Qubit40使用与维护SOP

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Qubit标准操作规程

Qubit标准操作规程

Qubit? 3.0荧光定量仪操作与维护规程一、目的使 Qubit? 3.0 荧光定量仪能够正确和正常的使用,保证系统的正常运行的准确性和精密度,以获得准确可靠的检验结果。

二、适用范围可用于定量的DNA,RNA, micro RNA 和蛋白质 ,使用高度敏感和准确的荧光技术量子位定量分析三、工作原理Qubit? 荧光定量仪采用荧光染料与特异性的靶分子结合。

这些荧光染料只有与这些靶分子结合时才会发射荧光信号,即使在浓度很低时。

Qubit?3.0荧光定量仪比传统的紫外吸光法更加准确。

以往的紫光吸光法不具选择性,测量260nm所有分子的吸光值——包含DNA,RNA,蛋白质,游离核苷酸或多余的盐离子。

此外,紫外分光光度计的灵敏度不足,无法完成低浓度 DNA和 RNA的精确定量。

使用Qubit? 荧光定量仪,将大大提升准确性。

因为Qubit? 分析试剂盒里的荧光染料只与样品中的特异分子结合——DNA,RNA或蛋白,避免不准确测量带来的重复工作四、职责实验室负责该系统的日常维护保养,包括每周保养,以及需要时的保养工作。

1.保证仪器设备在计量有效期内使用,并配合完成计量相关工作。

2.负责仪器设备的正确使用、妥善保管和精心维护。

3.负责仪器设备的日常保养、定期校准。

五、仪器特点1.快速和高度精确的定量的DNA , RNA 和蛋白质样品少于 5 秒。

2.高水平的准确性只有 1 —— 20 μ L的样品,甚至用很稀的样品3.使用染料选择性的双链Dna、 RNA 或蛋白质样品中的污染物的影响降至最低。

4.大型、先进的彩色触摸屏为简单工作流导航的。

5.以图形方式显示达20 的数据点6.可以个性化仪器用户界面将显示只有常用的化验六、使用要求1.不要在阳光直射下操作仪器2.样品处理过程中需带无粉橡胶手套3.在室温使用的仪器 (22-28 oC)4.测量之前已经进行校准七、操作指南仪器外观USB 电缆接口样品室电源插口USB 驱动器端口触摸屏7.1 仪器开启和关闭1.该仪器在平坦的地方,水平 ,干燥的表面2.将提供的电源线的一端插入Qubit?3.0 荧光计3.电源线另一端附加适当的插头适配器的,插在合适的电源上4.仪器自动开启,首先显示闪屏 ,然后主屏幕5.要关闭 Qubit? 3.0 荧光计,直接拔下电源7.2 仪器开机后,主屏幕自动显示,可以在屏幕上选择以下功能:1.选择一个定量测定: dsDNA, RNA, oligo (ssDNA), 蛋白质 ,或离子球2.选择荧光计模式3.访问以前保存的数据4.系统设置7.3 屏幕设置( Instrumentsettings)1.睡眠模式2.亮度设置3.日期时间设置4.恢复设置5.语言设置7.3.1 设置睡眠模式:a.系统默认为 10 分钟进入睡眠模式,如要调整该项,在屏幕上点击“ Sleep mode”b.点击文本框中得数字,然后更改,仪器设置范围为1~60 分钟c.设置好后点击保存返回设置界面7.3.2 设置亮度a.屏幕上点击“Brightness”b.移动滑块按钮向上或向下调整显示器的亮度c.设置好后点击保存返回设置界面7.3.3 设置时间日期a.屏幕上点击“Date/Time ”b.选着日期时间格式然后进入下一步c.点击相应的文本框进行设置d.设置完成后点击保存返回设置界面7.3.4 恢复设置:恢复出厂设置,删除所有保存的数据,用户定义的仪器设置和定制的化验,该选项请慎重选择7.3.5 语言设置a.屏幕上点击“Language”b.选择相应的选项c.点击保存返回设置界面7.4 校准仪器工作原理是先使用标准浓度的试剂生成荧光值和浓度二维坐标轴,检测时测出溶液的荧光值,然后根据荧光值来换算浓度,所以进行测验时需要选择新校准或使用以前保存的校准(如该功能第一次使用或更换检测试剂盒就需重新校准)7.4.1 点选需要检测的项目,进入下一级目录7.4.2 点选试验,如第一次选择会直接提示进行校准,如以前进行过校准,则会提示使用以前的或新进行校准,这里选择进行校准7.4.3 出现下面界面,将试剂盒中用于校准的标准品1#放入样品室,点击“Read standard ”,大约 3 秒,读取完成进入到下一步,放入标准品2#,点击“ Read standard”(蛋白质校准还需放入标准品3#)。

消毒机维护工作处理流程

消毒机维护工作处理流程

消毒机维护工作处理流程英文回答:Standard Operating Procedure for Disinfection Machine Maintenance.Purpose:The purpose of this standard operating procedure (SOP) is to provide a detailed process for the maintenance of disinfection machines to ensure their optimal performance and adherence to safety standards.Scope:This SOP applies to all personnel responsible for the maintenance of disinfection machines within the organization.Responsibilities:Maintenance technicians.Supervisors.Managers.Materials:Disinfection machine maintenance kit.Safety gear (gloves, mask, safety glasses)。

Cleaning solutions.Lubricants.Spare parts (if required)。

Procedure:1. Preparation:Gather necessary materials and safety gear.Isolate the disinfection machine from power sources.Clear the area around the machine for proper access.2. Inspection:Visually inspect the exterior of the machine for any damage or leaks.Check for loose or missing components.Examine the electrical connections for any signs of damage or fraying.3. Cleaning:Use a damp cloth and cleaning solution to clean the exterior surfaces of the machine.Disassemble the removable parts, such as nozzles and reservoirs, and clean them thoroughly with the cleaning solution.Allow the cleaned components to dry completely before reassembly.4. Lubrication:Apply lubricant to all moving parts, such as hinges, bearings, and gears, as per the manufacturer's instructions.Use the appropriate lubricant for each specific component.5. Filter Replacement:Inspect the filters and replace them if necessary.Refer to the manufacturer's guidelines for the recommended filter replacement frequency.6. Nozzles Inspection and Cleaning:Check the nozzles for any blockage or damage.Use a soft brush or compressed air to clean the nozzles and remove any debris.7. Electrical Inspection:Inspect the electrical connections for any loose wires or damaged insulation.Tighten any loose connections and repair or replace damaged insulation as needed.8. Calibration:Calibrate the disinfection machine according to the manufacturer's instructions.Use a test solution and follow the calibration procedures to ensure accurate and reliable operation.9. Reassembly:Reassemble the machine, ensuring that all components are securely fitted.Tighten any bolts or screws to prevent loosening during operation.10. Testing:Conduct a test run of the disinfection machine to verify its functionality.Observe the machine for any leaks, unusual noises, or other irregularities.11. Documentation:Record the maintenance activities performed and any observations made in a maintenance log.Note any spare parts used or repairs made.中文回答:消毒机维护工作处理流程。

Qubit40使用与维护SOP

Qubit40使用与维护SOP

Qubit? 4.0荧光计的使用与维护标准操作规程1.目的检测核酸建库效果,作为核酸建库的质量控制措施。

2.适用范围适用于检测核酸和蛋白的含量。

3.职能用于建库及DNB制备相关的实验员检测核酸或蛋白质。

4.内容4.1仪器型号ThermoFish Qubit? 4.0 Fluorometer4.2检测原理:Qubit? 4荧光仪定量检测核酸,其原理是基于特定荧光染料与所检测的核酸靶分子结合。

这些荧光染料只有与这些靶分子结合时才会发射荧光信号,即使在浓度很低时。

Qubit? 4.0荧光定量仪比传统的紫外吸光法更加准确。

紫外吸光法不具有选择性,测量260nm所有分子的吸光值,包含DNA、RNA、蛋白质、游离核苷酸或多余的盐离子。

此外,紫外分光光度计的灵敏度不足,无法完成低浓度DNA和RNA的精确定量。

使用 Qubit? 4荧光定量仪,将大大提升准确性。

因为Qubit? 4分析试剂盒里的荧光染料只与样品中的特异分子结合——DNA、RNA或蛋白,避免不准确测量带来的重复工作。

4.3检测操作:4.3.1使用要求:(1)请勿在阳光直射下操作仪器。

(2)处理样品时戴无粉手套。

(3)仅在室温(22-28 ℃)下使用仪器。

(4)在室温下保存所有的试剂盒,仅在Qubit? 4荧光计测定荧光时才插入分析管。

(5)在测量之前请勿用手握住分析管。

(6)测量前仪器已经用适当的校准品校准过。

(7)将样品或标准品与工作液混合之后,让Qubit?DNA和RNA分析管孵育2min。

(8)将样品或标准品与工作液混合之后,让Qubit?蛋白分析管孵育15min。

(9)如果要多次读取同一支管,请从仪器中取出分析管,让其平衡至室温30s,再进行下一次读取。

(10)不建议多次读取RNA样本。

4.3.2配置工作液:(1)在主界面上选择试剂计算器计算出配置 Qubit?工作液所需的染料和缓冲液的量。

(2)输入将在Qubit? 4荧光仪上运行的样本数和标准品数量。

自动生化分析仪应用中校准、维护和 SOP 文件准备要求

自动生化分析仪应用中校准、维护和 SOP 文件准备要求

自动生化分析仪应用中校准、维护和SOP 文件准备要求天津医科大学第二医院李忠信天津市儿童医院沈永明管卫这是经典的检定报告,检定合格可以投入使用。

某些仪器也报告过他们的性能指标,但没有提供检定方法。

目前国家行政管理部门尚没有开展这方面的检定,国外大公司在中国的机构也不提供这方面的服务。

药品食品监督管理局正在着手制定有关的技术标准。

( 二) 用户对检测系统精密度和准确度的核实实验室期望核实检测系统(为完成一个检测项目所涉及的仪器、试剂、标准品、校正品、质控品、操作程序和维护程序等的组合称为检测系统)已被认可的性能所进行的评估为核实(Demonstration )实验。

1. 使用校正物对检测系统进行校准一个检测系统在质控在控的条件下,检测校正物的值,若与校正物给定值的相对偏倚在± 2% 之内。

表明所测结果准确并具有溯源性。

在初始校准未通过或质控未通过或更换试剂时应执行再校准。

仪器在更换光源灯,反应槽清洗,更换比色杯,调整项目参数等维护保养程序之后亦应执行再校准。

检测系统设有校准程序。

各项目在各系统中的校准周期不尽相同,应按各自配套的试剂盒说明书进行。

项目确定后将其记录于“日校准记录表”中。

校准结果的确认依据“试剂说明书”中的判断指标。

若超出允许范围,应查找原因或与厂家联系。

2. 精密度核实(1 )实验设计-天数和重复次数以s 批内和s 总各表示为厂商提供的批内和总精密度水平。

以s 批内和s 总各表示为实验室核实实验的批内和总精密度水平。

在进行以下标准差大小比较时,厂商的s 批内和s 总对应的各个均值(批内均值和总均值)大小应相同或极其相近,只有在这样的条件下,才可以对标准差进行大小的比较。

如果厂商按照美国的临床实验室标准委员会的EP5 文件进行的批内和总精密度估计时,它们的均值采用总均值表示。

在这样的情况下,进行标准差大小比较时可以直接使用变异系数(CV )作比较。

①如果s 批内<2/3 s 总,实验至少要做 5 天,每批每个水平作 4 次重复检测。

超声波清洗器操作,维护sop

超声波清洗器操作,维护sop

1. 介绍超声波清洗器是利用超声波发生器所发出的高频振荡讯号,通过换能器转换成高频机械振荡而传播到介质—清洗溶液中,超声波在清洗液中疏密相间地向前辐射,使液体流动而产生数以万计的微小气泡,这些气泡在超声波纵向传播成的负压区形成、生长,而在正压区迅速弥合,在这种被称之为“空化”效应的过程中气泡闭合可形成超过1000个气压的瞬间高压,连续不断产生的高压就像一连串小“爆炸”不断地冲击物件表面,使物件表面及缝隙中的污垢迅速剥落,从而达到物件表面净化的目的。

2. 职责操作,管理人员必须严格按照本文件内容要求执行。

3. 定义本规程适用于KQ2000E型超声波清洗器4. 操作规程4.1将需要清洗的物件放入清洗网架中,把清洗网架放入清洗槽内,绝对不能将物件直接放入清洗槽内,以免影响清洗效果,同时会损坏仪器。

4.2按比例放入清洗剂。

注入水或溶液,水位不得低于60mm,最高不得高于80mm。

4.3 将超声波清洗器接入220V/50Hz电源(注意接地)。

4.4 按下ON电源开关,绿色指示灯亮,说明电源正常,可以使用。

4.5 用温度控制器调节好清洗温度,温度指示灯会亮,说明正在加热。

当温度达到要求时,温度指示灯熄灭,加热停止。

4.6 当加热温度达到要求时,可以开启清洗定时器,根据清洗要求设置定时器的工作时间。

一般清洗在10~20分钟,也可调在常通位置,对于特别难洗的物件可适当延长清洗时间。

4.7 清洗完毕后,从清洗槽内取出网架,用温水喷洗或在另一只无溶剂的温水清洗槽中漂洗。

4.8 漂洗完毕后进行热风干燥、存放、组装。

5. 安全事项5.1 使用本仪器时,必须有接地装置。

5.2 在清洗中物件放入网架中,同时放入清洗槽内,切勿将物品直接放入清洗槽底部,否则会损坏仪器。

5.3 使用适当的清洗化学试剂,必须与不锈钢制造的超声波清洗槽相适应。

不得使用强酸、强碱等化学试剂。

5.4 应避免水溶液或其它各种有腐蚀性液体侵入清洗器内部。

5.5 在清洗槽内无水溶液的情况下,不应开机工作,一面烧坏清洗器。

全自动样品处理器安全操作及保养规程

全自动样品处理器安全操作及保养规程

全自动样品处理器安全操作及保养规程前言全自动样品处理器是一种非常重要的实验室设备,可以大大提高实验室的工作效率,但是在使用时需要非常注意安全操作和定期保养。

本文将详细介绍全自动样品处理器的安全操作和保养规程,以确保实验室人员的安全和设备的正常运行。

安全操作规程1.工作前的准备:在进行实验时,需要提前检查设备和试剂的状态,保证设备和试剂的质量处于优良状态,电源、供气系统、制冷设备、操作面板等设备功能良好,操作步骤、参数等设定正确。

2.穿戴个人防护装备:在操作全自动样品处理器时,需要穿戴相应的个人防护装备,如实验手套、口罩、防护镜、实验服等,以保护自己的身体和呼吸系统。

3.正确操作设备:在进行实验时,需要按照设备的正确操作顺序,使用正确的试剂和设备,避免出现偏差和误操作,同时使用设备时也要注意接入平衡气体,以免产生危险的气体排放。

4.保持通风:在进行实验时需要保持通风,同时打开操作室内的通风设备,以保证室内空气的清新,避免操作时产生的有毒气体对工作人员产生危害。

5.定期检查设备:需要定期检查设备的运动状态、机械零部件的磨损和松动、控制系统的正常运行等,确保全自动样品处理器的完好性,这样可以让设备更加稳定地运行。

6.封存废弃物:在进行实验时,需要将产生的危险废弃物放置在专门的载体中,并封存好,以便于专业人员进行处理,避免废弃物对环境和人体产生危害。

保养规程1.设备日常保养:在设备的日常使用中,需要进行相应的保养工作,如清理设备、消毒设备、定期更换关键部件等,这样可以保持设备的长期正常运行,延长设备的使用寿命。

2.仪器检测:需要定期进行仪器检测,以评估设备的运行状态和性能,这样可以及早发现设备出现的问题,并及时进行维护,防止设备出现严重的问题。

3.试剂管理:需要对试剂进行专业管理,避免试剂的混淆、污染和过期等问题,同时对试剂进行标记,以便于识别和使用。

4.及时维修:如果设备出现了故障或问题,需要及时进行维修和处理,以避免故障加重或者影响设备的正常运行。

Waters Quattro Premier 液质联用仪的使用 与维护保养标准操作规程(SOP)

Waters Quattro Premier液质联用仪的使用与维护保养标准操作规程(SOP)2010-11-09目录1.简述 (1)1.1样品入口 (2)1.2真空系统 (2)1.3数据系统 (2)2.环境要求 (3)3.仪器使用 (3)3.1开机步骤 (3)3.2质谱调谐窗口各项参数设定 (5)3.3创建项目 (6)3.4质量校正 (7)3.5调谐(Tuning) (14)3.6信号采集 (15)3.7 2695型液相色谱(Inlet Method) (19)3.8创建质谱方法 (25)3.9创建样品列表 (27)3.10 运行样品列表( Sample List) (30)3.11 QuanLynx来编辑定量方法 (39)3.12 用QuanLynx进行批处理 (44)3.13 查看QuanLynx定量结果 (47)3.14关机 (52)4.注意事项 (53)5.维护与保养 (54)1. 简述Quattro Premier (Figure 1-1 )是一台高效串联四极杆质谱仪,用于常规LC/MS/MS分析。

Figure 1-1 Quattro Premier Mass Spectrometer样品的离子化发生在处于大气压状态下的离子源中。

离子通过取样锥孔进入真空系统,然后穿过源travelling-wave(T-Wave TM)进入第一级四极杆,在此按照质/荷比(m/z)过滤(Figure 1-2 )。

按照质量数分开的离子进入T-Wave碰撞室,进一步发生碰撞诱导裂解(CID)或者直接进入第二级四极杆。

碎片离子通过第二级四极杆进行质量分析。

离子最后经过倍增电极,phosphor和光电倍增器检测系统检测。

输出信号被放大,数字化后传给信号系统。

Figure 1-2 Quattro Premier Schematic1.1 样品入口该仪器可以与下列两种进样方式组合:a. HPLC系统,可以提供LC流出组分的分子量信息,进行目标分析和定量。

Qubit4.0使用与维护SOP

Qubit™4.0荧光计的使用与维护标准操作规程1.目的检测核酸建库效果,作为核酸建库的质量控制措施。

2.适用范围适用于检测核酸和蛋白的含量。

3.职能用于建库及DNB制备相关的实验员检测核酸或蛋白质。

4.内容4.1仪器型号ThermoFish Qubit™ 4.0 Fluorometer4.2检测原理:Qubit™4荧光仪定量检测核酸,其原理是基于特定荧光染料与所检测的核酸靶分子结合。

这些荧光染料只有与这些靶分子结合时才会发射荧光信号,即使在浓度很低时。

Qubit™4.0荧光定量仪比传统的紫外吸光法更加准确。

紫外吸光法不具有选择性,测量260nm所有分子的吸光值,包含DNA、RNA、蛋白质、游离核苷酸或多余的盐离子。

此外,紫外分光光度计的灵敏度不足,无法完成低浓度DNA和RNA的精确定量。

使用Qubit™4荧光定量仪,将大大提升准确性。

因为Qubit™4分析试剂盒里的荧光染料只与样品中的特异分子结合——DNA、RNA或蛋白,避免不准确测量带来的重复工作。

4.3检测操作:4.3.1使用要求:(1)请勿在阳光直射下操作仪器。

(2)处理样品时戴无粉手套。

(3)仅在室温(22-28 ℃)下使用仪器。

(4)在室温下保存所有的试剂盒,仅在Qubit™4荧光计测定荧光时才插入分析管。

(5)在测量之前请勿用手握住分析管。

(6)测量前仪器已经用适当的校准品校准过。

(7)将样品或标准品与工作液混合之后,让Qubit™DNA和RNA分析管孵育2min。

(8)将样品或标准品与工作液混合之后,让Qubit™蛋白分析管孵育15min。

(9)如果要多次读取同一支管,请从仪器中取出分析管,让其平衡至室温30s,再进行下一次读取。

(10)不建议多次读取RNA样本。

4.3.2配置工作液:(1)在主界面上选择试剂计算器计算出配置Qubit™工作液所需的染料和缓冲液的量。

(2)输入将在Qubit™4荧光仪上运行的样本数和标准品数量。

可选:如果您想在计算的总容量中包含一个额外的管,请按下“超额”复选框。

SOP-CS-001 衡器使用、维护、校正操作规程

19衡器使用、维护、校正操作规程Documentation No./文件编号:SOP-CS -001 Version/版本:01Effective Date/执行日期:2019/08/08 Expiry Date/有效期:2022/08/07Initiation Department/文件发起部门:工程部Distributing Numbers/分发数量:7份Distributing Dept./收文单位:QA、分析部、生产部、仓管处、安全部、工程部、QCAuthor起草/日期:Checker审阅/日期:Reviewer审核/日期:Approval批准/日期:1.目的建立衡器的使用、维护、校正操作规程,确保衡器的正确使用与称量准确,延长衡器使用寿命。

2.范围适用于各部门衡器的使用与维护、校正操作。

3.职责3.1验证计量处负责本规程的制定与管理。

3.2使用部门依本规程进行衡器的使用、日常校正与维护。

3.3验证计量处负责按照本规程进行校正、修理工作。

4.定义4.1最大称量(Max):该秤可以进行的称重最大值,电子秤背后一般会注明最大称量。

4.2最小称量(Min):该秤能够进行称重的最小值,电子秤背后一般会注明最小称量。

4.3分度值(e):台秤在称重过程中能显示变化的最小值。

4.4四角误差:四个角相对中间点称重值的偏差。

5.正文5.1台秤使用方法5.1.1将台秤放置于坚实、平整的地面上,四脚要切实着地,台秤保持水平。

5.1.2清除承重板上杂物,将游铊移至零位处。

5.1.3用手指按在标尺上面零位处,再将手指轻轻移至标尺末梢,然后放开手指,看标尺的移动量是否有全限的3/4。

5.1.4调整空秤平衡。

5.1.5将被称物轻轻放置于承重板的中央部位。

5.1.6放上适量的增铊,移动游铊至标尺摆动于平衡位置处,读出称重结果。

5.1.7称重结束后,取下被称物,移动游铊放置远处。

5.2.台秤的使用注意事项5.2.1台秤适用于对称重结果要求不是很高的非关键物料。

精密级数字式酸度计使用及维护标准操作规程

保健食品GMP文件1.目的本标准规定了数字式酸度计的使用方法。

2.适用范围本标准适用于数字式酸度计。

3.职责QC室主任:负责监督本规定的执行。

操作人员:严格按照本规程对数字式酸度计进行使用和维护保养。

4.操作方法4.1仪器在电极未连接到仪器之前,输入端必须连接短路插头,使仪器输入端短路,以保护前置转换器。

4.2首先把电极杆插入右侧孔内旋紧,然后把塑料电极夹对准装在电极杆上。

拔去电极保护套(电极下端的玻璃球泡较薄:当心碰碎),把电极固定在电极上。

然后旋去输入端短路插头,旋上电极插头。

短路插和电极保护套在不用时应妥善保管。

4.3接通电源开关,置选择旋扭于“PH”或“MV”档,使仪器预热10分钟,然后按下列方式进行标定。

4.3.1仪器的标定。

仪器在未测被测溶液时先要标定。

在连续测量时,每天标定1-2次已能满足要求。

4.3.2仪器根据测量精度要求,可选一点标定法和二点标定法,常规测量可采用一点标定法,精确测量时采用二点标定法。

4.3.2.1仪器一点标定可按下列步骤进行:4.3.2.1.1旋上电极,选择旋扭置于“PH”档,“斜率调节器”须时针旋到底。

4.3.2.1.2先用蒸馏水清洗电极,用滤纸擦干电极,然后把电极插入已知PH值的标准缓冲溶液中(如PH=4),调节温度调节器使所指示的温度与溶液温度相同,并摇动试杯使溶液达到平衡。

4.3.2.1.3旋转“定位”调节器使仪器的指示值为该缓冲溶液所在温度相应的PH值。

4.3.2.1.4仪器的一点标定已告完成。

经标定的仪器的定位电位器不应再有变动。

4.3.2.2仪器两点标定法按下列步骤进行:4.3.2.2.1用二种已知PH值的缓冲溶液(如PH=6.86,PH=4,或PH=9.18)。

4.3.2.2.2斜率调节器顺时针旋到底,旋转“温度”调节器使所指的温度与溶液温度相同,并摇动试杯使溶液均匀。

4.3.2.2.3把电极插入已知PH=6.86的缓冲溶液,旋转“定位”调节器,使仪器的指示值为该缓冲溶液所在温度相应的PH值(PH=6.86)。

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Qubit? 4.0荧光计的使用与维护标准操作规程
1.目的
检测核酸建库效果,作为核酸建库的质量控制措施。

2.适用范围
适用于检测核酸和蛋白的含量。

3.职能
用于建库及DNB制备相关的实验员检测核酸或蛋白质。

4.内容
4.1仪器型号
ThermoFish Qubit? 4.0 Fluorometer
4.2检测原理:
Qubit? 4荧光仪定量检测核酸,其原理是基于特定荧光染料与所检测的核酸靶分子结合。

这些荧光染料只有与这些靶分子结合时才会发射荧光信号,即使在浓度很低时。

Qubit? 4.0荧光定量仪比传统的紫外吸光法更加准确。

紫外吸光法不具有选择性,测量260nm所有分子的吸光值,包含DNA、RNA、蛋白质、游离核苷酸或多余的盐离子。

此外,紫外分光光度计的灵敏度不足,无法完成低浓度DNA和RNA的精确定量。

使用 Qubit? 4荧光定量仪,将大大提升准确性。

因为Qubit? 4分析试剂盒里的荧光染料只与样品中
的特异分子结合——DNA、RNA或蛋白,避免不准确测量带来的重复工作。

4.3检测操作:
4.3.1使用要求:
(1)请勿在阳光直射下操作仪器。

(2)处理样品时戴无粉手套。

(3)仅在室温(22-28 ℃)下使用仪器。

(4)在室温下保存所有的试剂盒,仅在Qubit? 4荧光计测定荧光时才插入分析管。

(5)在测量之前请勿用手握住分析管。

(6)测量前仪器已经用适当的校准品校准过。

(7)将样品或标准品与工作液混合之后,让Qubit?DNA和RNA分析管孵育2min。

(8)将样品或标准品与工作液混合之后,让Qubit?蛋白分析管孵育15min。

(9)如果要多次读取同一支管,请从仪器中取出分析管,让其平衡至室温30s,再进行下一次读取。

(10)不建议多次读取RNA样本。

4.3.2配置工作液:
(1)在主界面上选择试剂计算器计算出配置 Qubit?工作液所需的染料和缓冲液的量。

(2)输入将在Qubit? 4荧光仪上运行的样本数和标准品数量。

可选:如果您想在计算的总容量中包含一个额外的管,请按下“超额”复选框。

(3)按Enter计算配置Qubit?工作液所需的Qubit?染料和缓冲液的量。

注意:在此屏幕上可以更改计划检测的管数或超额选择。

(4)按Done返回主界面运行Qubit?检测。

4.3.3标准品校准:
(1)从试剂盒里取出标准品standard1,2,在主界面选择要读取新标准的检测类型。

要进入可用于检测的第二页,请将屏幕向右滑动。

要返回第一页,将屏幕向左滑动。

(2)选择所需的检测方法
(3)点选试验,如果第一次选择会直接提示进行校准,如以前进行过校准,则会提示使用以前的或新进行校准。

若要将先前的校正应用于样本读数,请按下“运行样本”。

这里选择进行校准。

(4)出现下面界面,将试剂盒中用于校准的标准品1#放入样品室,点击“Read standard”,大约3秒,读取完成进入到下一步,放入标准品2#,点击“Read standard”(蛋白质校准还需放入标准品3#)。

(5)在读取标准品2#后(或读取标准品3#后),校准就完成了。

如果校
准成功,软件显示读取标准的屏幕,显示荧光与浓度图。

(6)荧光与浓度图:标准数据点被一条线连接。

(圆圈表示正确的标准)如果校准失败,会显示“校准错误”,需重新进行校准。

(7)如果用于RNA IQ检测:检测成功,软件将显示准备好样本信息。

如果校准失败,会显示“校准错误”。

(8)如果收到“校准错误”消息,需要重新运行校准。

在弹出错误的屏幕中,按“OK”。

查看Read标准屏幕。

如果希望重新运行标准或运行新的标准,按Read标准,然后重复校准过程。

(9)检测RNA IQ,可以根据校准错误重新运行特定的校准。

错误消息提供了如何纠正校准错误的指导。

4.3.4样品检测
(1)将品与反应液混合(混合方案具体见试剂盒)孵化一段时间(DNA 和RNA为2min,蛋白质需要15min)。

(2)在Read standard(用于Qubit?定量分析)或Ready for samples 界面,按Run samples。

(3)在样本量屏幕中,选择用于Qubit?定量分析或 Qubit? RNA IQ 检测的样本体积和单位。

在方向盘上按+或-按钮选择检测管中样本体积
(1-20ul),从下拉菜单中选择输出样本浓度的单位。

在RNA IQ检测中,没有相关的单位,只选样本检测体积。

(4)将样品管插入到样品室,关上盖子,然后点击读取管。

定量分析大约需要3秒,质量分析需要5秒。

(5)在屏幕上就会显示所检测的浓度。

(6)多个样品检测:
a. 相同体积和浓度单位:只需更换样本室中样本管,点击读取。

b. 不同体积和浓度单位,更改体积和浓度单位重复上述步骤。

4.3.5数据读取:
(1)如果结果在检测范围内,则显示浓度值。

顶部的数值(大体字)是原始浓度。

底部的数值为稀释后浓度(插入Qubit? 4荧光计的样品管中
样品浓度)。

检测浓度存在一定范围,如超出检测范围会显示“超出范围”。

(2)可以点击屏幕上左右箭头进入体积和浓度设置界面和荧光与浓度图
a. 空心圆表示进行校准的标准品
b. 大的灰色圆圈代表最新样品
c. 蓝色圆圈代表在检测范围内
d. 黄色圆圈代表在拓展范围内
e. 红色圆圈代表在仪器检测范围外
单个样本多个样本超出检测高限超出检测低限
(3)数据管理
对保存的数据,可以进行以下操作:
a.针对每个样本查看详细的数据:从浓度检测界面、荧光与浓度图界面、主屏幕点击“Data,出现数据屏幕,点击想查看的数据集。

b.重命名数据文件:如需更改数据显示名称,在详细数据界面点击数据名,
在弹出的界面输入想要更改的即可。

c.可以保存数据,导出到USB存储器或电脑中:将USB存储器插入Qubit?
4 USB接口上,如果想导出的是数据集,则勾选该数据集;如需导出的是单个的数据,则点击数据集进入再勾选需要导出的数据;点击导出数据,数据就会以CSV格式保存到USB存储器。

若将数据直接导入到计算机,则使用USB电缆将Qubit?仪器连接到计算机,计算机作为外部设备访问Qubit?荧光剂,使用操作系统的普通文件浏览菜单访问保存在Qubit?仪器上的文件,把需要的文件复制到计算机上。

d.删除数据文件:在浓度、图形、RNA IQ结果或主屏幕上,点击数据。

在导出数据屏幕上,选中要删除数据左侧的选择框。

按下删除出现一个警告窗口,按Delete可永久删除选中的数据或数据集。

按“取消”可返回到先前的页面,而不删除任何数据。

4.4仪器维护
4.4.1 Qubit? 4荧光计不需要定期维护,不要进行任何维修或服务以免损坏仪器。

为解决仪器故障,请联系技术支持。

4.4.2不要将Qubit? 4荧光计暴露在阳光直射下。

4.4.3 定期清洗:干净的Qubit? 4荧光计用湿布擦拭表面。

清洁触摸屏,断开电源线,用沾有LCD(液晶显示)清洁剂的软布轻轻擦拭来清洁触摸屏。

注:用力过大会损坏触摸屏;立即把屏幕擦干;不要使用研磨性清洁剂或材料避免划伤触摸屏。

4.4.4 消毒仪器:断开荧光计的电源电缆,包括触摸屏,用软布轻蘸 70%乙醇,70%异丙醇或 10%的漂白剂(0.6%次氯酸钠)进行清洁。

注:仪器自带的布不建议与乙醇或异丙醇一起使用;确保清洁液不进入电源按钮、电源入口、样本槽、或USB驱动器端口;切勿将任何液体直接倾倒或喷在仪器上,以免仪器通电时触电。

(专业素材和资料部分来自网络,供参考。

可复制、编制,期待您的好评与关注)。

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