动变得缓慢。
4. 荷尔蒙：荷尔蒙是由内分泌系统分泌的化学物质。
一些荷尔蒙如肾上腺素和甲状腺素等可以影响心脏的兴奋性和收缩力，从而影响蛙心波动。
例如，肾上腺素可以增加心脏的兴奋性和收缩力，使心脏波动更为强烈。
总的来说，蛙心波动受到自主神经系统、血液中的物质浓度、温度和荷尔蒙等内环境因素的调节影响。
这些因素可以通过改变心率、心肌收缩力和心脏兴奋性来调节蛙心波动的强度和频率。
蛙的生理结构及脊蛙神经反射实验
谱写更加绚丽的篇章。Ｊ 【 ，
（ ：本课 题研 究论 文获 得 新 疆２ １年 中学生 生 物科 技论 注 ０１
文一 等 奖 ）
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还会 自主跳 动 一段 时 间 。实验 结 束后 ，我们 查找 了 相关 资料 ，
资料上说这是由于心机自主收缩的原因。
呼吸系 统 ． 在心脏的两旁有两个囊状物，这是肺。用细
玻璃管插入蛙的喉部 ，注意 ：要将管子插到口腔下方的孔里而
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课 外实践 Ｐ ｃｃ厢 ｒ ｔｅ ａｉ
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蛙 的生理 结构 及 脊 蛙神经反射 实验
文 Ｊ 陈雨涛 沈方宁 杨泽康 （ 新疆石河子第一中学高二２班 ） 指导教师 Ｉ ３ 董耀谦
自然 界 中 ，事 物的 发展 、能量 的转 化 、信 息 的传 递 等各 种 现 象 都包 含 着 因果 关 系 ，只要 时间 没有 停滞 ，这种 关 系将 广 泛 存 在 ，从 “ ”到 “ ” ，贯 穿 着事 物 的发 展 过程 ，当过 程 长 因 果
到 的 材 料 工 具 有 ：蛙 ，手 术 钳 ，镊 子 ，解 剖 盘 ，手 术 刀 ，注 射器 。
上 放 平 ，四 肢用 注 射针 头 固定 好 。注 意 ，针不 能 插得 太 浅 。然 后 找 到蛙 枕 骨 大孔 位置 ，用 镊 子调 起 青蛙 的腹 部 的皮 肤 ，用 手 术刀 剖开 蛙 的 腹部 的皮 肤 。再 把皮 肤 与下 面 的肌 肉剥 离 开 ，并 且 翻 向 两侧 。注 意 ：不 要 同 时把皮 和 肉一 起 剪开 ；剪尖 耍稍 上
离完 毕后 ，脊 髓周 围的神 经 露 了出 来 ，我 们用 镊 子对 它 加 以刺
蛙类的反射及心脏的神经支配
蛙类的反射及心脏的神经支配【摘要】在中枢神经系统参与下，机体对刺激所引起的适应性反应称为反射，而实现该反射的通路则称作反射弧。
动物的心脏受交感神经和迷走神经双重作用，在不同的刺激强度下，心脏会表现出不同的搏动特征。
本实验利用脊蛙分析反射弧的组成，探讨反射弧的完整性与反射活动的关系，通过对脊蛙的反射时进行测定，进一步探究反射弧的组成及其影响因素。
通过对迷走交感神经干进行不同强度的刺激和处理，进而探究心脏搏动同迷走交感神经干之间的联系。
实验结果表明，反射活动的结构基础是反射弧，包括感受器、传入神经、中枢、传出神经和效应器五部分。
反射弧的任何一部分受到破坏或发生障碍时，都不能实现完整的反射活动；迷走神经兴奋性较高，低频率低强度的电刺激迷走交感神经干时多产生迷走效应，心脏搏动缓慢，高频度高强度刺激时多产生交感效应，而两者之间则产生先迷走后交感的双重效应。
以蟾蜍作为实验动物,研究蛙类的反射及心脏的神经支配,对于了解反射弧的组成及反射传导的机理以及探究心脏的神经支配因素具有重要意义。
【关键词】蟾蜍；坐骨神经；反射弧；心脏；迷走交感神经干【引言】反射是机体应对外界刺激的特有功能之一，而心脏的神经支配是机体调节自身的有效途径。
反射和心脏搏动是动物生存的基础,以蟾蜍为实验对象, 研究蛙类的反射及心脏的神经支配, 可以了解生理学对于研究动物的反射和心脏的神经支配的常用方法和基本思路。
本实验通过对蟾蜍进行不同的刺激和处理，进而探究反射及反射弧存在的生理基础以及神经对于心脏搏动的意义。
材料与方法：1、实验动物蟾蜍２、实验器材支架、坩埚钳、蛙板、滤纸、棉花、秒表、纱布、烧杯、常用手术器械、张力换能器、BL420F、刺激电极、棉线、滴管３、实验药品任氏液、１％阿托品、０.５％和１％的硫酸溶液、２％普鲁卡因４、实验操作4.1 取一只蟾蜍，只毁脑。
将其挂在支架上，观察到蟾蜍没有蹬腿现象说明毁脑成功。
4.2 将蟾蜍腹位固定于蛙板上，剪开右侧股部背外侧皮肤，分离出坐骨神经，穿线备用。
蛙心灌流
实验报告说明：1、实验报告务必独完成，对抄袭者将按不及格处理；2、实验报告的格式请按下面的各项要求来填写，不要改动；3、正文字体统一用“仿宋-GB2312”、，小四号，单倍行距，小标题加黑；4、下面的“替换这里”字体底纹在完成后去除；5、实验报告按时上传，上传时文件名统一按照网上说明来命名；实验名称：蛙心灌流同组姓名： 实验日期： 室 温： 气 压： 成 绩：教 师：一、实验结果图一 加入0.65% NaCl 蛙的心搏曲线蛙心跳活动减弱姓名： 学号：蛙心收缩力增强蛙心跳活动增强(此图本应为先加阿托品再加Ach蛙的心搏曲线)蛙心跳活动减弱图六加入KCl蛙的心搏曲线蛙心跳活动减弱，甚至停在基线处二、分析与讨论蛙心起搏点静脉窦能按一定节律自动产生兴奋。
将离体蛙心保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍能保持节律性收缩。
心脏正常的节律性活动有赖于内环境理化因素的相对稳定，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。
心脏的神经支配及作用：①交感神经→去甲肾上腺素→心肌β1受体结合→正性变时、变力和变传导效应②副交感神经→乙酰胆碱→心肌M2受体结合→负性变时、变力和变传导效应心肌收缩的特点：①对细胞外Ca2+浓度的依赖性高；②“全或无”式收缩。
分析：1、正常情况下心肌细胞与骨骼肌细胞类似，其动作电位也具周期性：0期的去极化、1期的快速复极化初期、2期的平台期、3期的快速复极化末期和4期的静息期。
心肌细胞兴奋后，通过兴奋-收缩偶联机制使心肌细胞内粗、细肌丝滑行，与骨骼肌收缩不同的是心肌收缩需要胞外的Ca2+进入胞质后，触发肌质网膜的Ca2+通道打开，而使大量的Ca2+进入胞质从而产生收缩。
2、滴加0.65% NaCl由图一可以看出，当任氏液中加入Na+后，蛙的心搏曲线的基线明显下降，说明Na+对蛙类心脏的收缩性起抑制作用，使心脏的收缩力降低。
用0.65％NaCl溶液灌注蛙心，虽然灌流液是等渗的，但心脏的收缩强度和频率降低，这是由于缺乏其它与细胞兴奋性有关的一些离子。
实验五 蛙类心脏的神经支配
七、思考题 1． 分析刺激迷走交感神经干所产生 效应的机理。 2． 所滴加的药品A和B可能是什么？ 讲述其产生作用的机理。 3. 试设计一种单纯刺激迷走神经和单 纯刺激心交感神经的实验。
动物生理实验模块
实验五
蛙类心脏的神经支配
一、实验目的 1. 了解蛙类心脏的神经支配。
2．观察迷走神经干对心脏活 动的影响。
ห้องสมุดไป่ตู้
二.原理
蛙类的心脏活动受迷走神经和心交感神经 的双重支配，它的迷走神经和颈交感神经 混合成一个神经干。刺激强度的不同，可 能出现迷走效应或交感效应。
三、试剂与器材
蛙、计算机、生物信号处理系统、解剖 针、手术剪、眼科剪、圆头手术镊、蛙 板、刺激输出线、刺激电极、张力换能 器、蛙心夹、棉花、棉线、任氏液、滴 管、1%阿托品、1%心得安。
四、实验内容 （步骤）
（一）暴露迷走交感神经干（看示范） 暴露迷走交感神经干（看示范） （二）暴露心脏 （三）连接实验装置 （四）记录心搏曲线 （五）刺激神经干观察效应 （六）滴加阿托品，5min后，重复 滴加阿托品， 后 的实验， （五）的实验， 比较分析
五、注意事项
刺激参数设置要合理
六、结果和目标
蛙心脏神经支配
蛙心脏神经支配反射时的测定及反射弧的分析09生物学基地班陈西茜【摘要】选取只毁脑的脊蟾蜍，测量其从接受刺激到做出反应的时间，即为反应时。
破坏反射弧的任意部分，如接收器，传入神经，传出神经，都会使得反射不再出现。
蟾蜍的心脏受迷走神经和心交感神经的支配。
迷走神经和颈交感神经混合成迷走交感神经干、低频低强度刺激迷走交感神经干，产生迷走效应，使得心脏搏动停止。
中等频率和强度的刺激会造成先迷走后交感的双重效应。
阿托品可封闭迷走神经对心脏的影响，只表现出交感神经使心搏增强的效应。
【实验材料】1.材料：蟾蜍（先毁脑，后毁髓）2.试剂：1%阿托品，0.5%及1%的硫酸溶液，2%普鲁卡因，任氏液3.器材：蛙类手术器械，蛙嘴夹（试管夹），滤纸片，棉花，纱布，培养皿（2个），蛙心夹BL420E+生物机能实验系统，张力换能器，保护电极【实验内容】一．反射时的测定及反射弧的分析原理：1.反射弧是反射的结构基础和基本单位。
反射是在中枢神经的参与下，机体对内外环境变化所产生的具有适应意义的规律性应答。
反射弧包括五部分：感受器，传入神经，神经中枢，传出神经，效应器。
如下图：图一：反射弧模式图屈腿反射和搔扒反射的神经中枢都在脊髓，其效应器位于皮肤上。
外界刺激的信息转变为神经的兴奋活动变化，沿传入神经传至中枢，再沿传出神经传至效应器，作出相应的反应。
反射弧的任意一个部分被破坏都不能使反射反应发生。
2.普鲁卡因的作用机理：普鲁卡因是一种局部麻醉药。
能使细胞膜稳定，降低其对离子的通透性，使神经冲动达到时，钠、钾离子不能进出细胞膜产生去极化和动作电位，从而产生局部麻醉作用。
方法：1.去蟾蜍，毁脑，制备脊蟾蜍。
将右侧股部皮肤剪开一个小口，分离出坐骨神经，穿线备用2.用试管夹夹住蟾蜍下颌，悬挂于支架上。
将蟾蜍的右后肢的最长趾浸入0.5%的硫酸溶液中2-3mm，立即记下时间，当出现屈反射时，则停止计时，此为屈反射时。
用同样的方法测定左后肢最长趾的屈反射时。
蛙类生理实验报告
一、实验目的1. 学习蛙类生理实验的基本操作技能。
2. 观察和记录蛙类心脏在不同生理条件下（如温度、灌流液成分等）的活动情况。
3. 分析并讨论温度和灌流液成分对蛙心活动的影响。
二、实验原理蛙类作为两栖动物，其心脏结构和功能具有一定的特殊性。
通过离体蛙心灌流实验，可以研究心脏在失去神经支配后的生理活动及其影响因素。
实验中，通过改变灌流液的温度和成分，可以观察心脏的收缩频率、收缩幅度等指标，从而了解温度和灌流液成分对心脏活动的影响。
三、实验仪器与材料1. 实验仪器：蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、棉线、任氏液、套管夹、065％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验材料：青蛙、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）。
四、实验方法与步骤1. 准备实验器材，将蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极等固定在支架上。
2. 将青蛙麻醉后进行解剖，暴露心脏周围的大血管，用线将左主动脉下方结扎。
3. 将蛙心夹插入心脏，用张力传感器记录心脏的收缩情况。
4. 将蛙心放入装有任氏液的培养皿中，观察心脏的收缩频率和幅度。
5. 改变灌流液的温度（如25℃、37℃等），观察心脏的收缩频率和幅度。
6. 改变灌流液的成分（如加入1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸等），观察心脏的收缩频率和幅度。
7. 记录实验数据，进行分析和讨论。
五、实验结果与分析1. 在25℃的任氏液中，蛙心收缩频率约为每分钟80次，收缩幅度约为0.5g。
2. 将灌流液温度升高至37℃后，蛙心收缩频率增加到每分钟120次，收缩幅度增加到0.8g。
3. 在25℃的任氏液中加入1：10000肾上腺素后，蛙心收缩频率增加到每分钟100次，收缩幅度增加到0.7g。
4. 在25℃的任氏液中加入1：10000乙酰胆碱后，蛙心收缩频率降低到每分钟60次，收缩幅度降低到0.3g。
实验三离体蛙心灌流
部分结果分析
*肾上腺素，心脏正性作用并且舒张完全
1.肾上腺素与心肌细胞膜ß受体结合，使心肌细胞膜 上腺苷酸环化酶活化作用于ATP产生cAMP cAMP的作用： （1）激活Ca2+内流； （2）肌浆网释放Ca2+
因此心肌收缩加强
2.肾上腺素使Ca2+泵活动增强，肌浆网摄取Ca2+ 向细胞外转运，胞内Ca2+减少，心肌舒张过程加 快，舒张完全
三、实验器材及药品
实验对象：蟾蜍
实验器材：
张力换能器 蛙类手术器械一套 铁支架 双凹夹 蛙心套管 蛙心夹 刺激电极 滴管 烧杯
实验药品：
任氏液 无Ca任氏液 1 % KCl 1 % CaCl2 2 % CaCl2 0.01% Ach 0.01% Adr
四、手术操作
1.取蟾蜍，破坏脑和脊髓、暴露心脏。
（5）加入1-2滴0.01%Ach于任氏液中，待效应出现 后，用任氏液换洗至曲线恢复正常。
（6）钙僵：
加入4-5滴２% CaCl2于新换入的任氏液中，观察心缩 曲线的变化。
八、注意事项
1.制备标本时，应按指导试探着插管，避免损伤心脏(包括静 脉窦)。
2.每次换液时，插管内的液面均应保持恒定高度。 3.各种试剂的滴管不要混淆,以免影响实验结果。 4.药物作用不明显时，可适量增加。每次加药，心搏曲线出现
变化后立即将插管内液体吸出。 5.滴加任氏液于心脏表面使之湿润。 6.固定换能器时应稍向下倾斜，以免自心脏滴下的液体进入换
能器内造成短路。
观看实验录像……
九、讨论分析
*分析各观察结果的原因。 *心肌有效不应期长的生理意义。 *心率过慢，期前收缩后是否有代偿间歇？ *实验中套管内液面为什么要保持相同高度？
蟾蜍心脏实验2
蟾蜍心脏实验二1.蟾蜍心搏过程2.心室期外收缩与代偿间歇3.蟾蜍心脏的神经支配4.离体蟾蜍心脏灌流3.蟾蜍心脏的神经支配4.离体蟾蜍心脏灌流3蟾蜍心脏的神经支配1.了解蛙类心脏的神经支配。
2.观察迷走神经干对心脏活动的影响。
蛙和蟾蜍的心脏受迷走神经和心交感神经的双重支配。
它们的迷走神经和颈交感神经混合成一个神经干，称迷走交感神经干。
在正常情况下，迷走神经兴奋时，心脏搏动减弱减慢；交感神经兴奋时，心脏搏动增强加快。
由于迷走神经的兴奋性较高，因而低频低强度电刺激迷走交感干时，多产生迷走效应；高频高强度刺激时，易产生交感效应；中等频率和强度的刺激，往往表现为先迷走后交感的双重效应。
若在心脏处滴加阿托品，可封闭迷走神经对心脏的影响，而表现为单纯的交感效应。
材料实验动物：中华蟾蜍手术器材：解剖针、手术剪、眼科剪、圆头手术镊、蛙板、刺激输出线、刺激电极、张力换能器、蛙心夹、棉花、棉线、任氏液、滴管、1%阿托品。
实验仪器：BL420F/E+，张力换能器；铁架台观察项目1.开动仪器描记一段正常心搏曲线。
然后用低频低强度电刺激迷走交感神经干观察和记录心搏活动的变化。
之后用中等频率和强度的电刺激，观察和记录心搏活动的变化。
最后用高频高强度电刺激，观察和记录心搏活动的变化。
刺激方式为连续刺激、波宽10 ms。
2.在静脉窦和心房部位加阿托品溶液2-3 滴，5分钟后，再用原刺激强度刺激神经干。
观察并记录心搏活动的变化。
这时由于阿托品封闭迷走神经对心脏的作用，迷走效应不会出现，而表现单纯的交感效应。
注意事项刺激参数设置要合理神经周围的组织液需用棉球吸干，以防短路每次刺激的时间不宜过长，每次刺激要间隔3-5分钟，以防损伤神经 须常用任氏液湿润神经和心脏，以防组织干燥而失去生理机能交感神经和迷走神经的效应往往随季节、气温和动物个体而变化，在实验过程中灵活掌握结果对实验结果进行正确简明的表述1.2.离体蟾蜍心脏灌流4了解离体心脏灌流的方法观察钠、钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏活动的影响并探讨各作用机制。
蛙类心博观察及
【实验结果】
顺序 1 2 3 4 5 6 7 8 观察项目 任氏液 0.65%NaCl 3%CaCl2 1%KCl 1:10000 E 1:10000 ACh 3% 乳酸 2.5% NaHCO3 药量 灌流 灌流 1~2滴 1~2 滴 1~2 滴 1 滴 1 滴 2~4 滴 心肌收缩力 正常 减弱
--蛙心灌流
三. 观察项目
（一）描记正常心搏曲线
曲线的幅度 —— 心脏收缩的强弱
曲线的疏密 —— 心率的快慢 曲线的规律性—— 心跳的节律性 曲线的基线 —— 心室舒张的程度
㈡. 观察项目
顺序 1 2 3 4 5 6 7 8 观察项目 任氏液 0.65%NaCl 3%CaCl2 1%KCl 1:10000 E 1:10000 ACh 3% 乳酸 2.5% NaHCO3 药量 灌流 灌流 1~2滴 1~2 滴 1~2 滴 1 滴 1 滴 2~4 滴 心肌收缩力
【讨论】
1. 任氏液：做对照 2. 0.65%NaCl灌流 [Na+]o↑→Na+内流↑→ Na+-Ca2+交换↑ → [Ca2+]i↓ →兴奋—收缩耦联↓ →收缩力↓。
3. 3%CaCl溶液
[Ca2+]o ↑ → Ca2+内流↑ → [Ca2+]i↑ →兴奋—收 缩耦联↑ →收缩力↑ 舒张期Ca2+与肌钙蛋白不完全解离，基线上移 产生Ca2+强直