大吞噬小吞噬实验

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大吞噬小吞噬实验

大吞噬的实验报告

一、实验目的1. 了解大吞噬现象的基本原理和过程。

2. 观察和分析巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象。

3. 掌握大吞噬实验的操作步骤和注意事项。

二、实验原理大吞噬是指巨噬细胞对细胞外较大颗粒物质（如细菌、细胞碎片等）的吞噬作用。

巨噬细胞通过胞吞作用，将吞噬物质包裹在内吞泡中，然后将其降解并排出细胞外。

本实验采用鸡红细胞作为吞噬物质，观察和分析巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象。

三、实验材料1. 实验动物：小鼠2. 试剂：鸡红细胞、生理盐水、无菌淀粉液、冷亚甲蓝溶液、染色剂等3. 仪器：显微镜、离心机、移液器、培养皿、载玻片等四、实验方法1. 小鼠腹腔巨噬细胞的制备（1）实验前3小时，给小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。

（2）将小鼠处死，打开腹腔，用无菌生理盐水冲洗腹腔，收集腹腔液。

（3）将腹腔液离心，弃去上清液，沉淀即为小鼠腹腔巨噬细胞。

2. 巨噬细胞吞噬鸡红细胞的观察（1）将鸡红细胞用生理盐水洗涤，制成悬液。

（2）取制备好的巨噬细胞，加入鸡红细胞悬液，使其比例为1:10。

（3）37℃孵育30分钟后，取出培养皿，用冷亚甲蓝溶液染色。

（4）将染色后的细胞涂片，在高倍显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象。

五、实验结果1. 观察到巨噬细胞表面出现鸡红细胞，说明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬。

2. 部分巨噬细胞内出现多个鸡红细胞，表明巨噬细胞具有吞噬多个鸡红细胞的能力。

3. 观察到部分鸡红细胞聚集在巨噬细胞附近，可能与巨噬细胞释放的趋化因子有关。

六、实验分析1. 本实验成功观察到了巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，验证了大吞噬现象的存在。

2. 实验结果表明，巨噬细胞具有吞噬多个鸡红细胞的能力，说明巨噬细胞在免疫过程中起着重要作用。

3. 实验过程中，巨噬细胞释放的趋化因子可能参与了鸡红细胞的聚集现象，提示趋化因子在免疫过程中的作用。

七、实验总结1. 本实验成功观察到了巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，加深了对大吞噬现象的理解。

大吞噬实验的实验报告

一、实验目的1. 观察和了解巨噬细胞对异物的吞噬过程。

2. 掌握巨噬细胞吞噬实验的操作方法。

3. 分析巨噬细胞的吞噬功能。

二、实验原理巨噬细胞是一种具有吞噬功能的免疫细胞，主要来源于单核细胞。

在机体受到病原体感染时，巨噬细胞可以吞噬病原体，并激活其他免疫细胞，共同参与机体的免疫反应。

本实验通过观察巨噬细胞对异物的吞噬过程，了解巨噬细胞的吞噬功能。

三、实验材料1. 小鼠：体重20-25g，雌雄不限。

2. 无菌生理盐水。

3. 鸡红细胞悬液。

4. 巨噬细胞培养液。

5. 巨噬细胞培养瓶。

6. 显微镜及配套设备。

7. 吸管、试管、离心机、移液器等。

四、实验步骤1. 实验前准备：将小鼠置于恒温恒湿的环境中饲养，适应环境。

实验前1天，用无菌生理盐水给小鼠灌胃，以提高巨噬细胞的活性。

2. 巨噬细胞培养：取小鼠腹腔巨噬细胞，加入巨噬细胞培养液，置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。

3. 实验操作：a. 取鸡红细胞悬液，用生理盐水稀释至一定浓度。

b. 将培养好的巨噬细胞悬液加入鸡红细胞悬液中，混合均匀。

c. 将混合液加入巨噬细胞培养瓶中，置于培养箱中培养一段时间。

d. 取出培养瓶，用吸管轻轻吹打，使巨噬细胞与鸡红细胞分离。

e. 将分离后的巨噬细胞悬液离心，弃去上清液，收集沉淀。

4. 观察与记录：a. 取巨噬细胞沉淀，制成涂片。

b. 用姬姆萨染色液染色，置于显微镜下观察。

c. 记录巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况，包括吞噬细胞的形态、吞噬的鸡红细胞数量等。

五、实验结果与分析1. 观察结果：在显微镜下，观察到巨噬细胞呈现出典型的吞噬形态，细胞内含有多个鸡红细胞。

2. 分析：a. 巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用，说明巨噬细胞在机体免疫过程中起着重要作用。

b. 吞噬细胞的形态变化与鸡红细胞的吞噬程度有关，吞噬程度越高，细胞形态变化越明显。

c. 通过观察巨噬细胞的吞噬功能，可以了解巨噬细胞在机体免疫反应中的活性。

六、实验结论本实验通过观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，验证了巨噬细胞在机体免疫过程中的重要作用。

吞噬实验

吞噬实验
一、目的要求
1.熟悉大小吞噬细胞的吞噬作用。

二、材料方法
（一）材料：小白鼠、金黄色葡萄球菌、瑞氏染液等。

（二）方法：
1. 试验前3天，小白鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。

2. 实验时，每只小白鼠腹腔注射金黄色葡萄球菌菌液0.5ml（腹股沟斜进针），轻揉腹部，使菌液在腹腔中分布均匀，利于吞噬。

3. 30分钟后，将小鼠拉颈处死，四肢固定，于耻骨联合上方处横剪，再沿腹白线竖剪，将皮肤与腹膜剥离，固定，在剪开腹膜，打开腹腔暴露肠管，用滴管取出腹腔液，均匀涂布于载玻片上，然后在滴一滴瑞氏染液，染色1分钟，再加盐水染4分钟，之后倒置玻片冲洗。

4. 高倍镜观察。

三、实验报告
记录本组操作及结果。

小吞噬实验_实验报告

1. 熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。

2. 观察中性粒细胞在小吞噬实验中的吞噬现象。

3. 分析实验结果，了解中性粒细胞吞噬功能的变化。

二、实验原理中性粒细胞（又称小吞噬细胞）是血液中的主要吞噬细胞，具有吞噬和消化细菌、病毒、细胞碎片等异物的作用。

小吞噬实验通过观察中性粒细胞吞噬异物的过程，了解其吞噬功能的强弱。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜血液、生理盐水、2%中性红溶液、2%亚甲蓝溶液、载玻片、盖玻片、显微镜等。

2. 实验仪器：离心机、移液器、恒温箱、显微镜等。

四、实验步骤1. 取新鲜血液1ml，加入等量生理盐水，混匀后离心，取上清液作为实验用血液。

2. 将2%中性红溶液和2%亚甲蓝溶液按1:1的比例混合，作为吞噬剂。

3. 取2ml混合液加入实验用血液中，混匀后置于37℃恒温箱中培养30分钟。

4. 取1滴混合液滴于载玻片上，盖上盖玻片。

5. 在显微镜下观察中性粒细胞的吞噬现象，记录吞噬百分率和吞噬指数。

五、实验结果与分析1. 实验结果实验结果显示，中性粒细胞在小吞噬实验中能够有效吞噬中性红和亚甲蓝颗粒，吞噬百分率和吞噬指数分别为80%和1.5。

2. 结果分析实验结果表明，中性粒细胞具有较强的吞噬功能。

吞噬百分率和吞噬指数的升高，说明中性粒细胞在小吞噬实验中能够有效地吞噬吞噬剂，具有一定的免疫防御能力。

通过小吞噬实验，我们了解到中性粒细胞在小吞噬实验中具有较强的吞噬功能，能够有效吞噬中性红和亚甲蓝颗粒。

这一实验结果有助于我们更好地了解中性粒细胞在人体免疫系统中的作用，为临床诊断和治疗提供理论依据。

七、实验反思与体会1. 实验过程中，需要注意无菌操作，防止污染。

2. 实验结果受多种因素影响，如实验材料、实验条件等，需要严格控制实验条件，提高实验结果的可靠性。

3. 通过本次实验，加深了对中性粒细胞吞噬功能原理的理解，提高了实验操作技能。

八、实验总结小吞噬实验是一种常用的细胞生物学实验，通过观察中性粒细胞在小吞噬实验中的吞噬现象，了解其吞噬功能的强弱。

《小吞噬实验》课件

实验的不足之处与改进建议
实验设计：需要更加严谨，考虑更多的因素
实验操作：需要更加规范，避免操作失误
数据处理：需要更加细致，避免数据误差
实验结果：需要更加客观，避免主观判断
实验报告：需要更加详细，便于他人理解
实验改进：需要更加全面，提高实验效果
实验的应用前景与展望
实验结果：验证了小吞噬现象的存在
培养基
作用：为细胞提供生长所需的营养和条件
成分：包括营养物Biblioteka 、缓冲物质、激素等类型：有液体培养基、固体培养基等
制备方法：根据实验需求选择合适的配方和制备方法
其他试剂
缓冲液：用于维持实验环境的pH值荧光染料：用于标记细胞或蛋白质酶抑制剂：用于抑制某些酶的活性抗体：用于特异性识别和结合目标蛋白
小吞噬实验
,
汇报人：
目录 /目录
01
点击此处添加目录标题
04
实验操作
02
实验目的
05
实验结果分析
03
实验材料
06
实验总结与展望
01 添加章节标题
02 实验目的
了解吞噬作用
吞噬作用是细胞吞噬和消化外来物质的过程
实验目的是观察吞噬作用的过程和机制
通过实验了解吞噬作用的生理功能和意义
实验可以帮助我们理解免疫系统的工作原理
实验结论：小吞噬现象是细胞内物质运输的一种方式
实验目的：验证小吞噬现象的存在
展望：未来可以进一步研究小吞噬现象的机制和应用
实验中遇到的问题与解决方法
问题：实验过程中出现误差解决方法：重新进行实验，确保数据准确
解决方法：重新进行实验，确保数据准确

小吞噬试验_实验报告

1. 了解中性粒细胞吞噬功能试验（小吞噬试验）的原理和方法。

2. 掌握中性粒细胞吞噬功能试验的操作步骤。

3. 观察中性粒细胞吞噬功能的变化，分析实验结果。

二、实验原理中性粒细胞吞噬功能试验（小吞噬试验）是一种检测中性粒细胞吞噬功能的方法。

中性粒细胞在人体免疫系统中起着重要作用，具有吞噬、消化病原体的功能。

通过观察中性粒细胞对特定物质的吞噬情况，可以了解中性粒细胞的吞噬功能。

三、实验材料1. 实验动物：健康小鼠2. 实验试剂：中性粒细胞吞噬功能试剂、生理盐水、染色液、显微镜等3. 实验仪器：离心机、显微镜、培养箱等四、实验步骤1. 选取健康小鼠，随机分为实验组和对照组。

2. 实验组：腹腔注射中性粒细胞吞噬功能试剂，对照组：腹腔注射等体积的生理盐水。

3. 注射后24小时，取小鼠血液，分离中性粒细胞。

4. 将中性粒细胞与特定物质（如细菌、酵母等）混合，置于培养箱中培养。

5. 观察中性粒细胞对特定物质的吞噬情况，记录吞噬百分率和吞噬指数。

6. 对实验结果进行统计分析。

五、实验结果1. 实验组中性粒细胞的吞噬百分率和吞噬指数均高于对照组，说明中性粒细胞吞噬功能试验结果显著。

2. 随着培养时间的延长，中性粒细胞的吞噬百分率和吞噬指数逐渐增加，说明中性粒细胞吞噬功能随时间延长而增强。

1. 实验结果表明，中性粒细胞吞噬功能试验可以有效地检测中性粒细胞的吞噬功能。

2. 中性粒细胞吞噬功能试验具有操作简便、结果直观等优点，适用于临床和科研工作。

七、实验结论通过本次实验，我们掌握了中性粒细胞吞噬功能试验的原理和方法，了解了中性粒细胞吞噬功能的变化规律。

实验结果表明，中性粒细胞吞噬功能试验可以有效地检测中性粒细胞的吞噬功能，为临床和科研工作提供了有力支持。

八、实验反思体会1. 实验过程中，应严格按照操作步骤进行，避免人为误差。

2. 实验结果的分析应客观、准确，避免主观臆断。

3. 中性粒细胞吞噬功能试验具有实际应用价值，为临床和科研工作提供了有力支持。

吞噬实验.

结果
吞噬百分率 =
100个巨噬细胞中已吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞的数目 100
×100%
吞噬指数 =
100个已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞中鸡红细胞的数目 100
豚鼠过敏试验原理
I型超敏反应（速发型超敏反应） -致敏阶段 -发敏阶段
-效应阶段
方法
1、给豚鼠皮下注射蛋清（1：10）1ml 2、两周后 3、给豚鼠心内注射蛋清（10%）1ml 4、观察结果
主、被动免疫生物制品介绍
主动免疫疫苗（抗原）减毒活疫苗灭活疫苗类毒素亚单位疫苗重组疫苗 DNA疫苗被动免疫免疫球蛋白（抗体）血浆免疫球蛋白胎盘免疫球蛋白人特异性免疫球蛋白抗毒素
主、被动免疫
主动免疫被动免疫
注射次数起效时间持续时间
1-3次 2-3周数月-数年
1次立即 2-3周
应用
预防
治疗
吞噬试验分大吞噬（巨噬细胞）和小吞噬（中性粒细胞）
原因巨噬细胞的主要功能通过吞噬作用清除病原微生物及衰老死亡的细胞。抗原递呈功能免疫调理、ADCC及免疫调节作用等参与免疫效应巨噬细胞在固有免疫及适应性免疫中均发挥重要作用。
方法
给小鼠腹腔内注射6%无菌淀粉溶液 1ml 72小时腹腔内注射鸡红细胞1ml 30分钟脱颈处死小鼠，暴露腹腔用滴管吸取少许腹腔液，滴到在玻片上（只染死细胞）再滴1滴 0.03% 冷美蓝, 盖上盖玻片显微镜下观察结果
吞噬实验
豚鼠过敏试验
sduzfl@
主要实验内容Байду номын сангаас
巨噬细胞吞噬实验
豚鼠过敏试验生物制品介绍
原理
巨噬细胞能吞噬体内异物抗原及变性细胞，受到刺激后吞噬能力明显增强，并且巨噬细胞可以迁移至腹腔吞噬异物，本实验即通过腹腔注射异物（无菌淀粉），从而激活巨噬细胞，通过观察巨噬细胞吞噬能力，间接评价机体的免疫水平。

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小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞现象大吞噬实验
鸡红细胞
瑞式染色
吞噬了鸡红细胞的吞噬细胞
Chick erythrocytes
M Φ
操作：小吞噬（中性粒细胞对小颗粒物质的吞噬）
• 原理：血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞，通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤，能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物，是机体非特异性免疫的重要组成部分。 • 材料：1.葡萄球菌菌液 2. 抗凝人血（3.8%枸橼酸钠）、瑞氏染液、双蒸水 3. 酒精棉球、香柏油 • 器材：采血针1根/人，棉签3根/人，载玻片1张/人，双凹片2张/2人，抗凝剂1支/桌，细菌1支/桌，酒精灯1个/2人，接种环1个/2人。
加工、递呈抗原
免疫调节
在机体防御和来源于细菌等感染性微生物的免疫应答中发挥重要的作用
吞噬过程
示教片
• 大吞噬:单核巨噬细胞吞噬大颗粒异物
示教片大吞噬现象
1、淀粉溶液注入豚鼠腹腔内
2、次日再注入淀粉溶液，1小时后腹腔注入鸡血球悬液 3、血球注入后1小时吸取豚鼠腹腔液，瑞氏染色 4、油镜观察，可见巨噬细胞内吞噬有鸡血球
无菌观念
严格贯彻“无菌概念”的培养和训练，严格实施 “无菌操作”。实验中如发生意外，如菌液洒在桌面或含活菌的实验器材损坏使细菌溢出，污染衣物手指等，应立即报告老师，及时进行消毒处理。吸过菌液的吸管等要放在0.1%新洁尔灭溶液中，不得放在桌上，更不可冲洗于水槽内。用过的带菌玻片也应放于含消毒液的容器内。
微生物与免疫学实验
• 主要内容：实验室规则 • 免疫细胞 • 油镜的使用 • 示教片 • 操作 • 作业
实验室规则
• 一般规则 • “无菌”安全：穿白大衣不能吃东西禁止追跑打闹物品按指定地点存放肥皂洗手，消毒液泡手
实验室规则
1、只带书籍、文具等实验相关物品进入实验室。
2、必须穿工作衣，离室时脱下并反折。 3、严禁在实验室吃东西，不得随地吐痰。 4、实验中不得随便走动，应保持安静、有序。 5、实验器材使用后按要求摆放，有菌的器材按要求浸泡于消毒液中。实验器材如有损坏，及时报告并登记。 6、实验完毕应打扫实验室卫生，关闭门窗水电，洗手清洁后方可离室。
单核巨噬细胞
• 包括骨髓内的前单核细胞，外周血
中的单核细胞和组织内的巨噬细胞。
•
骨髓内中的髓样干细胞受某些细胞因子的作用发育成前单核细胞。前单核细胞进一步发育成为单核细胞进入血流。然后移行至全身各组织器官内，发育成熟为巨噬细胞。
重要功能：
吞噬杀伤作用
参与和促进炎症反应
杀伤靶细胞
• • • •
步骤
• 洗手消毒扎手指（一针见血） • 一滴抗凝剂双凹片 2滴血，用针混匀 • 点酒精灯取菌环烧3次取3～4环菌液加入血中用取菌环混匀温育（37度）30 分钟推片（慢、厚）自然干燥 • 加瑞氏染液2滴1分钟加缓冲液4滴（染液与缓冲液比为1：2）混匀染10分钟冲洗吸干油镜观察 *纸入盆，双凹片、针入瓷缸（前面），油片入玻璃缸（后面）泡手
免疫细胞
吞噬细胞
——大吞噬细胞
（单核巨噬细胞吞噬大颗粒异物）
——小吞噬细胞
（中性粒细胞对小颗粒物质的吞噬）
大、小吞噬细胞 •大吞噬细胞－巨噬细胞 •小吞噬细胞－中性粒细胞
中性粒细胞（小吞噬细胞）
• 存在部位：血液、炎症部位（全身），是白细胞中数量最多的一种。 • 功能基础：溶酶体，过氧化物酶及杀菌物质。 • 作用：趋化作用吞噬功能 • 功能：主要吞噬化脓菌 • 反应时间及寿命：反应时间快，数分钟到几小时，寿命短，平均数小时。
瑞氏染色法
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1.瑞氏染料由酸性染料伊红（E-）和碱性染料亚甲蓝（M+）组成。伊红通常为钠盐，有色部分为阴离子。亚甲蓝（又名美蓝）为四甲基硫堇染料，有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐，即氯化美蓝，有色部分为阳离子。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料（即天青）。将适量伊红、美蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染料。甲醇的作用：一是溶解美蓝和伊红；二是固定细胞形态。 2.染色原理既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质。原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。
实验报告
画图：
• 大吞噬（巨噬、鸡红细胞）小吞噬（中性粒、细菌、红细胞及其他细胞）小吞噬实验方法注：画图要注意视野、比例、颜色、背景、标注
纸入盆，双凹片、针入瓷缸（前面），油片入玻璃缸（后面）, 泡手
油镜的使用
• 保护：拿取手式 • 对光：升聚光器打开光栅反光镜采光 • 观察：标本固定载物台上低倍镜找到标本低倍镜移开滴香柏油换油镜目镜观察，细调至清晰 • 使用完毕立即用擦镜纸擦干镜头上的油 • 原理Fra bibliotek结果观察
油镜检查：寻找中性粒细胞，如果染色结果正确，可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色，而粒细胞的细胞浆则为淡红色。
3.pH的影响（pH6.4～pH6.8）细胞各种成分均属蛋白质，因蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液pH而定，在偏酸性环境中正电荷增多，易与伊红结合，红细胞和嗜酸性粒细胞染色偏红，细胞核呈淡蓝色或不染色；在偏碱性环境中负电荷增多，易与美蓝结合，所有细胞呈灰蓝色，颗粒呈深暗，嗜酸性颗粒呈暗褐，甚至棕黑色，中性颗粒偏粗，呈紫黑色。稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应近中性，否则可导致细胞染色呈色异常，形态难以识别，甚至错误。 4.染色方法和注意事项（1）血涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。（2）冲洗时应以流水冲洗，不能先倒掉染液，以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久，以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗。