二苯乙烯苷的含量测定研究
二苯乙烯苷的含量测定研究
发表时间：2018-06-11T11:38:13.543Z 来源：《中国误诊学杂志》2018年第9期作者：杨金颖1 纪京辉2 [导读] 测定不同批次首乌藤、制何首乌及XX合剂中二苯乙烯苷的含量。
杨金颖1 纪京辉2
1.天津市武清区中医医院制剂室天津 301700；
2.天津市武清区飞鹰集团有限公司天津 301700；
摘要：目的：测定不同批次首乌藤、制何首乌及XX合剂中二苯乙烯苷的含量。
方法：采用高效液相色谱法对不同批次的首乌藤、制何首乌、XX合剂进行含量测定。
结果：不同批次的首乌藤、制何首乌、XX合剂的含量测定结果有差异。
结论：不同产地不同批次的首乌藤和制何首乌质量有差异，不同批次的XX合剂亦有差异。
关键词：二苯乙烯苷；含量测定；研究
[Abstract] Objective：To determinate different batches of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture. Method：The contents of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture were determined by HPLC. Result：The determination results of different batches of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture are different. Conclusion：There are differences in the quality of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture. [Key words] stilbene glucoside；content determination；study；
2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（C20H22O9），简称二苯乙烯苷，属多羟基酚类化合物，是蓼科植物何首乌的特有成分。
研究表明[1-2]，二苯乙烯苷具有多种生理活性和药用价值，主要表现在降血脂及抗动脉粥样硬化、抗肿瘤、神经保护、抗衰老、抗氧化清除自由基、保护肝脏等方面。
二苯乙烯苷以糖苷的形式存在，固态稳定性较好，其具有良好的水溶性，但光照、温度、金属离子对二苯乙烯苷的稳定性影响较大[3]。
何首乌各器官中块根的二苯乙烯苷含量最高，其次为老根和老茎[1]。
本实验对不同批次的首乌藤、制何首乌、XX合剂进行含量测定，以期确定饮片的最佳供货单位，并证实饮片的质量会直接影响到制剂的质量，为今后制剂室采购饮片提供参考。
1.资料与方法
1.1.仪器与试药
1.1.1仪器：高效液相色谱仪：岛津LC-2010CHT高效液相色谱仪，分析柱：WondaSil C18（250mm×4.6mm，5µm）；BT25S型电子天平（十万分之一），BSA224S型电子天平（万分之一）。
1.1.2试药：二苯乙烯苷：110844-201411（93.2%）和110844-201512（91.0%），购自中国食品药品检定研究院。
首乌藤：（亳州市药材总公司中药公司，批号：140216），（亳州市利尔中药材饮片有限公司，批号：151201、160701、161201），（安徽益生源中药饮片科技有限公司，批号：160501）；制何首乌：（亳州市惠康中药饮片有限公司，批号：20140210），（安徽人民中药饮片有限公司，批号：151001、160301、160601），（亳州市利尔中药材饮片有限公司，批号：170302）；XX合剂（某院内制剂，批号：20150506、20150617、20150805、20151113、20160505、20160616、20160727、20160728、20161028、20161231、20170401、20170603、20170801、 20170929）。
甲醇、乙腈为色谱纯；乙醇为分析纯；水为娃哈哈纯净水。
1.2不同批次首乌藤、制何首乌、XX合剂中二苯乙烯苷的含量测定 1.
2.1色谱条件：①首乌藤中测定二苯乙烯苷色谱条件[4]：WondaSil C18色谱柱（250mm×4.6mm，5µm），检测波长为320nm，柱温40℃，流速：1.0 mL·min-1，流动相为乙腈：水（26：74）。
色谱图见图1。
②制何首乌中测定二苯乙烯苷色谱条件[4]：WondaSil C18色谱柱（250mm×4.6mm，5µm），检测波长为320nm，柱温40℃，流速：1.0 ml/min，流动相为乙腈：水（25：75）。
色谱图见图2。
③XX合剂中测定二苯乙烯苷色谱条件[5]：WondaSil C18色谱柱（250mm×4.6mm，5µm），检测波长为320 nm，柱温40℃，流速：1.0 mL/min，流动相为乙腈：水（20：80）。
色谱图见图3。
2.结果
2.1《中国药典》2015年版规定首乌藤中含二苯乙烯苷不得少于0.20%，制何首乌中含二苯乙烯苷不得少于0.70%，不同批次首乌藤和制何首乌的含量测定结果，如表1所示。
养肾补血颗粒中二苯乙烯苷的含量测定
性关 系， ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ９ ； 平均加样回收率为 ９ ７ ． １ ７ ％， Ｒ Ｓ Ｄ为 ２ ． ０ ７ ％（ ｎ ＝ ６ ） 。 结论： 该方法操作 简便 ， 准确 可靠 ， 可用于养 肾补血颗粒 中二
苯 乙烯苷 的含 量 测 定 。 关键词 ： 养 肾补血颗 粒 二苯 乙烯苷 高效液相 色谱
指标。 图 ３ 供试品溶液 Ｈ ＰＬ Ｃ图 １ 仪 器 及 试 剂 ． ７ 线性关 系考察 ： 分别精密吸取浓度为 ４ ． ５ ￣ ｇ ／ ｍ ！ 的对照 品溶 Ｗａ ｔ ｅ ｒ ｓ ５ １ ５高效液相 色谱 仪 ， Ｗａ ｔ ｅ ｒ ｓ ２ ４ ８ ７双波长紫外检测 ２ … ３ ５ ７ 、 ９ ｌ ，以及浓度 为 ０ ． １ ５ ６ ｍ ｇ ／ ｍ ｌ 的对 照品溶液 １ ． ５ 、 器， Ｈ Ｎ１ ０ ０ ３超声波清洗机 ； ２ ， ３ ， ５ ， ４ ’ 一 四羟基二苯 乙烯 一 ２ — ０ 一 液 １ ． ０ ｗ ｌ ， 注入 液相色谱仪 ， 测定 峰面积 ， 以对照 品进样 量 （ ｎ ｇ ） 为 Ｂ — Ｄ 一 葡萄糖 苷对照 品（ 中国药 品生物制 品检定所 提供 ， 含量 ２
以峰面积为纵坐标 ， ｙ ＝ ６ ７ ６ ２ ． ５ Ｘ 一 ２ ０ ０ ． １ ， ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ， 线性范 测定用 ， 批号 ０ ８ ４ ４ — ２ ０ ０ ０ ３ ） ， 养肾补血颗粒 （ 本公 司提供 ） ； 乙腈 横坐标 ， 围１ ５ ． ６ － ３ １ ２ ． ０ ｎ ｇ 。 为色谱纯 ， 水为超纯水。 ２ ． ８ 精 密度试验 ：精密吸取 同一对照 品溶液 ５ ｌ ，重复进样 ５ ２方 法 与 结果 Ｒ Ｓ Ｄ为 １ ． ３ １ ％。 ２ ． １ 色谱条件 ：以十八烷基硅烷键 合硅胶 为填充剂 ，乙腈一 水 次 ， ． ９重珊 ｆ 生试验 ： 取 同批号样 品 ５份 ， 依前法 制备 供试 品溶液 ， （ ２ ５ ： ７ ５ ）为流动相 ，柱温 ３ ０ ℃，流速为 １ ． ０ ｍ ｌ ／ ｍ ｉ ｎ ，检测波长 ２ 精密 吸取 １ ０ 进样 ， Ｒ Ｓ Ｄ为 １ ． ８ ６ ％。 ３ ２ ０ ｎ ｍ， 理论板数按二苯乙烯苷峰计算应不低 于 ３ ０ ０ ０ 。 ． １ ０回收率 试验 ： 取 已知含 量 的样 品 ６份（ 二苯 乙烯 苷含 量 ２ ． ２对照品溶液 的制备 ：精密称取 二苯乙烯苷对 照品适量 ， 加 ２ 甲醇制成 １ ５ ． ６ ￣ Ｅ ｍ ｌ 的溶液 ， 即得 ， 避光保存 。 为０ ． ８ ８ ｍ ｇ ／ 袋） ， 约Ｏ ． ５ ｇ ， 精 密称定 ， 分别精 密加 入对照 品溶 液 ｍ ｌ （ 二苯乙烯苷浓度为 Ｏ ． ０ ４ ５ ｍ ｇ ／ ｍ １ ） ， 照２ ． ４项制备供试 品溶 ２ ． ３供试 品溶液 的制备 ： 取 装量差异项下 的本 品， 研细 ， 取细 粉 ｌ 进样 １ ０ ， 计 算 回 收率 ， 结果 回收率 平 均值 为 ９ ７ ． １ ７ ％， 约１ ｇ ， 精密称定 ， 置锥形瓶中 ， 精密加入甲醇 ２ ５ ｍ ｌ ， 称定重量 ， 超 液 ， 声处理 （ 功率 ５ ０ Ｗ， 频率 ４ ０ ｋ Ｈｚ ） ３ ０分钟 ， 放冷 ， 再称定重量 ， 用 甲醇补足减失 的重量 ， 摇匀 ， 滤过 ， 取续滤液 ， 即得 ， 避光保存。 ２ ． ４阴性对照溶液 制备 ： 取制何首乌 的处 方药材 ， 按养 肾补 血 颗粒的制备 工艺制成阴性制 剂。再按“ ２ ． ３ ” 项 的方法制成供试 品溶液 ， 作为 阴性对照溶液 。 ２ ． ５检测波长的确定 ： 取对照品溶液 ， 在２ ０ ０ — ５ ０ ０ ｉ ｒ ｍ波 长处 扫 描， 结果二苯 乙烯苷在 ３ ２ ０ ｎ ｍ波长处有最大 吸收 。 ２ ． ６系统适用性试 验 ： 分别取对照 品溶 液 、 供试品溶液 和阴性 对照溶液注入液相色谱仪 ， 按 上述 色谱条件测定并记 录 ， 见 图
HPLC法测定何首乌中二苯乙烯苷的含量
［ ｙ ｗ ｒ ｓ Ｒａｉ ｏｙｏ ｉ ｈｆ ｒ ； ， ， ， ＂ｔｔ ｈｄｏｙｔｂ ｎ － － － ｇｕ ｏｉｅ Ｈ Ｌ ； ｓｓｍｅ ｔ Ｋｅ ｏ ｄ ］ ｄｘｐ ｌｇ ｎ ｍｕ ｉｏｉ ２ ３ ５ ４－ｅｒ ｙ ｒｘ ｓ ｌｅ ｅ Ｏ １ Ｄ— ｌｃｓ ； Ｐ Ｃ Ａｓｅｓ ｎ ｌ ａ ｉ ３ ｄ
ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｏ ｏ ｔｎ ｆ２ ３ ５ ４ －ｅｒ ｈ ｄ ｏ ｙｔ ｂ ｎ － １－ ｇｕ ｏ ｅｅｍｉａｉ ｆｃ ｎ ｅ ｔｏ ， ， ， ｔｔａ ｙ ｒ ｘ ｓｉ ｅ ｅ Ｏ－３ Ｄ－ ｌｃ － ｏ ｌ
ｓ ｄ ｎ ｒ ｄｉ ｏ ｙ ｏ ｕｌｉ ｏ ｉ ｉ ｅ ｉ ａ ｘ ｐ ｌ ｇ ｎｉｍ ｔｆ ｒ ｌ
ａ ｅ ｒ ｃ ｖ ｒ ｎ ｅ ｉｉ ｎ ｗｅ ｅ ９ ９ ％ ．Ｃｏ ｃ ｕ ｉ ｎ：Ｔｈ ｔ ｏ ｓ ｓｍｐ ｅ ｃ ｕ ａ ｅ ａ ｄ ｃ ｎ ｂ ｆ ｃ ｉ ｅ ｍｅ ｈ ｄ ｔ ｇ ｅ ｏ ｅ ｙ ａ ｄ ｒ ｃ ｓｏ ｒ ９。６ ｎ ｌ ｓｏ ｅ ｍｅ ｈ ｄ ｉ ｉ Ｌ ，ａ ｃ ｒ ｔ ， ｎ ａ ｅ ａ ｅ ｆ ｔ ｔ ｏ ｏ ｅ ｖ
［ 章编 号】１ ７ — ７ １２ １ ）６ ｃ一 ４ — ２ 文 ６ ４ ４ ２ （０ ０ ０ （ ）０ １ ０
ＨＰＬＣ ｔ ｒ ｉ ｔｏ ｏ ｔｌ ｎｅ ｇ ｕｃ ｓｄｅ ｉ ｌ ｇ ｎ Ｄｅ ｅ ｍ ｎａ ｉ ｎ ｆｓｉ ｂｅ ｌ ｏ ｉ ｎ ｐｏ ｙ ｏ ｕｍ ｕｌｉ ｏ ｕｍ ｏ ｔ ｎｔ ｍ ｔｆ ｒ ｌ ｃ ｎｅ
３ ５ｎ Ｔ ｅｆｏ ｒｔ ｓ １０ ｍｌ ｎ ａ ｄ ｔ ｅｃ ｌｍｎ ｔｍｐ ｒｔ ｒ ｓ３ ２ ｍ． ｈ ｗ ａｅ ｗａ ． ／ ｎ ｈ ｏｕ ｅ ｅａｕ ｅｗａ ０℃ ．Ｒｅ ｕｔ ：Ｔ ｅ ｍｅｈ ｄ ｐ ｏ ｅ ｏ ｂ ｉ ｅ ｒｉ ｌ ｍｉ ｓｌ ｓ ｈ ｔｏ ｒ ｖ ｄ ｔ ｅｌｎ ａ ｎ ｔｅ ｒｎ ｅ ａ ．０ — ．０ ｇｗｉ ｏｒｌｔｏ ｏ ｆ ｃｅ ｔｏ ．９ ． ｈ ｉｅ ｒｆｒ ｌ ｓ Ｙ＝１ ２９ Ｘ＋ ５６ ． ｅａ ｅ－ ｈ ａ ｇ ｔ０２ ０ ４０ ０ Ｉ ｔ ｃ ｒｅａｉｎ ｃ ｅ ｉｎ ｆ０９ ９ ７ Ｔ ｅ ｌ ａ ｏｍｕａ ｗａ ｘ ｈ ｉ ｎ ５ ．２ ４ ．７ Ｔｈ ｖ ｒ
野生与栽培何首乌中二苯乙烯苷含量测定
（ ．５ ０４ ｍ） 滤过 ， 即得供试溶液 。
２４ 标准 曲线绘制 ． 精 密吸取 对照 品溶 液 ０ ５２ ０ ３ ５ ． ，． ，． ， ５０ ６ ５ ８０，０ ｌ置于 １ｍｌ 量瓶 中 ， ． ，． ，． １ ｍ ， ０ 容 用稀 乙醇稀 释 至
为探索何 首乌 的栽培条件及栽培技术提供参考依据 。
（ ．９４ ／ １ 。 ０２ ６ ｍｇｍ ）
２ ３ 供试 品溶 液 的制 备 取何 首 乌粉 末 （ 四 号筛 ） ． 过 约
０２ ， 密称 定 ， ． ｇ精 置于烧 瓶 中 ， 密加 入稀 乙醇 ２ ｍ ， 密 精 ５ ｌ精 称定重量 ， 加热 回流 ３ ｍ ｎ 放 冷。再精 密称 定重 量 ， ０ ｉ， 用稀 乙醇 补 足 减 失 的 重 量 ， 匀 ， 上 清 液 用 微 孔 滤 膜 摇 取
１３ 对 照品 ． １４ 药 材 ．
制 品检定所 ， 批号为 ０ ４ －２ ０ ０ ） ８４ ００ ３ 。
栽培 品由贵州省 中药材种植指导 中心、 施秉县 中药材办公室提供 ， 生品 由作 者 自己采集 。何 首乌野 生 野 品和栽 培品各 ４种样品 ， 贵 阳中医学 院药学 系生药教 研 经 室杨锦纲 副教授鉴定 ， 为蓼科 植物何 首乌 （ ｏ ｇｎ ｍ ｍｕ Ｐ ｌ ｏｕ ｌ ｙ — ｔ ｏｕ ｈｎ ． 的干燥块根 。 ｌ ｆ ｉ ｒｍ Ｔ ｕ ｂ ） 本 实验所用 药材在 ４ ℃ 一 ０ ０ ５ ℃条件下干燥 ４ ， ｈ 粉碎过 ４号筛备用 。 ２ 实验方法与结果 Ｊ ２ １ 色谱条件与系统 ． 用十 八烷基硅 烷键合 硅胶 为填充 剂 ： 腈一 水 （ ５： ７ ）为 流 动 相 ＷＧ — Ｃ８ 谱 柱 乙 ２ ５ Ｙ 。色
１０ ．４ １０ ．８ ｘ＝１０ ． １ Ｒ Ｄ＝ ．５ （ ５ 。 １８ ５ ，１７ ２ ： １６ ０ ； Ｓ ０ ７ ％ ｎ： ）
何首乌不同部位二苯乙烯苷含量测定
２ １２ 对 照 品溶 液 的制备 ．．
Ａ ｉｎｌ０ ｇｅｔ１０高效 液 相 色 谱 仪 （ 国 Ａ ｉｎ 公 ｌ 美 ｇｌ ｔ ｅ
２ １３ 系统 适用 性试 验 ． ．
Байду номын сангаас
司 ） ｅ ｏ ｈｌ 转蒸 发仪 （ 国 Ｈ ｉｏ ｈ公 、Ｈ ｉ ｌ ｂ２旋 ｄｐ ａ 德 ｅ ｌ ｄｐ 司 ） Ｓ一１２０ 、Ｈ ０６ Ｄ超 声 波 清 洗 器 （ 津 市 恒 奥 科 天
技发 展有 限公 司 ） Ｚ 、Ｄ Ｆ一６ ５ Ｂ真 空 干 燥 箱 （ ００ 上
羟基二 苯 乙烯一一 — 一 萄 糖 苷 （ ， ， ，’ｅ ａ ２Ｏ ＢＤ 葡 ２ ３ ５ ４一 ｔ— ｔｒ
ｈ ｄｏ ｙｓｌｅ ｅ２Ｏ ＢＤ ｇ ｃｓ ｅ ｙ ｒｘ—ｔｂ ｎ 一一 — — —ｌ ｏｉ ，简 称 Ｔ Ｇ） 自 ｉ ｕ ｄ Ｓ
分析纯 ，甲醇 、乙腈 为色谱 纯 （ ｉ ｅ 公 司产 ） Ｆ ｈｒ ｓ ，
地上部分二苯 乙烯苷含量较低不能作为提 取二苯 乙烯苷 的原料开 发利用 。认 为在 中医临床 上将何 首乌与何 首乌 藤分别使用有一定依据 。 关键词 ：何首乌 ；不 同部位 ；二苯 乙烯苷 ；含量测定
中 图分 类 号 ：Ｒ ８ ２４ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ： １０ － ２ ２ （０ ８ 叭 —０ Ｏ — ３ ０ ０ ７３ ２０ ） ｏ７
基 金 项 目 ：国 家 自然 科 学 基 金 资 助 （ Ｏ ：３ ７０ １ ） Ｎ ０ ６ ３ ２
收稿 日期 ：２ｏ — １—２ ０７ ０ ２
HPLC法测定生发乌发口服液中二苯乙烯苷的含量
关键词
生发鸟发 口服液； 二苯 乙ｏ ７ １ ９ （ ２ ０ １ ２ ） ０ ｌ 一 ０ ０ ５ ７ — ０ ３
中图分类号 ： Ｒ ２ ８ ４ ． １
Ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｓ ｏ ｆ Ｓ ｔ ｉ ｌ ｂ ｅ ｎ ｅ Ｇ ｌ ｕ ｃ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ ｉ ｎ Ｓ ｈ ｅ ｎ ｇ ｆ ａ Ｗ ｕ ｆ ａ Ｏ ｒ ａ ｌ Ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ Ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ
Ａ ｇ ｏ ｏ ｄ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｉ ｔ ｙ ｆ ｏ ｒ ｓ ｔ ｉ ｌ ｂ ｅ ｎ ｅ ｇ ｌ ｙ ｃ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ ｗ ａ ｓ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｎ ｇ ｅ ｏ ｆ １ ． ５ ２ ￣ ７ ５ ． ７ ６ ｇ ／ ｈ ｄ ， ｒ ＝ Ｏ ． ９ ９ ９ ９ ， ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｙ ｆ ｏ ｉ ｔ ｗ ａ ｓ ９ ９ ． ２ ３ ％ｗ ｉ ｔ ｈ ＲＳ Ｄ ｆ ｏ １ ． ９ ８ ％（ ｎ ＝ ６ ） ． Ｃ ｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ ： ｅ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｓ ｆ ｏ ｓ ｔ ｉ ｌ ｂ ｅ ｎ ｅ
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 法测定生发乌发 口服液中 二苯 乙烯苷 的含量
刘 倩 黄权芳 广西 中医药大学第一附属 医院 ５ ３ ０ ０ ２ ３ 南宁市东葛路８ ９ — ９ 号 摘 要 目的 ： 建立生发乌发 口 服液 中二苯乙烯苷含量测定 的方 法。方法 ： 采用Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 法进行测定 ， 色谱柱 为Ｄ ｉ ａ ｍ ｏ ｎ ｓ ｉ ｌ Ｃ 。 ８ 柱（ ４ ． ６ ｍ ｍ ｘ ２ ５ ０ ａ ｒ ｍ ． ， ５ ｍ ） ， 流动相为乙腈一 水（ １ ６： ８ ４ ） ， 柱温为室温， 检测波长为３ ２ ０ ｎ ｍ 。 结果： 二苯 乙烯 苷在１ ． ５ ２ — ７ ５ ． ７ ６ Ｉ Ｔ ｌ ｌ 的范 围内有 良好 的线性关 系 （ ｒ ＝ Ｏ ． ９ ９ ９ ９ ） ，平 均加样 回收率为９ ９ ． ２ ３ ％， Ｒ Ｓ Ｄ 为 １ ． ９ ８ ％（ ｎ ＝ ６ ） 。结论 ： 本实验建立的二苯 乙烯苷含量测定方法简便 ， 准确 ， 重复性好， 可用于生发乌发 口服液的质
龟芪壮骨颗粒中二苯乙烯苷的含量测定
龟芪壮骨 颗粒是 熟地黄 、 龟 甲、 杜仲 等十八 味中药组成 。 主要 功能为 补气补 血， 滋 补肝 肾， 强筋壮 骨 。 适用于 腰膝酸软 ， 气血不足 等症 。 方 中主 要药 物何首乌
析， 样 品 中二 苯 乙烯 苷含 量 的Ｒ Ｓ Ｄ ＝１ ． ４ ９ ％， 测 定结 果见 表 ３ 。
表 ３龟芪 壮 骨颗 粒重 现性 试 验结 果表 （ 略）
２ ． ９ 加 样 回收率 试 验 精 密称取 ２ ， ３ ， ５ ， ４ ’ ＿四羟 基二 苯乙烯一 ２ 一 Ｏ －§一 Ｄ ＿ 葡萄糖 苷对 照品适量 ， 加入 到 已测知 ２ ， ３ ， ５ ， ４ ’ 。 四羟基 二苯 乙烯 － ２ — ０ 一Ｂ— Ｄ一 葡萄 糖苷 含量 的龟 芪
２ ． ３方 法
表５龟芪 壮骨 颗粒 中二苯 乙烯 苷含 量 测定结 果 （ 略）
３讨 论
内容 物２ ｇ ， 精 密 称定 ， 置锥 形瓶 ， 加 氯仿４ ０ ｍｌ ， 超 声 处理 （ 功 率２ ５ ０ Ｗ， 频率 ２ ０ ｋ Ｈｚ ） １ ５ ｍｉ ｎ ， 滤过， 药 渣挥 干氯仿 ， 连 同滤纸移 入具塞 锥形瓶 中 ， 精 密￣ Ｊ Ｉ Ａ４ ０ ％ 乙醇２ ５ ｍｌ ， 称定 重量 ， 超 声处 理 （ 功率２ ５ ０ Ｗ， 频率２ ０ ｋ Ｈ ｚ ） １ ０ ａｉ ｒ ｎ， 放冷， 用４ ０ ％乙
定含量 为９ ９ ． ６ １ ％） ； 龟芪 壮骨颗 粒 由敦化市 瑞 隆药 业有 限责任 公司提 供 ； 其它
化学 试 剂均 为 国产 ， ＡＲ 级。 ２方 法与 结 果 ２ ． １ 色谱 条件
壮骨颗粒样品中， 置具塞锥形瓶中， 精密加入４ ０ ％乙醇ｌ Ｏ Ｏ ｍｌ ， 按供试品溶液的
近红外漫反射光谱法快速测定首乌丸中二苯乙烯苷的含量
中国药房2017年第28卷第18期China Pharmacy 2017V ol.28No.18首乌丸由制何首乌、熟地黄、桑椹等中药组成，具有补肝肾、益精血、乌须发的功效，可用于治疗肝肾两虚、头晕目花、耳鸣、腰酸肢麻、须发早白、高血脂等症[1]。
该制剂现收载于2015年版《中国药典》（一部），采用高效液相色谱法（HPLC ）作为测定首乌丸中二苯乙烯苷含量的标准方法，但该方法操作较为烦琐，不仅费时费力，而且易破坏样品[2]。
近红外漫反射光谱法（Near infrared diff-use reflectance spectroscopy ，NIDRS ）作为一门绿色分析技术，通过扫描样品的近红外光谱，可以得到样品中有机分子含氢基团的特征信息[3]，在药物的定性、定量分析方面具有广泛的应用前景[4-7]。
鉴于此，本课题组采用NIDRS 法建立了快速测定首乌丸中二苯乙烯苷含量的方法，以期为完善该制剂的质量标准提供参考。
1材料1.1仪器1120型全自动HPLC 仪，配备SIL-20A 自动进样器、SPD-20A 紫外检测器、LC solution 工作站（日本Shim-adzu 公司）；Nicolet 6700型傅里叶变换近红外光谱仪，配有漫反射积分球、样品旋转器和石英样品杯、OMNIC 光谱采集软件和TQ 8.0分析软件（美国Thermo 公司）；BIY 211b 型万分之一电子分析天平和AY 120型十万分Δ基金项目：广东省科技计划项目（No.2009B 030801044）＊硕士研究生。
研究方向：中药资源与质量。
E-mail ：xila_1990@#通信作者：教授，博士。
研究方向：中药资源、中药质量标准及中药新药研究。
E-mail ：shengguo_ji@ 近红外漫反射光谱法快速测定首乌丸中二苯乙烯苷的含量Δ刘喜乐＊，贾灿潮，姬生国#（广东药科大学中药学院，广州510006）中图分类号R 917文献标志码A 文章编号1001-0408（2017）18-2539-04DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2017.18.26摘要目的：建立快速测定首乌丸中二苯乙烯苷含量的方法。
中药何首乌中二苯乙烯苷的含量测定(HPLC法)(精)
再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，
静置，上清液滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试 品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定， 即得。
注：本品按干燥品计算，含2，3，5，4’四羟基二苯乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷
(C20H22O9)不得少于1.0％。
依利特 P230/UV230+/EC2000型效 液相色谱仪操作规程
统。
清
理
每次操作完毕后，应及时清理所用物品，
废液倒到废液容器内，所用的玻璃仪器及
时送到洗刷池。实验台面、仪器表面用柔
软的抹布擦拭干净，时刻保持实验台和仪
器的整洁。
洗时间约20～30分钟。再用高浓度甲醇（含甲醇
85%以上）溶液冲洗，约30～60分钟（注：不能直
接用有机溶剂冲洗，盐类易析出，堵塞色谱柱，
造成色谱柱永久性损坏；所用水最好是重蒸馏的
水。必须抽滤和脱气）。 最后用纯甲醇冲洗约10 分钟，以保存色谱柱。
（2）不含盐的流动相的冲洗方法：操作结束
后，先用流动相冲洗约10～15分钟，再用
字至所需流速和最高和最低压力,再按“确
认”键。然后启动泵看压力是否超过范围。
（3） 调波长：根据检品要求调“波长”。 方法：打开“检测器”电源，按“操纵菜 单”键,屏幕显示 “MENU1”后按“△”或 “▽”键进行波长设定,设定是按数字键后 按 “确认”。
打开色谱工作站[ONLINE]
1.设置分析方法：根据检品所需设置分析方法（或直接调出 本检品已保存的方法）等待进样。 2.进样：待色谱工作站中的基线平稳后，进样。用仪器配备 的进样器，或用一次性注射器（进样器使用之前要用纯化 水及供试品润洗2-3次），吸取一定量的待检液（不少于 20ul。因进样器定量环自动控制在20ul。），进样阀处于
高效液相色谱法测定培元通脑胶囊中二苯乙烯苷含量
３ 讨 论
样 品 含 量 限 度 的确 定 须 进 一 步 积 累 数 据 加 以完 善 。 法 学 研 方 究 结 果 表 明 ， Ｐ Ｃ法 样 品处 理 简便 、 捷 ， 定 结 果 准 确可 靠 。 ＨＬ 快 测 本 法可 用 于 培元 通 脑 胶 囊 生 产 和 质 量 控 制 ， 缩 短 检 验 周 期 ， 大 提 能 大 高生 产 效 率 。 作 者 简 介 ： 国 明 （９ ７一） 男 ， 石 １７ ， 汉族 ， 南 新 县 人 ， 药 工 程 河 医
精 密 度 试 验 ： 同一 对 照 品 溶 液 ， 法 连 续 进 样 ５次 。 果 峰 取 依 结 面 积 积分 值 的 Ｒ Ｄ＝ ． ％ （ ５ ， 明仪 器精 密度 良好 。 Ｓ ０ ２ ｎ： ）表 稳 定 性试 验 ： 一 同 供 试 品溶 液 ， 隔 一 定 时 间 测 定 １ 。 取 每 次 结 果 含 量 的 Ｒ Ｄ＝０ ６ ％ （ ６ ， 明供 试 品 溶 液 在 ８ｈ内 基本 稳 Ｓ ． １ ｎ＝ ）表
加样 回收试验 ： 称取 已知含量的样品约 １ ， 密称定 ， 精 ｇ 分别精
密 加 人 高 、 、 ３个 水 平 的 二 苯 乙烯 苷 对 照 品 溶 液 各 ２份 ， 法 中 低 依 测 定其 含量 ， 计算 回收 率 。 果 见 表 １ 结 。
表 １ 二 苯 乙烯 苷加 样 回收 试 验 结 果 （ ｎ＝６ ）
培 元通 脑 胶 囊 质量 控 制 方 法 。
关键词 ： 高效 液 相 色谱 法 ； 元 通 脑胶 囊 ； 苯 乙烯 苷 ； 量 测 定 培 二 含
高效液相色谱法测定首乌精口服液中二苯乙烯苷的含量
Ａｂ ｔａ ｔ Ｏ ｊｃ ｖ ｎ Ｌ ｔｏ ａ ｓ ｂｉ ｅ ｒｈ ｅｅ ｉａ ｏ ， ， ，＂ ｔ ｈｄｏｙｔｂ ｎ－－ — － — ｕｏｙ ｓｒ ｃ ： ｂｅｔ ｅ Ａ ｉ ＨＰ Ｃｍｅ ｄｗ ｓｅｔ ｌｈ ｄ ｏ ｅｄｔ ｍ ｎｔ ｎｏ２ ３ ５４ ｔｒ ｙ ｒ ｓｌｅｅ Ｏ Ｂ－ ｇ ｃｐ— ｈ ａ ｓ ｆ ｔ ｒ ｉ ｆ － ａ ｅ ｘ ｉ ２ Ｄ ｌ
关键 词 ： 何首鸟； 二苯乙 烯苷； 高效液相 色 含 量 测 定 谱； 中图分类号 ： ２４ ２ Ｒ ８ ． 文献标 识码 ： 文章编 号 ： ０ －８ ５ ２ ０ ） ８１３ －１ Ａ １ ８０ ０ （ ０ ７ ０ ．８ ８ ０ ０
ＨＰ Ｃ Ｃ ｎｅ ｔ ｅｅｍｉａｉｎ ｏ ｔｂ ｎ ｓｉ ｈ ｕ ｊ ｇＯｒ ｌ ｏｕ ｏ ＝ ｏ ｔｎ ｔｒ ｎ ｔ ｆＳｉ ｅ ｅ Ｓ ｏ ｗｕｉ ＇ ｌｔ ｎ Ｌ Ｄ ｏ ｌ ｎ ｎ ａ ，Ｓ ｉ
首乌精 口服液 由何首乌醇提取后 加入香精 等辅料稀 释到一 ｐ Ｈ至 ７ ０～ ． ， ． ７ ５ 滤过 ， 灌封 ， 菌 ， 灭 即得 首乌精 口服液 ３ ｇ 含 ０ｍ （ 定浓度而得到 ， 具有乌 须发 、 悦颜色 、 养精 血 、 衰老之 功 ，其有 二 苯 乙 烯 苷 ）１ ｌ支 。 抗 ／ ０ｍ／ 效 成 分 二 苯 乙 烯 苷 具 有 显 著 的 药 理 活 性 。现 代 药 理 研 究 证 ２ ２ 色谱条件 色谱柱为 Ｓｍ ｔ ・ Ｉ ３９ｌｎＸ ５ Ｔ ， ． ｙ ｍｅ ｃ８ ． Ｔ ２０ｌｎ ５ ｙ ｒ （ ｌ ｌ ｌ ｍ） ｌ ， 明： 首乌及其所含的二苯 乙烯苷化合物 具有抗衰 老 ， 提高 免疫功 流动相为 乙腈・ （７ ３ ， 水 １：８ ）流速为 １０ｍ／ ｉ， ｌｍ ｎ测定波 长 ３０ｎ ２ ｍ， 能， 防治动脉硬化及保肝等作用 。临床 应用研究 表 明： 二苯 乙 柱温 ３ ℃。理论塔板数按二苯 乙烯苷峰计算 应不低于 ４０ 。二 ０ ５０ பைடு நூலகம்苷在防治中老年疾病 如高 脂血症 、 高血压 、 慢性 气管 炎 、 糖尿 苯乙烯苷对照品及首乌精 口服液（ 供试 品） 的色谱 图见图 １ 。 病； 精神神经性疾病如神经 衰弱 、 癫痫 等诸多方 面均具有 较为显 著的疗效 ｊ 。为控制产 品内在质量 ， 采用 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ对何首乌的活性 成分二苯 乙烯苷进行含量测定 的研究 ， 现报道如下 。